，色谱条件及质谱条件，用气相色谱质谱联用技术对标 准品进行检测，建立一个准确的检测方法。
[0050] 顶空条件为平衡温度110°c，平衡时间15min;进样针温度120°C，传输线温度 130°C;顶空瓶压力172kPa，加压时间3min，进样时间0. 05min，干吹2min，分流进样，分流比 5:1 ；
[0051] 实验考察了不同极性的气相色谱柱：非极性柱DB-5MS(30mX0. 250mmX0. 25μπι)、 强极性柱DB-WAX(30mX0. 250mmX0. 25μπι)、DB-1 (60mX0. 4mmX0. 32μπι)对 6 种待测含硫 类致嗅物质分离的影响。结果表明：选用非极性柱和极性柱时，含硫类致嗅物质的色谱峰与 溶剂峰分不开，其它待测物质色谱峰分离度也欠好；而选用强极性柱DB-1时，获得的色谱 峰峰形对称、定量准确、重现性好、分离效果好。因此，本试验选用DB-1作为色谱柱。
[0052] 柱温升温速率的优化
[0053] 由于硫化氢、甲流醇出峰时间比较接近，同时为了排除溶剂峰对分离的影响，因此 需要优化柱温的升温速率，以获得最佳分离效果。选择柱温起始温度为40°C，分别比较了升 温速率为15°C/min、10°C/min、5°C/min时分离效果，实验结果显示：当升温速率为15°C/ min时，溶剂峰与硫化氢的色谱峰分离不明显；当升温速率为10°C/min时，能够有效分离， 而继续降低升温速率为5°C/min时，色谱峰的分离效果没有明显改善，因此选择升温速率 为10°C/min。当柱温升高到110°C时，硫化氢的色谱峰已出峰，因此为了提高分析速度，将 升温速率提高为15°C/min。当柱温升高到200°C时，待测物质均已出峰，因此将柱温升温速 率提高到40°C/min。因此，最终选择柱温为：起始温度40°C，保持3min，以10°C/min升温 至ll〇°C，之后以15°C/min升温至200°C，再以40°C/min升温至240°C。
[0054] 最终确定色谱条件为色谱柱：08-1，6011^0.411111^0.32 4111;升温程序：起始温度 40°C，保持 3min，以 10°C/min升温至 110°C，再以 15°C/min升温至 200°C，再以 40°C/min 升温至240°C;进样口温度：250°C;载气：He(纯度>99. 999% );隔垫吹扫流量：3ml/min; 进样模式：不分流进样；进样量1. 〇μ1 ;
[0055] 质谱条件为离子源温度：230°C;四极杆温度：150°C;接口温度：240°C;电离方式： 电子轰击（EI)离子源；电子能量：70eV;电子倍增器电压：1671V;S頂采集模式，扫描质量 范围：40~350m/z;阈值：150 ;采样频率：2 ;溶剂延迟：4min。
[0056] 4)确证：分子特征提取：对原始数据进行处理并结合数据库进行匹配，采用质谱 进行分析，然后自动生成确证结果，对阳性制备样品保留时间结合离子源进一步确证。
[0057] 按照上述优化条件，对6种含硫类致嗅物质混合标样分析，得到标准品的保留时 间和特征离子如表1所示，气相色谱-质谱总离子流图如图1所示（浓度为200ng/ml)。
[0058] 采用上述的方法对配制好的含硫类致嗅物质系列混合标准工作溶液进行GC/MS 测定分析。每个质量浓度的样品测定3次，利用定量离子峰面积绘制标准曲线，以目标物的 峰面积（Y)对其质量浓度（X，ng/ml)进行线性回归，得到各含硫类致嗅物质的线性方程、相 关系数和线性范围如表2,6种含硫类致嗅物质的选择性离子色谱图和扫描质谱图见图2、 图3、图4、图5、图6和图7。
[0059] 表2 :6种挥发性含硫类致嗅物质线性方程、相关系数、线性范围及检测限
[0060]
[0061 ] 实施例2 :对水产品的检测
[0062] 1)标准溶液制备
[0063] 分别准确称取6种含硫类致嗅物质标准品0.lg(精确到0.OOOlg)，用正己烷定容 至50ml，得到含硫类致嗅物质标准储备液，浓度为2.Omg/ml。准确移取上述标准储备液，以 正己烧逐级稀释配制含硫类致嗅物质：10ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml、1μg/ml系 列混合标准工作溶液。
[0064] 2)样品前处理
[0065] 分别选用正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯对样品进行前处理，实验结果表明：正己烷 提取效果最好，因此，选择正己烷提取样品中的含硫类致嗅物质。
[0066] 选取不同种类的水产品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温 条件下离心分出有机相；
[0067] 作为优选，超声提取时保持温度在30°C以下。加入一定浓度的标准品进行检测分 析比较。
[0068] 3)测定
[0069] 通过优化的顶空条件，色谱条件及质谱条件，用气相色谱质谱联用技术对标准品 进行检测，建立一个准确的检测方法。对建立的方法对可疑样品，用正己烷超声萃取，气相 色谱分离，外标法定量测定，并检测分析水产品中的加标回收率。
[0070] 4)确证
[0071] 对原始数据进行处理并结合数据库进行匹配，采用质谱进行分析，然后自动生成 确证结果，对阳性制备样品保留时间结合离子源进一步确证。
[0072] 由表2可知，本方法重现性好，线性范围广，相关系数达0. 995以上，其灵敏度高， 检测限低，达到ppb级。
[0073] 取鱼样品进行加标回收试验，加混合标样200ng/ml，各进行6次样品测定，同时做 空白样试验，检测其本底成分，结果见表3。
[0074] 表3:回收率及精密度（η= 6)
[0075]
[0076] *N.D代表检测的浓度低于定量限
[0077] 由表3可知，本试验采用的样品处理方法，能够达到国家标准规定的要求。
[0078] 综上，本发明的气相色谱质谱联用技术检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法 操作简便快速，灵敏度高，其回收率及重复性能满足日常检测的要求。采用正己烷超声萃取 样品，有效地减少了基体成分的干扰。而且，该方法具有高通量、高灵敏度、高分辨率、高质 量精确度及可行的线性范围，可利用质谱定性的功能，对含硫类致嗅物质进行检测，大大地 减少了假阳性等误判事件，极大地提高了检测机构对水产品风险的监测能力。结果表明，6 种含硫类致嗅物质在10~l〇〇〇ng/mL范围内线性关系良好，r均大于0. 991，相对标准偏差 (n = 6)均小于10%。该方法简单、灵敏度高、分析时间短，适用于水产品中6种挥发性含 硫类致嗅物质的实际检测分析。
【主权项】
1. 一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法，其特征在于，所述的方法包括如下 的步骤： 1) 对标准品的配置： 准确称量6种含硫类致嗅物质的标准品用正己烷溶解来配置标准品溶液， 2) 待检测样品前处理： 取待检测的水产品样品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温条件 下离心分出有机相； 3) 测定： 标准品通过顶空进入质谱，进行一级准确质量数的采集，扫描采集参数；其中顶空条 件为平衡温度ll〇°C，平衡时间15min;进样针温度120°C，传输线温度130°C;顶空瓶压力 172kPa，加压时间3min，进样时间0. 05min，干吹2min，分流进样，分流比5:1 ; 色谱条件如下： 色谱柱为60mX0. 4mmX0. 32μπι的DB-1柱；升温程序：起始温度40°C，保持3min，以 10°C/min升温至110°C，再以15°C/min升温至200°C，再以40°C/min升温至240°C;进 样口温度：250°C;载气为氦气；隔垫吹扫流量：3ml/min;进样模式：不分流进样；进样量 Ι.ΟμΙ ; 质谱条件如下： 离子源温度：230°C;四极杆温度：150°C;接口温度：240°C;电离方式为电子轰击离子 源；电子能量为70eV;电子倍增器电压为1671V;S頂采集模式，扫描质量范围：40~350m/ z;阈值：150 ;采样频率：2 ;溶剂延迟：4min; 4) 选取不同种类的水产品粉碎后，加入正己烷进行超声提取30min，提取结束后低温 条件下离心分出有机相；然后对有机相按照步骤3)进行测定，确定是否含有含硫类致嗅物 质。2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤1)的标准品溶液的浓度为 10ng/ml-1000ng/ml〇3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤1)中超声提取时温度在30°C以 下。4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的6种含硫类致嗅物质为硫化氢、甲硫 醇、甲硫醚、二硫化碳、二甲二硫、二甲三硫。
【专利摘要】本发明提供一种检测水产品中6种含硫类致嗅物质的方法，本发明的检测方法操作简便快速，灵敏度高，水产品基质下其检出限可达2ppb以下，其回收率及重复性能满足日常检测的要求，采用基质分散法净化样品，有效地减少了基体成分的干扰，而且，本方法具有高通量、高灵敏度、高分辨率，高质量精确度及可行的线性范围，利用气相色谱质谱定性定量的功能，对水产品中含硫类致嗅物质进行检测，大大地减少了假阳性等误判事件，极大地提高了检测机构对水产品风险的监测能力，经检测后的水产品更为卫生安全。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105388224
【申请号】CN201510675222
【发明人】薛超波, 蒋玲波, 王萍亚, 夏瑛瑛
【申请人】舟山市食品药品检验检测研究院
【公开日】2016年3月9日
【申请日】2015年10月17日