专利名称：啤酒有害菌检测专用培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及到一系列啤酒有害菌检测专用培养基，属于微生物发酵领域。
背景技术：
啤酒有害菌的存在给啤酒工业造成巨大的损害。啤酒有害菌包括乳酸菌、野生酵母等，其中以乳酸菌最为常见，危害也最大。对啤酒有害菌的检测，普遍采用培养基检测技术，检测时间较长，一般需要5-7天，不能够及时反馈微生物的污染状况。同时国内啤酒和国外啤酒相比有自己的特点，趋向于淡爽化，浓度较低，苦味质很降，意味着国内啤酒对啤酒有害菌的抑制能力较差，同时由于气候和地理环境的差异，我国的啤酒有害菌分布也有自己的特点，很多在国外没有出现的有害菌在中国也有发现，很多在国外经常出现的严格厌氧菌在国内很少报道。因此需要针对中国啤酒的特点和微生物检测现状开发出适合自己的检测培养基，达到高效快速的检出目的。目前啤酒行业检测啤酒有害菌的培养基，如NBB、MRS等都是依靠进口，对于我国作为世界上连续8年世界啤酒生产第一的地位不对称，由于国内啤酒的特点与国外啤酒不一样，如国外啤酒的苦味值比较高，而苦味值高能够抑制啤酒有害菌的生长，同时又由于国内啤酒趋向于淡爽化方面，且啤酒浓度较低，我国当前啤酒原麦汁浓度主要以7-8度为主，而国外原麦汁浓度基本在11度以上，啤酒浓度越高，意味着酒精度越高，其对啤酒有害菌的抑制能力越高，综上所述，基于国内啤酒的特点所对应生产的啤酒有害菌的种类和数量与国外啤酒有害菌可能存在一定程度的差异，因此开发适合国内啤酒特点有害菌培养基是必要的。
发明内容
本发明解决的技术问题就是针对中国啤酒的有害菌特点，开发出检出率高，检测速度快的培养基系列。该系列培养基有三种配置形式，一种是液体培养基，第二种是在液体培养基的基础上添加琼脂而成的固体培养基，第三种是在液体培养基的基础上浓缩型而成的浓缩培养基，这三种形式的培养基配方和制作方法如下培养基A型(固体型)蛋白胨8_12g，牛肉浸粉6_10g，酵母膏4_6g，葡萄糖15_25g，吐温80 l-3ml,无水磷酸氢二钾l_3g，三水乙酸钠4-6g，柠檬酸三铵l_3g，MgS047H20 0. 1-0. 4gMnS044H20 :0. 05-0. 06g,麦根浸出物，0. 2_lg，精氨酸0. 5-0. 75g，叶酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):10-20g，琼脂粉20g，放线菌酮5_10mg。加入放线菌酮以抑制酵母生长，将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。该型培养基用于倾倒平板使用。培养基B型(液体型)蛋白胨8_12g，牛肉浸粉6_10g，酵母膏4_6g，葡萄糖15_25g，吐温80 l-3ml,无水磷酸氢二钾l_3g，三水乙酸钠4-6g，柠檬酸三铵l_3g，MgS047H20 0. 1-0. 4gMnS044H20 :0. 05-0. 06g,麦根浸出物，0. 2_lg，精氨酸0. 5-0. 75g，叶酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):10-20g，放线菌酮5-10mg，氯酚红0. 05-0. 07g。将以上试剂溶解在0.4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母生长，加入氯酚红可以提供颜色指示，当有害菌生长时，培养既可由红色变成黄色。该培养基应用于对设备表面的棉签擦拭等应用。培养基C型(浓缩型)蛋白胨:40-60g，牛肉浸粉:30-50g，酵母膏20_30g，葡萄糖75_125g，吐温80 5-15ml,无水磷酸氢二钾:5-15g,三水乙酸钠:20_30g，柠檬酸三铵5_15g，MgS047H20 0. 5-2g MnS044H20 :0. 25-0. 3g，麦根浸出物l_5g，精氨酸2. 5-37. 5g，叶酸l_2g，天然蜂蜜(不含防腐剂):50-100g，放线菌酮5-10mg。将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5.6。115度高压灭菌10分钟。冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母生长，该浓缩培养基可用于酵母泥和浑浊发酵液的检测使用。本发明产品的性状如下培养基A型(固体型)暗红色固体培养基，以玻璃瓶形式包装。培养基B型(液体型)红色液体，使用后如果有菌生长，则变黄色。培养基C型(浓缩型)棕红色液体，使用后如有菌生长，则变浑浊。
具体实施例方式实施例IA型(固体型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖:20g，吐温80 :1ml，无水磷酸氢二钾2g，三水乙酸钠5g，柠檬酸三铵:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麦根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，叶酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):15g,琼脂粉:20g,放线菌酮7mg。加入放线菌酮以抑制酵母生长，将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。该型培养基用于倾倒平板使用。 实施例2培养基B型(液体型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖:20g，吐温80 :1ml，无水磷酸氢二钾2g，三水乙酸钠5g，柠檬酸三铵:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麦根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，叶酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):15g,放线菌酮:7mg,氯酚红0. 06g。将以上试剂溶解在0.4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母生长，加入氯酚红可以提供颜色指示，当有害菌生长时，培养既可由红色变成黄色。该培养基应用于对设备表面的棉签擦拭等应用。实施例3培养基C型(浓缩型)
蛋白胨50g，牛肉浸粉40g，酵母膏20g，葡萄糖100g，吐温80 :5ml，无水磷酸氢二钾10g，三水乙酸钠25g，柠檬酸三铵:10g, MgS047H20 :lg，MnS044H20 :0. 25g，麦根浸出物2. 5g，精氨酸:2. 5g，叶酸:2g,天然蜂蜜(不含防腐剂):75g,放线菌酮:35mg。将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5.6。115度高压灭菌10分钟。冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母可用于酵母泥生长，该浓缩培养基和浑浊发酵液的检测使用。实施例4对比检测效果实验
权利要求
1.啤酒有害菌检测专用系列培养基，其组分配方和相关配制方法如下(1)培养基A型(固体型)蛋白胨8-12g，牛肉浸粉；6-10g，酵母膏4-6g，葡萄糖:15-25g，吐温80 :l_;3ml，无水磷酸氢二钾:l-3g,三水乙酸钠:4-6g,柠檬酸三铵:l-3g, MgS047H20 :0. 1-0. 4gMnS044H20 0. 05-0. 06g，麦根浸出物，0. 2-lg，精氨酸:0. 5-0. 75g，叶酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):10-20g，琼脂粉20g，放线菌酮:5-10mg ；加入放线菌酮以抑制酵母生长，将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用INHCL调整pH至5. 6，再补足水至1L。121度高压灭菌。冷却后备用。(2)培养基B型(液体型)蛋白胨8-12g，牛肉浸粉6-10g，酵母膏4-6g，葡萄糖:15-25g，吐温80 :l_;3ml，无水磷酸氢二钾:l-3g,三水乙酸钠:4-6g,柠檬酸三铵:l-3g, MgS047H20 :0. 1-0. 4gMnS044H20 0. 05-0. 06g，麦根浸出物，0. 2-lg，精氨酸:0. 5-0. 75g，叶酸0. 2-0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂)10-20g，放线菌酮5-10mg，氯酚红:0. 05-0. 07g。将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至1L。121度高压灭菌，冷却后备用。(3)培养基C型(浓缩型)蛋白胨40-60g，牛肉浸粉30-50g，酵母膏20-30g，葡萄糖75_125g，吐温80 5-15ml,无水磷酸氢二钾:5-15g,三水乙酸钠:20_30g，柠檬酸三铵5_15g，MgS047H20 0. 5-2g MnS044H20 :0. 25-0. 3g，麦根浸出物l_5g，精氨酸2. 5-37. 5g，叶酸l_2g，天然蜂蜜(不含防腐剂)50-100g，放线菌酮5-10mg;将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，115度高压灭菌10分钟。冷却后备用。
2.如权利要求1所述的培养基其中培养基A型(固体型)用于倾倒平板使用，培养基B型(液体型)应用于对设备表面的棉签擦拭等应用，培养基C型(浓缩型)可用于酵母泥和浑浊发酵液的检测使用。
3.如权利要求1所述的培养基，其中各系列培养基配方优选如下(1)A型(固体型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖20g，吐温80 :1ml,无水磷酸氢二钾2g，三水乙酸钠5g，柠檬酸三铵:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麦根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，叶酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):15g,琼脂粉:20g,放线菌酮7mg ；加入放线菌酮以抑制酵母生长，将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用INHCL调整pH至5. 6，再补足水至1L，121度高压灭菌。冷却后备用。该型培养基用于倾倒平板使用。(2)培养基B型(液体型)蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母膏5g，葡萄糖20g，吐温80 :1ml,无水磷酸氢二钾2g，三水乙酸钠5g，柠檬酸三铵:2g, MgS047H20 :0. 2g，MnS044H20 :0. 05g，麦根浸出物0. 5g，精氨酸:0. 5g，叶酸:0. 4g，天然蜂蜜(不含防腐剂):15g,放线菌酮:7mg,氯酚红0. 06g ；将以上试剂溶解在0. 4L水中，再加入0. 5L啤酒，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至.1L。121度高压灭菌，冷却后备用。加入放线菌酮以抑制酵母生长，加入氯酚红可以提供颜色指示，当有害菌生长时，培养既可由红色变成黄色，该培养基应用于对设备表面的棉签擦拭等应用。(3)培养基C型(浓缩型)蛋白胨50g，牛肉浸粉40g，酵母膏20g，葡萄糖100g，吐温80 :5ml，无水磷酸氢二钾:10g，三水乙酸钠:25g，柠檬酸三铵:10g, MgS047H20 :lg，MnS044H20 :0. 25g，麦根浸出物.2. 5g，精氨酸2. 5g，叶酸:2g,天然蜂蜜(不含防腐剂):75g,放线菌酮:35mg ；将以上试剂溶解在0. 9L水中，用IN HCL调整pH至5. 6，再补足水至1L，115度高压灭菌10分钟，冷却后备用，加入放线菌酮以抑制酵母可用于酵母泥生长，该浓缩培养基和浑浊发酵液的检测使用。
4.如权利要求1所述啤酒有害菌检测专用系列培养基在啤酒有害菌尤其是纯生啤酒的检测应用。
全文摘要
本发明涉及到一系列啤酒有害菌检测专用培养基，该系列培养基有三种配置形式，一种是液体培养基，第二种是在液体培养基的基础上添加琼脂而成的固体培养基，第三种是在液体培养基的基础上浓缩型而成的浓缩培养基，该培养基主要针对中国啤酒的有害菌特点，有自己独特的配方组分，与其他产品相比，出检出率高，检测速度更快。
文档编号C12Q1/04GK102392067SQ20111038329
公开日2012年3月28日 申请日期2011年11月28日 优先权日2011年11月28日
发明者宋常欣, 宋绪磊, 张五九, 李红, 骆怀民, 黄彦君 申请人:中国食品发酵工业研究院