本发明涉及植物组织培养技术领域，具体而言，涉及一种绿萝丛生芽诱导培养基及绿萝丛生芽培养方法。
背景技术：
绿萝(学名:Epipremnum aureum)，属于天南星科麒麟叶属植物，大型常绿藤本，性喜温暖、潮湿环境，生长于热带地区，常攀援生长在雨林的岩石和树干上，其缠绕性强，气根发达，可以水培种植。
绿萝是非常优良的室内装饰植物之一，攀藤观叶花卉。萝茎细软，叶片娇秀。在家具的柜顶上高置套盆，任其蔓茎从容下垂，或在蔓茎垂吊过长后圈吊成圆环，宛如翠色浮雕。这样既充分利用了空间，净化了空气，又为呆板的柜面增加了线条活泼、色彩明快的绿饰，极富生机，给居室平添融融情趣。形态特征：绿萝藤长数米，节间有气根，随生长年龄的增加，茎增粗，叶片亦越来越大。叶互生，绿色，少数叶片也会略带黄色斑驳，全缘，心形。它的花语“守望幸福”也增加了其可观赏度。
环保学家发现，一盆绿萝在8～10平方米的房间内就相当于一个空气净化器，能有效吸收空气中甲醛、苯和三氯乙烯等有害气体。绿萝不但生命力顽强，而且在室内摆放，其净化空气的能力不亚于常春藤和吊兰。新铺的地板非常容易产生有害物质。由于绿萝能同时净化空气中的苯、三氯乙烯和甲醛，因此非常适合摆放在新装修好的居室中。
绿萝还具有很好的药用价值，具有活血散瘀的功效。可以治疗跌打损伤。
目前，绿萝主要通过扦插繁殖，插条用量大，占地面积广，同时，绿萝生长环境高温高湿，扦插繁殖的后代极易感病菌，生产中经常出现大规模茎腐、根腐现象。
植物组织培养中要用到各种培养基。培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要，添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子。
但是目前，还没有专门适合于绿萝组织培养的培养基，严重影响了对绿萝这种经典材料的研究。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供的一种绿萝丛生芽诱导培养基及绿萝丛生芽培养方法，更好的克服了上述现有技术存在的问题和缺陷，一方面弥补现有技术中绿萝组织培养研究的空白，另一方面提供一种绿萝快速的育种方法，可以短时间内繁殖出大量的绿萝丛生芽，大大提高绿萝的繁殖系数。
一种绿萝丛生芽诱导培养基，所述丛生芽诱导培养基包括MS基本培养基、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉。
进一步地，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.05～0.10mg/L，吲哚丁酸的浓度为1.0～2.0mg/L，萘乙酸的浓度为0.5～1.0mg/L，蔗糖30g/L，香蕉泥30g/L，琼脂粉7g/L。
进一步地，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.10mg/L，吲哚丁酸的浓度为2.0mg/L，萘乙酸的浓度为0.5mg/L，蔗糖30g/L，香蕉泥30g/L，琼脂粉7g/L。
进一步地，所述丛生芽诱导培养基的pH为5.8～6.0。
本发明还提供了一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：所述丛生芽诱导培养基包括MS基本培养基、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉。
(2)将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中培养得到绿萝丛生芽。
进一步地，所述丛生芽诱导培养基中，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.05～0.10mg/L，吲哚丁酸的浓度为1.0～2.0mg/L，萘乙酸的浓度为0.5～1.0mg/L，蔗糖30g/L，香蕉泥30g/L，琼脂粉7g/L。
进一步地，所述步骤(1)中，将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经灭菌冷却至室温后待用。
进一步地，所述步骤(1)中的灭菌方法为高压灭菌或高温灭菌。
进一步地，所述步骤(2)中的培养条件为：光照强度为2000～30001x，光照时间为12h/d，温度为25～28℃，湿度为50～65％。
进一步地，所述步骤(2)中，绿萝丛生芽培养培养时长为30～40天。
与现有技术相比，本发明的一种绿萝丛生芽诱导培养基及绿萝丛生芽培养方法的有益效果是：
本发明的绿萝丛生芽诱导培养基及绿萝丛生芽培养方法利用绿萝的愈伤组织诱导出绿萝丛生芽，得到大量同质无性系；并且以MS培养基为基本培养基，通过结合特定浓度的6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸植物生长调节剂，以及香蕉泥、蔗糖及琼脂粉，使所得丛生芽诱导培养基可有效诱导出。利用该丛生芽诱导培养基对绿萝愈伤组织进行丛生芽培养，可使诱导效率达到92％以上，提高绿萝丛生芽的繁殖系数，显著提高组培效率，易于工厂化生产绿萝组培苗。
为使本发明的上述目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，作详细说明如下。
具体实施方式
为了便于理解本发明，下面结合实施例的方式对本发明的技术方案做详细说明，在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。
但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
如本文所用，术语：
“一个”、“一种”和“所述”可交换使用并指一个或多个。
“和/或”用于表示所说明的情况的一者或两者均可能发生，例如，A和/或B包括(A和B)和(A或B)；
另外，本文中由端点表述的范围包括该范围内所包含的所有数值(例如，1至10包括1.4、1.9、2.33、5.75、9.98等)。
另外，本文中“至少一个”的表述包括一个及以上的所有数目(例如，至少2个、至少4个、至少6个、至少8个、至少10个、至少25个、至少50个、至少100个等)。
本发明提供了一种绿萝丛生芽诱导培养基，所述丛生芽诱导培养基包括MS基本培养基、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉。
优选地，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.05～0.10mg/L，例如0.05mg/L、0.06mg/L、0.07mg/L、0.08mg/L、0.09mg/L或0.10mg/L等；
优选地，所述吲哚丁酸的浓度为1.0～2.0mg/L，例如1.0mg/L、1.2mg/L、1.4mg/L、1.5mg/L、1.8mg/L或2.0mg/L等；
所述萘乙酸的浓度为0.5～1.0mg/L，例如0.5mg/L、0.6mg/L、0.7mg/L、0.8mg/L、0.9mg/L或1.0mg/L等；
所述蔗糖的浓度为30g/L；
所述香蕉泥的浓度为30g/L；
所述琼脂粉的浓度为7g/L。
优选地，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.10mg/L，吲哚丁酸的浓度为2.0mg/L，萘乙酸的浓度为0.5mg/L，蔗糖30g/L，香蕉泥30g/L，琼脂粉7g/L。
优选地，所述丛生芽诱导培养基的pH为5.8～6.0，例如pH＝5.8，pH＝5.9或pH＝6.0。
上述，需要理解的是，MS培养基为组织的生长提供所需的碳源、氮源、水、无机物和生长因子。
所述MS培养基包括大量元素、微量元素和有机化合物，具体的配方如下：
大量元素的组分及其对应的浓度为：硝酸钾1900mg/L、硝酸铵1650mg/L、七水硫酸镁370mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、二水氯化钙440mg/L；
微量元素的组分及其对应的浓度为：碘化钾0.83mg/L、硼酸6.2mg/L、四水硫酸锰22.3mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、六水氯化钴0.025mg/L、七水硫酸亚铁27.8mg/L、乙二胺四乙酸二钠浓度为37.3mg/L。
有机化合物的组分及其对应的浓度为：肌醇100mg/L、烟酸0.5mg/L、盐酸吡哆醇0.5mg/L、盐酸硫胺素0.1mg/L、甘氨酸2.0mg/L。
上述，可以理解的是，6-苄氨基腺嘌呤(6-Benzylaminopurine)，简称6-BA。可以理解的是，6-苄氨基腺嘌呤有味6-BA，是人工合成的细胞分裂素。6-BA具有抑制植物叶内叶绿素、核酸、蛋白质的分解，保绿防老；将氨基酸、生长素、无机盐等向处理部位调运等多种效能。6-苄氨基腺嘌呤作为一种植物生长调节剂，具有促进促进愈伤组织形成丛生芽的作用。
可以理解的是，吲哚丁酸亦作为一种植物生长调节剂，具有促进促进愈伤组织形成丛生芽的作用。
吲哚丁酸可以作为植物主根生长促进剂，常用于木本和草本植物的浸根移栽，硬枝杆插，能加速根的生长，提高植物生根的百分率，也可用于植物种子的浸种和拌种，可提高发芽率和成活率。高浓度吲哚丁酸也可促进部分组培苗的增殖。
可以理解的是，萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid)，简称NAA。萘乙酸是促进植物根系生长的植物生长调节剂，也是萘乙酰胺的中间体。萘乙酸具有促进细胞分裂与扩大，诱导形成不定根，增加坐果，防止落果，改变雌、雄花比率等。萘乙酸可经叶片、树枝的嫩表皮、种子进入到植物体内，随同营养流输导到作用部位。通常用于小麦、水稻、棉花、茶、桑、番茄、苹果、瓜类、马铃薯、林木等，是一种良好的植物生长刺激素。
可以理解的是，蔗糖为细胞的分裂、扩大、增至提供必要的能量。
可以理解的是，香蕉泥中含有大量的糖类，并且，在香蕉泥中含有植物激素，比如细胞分裂素，生长素，乙烯和赤霉素，可为植物组织细胞分裂分化提供能源。
可以理解的是，琼脂粉是从植物里提取出来的藻胶。琼脂因为有特殊的胶凝性质，尤其有显着的稳固性、滞度和滞后性，并且易吸收水分，有特殊的稳定效应；具有增量剂、增稠剂、乳化剂、胶凝剂、稳定剂、赋形剂、助悬剂、水分保持剂等功效。琼脂粉主要作用是固化培养基，起支撑作用。
本发明还提供了一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：所述丛生芽诱导培养基包括MS基本培养基、6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉。
(2)将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中培养得到绿萝丛生芽。
优选地，所述丛生芽诱导培养基中，所述6-苄氨基腺嘌呤的浓度为0.05～0.10mg/L，吲哚丁酸的浓度为1.0～2.0mg/L，萘乙酸的浓度为0.5～1.0mg/L，蔗糖30g/L，香蕉泥30g/L，琼脂粉7g/L。
优选地，所述步骤(1)中，将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经灭菌冷却至室温后待用。
优选地，所述步骤(1)中的灭菌方法为高压灭菌或高温灭菌。
优选地，所述步骤(2)中的培养条件为：光照强度为2000～30001x；光照时间为12h/d；温度为25～28℃；湿度为50～65％。
优选地，所述步骤(2)中，绿萝丛生芽培养培养时长为30～40天，例如30天、35天或40天等。
为了便于理解本发明，下面结合实施例来进一步说明本发明的技术方案。申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细工艺设备和工艺流程，但本发明并不局限于上述详细工艺设备和工艺流程，即不意味着本发明应依赖上述详细工艺设备和工艺流程才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
实施例1
一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经高压灭菌冷却至室温后待用；其中各组分用量为MS基本培养基1L、6-苄氨基腺嘌呤0.05mg、吲哚丁酸1.0mg、萘乙酸0.5mg、蔗糖30g、香蕉泥30g、琼脂粉7g。
(2)接种：在超净工作台上及无菌条件下，将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中。
(3)诱导培养丛生芽：将接种好的绿萝愈伤组织在无菌、光照强度为2000～30001x、光照时间为12h/d、温度为25～28℃、湿度为50～65％的培养条件下，培养30天获得绿萝丛生芽。
实施例2
一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经高压灭菌冷却至室温后待用；其中各组分用量为MS基本培养基1L、6-苄氨基腺嘌呤0.08mg、吲哚丁酸1.5mg、萘乙酸0.5mg、蔗糖30g、香蕉泥30g、琼脂粉7g。
(2)接种：在超净工作台上及无菌条件下，将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中。
(3)诱导培养丛生芽：将接种好的绿萝愈伤组织在无菌、光照强度为2000～30001x、光照时间为12h/d、温度为25～28℃、湿度为50～65％的培养条件下，培养30天获得绿萝丛生芽。
实施例3
一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经高压灭菌冷却至室温后待用；其中各组分用量为MS基本培养基1L、6-苄氨基腺嘌呤0.1mg、吲哚丁酸2.0mg、萘乙酸0.5mg、蔗糖30g、香蕉泥30g、琼脂粉7g。
(2)接种：在超净工作台上及无菌条件下，将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中。
(3)诱导培养丛生芽：将接种好的绿萝愈伤组织在无菌、光照强度为2000～30001x、光照时间为12h/d、温度为25～28℃、湿度为50～65％的培养条件下，培养30天获得绿萝丛生芽。
实施例4
一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经高压灭菌冷却至室温后待用；其中各组分用量为MS基本培养基1L、6-苄氨基腺嘌呤0.1mg、吲哚丁酸2.0mg、萘乙酸0.8mg、蔗糖30g、香蕉泥30g、琼脂粉7g。
(2)接种：在超净工作台上及无菌条件下，将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中。
(3)诱导培养丛生芽：将接种好的绿萝愈伤组织在无菌、光照强度为2000～30001x、光照时间为12h/d、温度为25～28℃、湿度为50～65％的培养条件下，培养30天获得绿萝丛生芽。
实施例5
一种绿萝丛生芽培养方法，包括以下步骤：
(1)配制丛生芽诱导培养基：将6-苄氨基腺嘌呤、吲哚丁酸、萘乙酸、蔗糖、香蕉泥及琼脂粉溶解于MS基本培养基中，经高压灭菌冷却至室温后待用；其中各组分用量为MS基本培养基1L、6-苄氨基腺嘌呤0.10mg、吲哚丁酸2.0mg、萘乙酸1.0mg、蔗糖30g、香蕉泥30g、琼脂粉7g。
(2)接种：在超净工作台上及无菌条件下，将绿萝愈伤组织接种到步骤(1)中配制好的丛生芽诱导培养基中。
(3)诱导培养丛生芽：将接种好的绿萝愈伤组织在无菌、光照强度为2000～30001x、光照时间为12h/d、温度为25～28℃、湿度为50～65％的培养条件下，培养30天获得绿萝丛生芽。
上述实施例1～5的绿萝丛生芽实验结果如下表所示：
由表中结果分析得出如下苗结论：在相同的培养条件下，实施例1中绿萝丛生芽的诱导率为92％，健壮芽百分率为90％；实例2中绿萝丛生芽的诱导率为94％，健壮芽百分率为92％；实施例3中绿萝丛生芽的诱导率为96％，健壮芽百分率为95％；实施例4中绿萝丛生芽的诱导率为95％，健壮芽百分率为90％；实施例5绿萝丛生芽的诱导率为93％，健壮芽百分率为93％。并且各植物生长激素浓度的变化对绿萝丛生芽诱导效果具有明显影响，6-苄氨基腺嘌呤由浓度0.1mg/L降低到0.05mg/L及吲哚丁酸由浓度2.0mg/L降低到1.0mg/L时，绿萝丛生芽诱导率降低；而萘乙酸的浓度由1.0mg/L降低至0.5mg/L时，绿萝丛生芽诱导率反而有所上升。
综合以上分析，得出绿萝丛生芽诱导的最佳培养基为：
MS基本培养基1L、6-苄氨基腺嘌呤0.1mg、吲哚丁酸2.0mg、萘乙酸0.5mg、蔗糖30g、香蕉泥30g、琼脂粉7g。
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。