一种人抗肝肾微粒体抗体的快速定量检测试剂盒的制作方法

文档序号:12119429阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种抗LKM-1抗体的快速定量检测试剂盒,其为荧光免疫层析检测试纸卡;所述试纸卡是在PVC板上顺次相互搭接经过处理的样品垫、吸附有稀土荧光微球标记LKM-1抗原的结合垫、包被有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫,组装后形成试纸卡。

2.根据权利要求1所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,所述稀土荧光微球掺杂有铕元素;所述稀土荧光微球的直径为50-100nm。

3.根据权利要求1所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,所述LKM-1抗原为细胞色素P450 2D6蛋白(简称CYP2D6蛋白)。

4.根据权利要求2所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,所述吸附有稀土荧光微球标记LKM-1抗原的制备方法为:

1、稀土荧光微球的活化;

2、稀土荧光微球标记的CYP2D6蛋白制备:

将CYP2D6蛋白与上述活化的稀土荧光微球混合,反应过夜;然后加入硼氢化钠反应;离心洗涤3遍,重悬于的pH7.6的100mM Tris-HCl缓冲液中(含0.5%GSH、0.1%BSA和0.2%木质素磺酸钠),4℃避光保存备用。

5.根据权利要求4所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,所述吸附荧光微球标记的抗体的结合垫通过以下方法制备:将玻璃纤维膜浸泡于含0.5%GSH、1.5%木质素磺酸钠和0.5%BSA的100mM Tris-HCl缓冲液中,pH7.6;浸泡,然后取出并烘箱烘干,将玻璃纤维膜置于喷台上,用微定量喷头将稀土荧光微球标记的LKM-1抗原溶液喷到玻璃纤维膜,即得。

6.根据权利要求1所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,所述包被有检测线和质控线的硝酸纤维素膜的制备方法如下:用包被稀释液将兔抗人CYP2D6单克隆抗体和羊抗小鼠IgG抗体制成溶液,将它们分别作为检测线和质控线平行喷洒于硝酸纤维素膜上进行包被,然后置于烘箱中烘干。

7.根据权利要求6所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,所述包被稀释液为含0.5%BSA和0.5%木质素磺酸钠的100mMTris-HCl缓冲液,pH7.4。

8.根据权利要求1所述的快速定量检测试剂盒,其特征在于,将玻璃纤维膜浸泡于0.25M Tris缓冲液(pH7.5),含1.2%TritonX-100,2.5%BSA的处理液中,于4℃浸泡4个小时,然后置于烘箱中,37℃烘干4小时。

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