专利名称：一种金属配合物核酸荧光探针的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种核酸荧光探针，可以用于核酸等磷酸衍生物的荧光检测，属于生物检测技术领域。
背景技术：
核酸是生命的遗传物质，在生命活动中起重要作用。核酸的检测在疾病诊断、环境微生物鉴定、适配体等领域有重要应用。因此，发展核酸的荧光检测探针意义重大。传统的核酸荧光探针有EB、YOYO, Τ0Τ0、Sybr Green、DAPI及Hoechst染料，用于双链的DNA的检测，灵敏度很高，但是对于单链DNA，特别是短链单链DNA的检测效果很差。目前文献中有一些单链DNA荧光探针的报道，主要是带有季铵盐基团的分子，这类分子通过静电作用结合DNA，从而使荧光增强。这类分子有两个主要不足:首先静电作用是比较弱的分子间作用，这直接导致探针的灵敏度很低，难以与传统双链探针相比；其次，探针分子容易受其他电解质的干扰，例如带负电荷的蛋白质也可以以静电作用结合探针，从而干扰了 DNA的检测。这两个缺点限制了这些探针分子的实际应用，因而目前对于单链DNA还没有足够灵敏的荧光染料以取代荧光标记或同位素标记的DNA探针，特别是在核酸电泳的应用中，荧光标记或者同位素标记的核酸探针成本高，操作复杂，而传统的核酸荧光染料难以有效对单链核酸显色，因而发展单链核酸的荧光染料可以大大降低核酸的检测成本，意义重大。
发明内容
本发明要解决的问题在于针对现有技术的不足，提供一类高灵敏度的核酸探针，无论是对双链DNA，还是单链DNA都有较好的荧光响应。本发明设计的探针分子，以配位键结合单链核酸，结合后使探针分子的构象锚定在核酸上，进而引起荧光增强，从而起到检测的作用。由于核酸是磷酸二酯聚合物，每个单元含有一个磷氧四面体的结构，所以我们选择能够跟其以配位方式结合的基团:二(2-吡啶甲基)胺基-锌(II)(简称DPA-Zn (II))，我们将这个基团接在一些荧光分子上，通过与DNA特异配位，限制分子的构象，抑制分子的非辐射跃迁，从而使发色团的荧光增强。本发明所提供的核酸荧光探针，这类化合物的结构通式如下所示:
权利要求
1.一类化合物，结构式如下:
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，其结构是:
3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，其结构是:
4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，其结构是:
5.权利要求1所述的化合物用作磷酸及磷酸衍生物的检测试剂。
6.权利要求1所述的化合物用作核酸的检测试剂。
7.权利要求1所述的化合物用作核酸凝胶电泳或细胞成像的显色剂。
8.权利要求1所述的化合物的中间体，结构式如下:
全文摘要
本发明公开了一种新型核酸荧光探针，结构为将DPA或DPA-Zn(II)基团与四苯乙烯相连。DPA-Zn(II)在溶液中可以与核酸等磷酸衍生物结合，抑制分子的非辐射跃迁，从而发荧光。该荧光探针可用于核酸的检测，无论是对双链DNA，还是单链DNA检测都有较高灵敏度。将此类探针应用于凝胶电泳或生物样品中核酸的检测和显色具有较好的应用前景。
文档编号C12Q1/68GK103214501SQ20131012717
公开日2013年7月24日 申请日期2013年4月12日 优先权日2013年4月12日
发明者杨楚罗, 朱策泽 申请人:武汉大学