一种抗菌肽活性淡水鱼养殖专用饲料添加剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于饲料领域，具体涉及一种抗菌肽活性淡水鱼养殖专用饲料添加剂及其 制备方法。
【背景技术】
[0002] 随着水产养殖业的发展，淡水鱼的养殖已经成为我国渔业最重要的组成部分，但 是，随着养殖环境的劣变和高密度养殖的发展，细菌性感染已经成为淡水鱼类养殖业发展 壮大的阻碍，常见的由细菌引起的烂尾、烂鳍症、细菌性鳃病、立鳞病、红点病、细菌性败血 症对淡水鱼的养殖都会带来致命的危害，特别是细菌性败血症，主要由嗜水气单胞菌和温 和气单胞菌等感染引起，该病对团头鲂，鲫鱼、鲢鱼、鳙鱼危害最为严重，感染初期，鱼的颂、 咽腔、鳃盖、眼睛、鳍基及体侧呈点状出血，肠内有少量食物，严重时体表成片出血，眼球突 出，眼眶发红，肛门红肿，腹部膨大，腹腔有腹水并有溶血现象，解剖后可见腮丝末端腐烂， 肝、肾肿大，脾呈紫黑色，胆囊胀大，肠系膜、腹壁、肠壁充血发红，该病死亡率极高，在养殖 户中也被称为"淡水鱼之癌"，一般该病爆发时传染性极强，且必须通过清塘、消毒才能杜绝 该病的再次爆发。基于淡水鱼养殖中存在的以上问题，目前兽医采用的主要手段是抗生素 疗法，在鱼类饲料中加入抗生素，在池塘中加入生石灰等消毒。但是，由于持续低水平饲喂 抗生素，抗生素饲料添加剂造成的细菌耐药性、肉制品中药物残留、过敏中毒反应以及"三 致"作用等危害日益严重，越来越受到人们的关注和许多国家的限制。从现状和发展趋势 看，在食用动物中禁用、限用抗生素饲料添加剂已经成为世界共识，是大势所趋。
[0003] 目前，饲料抗生素的替代方式主要有两种，其一为饲喂微生物添加剂即益生素 (菌)来改善肠道微生物的比例，抑制有害微生物，促进动物生长;其二为使用饲用酸化剂， 改善肠道内容物的酸碱度，抑制有害菌，促进有益菌生长。但总体而言，以上两种措施相对 于抗生素的作用仍然有一定的差距。各种动物在长期的自然进化过程中在体内已建立了平 衡的微生物菌群共生生态系统，并建立了一套维持其体内菌群稳态的机制，抗菌肽是这一 机制中的主要因子之一在维持肠道正常菌群平衡中起着非常重要的作用，并可能与肠道粘 膜免疫有一定的关系。与抗生素相比，抗菌肽的抑菌活性更高、抑菌范围更广，对于动物的 生产性能也具有明显的促进作用；更为重要的是，抗菌肽不会产生任何的耐药性；因此，研 制和开发出合适的抗菌肽，将是饲料抗生素的最佳替代品。
[0004] 抗菌肽是指存在于生物体内能抵抗外界微生物侵害，消除体内突变细胞的一类小 分子多肽，它是先天免疫系统的重要组成部分。抗菌肽通常由15-45个氨基酸残基组成，大 部分带正电荷。多种生物如细菌、昆虫、植物和脊椎动物体内都含有抗菌肽。由于抗生素耐 药性和残留问题的日益突出，作为一种抗生素的替代物，抗菌肽因其没有抗生素的上述缺 点而备受关注。抗生素在畜牧生产中应用已久，但其长期使用也引起了耐药性和残留等严 重问题。因此有必要寻找与抗生素效果相似，而又没有上述问题的抗生素替代物。抗菌肽是 在生物体内广泛存在的一种抗菌物质，是一种低分子量的多肽，对革兰氏阳性和阴性菌均 有较强的杀伤作用。
[0005] 尽管抗菌肽的有效作用已经得到普遍的确认，也在业界内得到了认可，但是近年 来，抗菌肽的应用仍受到较大的局限，具体而言，一方面，其生产工艺不成熟，高产菌株难以 发现和产业化生产，另一方面，成本高昂，难以在大范围内推广。基于此，经与国内多所知名 高校长期合作研究，在大量实验的基础上，得到了一种抗菌肽活性饲料的制备方法，并且具 体研究了各种饲喂对象，例如猪、鸡、鸭、牛和水产动物的生长和摄食习惯，进行了差异化的 深入研究，获得了多种具体活性肽饲料及其制备方法，例如本发明所涉及的抗菌肽活性淡 水鱼养殖专用饲料添加剂及其制备方法。
【发明内容】
[0006] 为了弥补现有技术中抗菌肽饲料生产难以产业化以及生产成本高的缺陷，本发明 旨在提供一种抗菌肽活性淡水鱼养殖专用饲料添加剂及其制备方法。
[0007] 为解决以上问题，本发明采用如下技术方案：
[0008] -种抗菌肽活性淡水鱼养殖专用饲料添加剂及其制备方法，是由组分A和组分B组 成，其中组分A是由玉米粉300-500重量份，苹果渣20-30重量份，DDGS 10-15重量份，玉米蛋 白粉20-30重量份和豆柏100-200重量份经复合发酵菌剂发酵制备而成；组分B是由黄芪9-15重量份，马齿苋22-30重量份，贯众3_5重量份，牡丹皮5_7重量份，白研!〇. 05-0.1重量份， 米糠50-80重量份制备而成；其中所述的复合菌剂是地衣芽孢杆菌（Bacillus lichnifarimis)、短小芽抱杆菌(Bacillus brevis)和产 |j元假丝酵母(Candida util is)组 成。
[0009] 其中制备组分A的制备方法包括如下步骤：
[0010]步骤（1)，按重量份称取玉米粉、苹果渣、DDGS、玉米蛋白粉和豆柏，将其混合均匀 后粉碎过10-30目筛，而后加入混合物重量30%的纯净水，搅拌均匀；
[0011] 步骤(2)，向步骤(1)搅拌得到的混合物中加入活化后的复合菌剂，继续搅拌均匀， 而后在27-29°C发酵8-12小时，在此过程中向混合物中通过空气，通气量为15L空气/100kg 饲料混合物/分钟;而后调整发酵混合物的温度，在35-38 °C发酵8-12小时，在此过程中向混 合物中通过空气，通气量为5L空气/100kg饲料混合物/分钟;接下来调整发酵物的温度，在 42-44 °C静置发酵12-24小时；
[0012] 步骤(3)，将步骤(2)制得的发酵产物进行低温干燥，再粉碎成粉，过30-50目的，即 得组分A。
[0013] 其中组分B的制备方法包括如下步骤：
[0014]步骤(一），按重量份称取黄芪、马齿苋、贯众、牡丹皮、白矾和米糠，并将称取的牡 丹皮、贯众和马齿苋碎成10-20目的粉末，将称取的米糠、白矾分别粉碎成50-60目的粉末； [0015]步骤(二），取称取的牡丹皮、贯众和马齿苋，将其与体积浓度为75 %的乙醇按等质 量混合，在密闭容器中加热至55-65Γ，提取3-5小时，而后过滤得到醇提滤渣和醇提滤液； 将醇提滤渣和称取的黄芪以及白矾粉末混合，加入混合物质量1.5-2倍的水，在密闭容器中 加热至50_55°C，提取8_12小时，而后过滤得到水提滤液；
[0016] 步骤(三），将步骤(二)制得的醇提滤液和水提滤液以及步骤(一)制得的米糠粉混 合，搅拌均匀后进行低温干燥，再粉碎成30-50目的粉末，即得组分B。
[0017] 在生产过程中，可以将制得的组分A和组分B混合均匀后包装出售，也可以是单独 包装出售，待用户实际使用时进行混合。
[0018] 优选地，组分A是由玉米粉400重量份，苹果渣25重量份，DDGS 15重量份，玉米蛋白 粉25重量份和豆柏150重量份经复合发酵菌剂发酵制备而成。
[0019] 优选地，组分B是由黄芪12重量份，马齿苋25重量份，贯众4重量份，牡丹皮6重量 份，白研*0.08重量份，米糠60重量份。
[0020] 优选地，作为建议，但并不强制地，所述的复合菌剂是地衣芽孢杆菌（Bacillus lichnifarimis)、短小芽抱杆菌(Bacillus pumilus)和产 |j元假丝酵母(Candida util is)按 照活菌数(CFU)1:1:1组成。
[0021] 优选地，作为建议，但并不强制地，所述的地衣芽孢杆菌为购自中国普通微生物菌 种保藏管理中心的编号为CGMCC 1.1858或者编号为CGMCC 1.7461的地衣芽孢杆菌;所述短 小芽孢杆菌为购自中国普通微生物菌种保藏管理中心的编号为CGMCC 1.3533或者编号为 CGMCC 1.2160的短小芽孢杆菌，所述产朊假丝酵母为购自中国普通微生物菌种保藏管理中 心的编号为CGMCC 2.1180或者编号为CGMCC 2.1005的产朊假丝酵母。
[0022] 本发明所涉及的抗菌肽活性淡水鱼养殖专用饲料添加剂的使用方法是:将其与常 规的饲料原料按照1:80的质量比混合均匀后，按照常规的淡水鱼颗粒饲料的制粒方法制粒 后，按照常规的淡水鱼饲喂方法使用即可。
[0023] 基于以上
【发明内容】
，本发明具有如下优点：
[0024] 第一，发明人经反复实践，得出发酵效