一株中度耐盐海洋芽孢杆菌及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种中度耐盐海洋芽孢杆菌（图一）OceanobacillusrekensisPT-11T(=KCTC33144T=DSM26900T)。通过从新疆莎车县盐碱土分离、筛选、生理生化鉴定等工作，确定该菌株为革兰氏阳性菌，严格好氧，产芽孢，具有运动性，细胞大小为0.3-0.5×1.0-1.2μm，菌落呈奶油色，NaCl耐受范围为5%-20%(最佳盐浓度为5%-12%)，pH生长范围为6.5-10.0(最佳pH范围为8.0-9.0)，温度生长范围为15-40℃(最佳生长温度为30-37℃)。氧化酶和过氧化氢酶阳性，脲酶阴性，具有硝酸还原能力，可以水解吐温-80和明胶，不能水解淀粉和纤维素。其生长过程中不产生H2S和吲哚，M.R.和V.P.实验阴性。基于该菌能耐受较高盐浓度，可广泛应用于高盐浓度下发酵生产各种基因工程产品。
【专利说明】一株中度耐盐海洋芽孢杆菌及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及微生物菌种及其应用领域，具体地说，本发明涉及一种中度耐盐海洋芽孢杆菌及其应用的【技术领域】。
【背景技术】
[0002]中度嗜盐菌并非分类学上的专业名词，而是对一类最佳耐盐浓度在3%_15%的极端微生物的统称。它广泛分布在各类高盐环境中，如海洋、盐湖、盐碱地、盐池这些自然环境及很多发酵食品中都能被发现。
[0003]中度嗜盐菌因其独特的生长环境与耐盐机制，从而具有很多显著的特点:可在较高的盐浓度下生长，降低发酵过程中染菌风险；不需要较为复杂的营养条件，碳氮源利用范围广泛；生理生化特性多样，潜在应用价值巨大。
[0004]在酶制剂生产上的应用。工业生产通常需要满足很多特殊的物化条件，然而却常常难以与酶反应所需的最佳条件相匹配，这就对酶的适应条件提供了更高的要求。中度嗜盐菌产生的酶恰恰具有广泛的盐度、温度耐受范围，还有容易纯化的优点，故而受到广泛关注，有着良好的商业应用前景。
[0005]基因工程和化妆品领域的应用。在高盐环境下，中度嗜盐菌常常可以积累许多相容性物质，如海藻糖，四氢嘧啶，甜菜碱，脯氨酸，羟基四氢嘧啶等。因其具有良好的渗透保护功能，受到分子基因工程与化妆品领域的广泛关注。其中，四氢嘧啶和羟基四氢嘧啶是一种被称为分子伴侣的稳定 剂，它们具有在极端环境如高盐、高温、干燥或低温下稳定和保护生物大分子酶、DNA的作用。同时它们还具有防止皮肤干燥，减缓皮肤衰老的作用，是一种很好的化妆品保湿剂。
[0006]中度嗜盐菌在其他很多方面依然表现出很好的应用前景。如抗生素等活性物质的生产，新型酶如限制性内切酶等的提取，以及乳化剂的合成等方面都有广泛的用途。
【发明内容】
[0007]针对国内外有关中度耐盐海洋芽孢杆菌的研究现状，本发明提供一种新的中度耐盐海洋芽孢杆菌及其应用，所述的中度耐盐海洋芽孢杆菌碱性磷酸酶阴性、β -半乳糖苷酶阴性、葡萄糖醛酸酶阳性、α-葡萄糖苷酶阴性，其菌落奶油色、盐浓度承受范围为5至20 (%，w/v，盐浓度对该菌生长影响曲线见图三)，这些特征已明显区别于其他已公开报道的其他海洋芽孢杆菌有效种。
[0008]本发明具体提供一种海洋芽抱杆菌rekensis PT-1It (=KCTC33144T=DSM 26900τ)
本发明通过以不同的温度、PH值、盐浓度和培养基为富集条件，从新疆莎车盐湖中取样，分离纯化培养到多株菌，经过多级筛选确定一株嗜盐海洋芽孢杆菌iOceanobacillusrekensis PT-1It),命名为rehwsis海洋芽孢杆菌,该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位:韩国典型菌种保藏中心(KCTC)和德国微生物和细胞培养保藏中心(DSMZ)，保藏时间分别为2013年3月6日和2013年3月19日，保藏号分别是KCTC33144T =DSMZ 26900T，KCTC地址为韩国大田市儒城区韩国生物科学和技术研究所，邮编是305-806，DSMZ地址为德国布伦瑞克莱布尼茨研究所，邮编38124。经微生物多相分类鉴定为海洋芽孢杆菌如&77狀 rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM 26900τ))。该菌革兰氏阳性菌，严格好氧，产芽孢，具有运动性，细胞大小为0.3-0.51.0-1.2 μ m,菌落呈奶油色，NaCl耐受范围为5%-20%(最佳盐浓度为5%_12%)，pH生长范围为6.5-10.0(最佳pH范围为8.0-9.0)，温度生长范围为15-40°C (最佳生长温度为30_37°C )。氧化酶和过氧化氢酶阳性，脲酶阴性，具有硝酸还原能力，可以水解吐温-80和明胶，不能水解淀粉和纤维素。其生长过程中不产生H2S和吲哚，M.R.和V.P.实验阴性。细胞主要脂肪酸为anteisO-C15:0和iso_C15:0，主要呼吸醌为MK-7，细胞壁肽聚糖类型主要为内消旋二氨基庚二酸(meso-DAP)，主要极性脂为磷脂酰甘油(PG)。DNA (G+C)含量为36.7 mol%。能利用碳源:糊精、D-麦芽糖、D-海藻糖、蔗糖、D-松二糖、水苏糖、四唑紫、D-蜜三糖、1%乳酸钠、D-丝氨酸、D-葡萄糖-6-磷酸、D-果糖-6-磷酸、二甲胺四环素、L-丙氨酸、L-左旋谷氨酸、L-丝氨酸、果胶、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、葡罗酰胺、奎尼酸、D-乳酸甲酯、L-乳酸、L-苹果酸、溴代丁二酸、萘啶酮酸、氧化锂、吐温-40、Y -氨基丁酸、α -羟基丁酸、β -羟基丁酸、乙酰乙酸、丙酸、醋酸、氨曲南、丁酸钠；不能利用碳源:D_纤维二糖、龙胆二糖、万古霉素、四唑蓝、a -D-乳糖、D-蜜二糖、β -甲基-D-葡萄糖苷、D-水杨苷、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、N-乙酰_β -D-甘露糖胺、N-乙酰-D-半乳糖胺、N-乙酰-神经氨酸、a -D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖、D-半乳糖、3-甲基-匍萄糖、D-岩操糖、L-岩操糖、L-鼠李糖、肌苷、梭链孢酸、D-山梨醇、D-甘露醇、D-阿拉伯醇、肌醇、甘油、D-葡萄糖-6-磷酸、D-果糖-6-磷酸、D-天门冬氨酸D-丝氨酸醋竹桃霉素利福霉素二甲胺四环素明胶氨基乙酰-L-脯氨酸L-丙氨酸L-精氨酸L-天门冬氨酸、L-组氨酸、L-焦谷氨酸、林可霉素、盐酸胍、硫酸四癸钠、D-半乳糖醛酸、L-半乳糖酸内酯、粘酸、D-葡糖二酸、P-羟基-苯乙酸、丙酮酸甲酯、柠檬酸、α-氧代戊二酸、D-苹果酸、亚碲酸钾、α-氧代丁酸甲酸和溴酸钠。
[0009]对该菌株rekens is ΡΤ_11τ的形态观察、生理生化及培养特性和化学分类均按照《放线菌系统学——方法、原理与实践》进行。其中碳源利用情况采用Biolog全自动细菌鉴定系统，采用高效液相法来测定该菌的醌组分和细胞内GC含量，使用2.5%戊二醛固定该菌后，在扫描电镜下观察该菌的形貌(图一)，参考菌株为Oceanobacillus profundus CL-MP28T(DSM 18246τ) > OrnithinibacillusbavariensisWSBC 24001T、用于和测试菌株 PT-1l 比较。
[0010]本发明通过DNA的提取，16S rDNA的PCR及测序，同时根据在NCBI山上比对结果和进化树的构建，进一步对该菌的分类地位进行判断。
[0011]米用Sanger 法对rekensis ΡΤ_11τ 的 16S rDNA 测序结果如下(该序列已在NCBI登记，登录号为HQ620695)，全长共1592bp:
GACGAGCTCAGAGTTTGATCCTGGCTCAGGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAGCGCG
GGAAGCAAGTGATCACCCTTCGGGGTGTGAACTTGTGGAACGAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGCAACCTG
CCTGTAAGATCGGGATAACTCGCGGAAACGTGAGCTAATACCGGATAATACTTTTTAACTCCTGTTGGAAAGTTAAA
AGACGGCATCTCGCTGTCACTTACAGATGGGCCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATGGCTCACCAAGGCG
ACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAA
ACTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCGAGAGTAACTGCTCGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTA
ACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGCGCTCGCAGGC
GGTCTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCACGGCTTAACCGTGGAGGGTCATTGGAAACTGGAGGACTTGAGTACAGAA
GAGGAGAGTGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTCTCT
GGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAAC
GATGAGTGCTAGGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGTTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTAC
GGCCGCAAGGCTGAAACTCAAAAGAATTGACGGGGACCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGACGCAAC
GCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAACCCTAGAGATAGGGCTTTCCCTTCGGGGACAGAGTGACAG
GTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTAG
TTGCCAGCATTTAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCAT
CATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGAACAAAGGGAAGCTAAATCGCGAGGTCAAGCAA
ATCCCATAAAACCATTCTCAGTTCGGATTG TAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGCCGGAATCGCTAGTAATCGCGG
ATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGTCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTGGTAACACCCGA
AGTCGGTGAGGTAACCTTTTTAGGAGCCAGCCGCCGAAGGTGGGACTGATGATTGGGGTGAAGTCGTAACAAGGTAG
CCGTATCGGAAGGTGCGGCTGGATCACCTCCTTAAGCTTGGTACCCGGGAATCTCTA
基于16S rDNA基因构建的系统发育树见图二，从图上可以看出海洋芽孢杆菌OceanobaciIlus rekensis PT-1It 与海洋芽抱杆菌的一个有效种 Oceanobacillusprofundus CL_MP28T (DSM 18246τ)聚为一个分支，该海洋芽抱杆菌
亲缘性最近的菌株profundus CL_MP28T (DSM 18246τ)的
16S rDNA相似度为97.267%，结合表型、生理生化和基因型比较数据，表明海洋芽孢杆菌OceanobaciIlus rekensis 为海洋芽抱杆菌属 Oceanobacillus 的一个新种。
[0012] 基于该菌严格好氧，产芽孢，具有运动性，NaCl耐受范围为5%_20%(最佳盐浓度为5%-12%)，pH生长范围为6.5-10.0(最佳pH范围为8.0-9.0)，温度生长范围为15-400C (最佳生长温度为30-37°C)。氧化酶和过氧化氢酶阳性，具有硝酸还原能力，可以水解吐温-80和明胶，同时可利用如下碳源发酵等特性，因此本发明提供的海洋芽孢杆菌Oceanobacillus rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM 26900t)可广泛的应用在各类基因工程产品的高盐浓度发酵中。(可利用的碳源:糊精、D-麦芽糖、D-海藻糖、蔗糖、D-松二糖、水苏糖、四唑紫、D-蜜三糖、1%乳酸钠、D-丝氨酸、D-葡萄糖-6-磷酸、D-果糖-6-磷酸、二甲胺四环素、L-丙氨酸、L-左旋谷氨酸、L-丝氨酸、果胶、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、葡罗酰胺、奎尼酸、D-乳酸甲酯、L-乳酸、L-苹果酸、溴代丁二酸、萘啶酮酸、氧化锂、吐温-40、Y-氨基丁酸、α-羟基丁酸、β_羟基丁酸、乙酰乙酸、丙酸、醋酸、氨曲南、丁酸钠；不能利用碳源:D-纤维二糖、龙胆二糖、万古霉素、四唑蓝、a -D-乳糖、D-蜜二糖、β -甲基-D-葡萄糖苷、D-水杨苷、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、N-乙酰-β -D-甘露糖胺、N-乙酰-D-半乳糖胺、N-乙酰-神经氨酸、a -D-葡萄糖、D-甘露糖、D-果糖、D-半乳糖、3-甲基-葡萄糖、D-岩藻糖、L-岩藻糖、L-鼠李糖、肌苷、梭链孢酸、D-山梨醇、D-甘露醇、D-阿拉伯醇、肌醇、甘油、D-葡萄糖-6-磷酸、D-果糖-6-磷酸、D-天门冬氨酸D-丝氨酸醋竹桃霉素利福霉素二甲胺四环素明胶氨基乙酰-L-脯氨酸L-丙氨酸L-精氨酸L-天门冬氨酸、L-组氨酸、L-焦谷氨酸、林可霉素、盐酸胍、硫酸四癸钠、D-半乳糖醛酸、L-半乳糖酸内酯、粘酸、D-葡糖二酸、P-羟基-苯乙酸、丙酮酸甲酯、柠檬酸、α -氧代戊二酸、D-苹果酸、亚碲酸钾、 氧代丁酸甲酸和溴酸钠。)
通过实施本发明的具体技术指标，可达到以下预期效果。
[0013]本发明的海洋芽抱杆菌rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM26900τ)可在较高盐浓度下正常生长，硝酸盐还原阳性，能够水解Tween 80和使明胶液化，可广泛应用在酯酶生产和各种基因工程产品高盐浓度下发酵领域。
[0014]下面举实施例说明本发明，但是本发明并不限于下述实施例
【专利附图】
【附图说明】:图1是扫描电子显微镜20000倍下菌株PT-1l的形貌。图2是基于16SrDNA序列构建的PT-1l和相关菌种系统发育树。图3是PT-1l在不同盐浓度下的生长状况。图 4 是 Biolog 结果其中 I 至 4 为属 Oceanobacillus 的 profundus、PT_ll、iheynsis、bavariensis。图 5 是酶活实验结果 l、Oceanobacillus profundus DSM 18246T ;2、PT_11。图 6 是其他特征数据 1、ΡΤ-11 ;2、Ornithinibacillus bavariensis 3、Oceanobacillusprofundus
【具体实施方式】
[0015]实施例一:海洋芽抱杆菌Oceanobacillus rekensis的筛选和分离 样品采集与菌株筛选分离
样品采集于新疆维吾尔族自治区莎车县。样品来自多个区域，分布于东经76° 1 57"至77° 46' 30"、北纬37° 27' 30"至39° 15"之间。用无菌玻璃瓶收取距表层5-lOcm 土壤 ，经风干，研磨，过筛，置于4°C保存，用于后续分离。筛选培养基选用苯酚富集培养基(PT)，腐殖酸富集培养基(HVA)，钥酸钠富集培养基(HNA)和高盐富集培养基(YCSS)，纯化培养基选用胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB+10% NaCl)，通过接种不同的富集培养基对菌株进行筛选。将Ig 土样加入装有25ml液体培养基的摇瓶中，在28°C下振荡培养7天。然后用移液枪吸取富集液，作10倍梯度稀释，取200 μ I 10-广10-4倍数稀释液分别涂布到对应培养基平板上，置于28°C下继续培养一周。观察生长状况与形态特征，将长出的菌落转接至TSB固体培养基，经多次划线，再挑取单菌落转接至TSB斜面培养基，置于4°C作短期保藏。同时取新鲜菌液混合25%浓度甘油，置于-80°C作长期保藏。(所有培养基配方见下表)
苯酚富集培养基(PT):酪蛋白胨7.58，氯化钠10(^，酵母浸出物1(^，苯酚69(^1 ,MS混合液 I unit，无菌水 1000ml，ρΗ8.2-8.5。
[0016]腐殖酸富集培养基(HVA):腐殖酸Ig,氯化钠150g , MS混合液I unit,无菌水1000ml ，pH8.2-8.5。
[0017]钥酸钠富集培养基(HNA):酪蛋白胨7.5g，氯化钠150g，酵母浸出物IOg ,MS混合液 I unit,无菌水 1000ml , ρΗ8.2-8.5。
[0018]高盐富集培养基(YCSS):酪蛋白胨7.5g，氯化钠250g，酵母浸出物10g，MS混合液 I unit,无菌水 1000ml , ρΗ8.2-8.5。
[0019]MS混合液:浓度为0.05g/L相容性物质(甜菜碱，脯氨酸，甘氨酸，D-山梨醇，谷氨酸盐)混合液1.5ml ;浓度为0.05g/L氨基酸(天冬氨酸，组氨酸，赖氨酸，蛋氨酸，缬氨酸，亮氨酸，酪氨酸，谷氨酸)混合液15ml ;浓度为0.025mg/L维生素(VBl，VB2, VB12, VB6, VH,VM, VPP)混合液 0.25ml ο[0020]胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB+10% NaCl):胰蛋白胨15g，大豆蛋白胨5g，NaCl 100g，琼脂粉 18g，蒸馏水 1000ml, ρΗ8.0-8.2。
[0021]菌株描述:
革兰氏阳性菌，严格好氧，产芽孢，具有运动性，细胞大小为0.3-0.51.0-1.2 μ m，菌落呈奶油色，NaCl耐受范围为5%-20%(最佳盐浓度为5%_12%)，pH生长范围为6.5-10.0 (最佳pH范围为8.0-9.0)，温度生长范围为15-40°C (最佳生长温度为30_37°C )。氧化酶和过氧化氢酶阳性，脲酶阴性，具有硝酸还原能力，可以水解吐温-80和明胶，不能水解淀粉和纤维素。其生长过程中不产生H2S和吲哚，M.R.和V.P.实验阴性。细胞主要脂肪酸为anteisO-C15:0和iso_C15:0，主要呼吸醌为MK-7，细胞壁肽聚糖类型主要为内消旋二氨基庚二酸(meso-DAP)，主要极性脂为磷脂酰甘油(PG)。DNA (G+C)含量为36.7 mol%。
[0022]实施例二:海洋芽孢杆菌Oceanobacillus rekensis的多相分类鉴定
对该菌株OceamAmciIlus rekensis PT-1It的形态观察、生理生化及培养特性和化学分类均按照《放线菌系统学——方法、原理与实践》进行。其中碳源利用情况采用Biolog全自动细菌鉴定系统，采用高效液相法来测定该菌的醌组分和细胞内GC含量，脂肪酸成分测定采用美国MIDI公司SheiOlock全自动细菌鉴定系统分析，酶学特性采用 API Tm'1^热备签定，参考舊株为 Oceanobacillusprofimdus CL-MP28T (DSM 18246τ)、Oceanobacillusiheynsis>Ornithinibadllusbavariensis WSBC 24001τ,碳源利用情况米用Biolog全自动细菌鉴定系统测定。结果见图4、5和6.从酶活结果来看，该菌株PT-1l与亲缘性最近对照模式菌 OceanobaciIlusprofundusDSM 18246τ有4种酶活性不同；在碳源利用方面，共有13种情况不同；模式菌株GC含量明前高于测试菌株PT-1I，结合进化树数据，判断该株菌为海洋芽孢杆菌属的一个新种。
[0023]实施例三:16S rDNA测序及进化树构建
采用SDS法提取细菌总DNA，通过PCR法扩增菌株16S rRNA基因序列，DNA测序由上海生工生物工程技术服务有限公司完成。到GenBank(http://www.ncb1.nlm.nih.gov/)数据库将各菌株测得的16S rRNA基因部分序列提交注册获得序列号。再在NCBI (NationalCenter for Biotechnology Information)上进行BLAST比对，找到亲缘关系最近的菌株。通过BioEdit将亲缘性最近的相应菌株进行序列比对，然后在软件MEGA 5.0上分别使用Neighbor-Joinin(N-J)法构建系统进化树，进化树bootstrap为1000。PCR相应引物、反应体系、条件如下:引物 PA8: 5’ -CCGTCGACGAGCTCAGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’ 和 PB1:5’ -CCCGGGTACCAAGCTTAAGGAGGTGATCCAGCCGCA-3’，反应体系(25 μ I 体系):Mg2+ 2.5 μ IjPA8
2.5 μ IjPB1 2.5 μ l，dNTP 0.75 μ 1,Η20 14 μ l，Taq 酶 0.25 μ 1，反应条件 95°C预变性 5min,94°C变性45s，50°C退火45s，延伸lmin，重复35个循环，72°C保温lOmin。构建的进化树见图二
实施例四:海洋芽抱杆菌 Oceanobacillus rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM26900τ)的应用
用试管配制明胶液化培养基，121°C灭菌20min，将菌株穿刺接种，在30°C恒温箱中静置培养30天，分别在5，10,20,30天观察记录明胶液化程度。观察前将试管冷却20-30min或用自来水冲洗30min,可以更清晰的观察到液化程度。结果分析莎车芽孢杆菌HNA-14T=CICC 1055#可使明胶液化。[0024]实施例五:海洋芽抱杆菌6fc<9a/7oAaci77w5.rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM26900T)的应用
硝酸盐还原:滴加格里斯氏试剂Α，B到待测细菌培养液中，若变红色，则为硝酸盐还原阳性，若不变色，滴加二苯胺试剂后，仍不呈蓝色，则为硝酸盐还原阴性。结果显示测试菌株PT-1l显红色，所以为硝酸盐还原阳性。
[0025]实施例六:海洋芽抱杆菌rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM26900τ)的应用
酯酶活性:将测试菌株PT-1l接种到含有1%的Tween 80的TSA培养基上，观察是否有晕圈出现，若出现则为阳 性，若否，则为阴性。结果显示有晕圈出现，证明该菌株有酯酶活性。
【权利要求】
1.一种中度耐盐海洋芽抱杆菌 6fc<9a/7oAaci77w5.rekensis PT-1It (=KCTC 33144t=DSM26900τ)。
2.如权利要求1所述的中度耐盐海洋芽孢杆菌rekensisPT-1It(=KCTC 33144T=DSM 26900τ)，其特征是革兰氏阳性菌，严格好氧，产芽孢，具有运动性，细胞大小为0.3-0.5X1.0-1.2 μ m，菌落呈奶油色，NaCl耐受范围为5%_20%(最佳盐浓度为5%-12%)，pH生长范围为6.5-10.0 (最佳pH范围为8.0-9.0)，温度生长范围为15-40°C (最佳生长温度为30-37°C )，氧化酶和过氧化氢酶阳性，脲酶阴性，具有硝酸还原能力，可以水解吐温-80和明胶，不能水解淀粉和纤维素，其生长过程中不产生H2S和吲哚，M.R.和V.P.实验阴性，细胞主要脂肪酸为anteisO-C15:0和iso-C15:0，主要呼吸醌为MK-7，细胞壁肽聚糖类型主要为内消旋二氨基庚二酸(meso-DAP)，主要极性脂为磷脂酰甘油(PG)，DNA (G+C)含量为 36.7 mol%。
【文档编号】C12N1/20GK103952347SQ201410162876
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年4月22日 优先权日:2014年4月22日
【发明者】田永强, 刘波, 田杰伟 申请人:四川大学