n ;分三段收集解析液，解析初期解析液中藏花素浓度较低，解析液色价为0.6-1.0A，收集此段液体b;解析中期解析液中藏花素浓度最高，解析液色价为2.0-2.3A，收集此 段液体c;解析后期解析液中藏花素浓度降低，解析液色价为1.2-1.5A，收集此段液体d;
[0041] (2)藏花素粗提取液的精制
[0042]将第（1)步中收集的解析液c，调节至色价为2A，上经过活化处理的DEAE-纤维素吸 附柱，控制流速0.5ml/min，收集流出液e;吸附柱吸附饱和后，加纯水5BV冲洗吸附柱；
[0043]用质量分数为60 %的乙醇水溶液，对DEAE-纤维素吸附柱进行解析，控制解析液流 出速度为I.Oml/min，分三段收集解析液，解析初期解析液中藏花素含量较低，解析液色价 为0.3-0.6A，收集此段液体f;解析中期解析液中藏花素含量最高，解析液色价为1.4-1.7A， 收集此段液体g;解析后期解析液中藏花素含量降低，解析液色价为0.5-0.8A，收集此段液 体h;
[0044]将液体g减压浓缩除去乙醇后干燥成粉，即得到纯度为81.6%的藏花素粉末，藏花 素收率为36.8-40 %;
[0045] (3)藏花酸的精制
[0046] 合并步骤（1)中的液体a、液体b、液体d，步骤(2)中的液体e，液体f，液体h;调节混 合液的pH至中性，酒精的质量分数达到60 %，搅拌均匀，加入混合液体积1.0 倍的的乙酸乙 酯萃取混合液体中的藏花酸，萃取3次，合并萃取液，减压蒸馏除去乙酸乙酯和乙醇后，回调 pH至3-5，减压浓缩干燥即得到纯度为74.4%的藏花酸，藏花酸收率为24.8% ;萃余液减压 蒸馏除去乙醇后用于步骤(1)中稀释栀子黄色素原料，重复上述过程。
[0047]经大量实验验证，本实施为本发明的最优实施方式。
[0048] 实施例2
[0049] -种从栀子黄色素中分离提纯藏花素和藏花酸的方法，包括下述步骤：
[0050] (1)栀子黄色素中藏花素的粗分离；
[0051]选用色价为170A的栀子黄色素为原料，将其稀释成色价为5A的栀子黄水溶液，加 梓檬酸调节口^1至5，上经过活化处理的〇-151型树脂柱，控制流出阀流速为3.〇1]11/1]1；[1]1，收集 流出液体a;待树脂柱饱和吸附后，加纯水4BV冲洗树脂柱；
[0052]用质量分数为80 %的乙醇水溶液对树脂柱进行解析，控制解析液流出速度为 1.5ml/min ;分三段收集解析液，解析初期解析液中藏花素浓度较低，解析液色价为0.6-1.0A，收集此段液体b;解析中期解析液中藏花素浓度最高，解析液色价为2.0-2.3A，收集此 段液体c;解析后期解析液中藏花素浓度降低，解析液色价为1.2-1.5A，收集此段液体d; [0053] (2)藏花素粗提取液的精制
[0054]将第（1)步中收集的解析液c，调节至色价为2A，上经过活化处理的DEAE-纤维素吸 附柱，控制流速lml/min，收集流出液e;吸附柱吸附饱和后，加纯水2BV冲洗吸附柱；
[0055]用质量分数为70 %的乙醇水溶液，对DEAE-纤维素吸附柱进行解析，控制解析液流 出速度为1.5ml/min，分三段收集解析液，解析初期解析液中藏花素含量较低，解析液色价 为0.3-0.6A，收集此段液体f;解析中期解析液中藏花素含量最高，解析液色价为1.4-1.7A， 收集此段液体g;解析后期解析液中藏花素含量降低，解析液色价为0.5-0.8A，收集此段液 体h;
[0056]将液体g减压浓缩除去乙醇后干燥成粉，即得到纯度为80.1%的藏花素粉末，藏花 素收率为38.2%;
[0057] (3)藏花酸的精制
[0058] 合并步骤（1)中的液体a、液体b、液体d，步骤(2)中的液体e，液体f，液体h;调节混 合液的pH至中性，酒精的质量分数达到70 %，搅拌均匀，加入混合液体积0.5倍的的乙酸乙 酯萃取混合液体中的藏花酸，萃取5次，合并萃取液，减压蒸馏除去乙酸乙酯和乙醇后，回调 pH至3-5，减压浓缩干燥即得到纯度为72.3 %的藏花酸，藏花酸收率为20.9 % ;萃余液减压 蒸馏除去乙醇后用于步骤(1)中稀释栀子黄色素原料，重复上述过程。
[0059] 实施例3
[0060] 一种从栀子黄色素中分离提纯藏花素和藏花酸的方法，包括下述步骤：
[0061] (1)栀子黄色素中藏花素的粗分离；
[0062]选用色价为200A的栀子黄色素为原料，将其稀释成色价为5A的栀子黄水溶液，加 梓檬酸调节pH至6,上经过活化处理的〇-151型树脂柱，控制流出阀流速为4.〇1111/1]1；[1]1，收集 流出液体a;待树脂柱饱和吸附后，加纯水5BV冲洗树脂柱；
[0063]用质量分数为70 %的乙醇水溶液对树脂柱进行解析，控制解析液流出速度为 2.5ml/min ;分三段收集解析液，解析初期解析液中藏花素浓度较低，解析液色价为0.6-1.0A，收集此段液体b;解析中期解析液中藏花素浓度最高，解析液色价为2.0-2.3A，收集此 段液体c;解析后期解析液中藏花素浓度降低，解析液色价为1.2-1.5A，收集此段液体d; [0064] (2)藏花素粗提取液的精制
[0065]将第（1)步中收集的解析液c，调节至色价为2A，上经过活化处理的DEAE-纤维素吸 附柱，控制流速0.5ml/min，收集流出液e;吸附柱吸附饱和后，加纯水4BV冲洗吸附柱；
[0066]用质量分数为80 %的乙醇水溶液，对DEAE-纤维素吸附柱进行解析，控制解析液流 出速度为l.Oml/min，分三段收集解析液，解析初期解析液中藏花素含量较低，解析液色价 为0.3-0.6A，收集此段液体f;解析中期解析液中藏花素含量最高，解析液色价为1.4-1.7A， 收集此段液体g;解析后期解析液中藏花素含量降低，解析液色价为0.5-0.8A，收集此段液 体h;
[0067]将液体g减压浓缩除去乙醇后干燥成粉，即得到纯度为79.5%的藏花素粉末，藏花 素收率为37.5%;
[0068] (3)藏花酸的精制
[0069] 合并步骤（1)中的液体a、液体b、液体d，步骤(2)中的液体e，液体f，液体h;调节混 合液的pH至中性，酒精的质量分数达到75 %，搅拌均匀，加入混合液体积1.5倍的的乙酸乙 酯萃取混合液体中的藏花酸，萃取3次，合并萃取液，减压蒸馏除去乙酸乙酯和乙醇后，回调 pH至3-5，减压浓缩干燥即得到纯度为69.5 %的藏花酸，藏花酸收率为25.8 % ;萃余液减压 蒸馏除去乙醇后用于步骤(1)中稀释栀子黄色素原料，重复上述过程。
【主权项】
1. 一种从栀子黄色素中分离提纯藏花素和藏花酸的方法，其特征在于包括下述步骤： (1) 栀子黄色素中藏花素的粗分离； 选用色价为170-200A的栀子黄色素为原料，将其稀释成色价为5A的栀子黄水溶液，加 朽1檬酸调节pH至5-6，上经过活化处理的D-151型树脂柱，控制流出阀流速3.0-4. Oml/mim， 收集流出液体a;待树脂柱饱和吸附后，加纯水4-5BV冲洗树脂柱； 用质量分数为70%_80%的乙醇水溶液对树脂柱进行解析，控制解析液流出速度为1.5_ 2.5ml/min;分三段收集解析液，解析初期解析液色价为0.6-1.0A，收集此段液体b;解析中 期解析液色价为2.0-2.3A，收集此段液体c;解析后期解析液色价为1.2-1.5A，收集此段液 体d; (2) 藏花素粗提取液的精制 将第（1)步中收集的解析液c，调节至色价为2A，上经过活化处理的DEAE-纤维素吸附 柱，控制流出阀流速0.5-1.0ml/min，收集流出液e;吸附柱吸附饱和后，加纯水2-5BV冲洗吸 附柱； 用质量分数为60%_80%的乙醇水溶液，对DEAE-纤维素吸附柱进行解析，控制解析液流 出速度为1.0-1.5ml/min，分三段收集解析液，解析初期解析液色价为0.3-0.6A，收集此段 液体f;解析中期解析液色价为1.4-1.7A，收集此段液体g;解析后期解析液色价为0.5-〇.8六，收集此段液体11 ; 将液体g除去乙醇后减压浓缩干燥成粉，即得到纯度为79-82%的藏花素粉末，藏花素收 率为 36.8-40%; (3) 藏花酸的精制 合并步骤（1)中的液体a、液体b、液体d，步骤(2)中的液体e，液体f，液体h;调节混合液 的pH至中性，乙醇的质量分数达到60%-75%，搅拌均匀，加入混合液体积0.5-1.5倍的的乙酸 乙酯萃取混合液体中的藏花酸，萃取3-5次，合并萃取液，除去乙酸乙酯和乙醇，回调pH至3-5，减压浓缩干燥即得到纯度为69.5-75%的藏花酸，藏花酸收率为20-26%;萃余液除去乙醇 后用于步骤(1)中稀释栀子黄色素原料，重复上述过程。
【专利摘要】本发明公开了一种从栀子黄色素中分离提纯藏花素和藏花酸的方法，该方法是以色价为170-200A的栀子黄色素为原料，将其稀释成色价为5A的栀子黄水溶液，加酸调节pH至5-6,用D-151型树脂柱提取栀子黄色素中的藏花素，并用DEAE-纤维素吸附柱精制粗提取的藏花素制得纯度为79-82%的藏花素粉末，藏花素收率为36.8-40%；将粗提藏花素和精制藏花素剩余的液体加乙醇后，加入乙酸乙酯萃取制得纯度为69.5-75%的藏花酸，藏花酸收率为20-26%；本发明从栀子黄色素原料入手，提供了一种操作过程简单，分离提纯效率高，操作量大，可实现工业化大规模生产的从栀子黄色素中分离提纯藏花素和藏花酸的方法。
【IPC分类】C07H13/06, C07H1/08, C07C57/13, C07C51/42
【公开号】CN105503968
【申请号】CN201510876105
【发明人】梅元碧, 王力, 张伟
【申请人】武汉绿孚生物工程有限责任公司
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月2日