一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及食品、药物分析领域，具体涉及一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法。
【背景技术】
[0002]决明属于豆科植物。决明子是豆科植物决明的干燥成熟种子，国家卫生部颁布的药食同源植物。始载于《神农草本经》，决明子被列为上品，其味甘、苦，微寒，入肝、肾经，具有降压、降脂、保肝、明目、润肠和抗菌等作用。在民间决明子有着悠久的使用历史，或泡茶饮，或炒后与其它药物配伍。
[0003]决明子多糖是决明子中具有医疗保健作用的主要成分之一，具有清除自由基和抗氧化功能。富含多糖的决明子水提醇沉物或水提物具有显著的降压和调节免疫等作用。
[0004]多糖的质量是影响其功效活性的关键点。如何用一种简便、快捷、准确的方法来控制决明子多糖的质量，是亟待解决的一个难题。已有文献报道利用指纹图谱技术控制多糖的质量，但多采用单一指纹图谱，根据保留时间的范围进行直接判断(CN102008515A，一种灵芝孢子粉指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱)，或者辅助于聚类分析统计学手段(CN102680607A，一种基于指纹图谱的可可粉掺假检测方法)进行多糖的质量判定。由于对于同一种品种来源的多糖，其高级结构具有复杂性而单糖组成成分具有相对稳定性，以及仪器检测方法的灵敏性，因此现有方法具有难以克服的缺点，即难于判定未知样品是否符合标准样品的指纹图谱，时而出现假阳性结果。本发明采用多维指纹图谱综合判断，辅助于统计学手段，综合结果数据，从而得到可靠结论。
【发明内容】
[0005]为解决上述问题，本发明提供了一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，检测精确度高。
[0006]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为:
[0007]—种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，包括如下步骤:
[0008]S1、构建标准品决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱；
[0009]S2、采用Kennard-Stone算法对步骤SI采集的图谱进行优选，剔除掉样品图谱中异常样品图谱，然后选择并设定训练集和测试集；
[0010]S3、针对步骤SI采集的图谱特性，设定最佳分解层数，并按照最佳分解层数对步骤SI采集的图谱进行双树复小波变换，得到各层分解系数；
[0011]S4、对步骤S3所得的各层分解系数分别进行重构，得到各层重构的图谱；
[0012]S5、对步骤S4所得的各层重构的图谱，使用直接标准化算法对图谱进行校正；
[0013]S6、将校正后决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱构建成三维标准指纹图谱；
[0014]S7、构建待检测样品的决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图，构建成三维图谱后与步骤S6所得的三维标准指纹图谱进行相似度评价，当相似度均大于85%以上，则表明待检测样品中的决明子多糖合格。
[0015]其中，标准品和待检测样品所使用的决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图构建方法需一 Sc ο
[0016]其中，所述步骤S4中所述的重构是对不同的图谱的分解后的每一层小波系数分别进行重构。
[0017]本发明具有以下有益效果:
[0018]建立了决明子多糖的指纹图谱技术标准，有效地全面监控原料质量，从而保障产品的质量稳定、均匀、可控;采用不同的检测分析方法，构建三维指纹图谱标准库，可协同地、互补地、全面地监控原料药材、半成品、成品的质量，通过色谱指纹特征相似度的比较，评价优劣、稳定性和一致性，弥补现行质量控制方法或单一指纹图谱的不足;采用双树复小波对图谱进行多尺度分解并重构，然后应用分段直接标准化对重构每一层图谱进行校正提高了标准三维图谱模型构建的精确度，从而提高了检测的精确度。
【具体实施方式】
[0019]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0020]本发明实施例提供了一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，其特征在于，包括如下步骤:
[0021]S1、构建标准品决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱；
[0022]S2、采用Kennard-Stone算法对步骤SI采集的图谱进行优选，剔除掉样品图谱中异常样品图谱，然后选择并设定训练集和测试集；
[0023]S3、针对步骤SI采集的图谱特性，设定最佳分解层数，并按照最佳分解层数对步骤SI采集的图谱进行双树复小波变换，得到各层分解系数；
[0024]S4、对步骤S3所得的各层分解系数分别进行重构，得到各层重构的图谱；
[0025]S5、对步骤S4所得的各层重构的图谱，使用直接标准化算法对图谱进行校正；
[0026]S6、将校正后决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱构建成三维标准指纹图谱；
[0027]S7、构建待检测样品的决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图，构建成三维图谱后与步骤S6所得的三维标准指纹图谱进行相似度评价，当相似度均大于85%以上，则表明待检测样品中的决明子多糖合格。
[0028]标准品和待检测样品所使用的决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图构建方法需一致。
[0029]所述步骤S4中所述的重构是对不同的图谱的分解后的每一层小波系数分别进行重构。
[0030]其中，所述决明子多糖GC标准指纹图谱的构建是先将决明子多糖标准品水解产物的糖腈乙酸酯衍生化，随后采用气相色谱法分析供试品溶液，最终获得决明子多糖GC指纹图谱;所述决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱的构建是先将决明子多糖标准品进行完全水解，随后进行决明子多糖标准品水解产物的1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(即PMP)衍生化反应，再进行高效液相色谱的指纹分析，最终按照获得的结果绘制决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱。
[0031]以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，其特征在于，包括如下步骤: 51、构建标准品决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱； 52、采用Kennard-Stone算法对步骤SI采集的图谱进行优选，剔除掉样品图谱中异常样品图谱，然后选择并设定训练集和测试集； 53、针对步骤SI采集的图谱特性，设定最佳分解层数，并按照最佳分解层数对步骤SI采集的图谱进行双树复小波变换，得到各层分解系数； 54、对步骤S3所得的各层分解系数分别进行重构，得到各层重构的图谱； 55、对步骤S4所得的各层重构的图谱，使用直接标准化算法对图谱进行校正； 56、将校正后决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱构建成三维标准指纹图谱； 57、构建待检测样品的决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图，构建成三维图谱后与步骤S6所得的三维标准指纹图谱进行相似度评价，当相似度均大于85%以上，则表明待检测样品中的决明子多糖合格。2.根据权利要求1所述的一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，其特征在于，标准品和待检测样品所使用的决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图构建方法需一致。3.根据权利要求1所述的一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，其特征在于，所述步骤S4中所述的重构是对不同的图谱的分解后的每一层小波系数分别进行重构。
【专利摘要】本发明公开了一种利用指纹图谱来控制决明子多糖质量的方法，包括如下步骤：构建标准品决明子多糖GC标准指纹图谱、决明子多糖完全水解下的HPLC标准指纹图谱以及决明子多糖不完全水解下的MS标准指纹图谱；采用双树复小波对图谱进行多尺度分解并重构，然后应用分段直接标准化对重构每一层图谱进行校正后构建三维标准指纹图谱；构建待检测样品的三维图谱，并与所得的三维标准指纹图谱进行相似度评价。本发明采用不同的检测分析方法，构建三维指纹图谱标准库，可协同地、互补地、全面地监控原料药材、半成品、成品的质量，通过色谱指纹特征相似度的比较，评价优劣、稳定性和一致性，检测精度高。
【IPC分类】G01N30/02
【公开号】CN105606730
【申请号】CN201511007602
【发明人】廉莲, 贺凤伟
【申请人】辽宁科技学院
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2015年12月23日