一株利用精氨酸且不积累瓜氨酸的嗜盐四联球菌的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一株利用精氨酸且不积累瓜氨酸的嗜盐四联球菌BBER23（Tetragenococcushalophilus）BBER23，属于微生物领域。所述嗜盐四联球菌已于2013年10月20日保藏于中国典型培养物保藏中心，中国武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCCNO:M2013480。这株嗜盐四联球菌BBER23能够利用精氨酸，并且不积累瓜氨酸。
【专利说明】一株利用精氨酸且不积累瓜氨酸的嗜盐四联球菌
【技术领域】
[0001]本发明涉及一株利用精氨酸且不积累瓜氨酸的嗜盐四联球菌，属于微生物领域。【背景技术】
[0002]氨基甲酸乙酯(Ethyl carbamate, EC)是一种致癌物质，主要会引发肺癌、肝癌等严重性肿瘤疾病，并且对人体的免疫系统造成伤害。研究发现，不仅酒类中含有氨基甲酸乙酯，而且在大豆发酵制品如酱油中同样不同程度的含有此类物质。
[0003]酿造酱油中氨基甲酸乙酯的主要前体物质是瓜氨酸与乙醇。因此降低酱油中瓜氨酸的含量是我们降低酱油中氨基甲酸乙酯有效措施之一。
[0004]在酱油生产中，酵母产生乙醇，一大类厌氧或兼性厌氧的乳酸菌可以把精氨酸通过精氨酸脱亚氨基途径(ADI途径)转化成瓜氨酸。ADI途径主要由三个基因控制:arcA基因，arcB基因，arcC基因，具体反应如下面的反应式所示。
[0005]
【权利要求】
1.一株利用精氨酸且不积累瓜氨酸的嗜盐四联球菌BBER23(Tetragenococcushalophilus) BBER23,于2013年10月20日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，中国武汉，武汉大学，保藏编号为CCTCCN0: M2013480。
2.权利要求1所述的嗜盐四联球菌，其特征在于，将单菌落接入含100g/lNaCl的MRS液体培养基，30°C静置培养四天，离心去上清获得菌体，用pH7.0的磷酸盐缓冲液悬浮菌体；向5mL离心管中加入4mL含5g/L精氨酸的氨基酸检测培养基,接种400 μ L的悬浮菌液，接种后0D_为7.8 ;30°C静置培养5天，精氨酸含量降到0，瓜氨酸积累量为0，鸟氨酸积累。
3.权利要求1所述的嗜盐四联球菌，其特征在于，将单菌落接入含100g/lNaCl的MRS液体培养基，30°C静置培养四天，离心去上清获得菌体，用pH7.0的磷酸盐缓冲液悬浮菌体；向5mL离心管中加入4mL含3g/L瓜氨酸的氨基酸检测培养基，接种400 μ L的悬浮菌液，接种后OD6tltl为7.8 ;30°C静置培养5天后，瓜氨酸含量降低，鸟氨酸积累。
4.权利要求1所述的嗜盐四联球菌，其特征在于，将单菌落接入含100g/lNaCl的MRS液体培养基，30°C静置培养四天，离心去上清获得菌体，用pH7.0的磷酸盐缓冲液悬浮菌体；向5mL离心管中加入4mL含3g/L瓜氨酸及5g/L精氨酸的氨基酸检测培养基，接种400 μ L的悬浮菌液，接种后的0D_为7.8 ;30°C静置培养5天，精氨酸、瓜氨酸含量降低，鸟氨酸积累。
5.权利要求2-4任一所述的嗜盐四联球菌，其特征在于，所述氨基酸检测培养基为:酵母膏 5g/L,牛肉膏 5g/L,胰蛋白胨 5g/L, NaC1180g/L,葡萄糖 0.5g/L, Tween_801g/L,MgSO4.7Η200.2g/L，MnSO4.H2O0.05g/L，FeSO40.4g/L，柠檬酸三胺 2g/L，CaCO30.lg/L，吡哆醛-5-磷酸 0.05g/L, K2HP042g/L, ρΗ6.0。
6.权利要求1所述嗜盐四联球菌应用于降低发酵食品中瓜氨酸的含量。
【文档编号】C12N1/20GK103695343SQ201310684008
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月13日 优先权日:2013年12月13日
【发明者】陈坚, 方芳, 廖淡宜, 堵国成, 吴惠玲, 周朝晖, 李铁桥, 黄早成 申请人:江南大学, 广东珠江桥生物科技股份有限公司