一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基及培养方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基及培养方法，属于植物组织 培养技术领域。
【背景技术】
[0002] 虎尾兰（Sansevieriatrifasciatavar.harnii)又称虎皮兰、千岁兰，是龙舌兰 科虎尾兰属，多年生常绿肉质草本植物。原产非洲热带和印度，是一种能净化室内环境的草 本观叶植物。其叶色美丽，似箭形的叶挺拔向上，适应性强。
[0003] 金边虎尾兰常见的繁殖方式有叶插法、分株法等，这些常规的繁殖方法繁殖系数 低，培养周期较长，而且不易获得大量的植株，且会出现品种退化现象，金边虎尾兰金边性 状易消失，影响观赏质量。组织培养已成为金边虎尾兰保持其优良性状且快速繁殖的方法。 具有繁殖系数高、保持原品种金边性状、避免种性分离、种苗不带病毒、生长一致等优点，从 而使种苗生产达到规模化、标准化和工厂化的目标。
[0004] 传统的组织培养的步骤一般是先诱导出愈伤组织，通过继代，建立能传代的愈伤 组织体系，然后诱导生芽、生根，形成完整幼苗。一步成苗法是指外植体在形成愈伤组织后， 不需要转移到分化培养基上，而是直接在原培养基上分化，分化的顺序通常是先根后芽， 直至形成健壮的全苗。它能在一步成苗培养基上直接分化出可移栽苗，简化了育苗程序，缩 短了育苗周期，提高了培养效率。
【发明内容】
[0005] 本发明为了解决问题，进而提供了一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基及培 养方法。
[0006] 本发明为解决上述技术问题采取的技术方案是：方案一：以MS为基本培养基，添 加不同浓度的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激动素组合，其中2,4_二氯苯氧乙酸的浓度为 0? 2mg/L、0. 4mg/L或 0? 6mg/L，萘乙酸的浓度为 0? 0mg/L、0.lmg/L或 0? 2mg/L，KT的浓度为 0? 5mg/L、LOmg/L或L5mg/L〇
[0007] 方案二：步骤一、配制虎尾兰一步成苗培养基，并进行灭菌处理；
[0008] 步骤二、取幼嫩无病虫害的虎皮兰叶片，用流水冲洗lh，75%酒精浸泡15s，0. 1% HgCl；^消毒剂处理5min,无菌水冲洗多次后，用解剖刀切成IcmXIcm块状；
[0009] 步骤三、将步骤二消毒灭菌过的外植体接种到苗培养基中，置于温度25±2°C条件 下进行培养，光照时间每天12-14小时，光照强度为2000-30001x;
[0010] 步骤四、光照40-50天后，得虎皮兰再生植株。
[0011] 本发明的有益效果是：本发明的培养基使虎尾兰叶片在形成愈伤组织后，不需要 转接到分化培养基上，而是直接在原培养基上分化成苗，为虎尾兰的快速繁殖提供了一条 有效的途径。
【附图说明】
[0012] 图1是是驯化移栽成功的组培苗。
【具体实施方式】
[0013]
【具体实施方式】一：本实施方式以下结合具体实施例对本发明做进一步描述和说 明。
[0014] -种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基，以MS为基本培养基，添加不同浓度 的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激动素组合，其中2,4_二氯苯氧乙酸的浓度为0. 2mg/L、 0? 4mg/L或 0? 6mg/L，萘乙酸的浓度为 0? 0mg/L、0.lmg/L或 0? 2mg/L，KT的浓度为 0? 5mg/L、 I.Omg/L或L5mg/L〇
[0015] 培养基最优配方为2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0.211^/1，萘乙酸的浓度为0.111^/ L，KT的浓度为I.Omg/L。
[0016] 或培养基最优配方为2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0.2mg/L，萘乙酸的浓度为 0? 2mg/L，KT的浓度为I. 5mg/L。
[0017]培养基40-50d后就可直接发育成完整植株，植株一次成苗率达到60%，，芽苗健 壮，根多而粗壮，移栽后成活率高。缩短了培养周期、简化了培养程序，提高了出苗率、降低 了生产成本。
[0018] 因为该培养基能较好的诱导虎尾兰叶片形成愈伤组织，愈伤组织淡黄绿色，小而 致密其诱导率高，而且一次成苗率达到60%，且芽苗健壮，根多而粗壮。
【具体实施方式】 [0019] 二：培养方法如下，步骤一、配制虎尾兰一步成苗培养基，并进行灭 菌处理；
[0020] 步骤二、取幼嫩无病虫害的虎皮兰叶片，用流水冲洗lh，75%酒精浸泡15s，0. 1% HgCl；^消毒剂处理5min,无菌水冲洗多次后，用解剖刀切成IcmXIcm块状；
[0021] 步骤三、将步骤二消毒灭菌过的外植体接种到苗培养基中，置于温度25±2°C条件 下进行培养，光照时间每天12-14小时，光照强度为2000-30001x;
[0022] 步骤四、光照40-50天后，得虎皮兰再生植株。
[0023] 采用下述试验验证本实施方式的效果：
[0024] 以MS为基本培养基，采用三因素三水平L9(34)的正交试验设计，添加不同浓度 的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激动素组合，蔗糖浓度为3%，琼脂浓度为0.7%，pH值为 5. 8。2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激动素各取三个水平，其中2,4_二氯苯氧乙酸的浓度 为 0? 2mg/L、0. 4mg/L、0. 6mg/L，萘乙酸的浓度为 0? 0mg/L、0.Img/L、0. 2mg/L，KT的浓度为 0. 5mg/L、l. 0mg/L、l. 5mg/L，配制成9组不同的虎尾兰一步成苗培养基，各组培养基激素配 比见表1。
[0025] 表1虎尾兰一步成苗培养基配比正交实验设计表L9 (34)
[0026]
【主权项】
1. 一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基，其特征在于：以MS为基本培养基，添加 不同浓度的2,4_二氯苯氧乙酸、萘乙酸、激动素组合，其中2,4_二氯苯氧乙酸的浓度为 0· 2mg/L、0. 4mg/L 或 0· 6mg/L，萘乙酸的浓度为 0· 0mg/L、0. lmg/L 或 0· 2mg/L，KT 的浓度为 0· 5mg/L、L Omg/L 或 L 5mg/L〇
2. 根据权利要求1所述一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基优化方法，其特征在 于步骤二的培养基配方为2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0. 2mg/L，萘乙酸的浓度为0. lmg/L， KT的浓度为I. Omg/L。
3. 根据权利要求1所述一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基优化方法，其特征在 于：步骤二中培养基配方为2,4-二氯苯氧乙酸的浓度为0. 2mg/L，萘乙酸的浓度为0. 2mg/ L，KT的浓度为I. 5mg/L。
4. 一种利用权利要求1所述培养基使虎尾兰一步成苗的培养方法，其特征在于： 步骤一、配制虎尾兰一步成苗培养基，并进行灭菌处理； 步骤二、取幼嫩无病虫害的虎皮兰叶片，用流水冲洗lh，75%酒精浸泡15s，0. 1 % HgCl2 的消毒剂处理5min,无菌水冲洗多次后，用解剖刀切成IcmX Icm块状； 步骤三、将步骤二消毒灭菌过的外植体接种到苗培养基中，置于温度25±2°C条件下进 行培养，光照时间每天12-14小时，光照强度为2000-30001x ; 步骤四、光照40-50天后，得虎皮兰再生植株。
【专利摘要】一种金边虎尾兰离体培养一步成苗培养基及培养方法，属于植物组织培养技术领域。本发明解决金边虎尾兰常规繁殖方法系数低，生长缓慢，难以形成规模化生产的问题。所述方法是按下述步骤进行的：步骤一、培养基消毒灭菌；步骤二、金边虎尾兰叶片幼苗消毒灭菌；步骤三、将步骤二消毒灭菌过的外植体接种到苗培养基中，置于温度25±2℃条件下进行培养，光照时间每天12-14小时，光照强度为2000-3000lx；步骤四、光照40-50天后，得虎皮兰再生植株。本发明用于金边虎尾兰离体的组织培养。
【IPC分类】A01H4-00
【公开号】CN104604686
【申请号】CN201510053903
【发明人】李媛, 侯可雷
【申请人】李媛
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年1月31日