弧菌数量快速检测方法

文档序号:579393阅读:7237来源:国知局
专利名称:弧菌数量快速检测方法
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域,具体说可用于水体或其它水域环境保护和卫生行业的弧菌监测一种仪器。
背景技术
弧菌是水产养殖中主要的细菌病原生物之一。它引起鱼类的弧菌病,其主要症状是各鳍条出血发红,肛门红肿,躯干部皮肤褪色、糜烂或隆起。有的病鱼体表现出血性溃疡,肠道通常有充血,肝脏肿大呈土黄色,有出血斑。也包括溶藻弧菌、副溶血弧菌,感染大多数的养殖鱼类,如虹鳟、鳗、香鱼、五条鰤、大鳞大马哈鱼、银大马哈鱼等,对红鳉、美洲红点鲑,鲫、银鲫、鲤鱼、乌鳢、斑马鱼、剑尾鱼、扁鲛等也有威胁。弧菌病主要流行于欧、日、美、中等,一旦流行,死亡率很高。鳗弧菌病是由鳗弧菌引起的一种细菌性鱼病,主要危害我国南方养殖的鳗鲡,对北方的鲑、鳟鱼也有一定的危害。在对虾养殖业中,弧菌是最主要的细菌性病害,如对虾红腿病死亡率达到90%;褐斑病死亡不严重,但降低水产品品质;对虾荧光病(发荧光的弧菌),高温时仅数小时即可死亡;另外对虾烂鳃病也以弧菌为主要病原,80年代以来,江苏南部海域曾发生文蛤大量死亡,3~4于即死亡85%,为溶藻弧菌引起,而台湾丽文蛤的病原菌是副溶血弧菌,总之,弧菌病一旦蔓延,就来势猛烈,许多鱼池尚来不及治菌,已死亡殆半。
由于弧菌对水产养殖业有极大的危害,人们研究了各种杀灭弧菌的方法,如投喂口服或注射弧菌疫苗,在每立方米水中泼洒1克漂白粉杀灭水中的弧菌,或用三氯异氰尿酸、磺胺甲基嘧啶、土霉素也可抑制和消灭弧菌,但是到目前为止,人们还没有预测该病流行的依据或方法,因此,以现该病流行的前兆是杀弧菌的关键,当前,检测弧菌的常规方法是平板主数法,每次耗时3~5天,生产上难以使用;更先进的DNA探针技术目前尚未推广,且只能进行定性分析。

发明内容
本发明的目的是提供利用弧菌的生理特性及种群增长原理,在设定条件下,当弧菌生长到一定密度时,由于弧菌的生长速度与设定条件有密切的关系,通过反应时间可以反推接种弧菌的密度,达到检测的目的一种弧菌数量快速检测方法。
为完成上述的发明目的所采取的技术方案利用弧菌的生理特性及种群增长原理,本方法由五部分组成,首先经控温装置,将生长温度控制在10℃~38℃之间,最佳温度25℃左右;第二步经反应器接种培养,将盐浓度设置在1%左右,生长PH值为6~10其最佳PH值为8左右;第三步通过传感器监测反应器的变化,由光电仪器自动控制出变化,当弧菌生长到一定密度时,可使专用的显示色剂变色;第四步控制器是本方法的核心,决定反应终点,是利用弧菌的生长速度与设定条件之间的关系决定反应终点;第五步显示器检测弧菌数量,通过反应器反推出接种弧菌的密度时间,达到检测目的进行杀菌。
本发明的优点可在3~8小时内检出水中弧菌数量,根据弧菌生长情况弧菌数量进行杀灭细菌,正确率高效果好。


图1为本发明流程图;图2为本发明检测方法的装置图。
具体实施例方式在反应室的设定条件下,弧菌的生长模式是指数生长,弧菌生长的胞外产物可以改变培养条件,这种培养基条件的改变达到一定程度,可以使培养基中特定的指示剂变色,变色的临界点与弧菌的接种密度有对应关系。本快速检测方法由以下五个步骤来完成检测结果,如图1所示,首先经控温装置,将生长温度控制在10℃~38℃之间,最佳温度25℃左右;第二步经反应器接种培养,将盐浓度设置在1%左右,生长PH值为6~10其最佳PH值为8左右;第三步通过传感器监测反应器的变化,由光电仪器自动控制出变化,当弧菌生长到一定密度时,可使专用的显示色剂变色;第四步控制器是本方法的核心,决定反应终点,是利用弧菌的生长速度与设定条件之间的关系决定反应终点;第五步显示器检测弧菌数量,通过反应器反推出接种弧菌的密度时间,达到检测目的进行杀菌。
监测弧菌数量的装置由图2所示,整机由恒温部分、检测部分、记时部分、显示部分及电源组成,电源220V供电连接恒温部分,由加热棒JRB经温控U15IC555电路控制;检测部分由U14 ICLM139电压比较器比较出控制信号,使三态门U13 IC74LS125开闭状态,同时控制蜂鸣器U14启动或停止;由U11 IC555电路组成的记时部分发出时钟信号,经U12 IC74LS393分频到1秒方波信号,由方波信号经IC74LS125传递给显示部分;显示部分由五只十进制运算单元U6~U10 IC74LS90和数字显示单7五只U1~U5 IC74LS247和五只共阳极数码管DS1~DS5组成,构成一个监测弧菌数最快速检测装置。
权利要求
1.一种弧菌数量快速检测方法,其特征在于整个快速检测方法由五部分组成,首先经控温装置,第二步经反应器接种培养,第三步通过传感器监测反应器变化,第四步经控制器决定反应终点,第五步显示器显示检测弧菌数量。
2.根据权利要求1所述的弧菌数量决定快速检方法,其特征在于控温装置将生长温度控制在10℃~38℃,最佳25℃左右。
3.根据权利要求1所述的弧菌数量快速检测方法,其特征在于反应器接种培养的盐浓度在1%左右,生长PH值为6~10其最佳PH值为8左右。
4.根据权利要求1所述的弧菌数量快速检测方法,其特征在于传感器监测反应器变化,是用光电仪器自动检测出变化,当弧菌生长到一定密度时,可使专用的显示色剂变色。
5.根据权利要求1所述的弧菌数量快速检测方法,其特征在于控制器是利用弧菌的生长速度与设定条件之间的关系决定反应终点。
6.根据权利要求1所述的弧菌数量快速检测方法,其特征在于显示器显示弧菌数量,是通过反应器反推出接种弧菌的密度时间,达到检测目的进行杀菌。
全文摘要
一种弧菌数量快速检测方法,其特征在于整个快速检测方法由五部分组成,首先经控制装置,第二步经反应器接种培养,第三步通过传感器监测反应器变化,第四步经控制器决定反应终点,第五步显示器显示检测弧菌数量。
文档编号C12M1/36GK1425759SQ0114266
公开日2003年6月25日 申请日期2001年12月14日 优先权日2001年12月14日
发明者袁峻峰 申请人:上海师范大学
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