转基因大豆、玉米和水稻外源基因检测用标准分子试剂盒的制作方法

文档序号:579511阅读:310来源:国知局
专利名称:转基因大豆、玉米和水稻外源基因检测用标准分子试剂盒的制作方法
技术领域
本实用新型涉及转基因检测技术,具体涉及一种转基因大豆、玉米和水稻外源基因检测用标准分子试剂盒。
(二)技术背景转基因产品的PCR检测必须以一种准确、可靠、稳定的标准物质作为阳性对照,以 防止假阴性的出现。目前国际上所构建的标准分子都是将1个目的基因克隆到1个质粒中, 或者将1个品种或品系的内参基因和目的基因同时克隆到1个质粒中,在做不同物种转基 因成分检测时,需要多个标准分子,比较繁琐。

发明内容本实用新型目的在于提供一种可以用于不同品种转基因粮食作物定性检测 CP4-EPSPS基因、CrylA(B)基因、BAR基因和PAT基因的转基因大豆、玉米和水稻外源基因 检测通用标准分子试剂盒。本实用新型的目的是这样实现的它包括一个带盖的封闭盒,封闭盒内装有载样 板和一个 Ep 管,Ep 管中装有 pMD18-T-PAT-CP4-EPSPS-CrylA(B) -BAR-RBCL 质粒。本实用新型还有这样一些技术特征1、所述的载样板上设置有载样孔,Ep管穿过载样孔设置。本实用新型是利用重组技术将转基因大豆、玉米和水稻的主要外源基因CrylA(B) 基因、BAR基因、CP4-EPSPS基因、PAT基因和共同的内参RBCL基因同时都克隆到一个质粒 中,在做大豆、玉米和水稻转基因成分定性检测时,在阳性对照PCR反应中加入该标准分子 质粒,内标准基因RBCL基因和外源基因CP4-EPSPS基因、Cry IA (B)基因、BAR基因和PAT基 因均得到了扩增,且扩增片段大小与预期片段大小一致,而阴性对照中仅扩增出内参基因 片段,空白对照中没有任何扩增片段,表明PCR反应体系正常工作,可以对样品检测结果进 行判定是否含有CP4-EPSPS基因、CrylA(B)基因、BAR基因和PAT基因。本实用新型中的标准分子与其他检测大豆、玉米和水稻转基因的标准分子不同, 其它产品需要至少4个标准分子即需4个EP管,而本实用新型将转基因市场上常见的转基 因粮食作物大豆、玉米和水稻的主要外源基因CrylA(B)基因、BAR基因、CP4-EPSPS基因、 PAT基因和共同的内参RBCL基因同时都克隆到一个质粒中,可以用于不同品种转基因粮食 作物定性检测CP4-EPSPS基因、CrylA(B)基因、BAR基因和PAT基因的通用阳性标准分子。 本实用新型只需用1个标准分子即只有1个EP管便满足检测需要。因此,本实用新型更轻 巧、简便快捷。不仅可以解决实验室普遍缺乏阳性标准物质的难题,还可以提高检测效率、 缩短检测周期。

图1为本实用新型盒体外形图;[0010]图2为本实用新型载样板结构图;图3为图2的横向视图;图4为本实用新型Ep管外形图。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步的说明结合图1-图4,本实施例包括一个带盖的密封盒1,盒内装有载样板2和一个EP 管 3,Ep 管 3 中装有 pMD18-T-PAT-CP4-EPSPS-CrylA (B) -BAR-RBCL 质粒,载样板上 2 上有载 样孔4,Ep管3穿过载样孔4设置。
权利要求一种转基因大豆、玉米和水稻外源基因检测用标准分子试剂盒,它包括一个带盖的封闭盒,其特征在于所述的封闭盒内装有载样板和一个Ep管。
2.根据权利要求1所述的转基因大豆、玉米和水稻外源基因检测用标准分子试剂盒, 其特征在于所述的载样板(2)上设置有载样孔(4),Ep管(3)穿过载样孔(4)设置。
专利摘要本实用新型提供了一种转基因大豆、玉米和水稻外源基因检测用标准分子试剂盒,包括一个带盖的封闭盒1,盒内装有载样板2和一个Ep管3,Ep管中装有pMD18-T-PAT-CP4-EPSPS-Cry1A(B)-BAR-RBCL质粒。本实用新型可以用于不同品种转基因粮食作物定性检测CP4-EPSPS基因、Cry1A(B)基因、BAR基因和PAT基因的通用阳性标准分子。本实用新型轻巧、简便快捷。不仅可以解决实验室普遍缺乏阳性标准物质的难题,还可以提高检测效率、缩短检测周期。
文档编号C12Q1/68GK201587947SQ2009202441
公开日2010年9月22日 申请日期2009年11月18日 优先权日2009年11月18日
发明者仇有文, 刘营, 敖金霞, 曲波, 李庆章, 袁肖寒, 高学军 申请人:东北农业大学
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