一种可去除干扰物的适用于HIV抗体的检测装置的制作方法

本实用新型属于HIV抗体检测领域，尤其是涉及一种可去除干扰物的适用于HIV抗体的检测装置。

背景技术：

人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus，简称HIV)，即艾滋病(AIDS，获得性免疫缺陷综合征)病毒，是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。1981年，人类免疫缺陷病毒在美国首次发现。它是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒，属逆转录病毒的一种。

HIV通过破坏人体的T淋巴细胞，进而阻断细胞免疫和体液免疫过程，导致免疫系统瘫痪，从而致使各种疾病在人体内蔓延，最终导致艾滋病。由于HIV的变异极其迅速，难以生产特异性疫苗，至今无有效治疗方法，对人类健康造成极大威胁。因而对HIV感染的诊断则是艾滋病预防控制工作的关键，诊断发现传染源才能更有效地控制艾滋病传播。

HIV抗体检测是AIDS检测中最常用的方法，目前根据血清学反应和病毒核酸序列测定，全球流行的HIV可分为2型：HIV-1型和HIV-2型，产生的相应的抗体主要有HIV-1和HIV-2两种抗体。通常通过血液对HIV抗体进行检测，及早发现被检测者是否感染了HIV。HIV抗体检测有多种方法，如凝聚法、间接免疫荧光法、酶联免疫吸附实验(ELISA)、胶体金免疫结合实验、蛋白印迹法等。目前应用最为普遍的是酶联免疫吸附实验(ELISA)，该方法灵敏度高，可进行大规模的人群筛选，但检测时必须由专业人员操作，还必须配合一定的仪器和设备使用，操作时间较长，无法当场出结果，不利于病人追踪。而我国一些边远地区受条件限制，无法使用ELISA法进行有效的筛选。

胶体金免疫层析技术是在酶免疫结合实验的基础上发展起来的一种固相标记免疫测定技术。通过血液中HIV抗体检测就可快速判断被检测者是否感染HIV，具有灵敏度高，操作简单，检测时间短，检测不受地域限制等优点，是较为理想的检测方法。

免疫检测法中能够改变被检测物浓度或改变被检物与相应检测抗体结合能力的物质,均可能对检测结果造成干扰。内源性干扰因素包括自身抗体、异嗜性抗体、人抗动物抗体及其他一些结合蛋白等。脂血、交叉反应及一些分析前变异、基质效应、甚至检测的设备不同也可对免疫检测造成干扰。这些干扰可引起许多检测结果的假性升高或降低,包括激素、肿瘤标志物、药物、肌钙蛋白和病原微生物的血清学检测等,进而影响临床对疾病的诊断和治疗的评估。由于各种干扰因素会导致免疫检测的假阳性或假阴性结果，进而引起临床对疾病的误诊误判，甚至错误的治疗，因此临床和实验室都必须对免疫检测中的干扰因素给予足够的重视。

当加入某些抗干扰物质后，比如动物IgG，可以消除部分影响，但是，加入的动物IgG又会对检测本身的抗原抗体反应产生影响，因此需要设计一种引入消除干扰物质，去除干扰，而又不会影响检测本身的抗原抗体反应的检测装置。

技术实现要素：

有鉴于此，本实用新型旨在提出一种可去除干扰物的适用于HIV抗体的检测装置，以解决上述技术问题。

为达到上述目的，本实用新型的技术方案是这样实现的：

一种可去除干扰物的适用于HIV抗体的检测装置，所述检测装置包括加样板、检测卡和标记磁珠；

所述加样板上设有若干用于放置检测卡的卡槽，所述卡槽的底部设有磁铁；

所述检测卡包括卡壳底、卡壳盖和试剂条，所述卡壳盖盖合于卡壳底的顶端，所述卡壳盖的上表面设有视窗和圆形的加样孔，所述卡壳底的上表面设有用于放置试剂条的放置区，所述试剂条包括硝酸纤维素膜、胶体金结合垫、样品垫和吸水滤纸，所述放置区包括设置于样品垫左右两侧的竖直挡板，设置于吸水滤纸左右两侧的围栏，设置于试剂条下方的若干支撑板和设置于试剂条前后两端的用于固定试剂条的U型挡板；

所述标记磁珠位于样品垫的上表面，所述标记磁珠的外表面依次包被有抗干扰物质层和待测样品层，所述标记磁珠与磁铁的位置相对应。

进一步地，所述抗干扰物质为IgG。

进一步地，所述卡壳盖的下表面均匀设有三个压板，所述压板与卡壳盖的下表面相垂直。

进一步地，所述加样孔的底端固定设有导流罩，所述导流罩的形状为从上到下直径逐渐减小的圆台形，所述导流罩的底端位于样品垫的上方。

进一步地，所述卡壳底的厚度为0.5-1mm。

进一步地，所述样品垫的下方还设有倾斜支板，所述倾斜支板沿层析方向向上倾斜设置，倾斜支板与卡壳底表面的夹角为4-6°；所述倾斜支板较高的一端高度与支撑板高度相等。

进一步地，两侧的竖直挡板之间的宽度大于加样孔的直径；

进一步地，所述围栏的高度小于竖直挡板的高度。

相对于现有技术，本实用新型所述的可去除干扰物的适用于HIV抗体的检测装置具有以下优势：

(1)本实用新型结构设计合理，标记磁珠的外表面依次包被有抗干扰物质层和待测样品层，能够将样品中的干扰物质去除，提高了检测的精确度。

(2)本实用新型提出了一种利用磁珠吸附法去除干扰物质的检测装置，此装置上设有标记磁珠，所述标记磁珠的外表面包被有抗干扰物质，标记磁珠上的抗干扰物质与样品中的干扰物质结合，利用磁场的方法将磁珠干扰物质复合物一起去除，然后再进行检测，以减少干扰物质对检测结果的干扰。

(3)本实用新型中卡壳底上设有竖直挡板，可以起到导流的作用；卡壳底上还设有倾斜支板，能够控制液体流速，避免层析的液体流速过快，导致检测结果不准确；卡壳底上设有支撑板，用于支撑试剂条；卡壳盖上的压板不仅能对试剂条进行固定，而且能起到控制液体流速的作用；试剂条的前后两端均设有U型挡板，能够进一步固定试剂条；加样孔下方设有导流罩，能够使得标记磁珠顺利的加入到样品垫上。

附图说明

构成本实用新型的一部分的附图用来提供对本实用新型的进一步理解，本实用新型的示意性实施例及其说明用于解释本实用新型，并不构成对本实用新型的不当限定。在附图中：

图1为本实用新型中检测装置的加样板结构示意图；

图2为本实用新型中检测装置的卡壳盖的俯视结构示意图；

图3为本实用新型中检测装置卡壳底的俯视结构示意图；

图4为本实用新型中检测装置的卡壳盖的侧视结构示意图；

图5为本实用新型中检测装置的卡壳底的侧视结构示意图；

图6为本实用新型中检测装置的卡壳底及其上的试剂条和磁珠的侧视结构示意图；

图7为本实用新型中不同检测结果判定的示意图。

附图标记说明：

1-加样板；2-卡槽；3-标记磁珠；4-卡壳底；5-卡壳盖；6-视窗；7-加样孔；8-倾斜支板；9-竖直挡板；10-U型挡板；11-支撑板；12-试剂条；13-围栏；14-磁铁；15-压板，16-导流罩。

具体实施方式

需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明创造中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

在本发明创造的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明创造和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明创造的限制。此外，术语“第一”、“第二”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”等的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明创造的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。

在本发明创造的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以通过具体情况理解上述术语在本发明创造中的具体含义。

下面将参考附图并结合实施例来详细说明本实用新型。

如图1-6所示，一种可去除干扰物的适用于HIV抗体的检测装置，所述检测装置包括加样板1、检测卡和标记磁珠3；

所述加样板1上设有六个用于放置检测卡的卡槽2，所述卡槽2的底部设有磁铁14；

所述检测卡包括卡壳底4、卡壳盖5和试剂条12，所述卡壳盖5盖合于卡壳底4的顶端，所述卡壳盖5的上表面设有视窗6和圆形的加样孔7，所述卡壳底4的上表面设有用于放置试剂条12的放置区，所述试剂条12包括硝酸纤维素膜、胶体金结合垫、样品垫和吸水滤纸，所述放置区包括设置于样品垫左右两侧的竖直挡板9，设置于吸水滤纸左右两侧的围栏13，设置于试剂条12下方的三个支撑板11和设置于试剂条12前后两端的用于固定试剂条12的U型挡板10；

所述标记磁珠3位于样品垫的上表面，所述标记磁珠3的外表面依次包被有抗干扰物质层和待测样品层，所述标记磁珠3与磁铁14的位置相对应；

所述抗干扰物质为IgG。

所述卡壳盖5的下表面均匀设有三个压板15，所述压板15与卡壳盖5的下表面相垂直。

所述加样孔7的底端固定设有导流罩16，所述导流罩16的形状为从上到下直径逐渐减小的圆台形，所述导流罩16的底端位于样品垫的上方。

所述卡壳底4的厚度为0.5mm。

所述样品垫的下方还设有倾斜支板8，所述倾斜支板8沿层析方向向上倾斜设置，倾斜支板8与卡壳底4表面的夹角为4°；所述倾斜支板8较高的一端高度与支撑板11高度相等。

两侧的竖直挡板9之间的宽度大于加样孔7的直径。

所述围栏13的高度小于竖直挡板9的高度。

本实用新型的实施过程为：

(1)磁珠的标记

1ml磁珠中加入10微升15mg/ml N-乙基-N′-(3-二甲基氨丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)，加入75微升10mg/mL N-羟基硫代琥珀酰亚胺(Sulfo-NHS)和0.1mg抗干扰物质，所述抗干扰物质为IgG，混匀后，室温反应1小时。对磁珠进行清洗得到标记磁珠，弃去上清液，加入1ml保存液。

(2)取100微升待测样品，所述待测样品为血清、血浆或全血中的一种，此处选取血清为例，加入到离心管中，再取5微升标记磁珠3，混匀，得到混合磁珠。将检测卡放置于加样板1的卡槽2内，使加样孔7位于磁铁的正上方。取上述70微升待测样品，加入到加样孔7中，进行测试。

(3)检测时，加入样品20min后观察检测线(T线)、质控线(C线)的显色情况。C线显色，T线出线，表明样本中HIV IgG呈阳性(见图7a)；C线显色，T线不显色，表明样本中的HIV IgG呈阴性(见图7b)；C线不显色(见图7c和图7d)，表明实验失败，需重新测试。

检测原理和方法

本发明创造中利用了抗原抗体反应和免疫层析检测法中双抗体夹心显色的原理，当涂覆有待测样品的标记磁珠到加样孔中时，由于磁场对标记磁珠的吸附作用，干扰物质不会随着液体的层析前行，当待测血清中含有一定浓度的HIV时，血清随着稀释液中的液体溶解胶体金结合垫中鼠源HIV单克隆抗体，并且HIV与该胶体金结合垫标记的鼠源HIV单克隆抗体发生特异性结合，形成抗原-抗体-胶体金复合物，并继续靠毛细作用向检测线移动。当血清到达检测线时，上述抗原-抗体-胶体金复合物与包被在检测线上的配对的HIV抗体进一步结合，形成抗体-抗原-抗体-胶体金双抗体夹心复合物，并在检测线上聚集显色。随着毛细作用的进一步向前，到达质控线时，由于胶体金垫中HIV单克隆抗体是鼠源性的，因此无论待测血清中是否含有HIV，均被固定于质控线的羊抗鼠二抗所捕获并显色，这种显色即保证了整个反应体系是正确的。

以上所述仅为本实用新型的较佳实施例而已，并不用以限制本实用新型，凡在本实用新型的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本实用新型的保护范围之内。