一种磺胺七合一检测方法及试剂盒与流程

文档序号:12118494阅读:232来源:国知局

本发明涉及磺胺七合一检测的技术领域,具体为一种磺胺七合一检测方法及试剂盒。



背景技术:

磺胺类药物是通过人工合成的氨苯磺胺衍生物,能抑制革兰氏阳性菌及一些阴性菌,可以治疗多种细菌感染,在兽医临床上广泛应用于治疗由敏感细菌感染的各种畜禽疾病,同时还可以作为饲料添加剂提高饲料的转化率和促进动物生长,目前常用的SAS有十几种。但该类药物存在严重副作用,人体中长期存在会导致许多细菌对磺胺类药物产生耐药性,且有潜在的致癌性,因此已引起了国内外的高度重视。磺胺类药,是通过人工合成的氨苯磺胺衍生物,主要用于预防和 治疗细菌感染性疾病。代表药物有磺胺二甲基嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺甲基异恶唑、磺胺间甲氧嘧啶和磺胺喹恶啉等。磺胺类药物能抑制革兰氏阳性菌及一些阴性菌,可以治疗多种细菌感染,在兽医临床上广泛应用于治疗由敏感细菌感染的各种畜禽疾病。由于磺胺类药物在体内的作用和代谢时间较长,通过任何途径摄入的磺胺都有可能在人体内蓄积。

蓄积浓度超过一定值时,就会对人体造成损害。短时间大剂量或长时间小剂量的刺激可分别引起急性或慢性中毒,影响机体的泌尿、免疫系统,破坏肌肉、肾脏和甲状腺等组织,如诱发人的甲状腺癌等。

所以需要对磺胺七合一进行检测,在检测中存在仪器贵重、操作技能要求高、检测时间长和所需费用高的问题,给检测带来了不便。



技术实现要素:

(一)解决的技术问题

针对现有技术的不足,本发明提供了一种磺胺七合一检测方法及试剂盒,具备磺胺七合一检测中的仪器普通且便宜,操作技能要求低,检测时间相对短和所需费用低等优点,解决了磺胺七合一在检测中存在仪器贵重、操作技能要求高、检测时间长和所需费用高的问题。

(二)技术方案

为实现上述磺胺七合一检测中的仪器普通且便宜,操作技能要求低,检测时间相对短和所需费用低的目的,本发明提供如下技术方案:本发明提出了一种磺胺七合一试剂盒,包括试剂盒和试剂,试剂包括磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶。

本发明还提出一种磺胺七合一检测方法,包括以下步骤:

S1、利用本体聚合的方法,合成磺胺的分子印迹材料:在玻璃容器中将等重量单位一比例份的2份磺胺噻唑、1份甲氧苄啶、3份磺胺喹恶啉、1份酞酰磺噻唑、3份磺胺甲噻二唑、4份磺胺二甲基嘧啶、12份磺胺甲噁唑、7份磺胺甲嘧啶、3份磺胺间二甲氧嘧啶、21份磺胺氯哒嗪载体、2份间甲氧嘧啶、7份磺胺喹噁啉、9份磺胺嘧啶、1份磺胺甲氧哒嗪和2份磺胺对甲氧嘧啶均匀混合搅拌,将混合后的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,通过氮气除氧10-20分钟,将其除氧后的混合物体进行超声处理13-23分钟,然后将其完全密封,放在60-75℃的液态水中,15-25小时,得到固体块状的聚合物;

S2、将磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,所得到的固体块状的聚合物粉碎,粉碎过后将其用滤纸包裹,将其内部滴入重量比为10:1的甲醇溶液,放置在30-35℃条件下反应3-5小时,待预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠,比例为20:3,反应产物在15℃下搅拌,搅拌15-20分钟,待完全融合;

S3、将所得搅拌物在50-65℃的温度下烘干,待完全烘干后放置5-8小时,得到固体状的混合物体,然后将其碾碎,待粉碎完后进行筛选,保留粉末状的物体,固态颗粒进行继续粉碎,直至全部成粉末状;

S4、将粉末倒入试剂盒内,在试剂盒内加入1:1的金属盐溶液,将其冷藏3-4小时,再加入10:1等量份的酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量正负相关,然后与标准的曲线比较,即可得出样品中的磺胺类药物的比例和多少。

优选的,S1中所采用的密封是导热的盒体密封。

优选的,S2中所提到的搅拌是采用搅拌器搅拌。

优选的,S3中固体状的混合物体粉碎采用的是药材粉碎机。

优选的,S4中冷藏采用的是冰柜冷藏。

(三)有益效果

与现有技术相比,本发明提供了一种磺胺七合一检测方法及试剂盒,具备以下有益效果:

1、该磺胺七合一检测方法及试剂盒,通过在玻璃容器中将等重量单位一比例份的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶的配合使用,达到了磺胺七合一检测中的仪器普通且便宜,操作技能要求低,检测时间相对短和所需费用低的优点,节约了时间提高了效率,设计合理,适用性强,给磺胺七合一检测提供了方便。

具体实施方式

下面将结合本发明的实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。

本发明实施例提供一种技术方案:一种磺胺七合一试剂盒,包括试剂盒和试剂,试剂包括磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶。

实施例一:

一种磺胺七合一检测方法,包括以下步骤:

S1、利用本体聚合的方法,合成磺胺的分子印迹材料:在玻璃容器中将等重量单位一比例份的2份磺胺噻唑、1份甲氧苄啶、3份磺胺喹恶啉、1份酞酰磺噻唑、3份磺胺甲噻二唑、4份磺胺二甲基嘧啶、12份磺胺甲噁唑、7份磺胺甲嘧啶、3份磺胺间二甲氧嘧啶、21份磺胺氯哒嗪载体、2份间甲氧嘧啶、7份磺胺喹噁啉、9份磺胺嘧啶、1份磺胺甲氧哒嗪和2份磺胺对甲氧嘧啶均匀混合搅拌,将混合后的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,通过氮气除氧10分钟,将其除氧后的混合物体进行超声处理13分钟,然后将其完全密封,放在60℃的液态水中,15小时,得到固体块状的聚合物;

S2、将磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,所得到的固体块状的聚合物粉碎,粉碎过后将其用滤纸包裹,将其内部滴入重量比为10:1的甲醇溶液,放置在30℃条件下反应3小时,待预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠,比例为20:3,反应产物在15℃下搅拌,搅拌15分钟,待完全融合;

S3、将所得搅拌物在50℃的温度下烘干,待完全烘干后放置5小时,得到固体状的混合物体,然后将其碾碎,待粉碎完后进行筛选,保留粉末状的物体,固态颗粒进行继续粉碎,直至全部成粉末状;

S4、将粉末倒入试剂盒内,在试剂盒内加入1:1的金属盐溶液,将其冷藏3小时,再加入10:1等量份的酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量正负相关,然后与标准的曲线比较,即可得出样品中的磺胺类药物的比例和多少。

实施例二:

一种磺胺七合一检测方法,包括以下步骤:

S1、利用本体聚合的方法,合成磺胺的分子印迹材料:在玻璃容器中将等重量单位一比例份的2份磺胺噻唑、1份甲氧苄啶、3份磺胺喹恶啉、1份酞酰磺噻唑、3份磺胺甲噻二唑、4份磺胺二甲基嘧啶、12份磺胺甲噁唑、7份磺胺甲嘧啶、3份磺胺间二甲氧嘧啶、21份磺胺氯哒嗪载体、2份间甲氧嘧啶、7份磺胺喹噁啉、9份磺胺嘧啶、1份磺胺甲氧哒嗪和2份磺胺对甲氧嘧啶均匀混合搅拌,将混合后的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,通过氮气除氧12分钟,将其除氧后的混合物体进行超声处理14分钟,然后将其完全密封,放在62℃的液态水中,18小时,得到固体块状的聚合物;

S2、将磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,所得到的固体块状的聚合物粉碎,粉碎过后将其用滤纸包裹,将其内部滴入重量比为10:1的甲醇溶液,放置在31℃条件下反应3.5小时,待预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠,比例为20:3,反应产物在15℃下搅拌,搅拌16分钟,待完全融合;

S3、将所得搅拌物在53℃的温度下烘干,待完全烘干后放置5.2小时,得到固体状的混合物体,然后将其碾碎,待粉碎完后进行筛选,保留粉末状的物体,固态颗粒进行继续粉碎,直至全部成粉末状;

S4、将粉末倒入试剂盒内,在试剂盒内加入1:1的金属盐溶液,将其冷藏3.2小时,再加入10:1等量份的酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量正负相关,然后与标准的曲线比较,即可得出样品中的磺胺类药物的比例和多少。

实施例三:

一种磺胺七合一检测方法,包括以下步骤:

S1、利用本体聚合的方法,合成磺胺的分子印迹材料:在玻璃容器中将等重量单位一比例份的2份磺胺噻唑、1份甲氧苄啶、3份磺胺喹恶啉、1份酞酰磺噻唑、3份磺胺甲噻二唑、4份磺胺二甲基嘧啶、12份磺胺甲噁唑、7份磺胺甲嘧啶、3份磺胺间二甲氧嘧啶、21份磺胺氯哒嗪载体、2份间甲氧嘧啶、7份磺胺喹噁啉、9份磺胺嘧啶、1份磺胺甲氧哒嗪和2份磺胺对甲氧嘧啶均匀混合搅拌,将混合后的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,通过氮气除氧14分钟,将其除氧后的混合物体进行超声处理15分钟,然后将其完全密封,放在65℃的液态水中,19小时,得到固体块状的聚合物;

S2、将磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,所得到的固体块状的聚合物粉碎,粉碎过后将其用滤纸包裹,将其内部滴入重量比为10:1的甲醇溶液,放置在32℃条件下反应3.8小时,待预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠,比例为20:3,反应产物在15℃下搅拌,搅拌18分钟,待完全融合;

S3、将所得搅拌物在55℃的温度下烘干,待完全烘干后放置6小时,得到固体状的混合物体,然后将其碾碎,待粉碎完后进行筛选,保留粉末状的物体,固态颗粒进行继续粉碎,直至全部成粉末状;

S4、将粉末倒入试剂盒内,在试剂盒内加入1:1的金属盐溶液,将其冷藏3.4小时,再加入10:1等量份的酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量正负相关,然后与标准的曲线比较,即可得出样品中的磺胺类药物的比例和多少。

实施例四:

一种磺胺七合一检测方法,包括以下步骤:

S1、利用本体聚合的方法,合成磺胺的分子印迹材料:在玻璃容器中将等重量单位一比例份的2份磺胺噻唑、1份甲氧苄啶、3份磺胺喹恶啉、1份酞酰磺噻唑、3份磺胺甲噻二唑、4份磺胺二甲基嘧啶、12份磺胺甲噁唑、7份磺胺甲嘧啶、3份磺胺间二甲氧嘧啶、21份磺胺氯哒嗪载体、2份间甲氧嘧啶、7份磺胺喹噁啉、9份磺胺嘧啶、1份磺胺甲氧哒嗪和2份磺胺对甲氧嘧啶均匀混合搅拌,将混合后的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,通过氮气除氧16分钟,将其除氧后的混合物体进行超声处理20分钟,然后将其完全密封,放在70℃的液态水中,23小时,得到固体块状的聚合物;

S2、将磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,所得到的固体块状的聚合物粉碎,粉碎过后将其用滤纸包裹,将其内部滴入重量比为10:1的甲醇溶液,放置在34℃条件下反应4.5小时,待预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠,比例为20:3,反应产物在15℃下搅拌,搅拌19分钟,待完全融合;

S3、将所得搅拌物在59℃的温度下烘干,待完全烘干后放置7小时,得到固体状的混合物体,然后将其碾碎,待粉碎完后进行筛选,保留粉末状的物体,固态颗粒进行继续粉碎,直至全部成粉末状;

S4、将粉末倒入试剂盒内,在试剂盒内加入1:1的金属盐溶液,将其冷藏3.8小时,再加入10:1等量份的酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量正负相关,然后与标准的曲线比较,即可得出样品中的磺胺类药物的比例和多少。

实施例五:

一种磺胺七合一检测方法,包括以下步骤:

S1、利用本体聚合的方法,合成磺胺的分子印迹材料:在玻璃容器中将等重量单位一比例份的2份磺胺噻唑、1份甲氧苄啶、3份磺胺喹恶啉、1份酞酰磺噻唑、3份磺胺甲噻二唑、4份磺胺二甲基嘧啶、12份磺胺甲噁唑、7份磺胺甲嘧啶、3份磺胺间二甲氧嘧啶、21份磺胺氯哒嗪载体、2份间甲氧嘧啶、7份磺胺喹噁啉、9份磺胺嘧啶、1份磺胺甲氧哒嗪和2份磺胺对甲氧嘧啶均匀混合搅拌,将混合后的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,通过氮气除氧20分钟,将其除氧后的混合物体进行超声处理23分钟,然后将其完全密封,放在75℃的液态水中,25小时,得到固体块状的聚合物;

S2、将磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶,所得到的固体块状的聚合物粉碎,粉碎过后将其用滤纸包裹,将其内部滴入重量比为10:1的甲醇溶液,放置在35℃条件下反应5小时,待预冷后边搅拌边逐滴加入重氮化的磺胺氯哒嗪钠,比例为20:3,反应产物在15℃下搅拌,搅拌20分钟,待完全融合;

S3、将所得搅拌物在65℃的温度下烘干,待完全烘干后放置8小时,得到固体状的混合物体,然后将其碾碎,待粉碎完后进行筛选,保留粉末状的物体,固态颗粒进行继续粉碎,直至全部成粉末状;

S4、将粉末倒入试剂盒内,在试剂盒内加入1:1的金属盐溶液,将其冷藏4小时,再加入10:1等量份的酶标二抗,用TMB底物显色,样本吸光值与其所含磺胺类药物的含量正负相关,然后与标准的曲线比较,即可得出样品中的磺胺类药物的比例和多少。

本发明的有益效果是:该磺胺七合一检测方法及试剂盒,通过在玻璃容器中将等重量单位一比例份的磺胺噻唑、甲氧苄啶、磺胺喹恶啉、酞酰磺噻唑、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺甲嘧啶、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪载体、间甲氧嘧啶、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪和磺胺对甲氧嘧啶的配合使用,达到了磺胺七合一检测中的仪器普通且便宜,操作技能要求低,检测时间相对短和所需费用低的优点,节约了时间提高了效率,设计合理,适用性强,给磺胺七合一检测提供了方便。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例,对于本领域的普通技术人员而言,可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型,本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

当前第1页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1