本发明公开了一种荔枝防腐保鲜剂的制备方法，属于水果防腐保鲜的技术领域。
背景技术：
荔枝属无患子科，为原产我国南方的名果，是国际市场上最具竞争力的果品之一。由于荔枝果实在盛夏高温季节采收，加上其结构特殊，采收后极易褐变和腐烂变质。目前，对荔枝腐烂控制的方法主要有：（1）防腐剂处理。用于荔枝保鲜的防腐剂主要有多菌灵、托布津、特克多、抑霉唑、施保功、施保克等。（2）二氧化硫处理。主要包括使用二氧化硫气体或燃烧硫磺产生的二氧化硫气体对荔枝进行熏蒸处理，或用二氧化硫供体进行缓释处理。二氧化硫处理对抑制微生物生长有一定效果，但不能控制某些采后病害。（3）热处理。主要包括热水、热湿空气、热干空气及热药物处理，处理方式有浸泡、喷涂、涂刷等，适宜的热处理可一定程度降低果实的腐烂率。另外，国内一些有关荔枝防腐保鲜的专利有：中国专利00133518.9公开了一种主要由炉甘石、陶土、绞股蓝草、鱼腥草、荷叶渣、柠檬酸、活性铁粉、硫酸铁粉、谷糠及食品保鲜剂棉籽蛋白组成的荔枝保鲜剂；中国专利02134343.8公开了利用臭氧水、超声波、热处理、CO2、臭氧水、保鲜剂等综合措施保鲜荔枝的方法；中国专利200410055506.9公开了一种由大蒜油、黄连素、肉桂醛、丁香酚、鞣酸蛋白、薄荷油、厚朴油脂、萝叶浸膏、桑寄生浸膏、夏枯草浸膏、大黄浸膏、琼脂、乙二醇、大豆油等组成的天然植物荔枝、龙眼保鲜剂；中国专利200610123793.1公开了一种使用富马酸二甲酯对荔枝进行防腐保鲜的方法。虽然对荔枝的防腐保鲜技术多种多样，但防腐保鲜剂用量大，抗菌时效短，抗菌谱窄，对人体有潜在危害、且保鲜效果不佳。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题：针对现有的荔枝防腐保鲜剂普遍存在用量大、保鲜防腐时效短、抗菌谱窄，且易对人体造成危害的缺陷。提供了一种从鳕鱼表皮中提取抗菌杀菌物质，配合植物发酵中释放的抑菌物质、微生物的次级代谢产物作为防腐成分，再将大豆蛋白粉酶解改性，与壳聚糖配合制备做保鲜成分来制备荔枝保鲜防腐剂的方法，本发明首先将鳕鱼用高钙盐刺激，使其表皮分泌抗菌粘液，再将鳕鱼表皮与植物提取液进行混合发酵，发酵过程中，可使鳕鱼表皮和植物中的杀菌抑菌物质释放出来，再将大豆蛋白粉用谷氨酰胺酶进行酶解，使蛋白质发生交联，大豆蛋白粉具有优异的阻气性和阻水性，可防止荔枝被氧化和水分流失，最后与壳聚糖等混合即可得到荔枝防腐保鲜剂，本发明制备的防腐保鲜剂防腐保鲜效果好，保鲜时间长，使用量小，且不含有对人体有害的物质，具有高效、安全、无毒的优势。
为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是：
（1）取鳕鱼1～2条，加入到鱼缸中，再加入3～4L质量分数为10%氯化钙溶液，并用虾对鳕鱼进行喂养2～3天后，将鳕鱼取出，收集鱼缸中的液体，并过滤，得到滤液，再将鳕鱼进行解剖，取其表皮并置于高速组织捣碎机中，以4500～5500r/min的转速粉碎25～30min，得到匀浆液，并与滤液混合3～5min，得到混合液；
（2）依次称取200～300g洋葱、80～100g柠檬和40～50g齿叶蓍，分别用水清洗3～5次后，置于榨汁机中榨汁，收集混合汁液，并与上述混合液一同加入到发酵罐中，搅拌混合3～5min，得到发酵底物，再加入发酵底物质量5～8%的巨大芽孢杆菌菌种，控制发酵罐温度为35～40℃，搅拌转速为120～150r/min，密封发酵6～8天；
（3）待发酵结束，将发酵罐中的物料转入离心机中，以4500～5500r/min的转速离心25～30min，收集上层液并置于烧杯中，再将烧杯移入灭菌箱中，调节灭菌箱温度为85～95℃，高温灭菌15～20min，得到灭菌上层液；
（4）称取60～80g大豆蛋白粉加入到烧杯中，再加入上述灭菌上清液和3～5g转谷氨酰胺酶，搅拌混合3～5min后，将烧杯置于集热式磁力搅拌器中，调节搅拌器温度至35～40℃，搅拌转速至180～200r/min，酶解3～4h，酶解结束，升温至85～90℃，高温灭酶10～15min，过滤收集酶解液；
（5）按重量份数计，称取50～60份上述酶解液、6～8份壳聚糖、3～5份抗坏血酸和1～2份L-半胱氨酸，加入到搅拌机中，搅拌混合25～30min，出料，即可得到荔枝防腐保鲜剂。
本发明的应用方法是：将本发明所得的荔枝防腐保鲜剂与水按1：200～800的比例稀释，并搅拌均匀，将清洗过的荔枝浸入稀释过的荔枝防腐保鲜剂中15～20分钟，取出沥干后装入塑料袋中，在4～6℃预冷10～12小时，用厚度为0.03～0.05mm聚乙烯薄膜包装即可。经检测，本发明所得的荔枝防腐保鲜剂保鲜效果显著，毒性低，易降解，能更好的防止水分散发，在2～4℃贮藏条件下，荔枝果实30天后腐烂率仅为1%～5%，具有极佳的防腐保鲜效果。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明所得的荔枝防腐保鲜剂安全、无毒，各组份间协同性好，广谱抑菌杀菌性能好，且能更好的防止水分散发；
（2）本发明所得的荔枝防腐保鲜剂制备方法简单，使用量小，对使用者无不良副作用。
具体实施方式
取鳕鱼1～2条，加入到鱼缸中，再加入3～4L质量分数为10%氯化钙溶液，并用虾对鳕鱼进行喂养2～3天后，将鳕鱼取出，收集鱼缸中的液体，并过滤，得到滤液，再将鳕鱼进行解剖，取其表皮并置于高速组织捣碎机中，以4500～5500r/min的转速粉碎25～30min，得到匀浆液，并与滤液混合3～5min，得到混合液；依次称取200～300g洋葱、80～100g柠檬和40～50g齿叶蓍，分别用水清洗3～5次后，置于榨汁机中榨汁，收集混合汁液，并与上述混合液一同加入到发酵罐中，搅拌混合3～5min，得到发酵底物，再加入发酵底物质量5～8%的巨大芽孢杆菌菌种，控制发酵罐温度为35～40℃，搅拌转速为120～150r/min，密封发酵6～8天；待发酵结束，将发酵罐中的物料转入离心机中，以4500～5500r/min的转速离心25～30min，收集上层液并置于烧杯中，再将烧杯移入灭菌箱中，调节灭菌箱温度为85～95℃，高温灭菌15～20min，得到灭菌上层液；称取60～80g大豆蛋白粉加入到烧杯中，再加入上述灭菌上清液和3～5g转谷氨酰胺酶，搅拌混合3～5min后，将烧杯置于集热式磁力搅拌器中，调节搅拌器温度至35～40℃，搅拌转速至180～200r/min，酶解3～4h，酶解结束，升温至85～90℃，高温灭酶10～15min，过滤收集酶解液；按重量份数计，称取50～60份上述酶解液、6～8份壳聚糖、3～5份抗坏血酸和1～2份L-半胱氨酸，加入到搅拌机中，搅拌混合25～30min，出料，即可得到荔枝防腐保鲜剂。
实例1
取鳕鱼1条，加入到鱼缸中，再加入3L质量分数为10%氯化钙溶液，并用虾对鳕鱼进行喂养2天后，将鳕鱼取出，收集鱼缸中的液体，并过滤，得到滤液，再将鳕鱼进行解剖，取其表皮并置于高速组织捣碎机中，以4500r/min的转速粉碎25min，得到匀浆液，并与滤液混合3min，得到混合液；依次称取200g洋葱、80g柠檬和40g齿叶蓍，分别用水清洗3次后，置于榨汁机中榨汁，收集混合汁液，并与上述混合液一同加入到发酵罐中，搅拌混合3min，得到发酵底物，再加入发酵底物质量5%的巨大芽孢杆菌菌种，控制发酵罐温度为35℃，搅拌转速为120r/min，密封发酵6天；待发酵结束，将发酵罐中的物料转入离心机中，以4500r/min的转速离心25min，收集上层液并置于烧杯中，再将烧杯移入灭菌箱中，调节灭菌箱温度为85℃，高温灭菌15min，得到灭菌上层液；称取60g大豆蛋白粉加入到烧杯中，再加入上述灭菌上清液和3g转谷氨酰胺酶，搅拌混合3min后，将烧杯置于集热式磁力搅拌器中，调节搅拌器温度至35℃，搅拌转速至180r/min，酶解3h，酶解结束，升温至85℃，高温灭酶10min，过滤收集酶解液；按重量份数计，称取50份上述酶解液、6份壳聚糖、3份抗坏血酸和1份L-半胱氨酸，加入到搅拌机中，搅拌混合25min，出料，即可得到荔枝防腐保鲜剂。
将本发明所得的荔枝防腐保鲜剂与水按1：200的比例稀释，并搅拌均匀，将清洗过的荔枝浸入稀释过的荔枝防腐保鲜剂中15分钟，取出沥干后装入塑料袋中，在4℃预冷10小时，用厚度为0.03mm聚乙烯薄膜包装即可。经检测，本发明所得的荔枝防腐保鲜剂保鲜效果显著，毒性低，易降解，能更好的防止水分散发，在2℃贮藏条件下，荔枝果实30天后腐烂率仅为1%，具有极佳的防腐保鲜效果。
实例2
取鳕鱼2条，加入到鱼缸中，再加入4L质量分数为10%氯化钙溶液，并用虾对鳕鱼进行喂养3天后，将鳕鱼取出，收集鱼缸中的液体，并过滤，得到滤液，再将鳕鱼进行解剖，取其表皮并置于高速组织捣碎机中，以5500r/min的转速粉碎30min，得到匀浆液，并与滤液混合5min，得到混合液；依次称取300g洋葱、100g柠檬和50g齿叶蓍，分别用水清洗5次后，置于榨汁机中榨汁，收集混合汁液，并与上述混合液一同加入到发酵罐中，搅拌混合5min，得到发酵底物，再加入发酵底物质量8%的巨大芽孢杆菌菌种，控制发酵罐温度为40℃，搅拌转速为150r/min，密封发酵8天；待发酵结束，将发酵罐中的物料转入离心机中，以5500r/min的转速离心30min，收集上层液并置于烧杯中，再将烧杯移入灭菌箱中，调节灭菌箱温度为95℃，高温灭菌20min，得到灭菌上层液；称取80g大豆蛋白粉加入到烧杯中，再加入上述灭菌上清液和5g转谷氨酰胺酶，搅拌混合5min后，将烧杯置于集热式磁力搅拌器中，调节搅拌器温度至40℃，搅拌转速至200r/min，酶解4h，酶解结束，升温至90℃，高温灭酶15min，过滤收集酶解液；按重量份数计，称取60份上述酶解液、8份壳聚糖、5份抗坏血酸和2份L-半胱氨酸，加入到搅拌机中，搅拌混合30min，出料，即可得到荔枝防腐保鲜剂。
将本发明所得的荔枝防腐保鲜剂与水按1：800的比例稀释，并搅拌均匀，将清洗过的荔枝浸入稀释过的荔枝防腐保鲜剂中20分钟，取出沥干后装入塑料袋中，在6℃预冷12小时，用厚度为0.05mm聚乙烯薄膜包装即可。经检测，本发明所得的荔枝防腐保鲜剂保鲜效果显著，毒性低，易降解，能更好的防止水分散发，在4℃贮藏条件下，荔枝果实30天后腐烂率仅为5%，具有极佳的防腐保鲜效果。
实例3
取鳕鱼1.5条，加入到鱼缸中，再加入3.5L质量分数为10%氯化钙溶液，并用虾对鳕鱼进行喂养2.5天后，将鳕鱼取出，收集鱼缸中的液体，并过滤，得到滤液，再将鳕鱼进行解剖，取其表皮并置于高速组织捣碎机中，以5000r/min的转速粉碎27.5min，得到匀浆液，并与滤液混合4min，得到混合液；依次称取250g洋葱、90g柠檬和45g齿叶蓍，分别用水清洗4次后，置于榨汁机中榨汁，收集混合汁液，并与上述混合液一同加入到发酵罐中，搅拌混合4min，得到发酵底物，再加入发酵底物质量6.5%的巨大芽孢杆菌菌种，控制发酵罐温度为37.5℃，搅拌转速为135r/min，密封发酵7天；待发酵结束，将发酵罐中的物料转入离心机中，以5000r/min的转速离心27.5min，收集上层液并置于烧杯中，再将烧杯移入灭菌箱中，调节灭菌箱温度为90℃，高温灭菌17.5min，得到灭菌上层液；称取70g大豆蛋白粉加入到烧杯中，再加入上述灭菌上清液和4g转谷氨酰胺酶，搅拌混合4min后，将烧杯置于集热式磁力搅拌器中，调节搅拌器温度至37.5℃，搅拌转速至190r/min，酶解3.5h，酶解结束，升温至87.5℃，高温灭酶12.5min，过滤收集酶解液；按重量份数计，称取55份上述酶解液、7份壳聚糖、4份抗坏血酸和1.5份L-半胱氨酸，加入到搅拌机中，搅拌混合27.5min，出料，即可得到荔枝防腐保鲜剂。
将本发明所得的荔枝防腐保鲜剂与水按1：500的比例稀释，并搅拌均匀，将清洗过的荔枝浸入稀释过的荔枝防腐保鲜剂中18分钟，取出沥干后装入塑料袋中，在5℃预冷11小时，用厚度为0.04mm聚乙烯薄膜包装即可。经检测，本发明所得的荔枝防腐保鲜剂保鲜效果显著，毒性低，易降解，能更好的防止水分散发，在3℃贮藏条件下，荔枝果实30天后腐烂率仅为3%，具有极佳的防腐保鲜效果。