细胞培养装置及方法_3

文档序号:9762729阅读:来源:国知局
接枝处理,可通过改变温度使温敏材料产生亲水和疏水之间的相变,从而使贴附于所述支架生长的细胞在培养结束后实现温敏性脱落收获。该支架的接枝处理按照常规方式处理即可,该温敏材料能够在培养结束后通过将温度降低到其相变温度以下,实现细胞自动与支架脱离的目的。考虑到细胞培养的适宜温度为37°C左右,温敏材料的相变临界温度优选为32°C,则细胞贴壁生长温度为37°C,实验中最好的脱落温度为20°C左右。可以理解的,具体使用中的最佳脱落温度可根据所培养细胞类型的不同,以及选用温敏材料的不同来设定。
[0080]可以理解的,所述支架表面也可不经过温敏材料接枝处理,不影响该装置的细胞培养效果,仅是在细胞收获时,需采用化学的胰蛋白酶消化或物理的细胞刮刀刮取的方式收集细胞,可能会对细胞造成化学或物理的损伤。
[0081 ] 优选的,该细胞培养装置还包括湿化装置300和空气过滤器500,所述湿化装置300为所述培养液储存装置210提供湿化气体;所述培养液储存装置210与外界连通的通气口设有空气过滤器500。通过上述设置,在整个细胞培养周期内,将整个细胞培养系统与外界隔绝,避免了可能被空气污染的可能。
[0082]可以理解的,如图22所示,该细胞培养装置还可以包括气栗400,则所述湿化装置300、所述气栗400和所述培养液储存装置210依次通过气体管连通,且所述湿化装置300和培养液储存装置210与外界连通的通气口设有空气过滤器500。
[0083]优选的,该细胞培养装置还包括固定架600,所述培养塔100安装固定于所述固定架600上。可以理解的,用户也可根据具体要求安放培养塔。
[0084]实施例1
[0085]—种细胞培养装置,如图1所示,包括:培养塔100和灌流系统。
[0086]培养塔100包括第一接管盖110、第二接管盖120、八个可供细胞贴附生长的支架130、八个密封圈140和八个扣圈150,所述第一接管盖110、支架130和第二接管盖120依次层叠设置,形成具有封闭空腔的培养塔100,所述第一接管盖110和所述第二接管盖120上分别设有灌流进口和灌流出口。
[0087]上述第一接管盖110、支架130和第二接管盖120依次层叠安装的具体方式如下:
[0088]如图2-4所示,所述密封圈140为环状,环绕所述支架130边缘设置,如图5_11所示,所述扣圈150为环状,环绕所述密封圈140边缘设置,如图12所示,所述扣圈150周向的内侧面设有扣圈台151,所述密封圈140周向的外侧面设有与该扣圈台151匹配的扣圈槽141,如图4、9所不,并且相邻层置的所述密封圈140相互接触。
[0089]并且,可将一个支架、一个密封圈,一个扣圈组装,构成一个独立包装的配件套装,如图18所示。
[0090]在本实施例中,所述扣圈150上还设有紧扣勾152和紧扣槽153,所述紧扣槽153内设有固定凸台154,所述紧扣勾152可伸入另一个扣圈150的紧扣槽153内,与该另一个扣圈150的固定凸台154卡接固定,并将层叠接触的所述密封圈140压紧固定,如图13-14所示。
[0091]所述第一接管盖110上还设有安装槽112,与该第一接管盖110相邻的扣圈150上的紧扣勾152可穿过该安装槽112与该第一接管盖110卡接固定,如图15所示。
[0092]所述第二接管盖120上还设有安装勾122,该安装勾122可伸入与该第二接管盖120相邻的扣圈150上的紧扣槽153内,与该扣圈150的固定凸台154卡接固定,如图16所示。
[0093]在本实施例中,如图5,图7所示,所述紧扣勾152和紧扣槽153环绕所述扣圈150边缘交替且均匀设置,可通过旋转扣圈150角度进行错位对应,将相邻扣圈以紧扣勾对应紧扣槽的方式重叠。并且,所述密封圈周向的内侧面设有与所述支架的周向边缘厚度相适配的支架槽。
[0094]在本实施例中,所述支架130由层叠的纤维纵横交错构成,如图17所示,所述纤维之间设有供细胞贴附生长和培养液流通的空隙,该空隙即纤维与纤维之间形成的孔径。
[0095]上述由纤维构成的支架目前在细胞培养上常用材料为PS(聚苯乙烯),以及PS和PCL(聚己内酯)、PLGA(聚乳酸-羟基乙酸共聚物)等几种材料。而支架的制备可以传统的注塑,也可以新兴的3D打印方法制备。在本实施例中,常用的单根纤维丝的直径为400μπι,多根纤维丝纵横交织形成的支架的孔径有300μπι、400μπι、500μπι三个规格。
[0096]并且所述支架表面经温敏材料接枝处理,可通过改变温度使温敏材料产生亲水和疏水之间的相变,从而使贴附于所述支架生长的细胞在培养结束后实现温敏性脱落收获。该支架的接枝处理按照常规方式处理即可,该温敏材料能够在培养结束后通过将温度降低到其相变温度以下,实现细胞自动与支架脱离的目的。考虑到细胞培养的适宜温度为37°C左右,温敏材料的相变临界温度优选为32°C,则细胞贴壁生长温度为37°C,实验中最好的脱落温度为20°C左右。
[0097]如图1所示,灌流系统包括培养液储存装置210、灌流管220和为灌流提供动力的灌流栗230,所述培养液储存装置210、所述灌流栗230和所述灌流进口 111依次通过所述灌流管220连通。
[0098]在本实施例中,该细胞培养装置还包括固定架600,所述培养塔100安装固定于所述固定架600上。
[0099]采用上述细胞培养装置进行细胞培养的方法,包括以下步骤:
[0100]一、安装培养塔。
[0101 ]取第一接管盖,将上述套件中扣圈的紧扣勾伸入所述安装槽与该第一接管盖卡接固定;按照上述方法,依次将各套件中扣圈的紧扣勾伸入另一个套件中扣圈的紧扣槽内,与该另一个套件中扣圈的固定凸台卡接固定,并将层叠接触的所述密封圈压紧固定,依次层叠安装预定数量的支架;
[0102]将待培养细胞接种至上述安装好的支架上,如图19所示;
[0103]再把第二接管盖的安装勾伸入与该第二接管盖相邻的扣圈上的紧扣槽内,将该第二接管盖安装固定,组装得到培养塔,如图20所示,将其置于CO2培养箱内,设置培养箱参数使其内部含有浓度约为5 %的(》2气体。
[0104]二、灌流培养细胞。
[0105]通过灌流管将所述灌流进口依次连通所述灌流栗和所述培养液储存装置,以所述灌流栗提供动力,将所述培养液储存装置内的培养液灌流至所述培养塔内,为细胞生长提供营养物质,并将细胞代谢产生的代谢物随着培养液流动从所述灌流出口排出。
[0106]在本实施例中,培养液从所述灌流出口排出后,再次进入培养液储存装置内,循环使用。
[0107]实施例2
[0108]—种细胞培养装置,与实施例1的细胞培养装置基本相同,如图21所示,不同之处在于:
[0109]本实施例的细胞培养装置还包括湿化装置、空气过滤器500、细胞收集瓶710、细胞收集管720、废液瓶810、废液管820、细胞收集阀730和废液阀830。
[0110]图21中,所述湿化装置通过对该细胞培养装置所处的培养环境(如细胞培养箱内环境)进行湿化处理,为所述培养液储存装置210提供湿化CO2气体。并且,在本实施例中,所述培养液储存装置210与外界连通的通气口设有空气过滤器500。
[0111]可以理解的,如图22所示,该细胞培养装置还可以包括气栗400,则所述湿化装置300、所述气栗400和所述培养液储存装置210依次通过气体管连通。
[0112]所述细胞收集管720—端连通所述灌流栗与所述灌流进口之间的灌流管220,另一端正对所述细胞收集瓶710的瓶口,所述细胞收集阀730设于所述细胞收集管720上。
[0113]所述废液管820—端连通所述灌流出口 121,另一端通入所述废液瓶810,所述废液阀830设于所述废液管820上。
[0114]采用上述细胞培养装置进行细胞培养的方法,包括以下步骤:
[ΟΙ15] —、安装培养塔。
[0116]取第一接管盖,将上述套件中扣圈的紧扣勾伸入所述安装槽与该第一接管盖卡接固定;按照上述方法,依次将各套件中扣圈的紧扣勾伸入另一个套件中扣圈的紧扣槽内,与该另一个套件中扣圈的固定凸
当前第3页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1