本发明涉及食品检测技术领域，具体为一种乳品中β-内酰胺的检测方法。
背景技术：
牛奶中的抗生素来自乳牛，乳牛被注射抗生素，是主要治疗乳腺发炎，乳腺炎是奶牛常见病，抗生素的使用是业界公开的秘密，牛奶中的抗生素可能导致饮用者过敏，或因长期接触抗生素而耐药。
乳牛因注射抗生素，导致其产下的奶水中含有残留的抗生素，由于β-内酰胺可以水解青霉素类抗生素，所以被不法分子作为解抗剂非法添加入乳品中，从而达到掩蔽抗生素的目的，影响抗生素的残留检测，β-内酰胺的产生是细菌药物耐药最常见的机制，长期食入非法添加的β-内酰胺，对人体健康会有严重影响。
目前常用的检测β-内酰胺的方法有两种，直接检测法和间接检测法，直接检测主要是基于抗原-抗体反应的检测试剂盒，费用高，其灵敏度差，特异性差，容易受到其他成分的干扰，间接检测法是应用色谱间接的测量β-内酰胺的活性，该检测方法精度高，但该检测方法时间长，重复性差，不能现场进行测试，并且这两种检测方法都需要对牛奶进行预处理。
技术实现要素：
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种乳品中β-内酰胺的检测方法，具备测量精度高、快速和检测费用低等优点，解决了现有乳品中β-内酰胺的检测方法精度较低、周期长和检测费用高的问题。
（二）技术方案
为实现上述乳品中β-内酰胺测量精度高、快速和检测费用低的目的，本发明提供如下技术方案：一种乳品中β-内酰胺的检测方法，包括以下步骤：
一、调校仪器：将酶热生物分析仪上的蠕动泵校准为0.45-0.5ml/L；
二、安装样品环：取市场上常见的非亲水透明塑料管支撑的塑胶管一根，安装在酶热生物分析仪上；
三、将酶热生物分析仪上的仪器信号放大旋钮调至80，然后将电流表指针调至中央零点位置，确保电流表工作正常；
四、调校记录仪：取市场上通用型记录仪，将其电压调至一伏左右，记录纸滚动速度为8cm/小时；
五、取适量青霉素酶溶液于容器内，再向容器内添加适量的青霉素溶液，的青霉素酶混合液，从而保持青霉素酶的活性，向酶热生物分析仪上的样品环内依次注射待测牛奶样品、青霉素酶混合液，然后将注射阀由注射档调至为上样档，检测样品8-10分钟，待样品的峰回落至基线时，注射下一个样品；
六、检测试验结束之后，将样品环从酶热生物分析仪上取下，向样品环内注入浓度为45%-60%浓度的酒精试剂，清洗仪器及样品环。
优选的，所述青霉素酶溶液及青霉素溶液由以下方法可制得：
一、材料准备：
磷酸二氢钠：3-6克；
磷酸氢二钠：15-20克；
去离子水：800-1000毫升；
青霉素样品：50-80毫升；
青霉素酶样品：6-10毫克；
牛奶：200-260毫升；
酒精试剂：300-400毫升；
二、配制样品：
S1、取3-6克磷酸二氢钠和15-20克磷酸氢二钠置于容器中，并向容器中添加800-1000毫升的去离子水，搅拌5-10分钟，静置，得到磷酸盐溶液；
S2、向磷酸盐溶液中添加6-20毫克青霉素酶样品，搅拌5-8分钟，得青霉素酶溶液，置于温度为4度的环境中储存；
S3、取少量S1中制得的磷酸盐溶液，并向其中添加6-10毫升的青霉素样品，得青霉素溶液。
优选的，所述注射样品进样品环与酶热生物分析同步进行，所述含β-内酰胺的牛奶待测样品与青霉素酶的混合液分别在两个独立的流动腔进入反应系统，在反应器内混合后产生催化反应，并且放热，酶热生物分析仪通过检测放出的热量数据通过温度传感器转化为温度数值，然后显示在酶热生物分析仪的显示屏上，便于试验人员进行记录。
优选的，所述主要的检测仪器如下：
A、双通道流动控制系统及其混合器、反应器和检测器；
B、检测传感器为温度传感器，包括热敏电阻、热电偶、热电堆和范文晶体管等；
C、电子测量为开尔文双臂电桥，差分温度测量方式，其检测灵敏度可达0.0001摄氏度-0.00015摄氏度。
优选的，所述酶热生物分析仪的检测原理是由该热焓变化所产生的反应系统的温度变化为检测信号，该温度信号可以分为差分方式或非差分方式测定。
优选的，所述的乳品β-内酰胺的检测方法可扩展至其它非含乳成分的液态食品、饮料、药品、化妆品、化学试剂和发酵制剂等。
优选的，所述样品每注射一次后，及时记录酶热生物分析仪上显示的温度数据，使用相同浓度的青霉素酶溶液和青霉素溶液对待测牛奶进行依次试验，并依次记录温度数据，将所得温度数据，去掉一个最大值，去掉一个最小值，然后求和再求得平均值，即可得到待测牛奶中所含的β-内酰胺的浓度值。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种乳品中β-内酰胺的检测方法，具备以下有益效果：
1、该β-内酰胺的检测方法，直接对乳品中的β-内酰胺进行分析：方法简单，仪器操作方便，且待测奶样品无需预处理，可直接进样分析，测量快速，完成一次测量约8分钟，检测成本低，检测一次约十元，灵敏度高，奶样品适合原料奶、奶制品和其他液态食品中的β-内酰胺的检测，并且通过该酶热生物分析仪所显示的数据，进行求平均值后可得出乳品中的β-内酰胺的浓度，从而判断乳品中的β-内酰胺的含量情况，便于工作人员了解具体情况。
具体实施方式
下面将结合本发明的实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供一种技术方案：一种乳品中β-内酰胺的检测方法，包括以下步骤：
一、调校仪器：将酶热生物分析仪上的蠕动泵校准为0.45-0.5ml/L，主要的检测仪器如下：
A、双通道流动控制系统及其混合器、反应器和检测器；
B、检测传感器为温度传感器，包括热敏电阻、热电偶、热电堆和范文晶体管等；
C、电子测量为开尔文双臂电桥，差分温度测量方式，其检测灵敏度可达0.0001摄氏度-0.00015摄氏度；
二、安装样品环：取市场上常见的非亲水透明塑料管支撑的塑胶管一根，安装在酶热生物分析仪上；
三、将酶热生物分析仪上的仪器信号放大旋钮调至80，然后将电流表指针调至中央零点位置，确保电流表工作正常；
四、调校记录仪：取市场上通用型记录仪，将其电压调至一伏左右，记录纸滚动速度为8cm/小时；
五、取适量青霉素酶溶液于容器内，青霉素酶溶液及青霉素溶液由以下方法可制得：
一、材料准备：
磷酸二氢钠：3-6克；
磷酸氢二钠：15-20克；
去离子水：800-1000毫升；
青霉素样品：50-80毫升；
青霉素酶样品：6-10毫克；
牛奶：200-260毫升；
酒精试剂：300-400毫升；
二、配制样品：
S1、取3-6克磷酸二氢钠和15-20克磷酸氢二钠置于容器中，并向容器中添加800-1000毫升的去离子水，搅拌5-10分钟，静置，得到磷酸盐溶液；
S2、向磷酸盐溶液中添加6-20毫克青霉素酶样品，搅拌5-8分钟，得青霉素酶溶液，置于温度为4度的环境中储存；
S3、取少量S1中制得的磷酸盐溶液，并向其中添加6-10毫升的青霉素样品，得青霉素溶液，再向容器内添加适量的青霉素溶液，注射样品进样品环与酶热生物分析同步进行，酶热生物分析仪的检测原理是由该热焓变化所产生的反应系统的温度变化为检测信号，该温度信号可以分为差分方式或非差分方式测定，含β-内酰胺的牛奶待测样品与青霉素酶的混合液分别在两个独立的流动腔进入反应系统，在反应器内混合后产生催化反应，并且放热，酶热生物分析仪通过检测放出的热量数据通过温度传感器转化为温度数值，然后显示在酶热生物分析仪的显示屏上，便于试验人员进行记录，的青霉素酶混合液，从而保持青霉素酶的活性，向酶热生物分析仪上的样品环内依次注射待测牛奶样品、青霉素酶混合液，然后将注射阀由注射档调至为上样档，检测样品8-10分钟，待样品的峰回落至基线时，注射下一个样品，样品每注射一次后，及时记录酶热生物分析仪上显示的温度数据，使用相同浓度的青霉素酶溶液和青霉素溶液对待测牛奶进行依次试验，并依次记录温度数据，将所得温度数据，去掉一个最大值，去掉一个最小值，然后求和再求得平均值，即可得到待测牛奶中所含的β-内酰胺的浓度值，乳品β-内酰胺的检测方法可扩展至其它非含乳成分的液态食品、饮料、药品、化妆品、化学试剂和发酵制剂等；
六、检测试验结束之后，将样品环从酶热生物分析仪上取下，向样品环内注入浓度为45%-60%浓度的酒精试剂，清洗仪器及样品环。
为了提高该乳品β-内酰胺的检测方法的准确性，检测者所使用的青霉素酶溶液及青霉素溶液的浓度对于检测乳品β-内酰胺的检测也很关键，因此我们为促使检测试验的准确性、完整性和充分性，特提出配制以下几种浓度的青霉素酶溶液及青霉素溶液的配制过程及方法。
实施例一：一种乳品β-内酰胺的检测所涉及的青霉素酶溶液及青霉素溶液的配制方法，包括以下步骤：
S1、取3克磷酸二氢钠和15克磷酸氢二钠置于容器中，并向容器中添加800毫升的去离子水，搅拌5-10分钟，静置，得到浓度为800U/ml的磷酸盐溶液；
S2、制备青霉素酶溶液：向800U/ml磷酸盐溶液中添加6毫克青霉素酶样品，搅拌5-8分钟，得浓度800U/ml青霉素酶溶液，置于温度为4度的环境中储存；
S3、制备青霉素溶液：取100毫升S1中制得的800U/ml磷酸盐溶液，并向其中添加6毫升的青霉素样品，得浓度为600U/ml青霉素溶液。
实施例二：一种乳品β-内酰胺的检测所涉及的青霉素酶溶液及青霉素溶液的配制方法，包括以下步骤：
S1、取4克磷酸二氢钠和16克磷酸氢二钠置于容器中，并向容器中添加880毫升的去离子水，搅拌5-10分钟，静置，得到浓度为900U/ml的磷酸盐溶液；
S2、制备青霉素酶溶液：向900U/ml磷酸盐溶液中添加7毫克青霉素酶样品，搅拌5-8分钟，得浓度900U/ml青霉素酶溶液，置于温度为4度的环境中储存；
S3、制备青霉素溶液：取100毫升S1中制得的900U/ml磷酸盐溶液，并向其中添加7毫升的青霉素样品，得浓度为700U/ml青霉素溶液。
实施例三：一种乳品β-内酰胺的检测所涉及的青霉素酶溶液及青霉素溶液的配制方法，包括以下步骤：
S1、取5克磷酸二氢钠和18克磷酸氢二钠置于容器中，并向容器中添加950毫升的去离子水，搅拌5-10分钟，静置，得到浓度为950U/ml的磷酸盐溶液；
S2、制备青霉素酶溶液：向950U/ml磷酸盐溶液中添加7毫克青霉素酶样品，搅拌5-8分钟，得浓度950U/ml青霉素酶溶液，置于温度为4度的环境中储存；
S3、制备青霉素溶液：取100毫升S1中制得的950U/ml磷酸盐溶液，并向其中添加10毫升的青霉素样品，得浓度为7600U/ml青霉素溶液。
实施例四：一种乳品β-内酰胺的检测所涉及的青霉素酶溶液及青霉素溶液的配制方法，包括以下步骤：
S1、取6克磷酸二氢钠和20克磷酸氢二钠置于容器中，并向容器中添加1000毫升的去离子水，搅拌5-10分钟，静置，得到浓度为1000U/ml的磷酸盐溶液；
S2、制备青霉素酶溶液：向1000U/ml磷酸盐溶液中添加7毫克青霉素酶样品，搅拌5-8分钟，得浓度1000U/ml青霉素酶溶液，置于温度为4度的环境中储存；
S3、制备青霉素溶液：取100毫升S1中制得的1000U/ml磷酸盐溶液，并向其中添加7毫升的青霉素样品，得浓度为800U/ml青霉素溶液。
本发明的有益效果是：该β-内酰胺的检测方法，直接对乳品中的β-内酰胺进行分析：方法简单，仪器操作方便，且待测奶样品无需预处理，可直接进样分析，测量快速，完成一次测量约8分钟，检测成本低，检测一次约十元，灵敏度高，奶样品适合原料奶、奶制品和其他液态食品中的β-内酰胺的检测，并且通过该酶热生物分析仪所显示的数据，进行求平均值后可得出乳品中的β-内酰胺的浓度，从而判断乳品中的β-内酰胺的含量情况，便于工作人员了解具体情况。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。