专利名称：霍霍巴组培快速繁殖方法
技术领域：
本发明涉及到本发明涉及霍霍巴的组培快速繁殖方法，属于植物的人工繁殖和栽培方法技术领域。
背景技术：
霍霍巴(Simmondisa Chinesis)，英文名Jojoba，霍霍巴科，霍霍巴属。原产墨西哥和美国加州，雌雄异株。种子中的霍霍巴油含量达50％以上，主要成分是不饱和高级醇和脂肪酸，有良好的稳定性，极易与皮肤融合。具有抗氧化、耐高温等特性，是高科技领域的高级润滑油和制造医药和化妆品的原料，被称为“二十一世纪可再生资源”和“植物黄金”。霍霍巴在我国主要依靠进口种子繁殖，而且繁殖力很低。目前广西、广东、云南等省、区有少数引种，关于霍霍巴成年植株和实生苗的茎尖繁殖的报道很少，并且存在很多问题，主要表现在多芽率低、玻璃苗严重、易褐化、难以生根以及生根时间长。因而严重制约了霍霍巴在我国的大面积推广。
发明内容
本发明的目的在于提供一种霍霍巴组培快速繁殖方法，进行工厂化生产以满足市场需求。
本发明的技术方案是这样实现的这种霍霍巴组培快速繁殖方法，其主要特点是A、茎尖消毒取霍霍巴植物茎尖，用流水冲洗8-12小时，用滤纸吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％消毒3-5分钟，无菌水冲洗至清；
B、启动培养将冲洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接种到如下比例的启动培养基中MS基本培养基4736.43毫克/升、水解乳蛋白200毫克/升，植物生长激素0.5-4毫克/升，食用糖15-40克/升，水余量；放置接种室，培养温度22-26℃，光照强度1000-3000勒克司，进行光照培养；C、增殖培养将培育3厘米以上的试管苗分别剪成0.5厘米以上的茎段，按照如下比例接种到增殖培养基中MS基本培养基4736.43毫克/升、肌醇200-500毫克/升，水解乳蛋白200-500毫克/升，植物生长激素0.5-4毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖15-40克/升，水余量；进行增殖培养30-40天；D、生根培养剪取3厘米左右的健壮试管苗，按照如下比例接种到生根培养基中MS基本培养基2368.22毫克/升、添加植物生长激素0.5-4毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量；进行生根培养20-30天。
所述的霍霍巴组培快速繁殖方法的延伸技术方案包括步骤B、C、D中霍霍巴组培所述的培养基中涉及的植物生长激素包括6-糠基嘌呤，6-苄基嘌呤，赤霉素、吲哚丁酸，吲哚乙酸，萘乙酸其中一种或几种。
所述的霍霍巴组培快速繁殖方法的延伸技术方案还包括步骤B、中霍霍巴组培所述的启动培养基中涉及的植物生长激素包括6-糠基嘌呤1-2毫克/升，6-苄基嘌呤0.5-4.0毫克/升。所述的霍霍巴组培快速繁殖方法的延伸技术方案还包括步骤C中霍霍巴组培所述的增殖培养基中涉及的植物生长激素包括6-苄基嘌呤0.5-3毫克/升，赤霉素0.5-1毫克/升。
所述的霍霍巴组培快速繁殖方法延伸技术方案还包括步骤D中霍霍巴组培所述的生根培养基中涉及的植物生长激素包括吲哚丁酸0.5-3毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，萘乙酸0.5毫克/升。
采用植物组织培养的方法繁殖霍霍巴，不仅可以节约大量外汇，而且不受外界条件的影响，四季皆可进行，节约育苗占地，降低生产成本。植物组织培养技术是利用细胞的全能性，采取植物体上的细胞团或一块组织，通过人为条件的控制，使这些组织形成千百万植株，并且保存了母体的全部优良性状，且遗传性状稳定。这种方法可在短期内形成大量优良试管苗，进行规模化、工厂化生产。
具体实施例方式
下面结合霍霍巴组培的繁殖实例说明本发明的具体实施方式
。
实施例11、取霍霍巴植物材料的茎尖，用流水冲洗8-12小时，用滤纸吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％消毒3-5分钟，无菌水冲洗至清。
2、将冲洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接种到本发明的启动培养基中，启动培养基的组成比例是在4736.43毫克/升MS基本培养基中加入水解乳蛋白200毫克/升，6-糠基嘌呤2毫克/升，6-苄基嘌呤0.5毫克/升，食用糖2500毫克/升，水余量。放置接种室，进行光照培养。
3、将培育3厘米以上的试管苗分别剪成0.5厘米以上的茎段，接种到本发明的增殖培养基中，增殖培养基的组成比例包括在4736.43毫克/升MS基本培养基中加入肌醇200毫克/升，水解乳蛋白500毫克/升，6-苄基嘌呤3毫克/升，赤霉素0.5毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖3000毫克/升，水余量。进行增殖培养，尽快达到所需数量。一般5天以后芽开始萌动，20天左右芽分化数达到8.5±2。该培养基玻璃化现象明显降低，与对照相比，一般可以降低50％以上。待试管苗长至3厘米以上，进行生根培养。
4、剪取3厘米左右的健壮试管苗接种到本发明的生根培养基中，生根培养基中是以2368.22MS培养基为基本培养基，添加吲哚丁酸2毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，萘乙酸0.5毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量，进行生根培养。培养5-8天左右，基部膨大。培养25天左右，生根率100％。根数达3-5条，根长0.5厘米左右即可移栽。在正常管理条件下，一般移栽成活率90％以上。
本发明组培的培养基中由于使用了聚乙烯醇、活性碳等保护性组分，并且根据不同培养需求选择性地使用植物生长激素，多芽率大幅度提高，可达8.5±2，最多达18芽/块；玻璃化苗10％以下；褐化率为0；生根率100％，生根时间在25天左右。本发明试管苗增殖系数8以上，一年可继代10次。在厂房面积为50平方米的条件下，每一外植体可年产试管苗500万株以上。并且遗传性状稳定，完全可以进行工厂化生产。
实施例21、取霍霍巴植物材料的茎段，用流水冲洗12-24小时，用滤纸吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％常规消毒后，无菌水冲洗至清。
2、将冲洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接种到本发明的启动培养基中，启动培养基的组成比例是在4736.43毫克/升MS基本培养基中加入水解乳蛋白200毫克/升，6-糠基嘌呤1毫克/升，6-苄基嘌呤0.5毫克/升，食用糖2500毫克/升，水余量，放置接种室，进行光照培养。
3、将培育3厘米以上的试管苗分别剪成0.5厘米以上的茎段，接种到本发明的增殖培养基中，增殖培养基的组成比例是在4736.43毫克/升MS基本培养基中加入肌醇500毫克/升，水解乳蛋白200毫克/升，6-苄基嘌呤0.5-2毫克/升，赤霉素1毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖40克/升，水余量，进行增殖培养。待试管苗长至5厘米左右时，进行生根培养。该培养玻璃化现象明显降低，与对照相比，一般可以降低50％以上。待试管苗长至3厘米以上，进行生根培养。
4、剪取3厘米左右的健壮试管苗接种到本发明的生根培养基中，生根培养基的组成比例是2368.22MS培养基为基本培养基，添加吲哚丁酸3毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量，进行生根培养。培养5-8天左右，基部膨大。培养25天以上即可生根，生根率100％，根数3-5条，根长0.5厘米左右。在正常管理条件下，移栽成活率90％以上。
权利要求
1.霍霍巴组培快速繁殖方法，其特征在于A、茎尖消毒取霍霍巴植物茎尖，用流水冲洗8-12小时，用滤纸吸取多余水分，然后用二氯化汞0.1％消毒3-5分钟，无菌水冲洗至清；B、启动培养将冲洗至清的材料修剪至0.3厘米以上，接种到如下比例的启动培养基中MS基本培养基4736.43毫克/升、水解乳蛋白200毫克/升，植物生长激素0.5-4毫克/升，食用糖15-40克/升，水余量；放置接种室，培养温度22-26℃，光照强度1000-3000勒克司，进行光照培养；C、增殖培养将培育3厘米以上的试管苗分别剪成0.5厘米以上的茎段，按照如下比例接种到增殖培养基中MS基本培养基4736.43毫克/升、肌醇200-500毫克/升，水解乳蛋白200-500毫克/升，植物生长激素0.5-4毫克/升，聚乙烯醇1-3克/升，食用糖15-40克/升，水余量；进行增殖培养30-40天；D、生根培养剪取3厘米左右的健壮试管苗，按照如下比例接种到生根培养基中MS基本培养基2368.22毫克/升、添加植物生长激素0.5-4毫克/升，活性炭0.5-1‰，食用糖20克/升，水余量；进行生根培养20-30天。
2.根据权利要求1所述的霍霍巴组培快速繁殖方法，其特征在于步骤B、C、D中霍霍巴组培所述的培养基中涉及的植物生长激素包括6-糠基嘌呤，6-苄基嘌呤，赤霉素、吲哚丁酸，吲哚乙酸，萘乙酸其中一种或几种。
3.根据权利要求1所述的霍霍巴组培快速繁殖方法，其特征在于步骤B、中霍霍巴组培所述的启动培养基中涉及的植物生长激素包括6-糠基嘌呤1-2毫克/升，6-苄基嘌呤0.5-4.0毫克/升。
4.根据权利要求1所述的霍霍巴组培快速繁殖方法，其特征在于步骤C中霍霍巴组培所述的增殖培养基中涉及的植物生长激素包括6-苄基嘌呤0.5-3毫克/升，赤霉素0.5-1毫克/升。
5.根据权利要求1所述的霍霍巴组培快速繁殖方法，其特征在于步骤D中霍霍巴组培所述的生根培养基中涉及的植物生长激素包括吲哚丁酸0.5-3毫克/升，吲哚乙酸0.5毫克/升，萘乙酸0.5毫克/升。
全文摘要
本发明提供一种霍霍巴组培快速繁殖方法，进行工厂化生产以满足市场需求。霍霍巴的组培步骤包括A.茎尖消毒,B.启动培养,C.增殖培养,D.生根培养。采用植物组织培养的方法繁殖霍霍巴，不仅可以节约大量外汇，而且不受外界条件的影响，四季皆可进行，节约育苗占地，降低生产成本，并且保存了母体的全部优良性状，遗传性状稳定。这种方法可在短期内形成大量优良试管苗，进行规模化、工厂化生产。
文档编号A01H4/00GK1541517SQ20031010964
公开日2004年11月3日 申请日期2003年11月6日 优先权日2003年11月6日
发明者王玉珍, 罗景兰, 徐进 申请人:中国科学院遗传与发育生物学研究所