专利名称：性器官肿瘤的靶向化学疗法的制作方法
技术领域：
当前发明涉及在雌激素和抗雌激素基础上的适合用于抑制肿瘤的化学疗法的新型化合物，它们的制备方法以及它们在疾病治疗时的用途，特别是针对癌症。
背景技术：
健康的细胞，癌症细胞和性器官的转移细胞含有雌激素受体(＝胞质蛋白)，参见“The nuclear receptor ligand-binding domainstructures andfunction”in Curr.Opin.Cell Biol.10，384-391(1998)。性激素的OH基团具有与雌激素受体结合的能力，因此，自然的和合成的女性性激素(雌激素)和它们的拮抗物(抗雌激素)对性器官的组织具有亲合力(乳房，子宫，卵巢，前列腺)。
雌激素受体特别强烈地积累在性器官肿瘤的癌症细胞，例如是在乳房肿瘤和它们的转移，(E.v.Angerer，The estrogen receptor as a target forrational drug design，pages 5，49 and 137，Springer-Verlag，Heidelberg 1995)。之前人们就已试图由联结把雌激素受体作为活化剂的靶，例如，自然的女性性激素雌二醇或者合成的激素二乙基己烯雌酚和一个活化基团，比如带失氮作用的基团，并且希望，以雌激素为基础的分子能够把活化基团带入肿瘤并接着能够摧毁肿瘤(G.Leclercq，Breast Cancer-Experimental andClinical Aspects，287-293，Pergamon，Oxford 1980；H.Hamacher，PotentielleAntineoplastika III，Arch.Pharm.311，184-195，Verlag Chemie，Weinheim1978)。然而，所有的这一类尝试都失败了(E.v.Angerer，loc.Cit.，155)。
为了抑制人体性器官肿瘤的活化剂的发展，人们需要一个跟人体肿瘤非常相似的动物模型，以实现真正显著的测试结果。已知的“哈金斯肿瘤“(C.Huggins et al.，Rapid induction of mammary carcinoma in the rat andthe influence of hormones，J.Exper.Med.109，25(1959))能够简单的产生和对抗，例如通过内分泌操纵和普通的化学疗法(比如和癌得星＝环磷酰胺一水合物)。相反，通过对二氨基联苯在雌性Wistar大鼠上产生的肿瘤需要更长的诱导时间并且(类似人体的乳房肿瘤)只有高达大约50％是依赖激素的；它们(类似人体的乳房肿瘤)并不能有效的受到化学疗法以及其它当今技术中治疗方法的影响。因此，我们在Wistar大鼠中找到了预期的合适的动物模型，它们带有由对二氨基联苯诱导出的乳房肿瘤。
现在令人惊讶的发现是，将二烷基三氮烯基团支撑的雌激素和抗雌激素运用于患有乳房肿瘤的大鼠后引起它们的再生。直接选择性地针对乳房肿瘤组织的治疗并不引起在当今技术中已知的副作用，譬如损害骨髓和肠上皮膜。虽然二烷基苯基三氮烯已知为常规的不选择性的抑制细胞物；参见Proc.Soc.Exper.Biol.Med.90，484(1955)；但是类似于烷化剂(和癌得星)它们无选择的干涉所有体细胞的繁殖。
此外，4-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-3-甲氧基-雌-1，3，5(10)-三亚乙基四胺-17-酮已知为氟化合物(由三氮烯基调换为氟)制备的中间产物；参见J.Org.Chem.46(12)，2520-2528(1981)。
发明内容
因此，本发明的物体是雌激素和抗雌激素，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代，除了4-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-3-甲氧基-雌-1，3，5(10)-三亚乙基四胺-17-酮。
在本发明意义上所用的术语“雌激素”和“抗雌激素”包括自然的和合成的雌激素以及抗雌激素活性化合物。作为雌激素和抗雌激素活性化合物，分别地，它们与二烷基三氮烯基团的取代产生根据发明的化合物，基本上所有的化合物适合于“受体占有率”，它是如下文中所描述的与10mg/l测试物在“在雌激素受体上抑制6，7-二氚-雌二醇的竞争抑制的证据”中得到的，其值最高为0.9，更佳的最高值为0.7，特别更佳的最高值为0.3。
在本发明意义上所用的术语“核心取代”涉及一个或多个雌激素和抗雌激素基本化合物的芳香族环。
不跟某一特定的理论相结合，根据发明的成功也许可以在当今条件下解释如下三氮烯基团显然可以如同OH基团与雌激素受体相结合。为了将有效基团带到靶，也就是说肿瘤组织，雌激素和抗雌激素分子的一部分被作为载体使用，这给予了根据发明的化合物类似激素的特异性。在癌症细胞中，有效基团引起癌症细胞的溶癌作用。
根据发明的化合物可以通过引入特定基团而被给予某些预期特征；例如化和物的水溶性程度可以在非常广的范围内通过引入亲水基团如预期的控制。根据发明的碱盐或者铵盐化合物带亲水基团是容易溶解在水中的。
带亲水基团的根据发明的化合物的一个优势是，与雌激素受体相比，它们可以在肿瘤细胞中过量积累到治疗所需要的量，而且多余的量可以迅速地从体内排出。由此，毒性的副作用被减到最小。
由于根据发明的化合物的类似激素的特异性相对少的量是需要的。
根据发明雌激素和抗雌激素衍生物作为载体，可以例如从化学团体类固醇，1，2-二苯乙烯，己雌酚，苯基-1，2-二(2，6-二氯-苯基)-1，2-二(乙烯氨基乙烷)，三苯基乙烯，苯基苯并呋喃，苯基苯并噻吩，特别是在位置3被苯甲酰基团取代的，4，5-二-苯基-咪唑，2，3-二芳基哌嗪和4，5-二-苯基-2-咪唑啉中使用。某些典型的载体类型会在下文中讨论。
根据发明的化合物包括例如类固醇三氮烯，其通式为
其中R1是氢，N＝N-NR7AR7B，O(CR8R9)nCO2H，CO2H或者SO3H，R2是OH，OCH3，N＝N-NR7AR7B或者O(CR8R9)nCO2H，R3是氢，N＝N-NR7AR7B，O(CR8R9)nCO2H，CO2H或者SO3H，R4和R6是相互独立的氢，O(CR8R9)nCO2H，(CR8R9)nCO2H或者C6H4OCH2CO2H以及R4此外是(CH2)10CON(C1-C4-烷基)2，R5是氢或者OH，R7A和R7B是相互独立的烷基，R8和R9是相互独立的氢，甲基，乙基，X是CO，CHOH或者C(OH)-C≡CH和n是1到10之间的一个正整数条件是，从R1到R3只有一个残基代表N＝N-NR7AR7B，和它们的盐，溶剂化物以及这些盐的溶剂化物。
这个类固醇三氮烯I可以例如通过氨基酸衍生物的重氮化作用获得，其通式为 其中从R1到R3中的一个残基代表NH2，余下的标记R1到R6和X具有通式I的图例中给出的含义，或者它们的盐以及通过反应合成的重氮盐，其通式为[R-N2]+Y-(III)
其中R是通式II，其中从R1到R3中的一个残基代表(N2)+，其它的变量具有通式II的图例中给出的含义，Y-是酸阴离子，和二烷基胺以及在必要时通过脱酸从已经获得的盐中得到。
将例如2-氨基-3-羧基甲氧基-雌二醇作为起始原料使用，那么反应可用如下图解通式1举例说明 被作为起始原料使用的氨基类固醇是已知的或者可以由类似于已知的制备方法配制。
氨基类固醇II的例子包括例如1-氨基-3-氧化乙酸-雌二醇，2-氨基-3-氧化乙酸-雌二醇，4-氨基-3-氧化乙酸-雌二醇，1-氨基-3-氧化乙酸-雌激素酮，2-氨基-3-氧化乙酸-雌激素酮，4-氨基-3-氧化乙酸-雌激素酮，1-氨基-3-甲氧基-雌二醇，2-氨基-3-甲氧基-雌二醇，4-氨基-3-甲氧基-雌二醇，1-氨基-3-甲氧基-雌激素酮，2-氨基-3-甲氧基-雌激素酮，4-氨基-3-甲氧基-雌激素酮，1-氨基-3-氧化乙酸-雌激素三醇，2-氨基-3-氧化乙酸-雌激素三醇，4-氨基-3-氧化乙酸-雌激素三醇，1-氨基-3-氧化乙酸-乙炔基-雌二醇，2-氨基-3-氧化乙酸-乙炔基-雌二醇，4-氨基-3-氧化乙酸-乙炔基-雌二醇，2-氨基-4-磺酸基-雌二醇，4-氨基-2-磺酸基-雌二醇，2-氨基-4-磺酸基-雌激素酮和4-氨基-2-磺酸基-雌激素酮。
将雌激素酮中的OH基团替换为三氮烯基团(参见实例11)，可以得到一个有效力的癌症化学疗法，它在低剂量时就显示了非常好的抑制大鼠乳房癌的效果。由此可以推断，三氮烯基团可以令人惊讶的在雌激素受体上作为附着基团替换重要的OH基团。如果要将OH基团(或者它们的醚)的最高结合特性在雌激素受体上为抵抗肿瘤的效果所使用，那么三氮烯基团会根据发明优先引入位置2或者4。
如上文中已经提到的，这可能是所希望的，为了提高水溶性可以给于根据发明的化合物亲水基团。磺酸盐基团和羧基化基团以及支撑此类基团的C1-C6残基优先作为亲水基团。即使如果有许多位置在一个附加取代中是在值得考虑的范围内，芳香族环的取代可以特别容易的进行-例如通过核心磺化或者酚羟基基团的醚化。
关于取代的位置，根据知识，雌激素酮，雌二醇或者乙炔基雌二醇具有强大的 对雌激素受体的亲合力，即使是大的取代物占据了位置2，4，7和11(P.W.Jungblut et al.，Hormon-Rezeptoren，Kolloquium der Gesellschaft fürphysiologische Chemie vom 05.-08.04.1967in Mosbach/Baden；M.Grlich，Arch.Geschwulstforschung 37/2，161-170(1971))可以作为准则。因此，这些位置也会被优先取代。
举例来说，在位置3是一个羧基烷氧基团，例如一个羧基甲氧基基团可以设置作为溶解基团[(前体药物)作为盐]。如果三氮烯基团位于位置2或者4中的一个，那么在第二个位置上(4或者2)可以支撑一个溶解基团，比如一个羧基烷氧基团的盐或者一个磺酸基团的盐。位置7和11可以为进一步的取代所使用，也可以支撑例如附加的溶解基团(譬如羧基烷氧基团)；由此，这个可能性是存在的，在必要时通过引入取代物来完成预期的选择性。
化合物，当它们的酚的OH基团醚化时可用作前体药物，也就是说，可以期待，在雌激素受体上的附着通过在位置3的羧基甲氧基基团而保留；参见例如炔雌醇甲醚，参见E.Mutschler，Arzneimittelwirkungen，Lehrbuchder Pharmakologie und Toxikologie，page 368，WissenschaftlicheVerlagsgesellschaft，Stuttgart 1997。因为在化学疗法的制备中，在当前情况只有活化剂结合雌激素受体是重要的，所以载体是雌激素或者抗雌激素并不重要。
雌激素类固醇是典型的抑制乳房癌的高特异性和高效力的活化剂，它与雌激素受体最优性结合，可以由雌激素通过引入二烷基三氮烯基团合成。由此可进一步假定，这类活化剂有效力的抑制所有的含雌激素受体的性器官(子宫，卵巢，前列腺)的癌症，因为它们结合雌激素受体。
1，2-二苯乙烯从1，2-二苯乙烯，二乙基己烯雌酚和己雌酚衍生的癌症化学疗法更进一步的根据发明的化合物是例如顺式-和反式-1，2-二苯乙烯以及己雌酚，其通式为 其中R是氢，甲基或者乙基，R1是氢，氯，甲基，乙基，CH2CO2H，CH(CH3)CO2H，OCH2CO2H，OCH(CH3)CO2H或者SO3H，R2是OH，OCH3，OCH2CO2H，OCH(CH3)CO2H或者N＝N-NR7AR7B，
R3是氢，氯，优先在位置6，或者N＝N-NR7AR7B，R4是氢，甲基，乙基，CH2CO2H或者CH(CH3)CO2H和R7A和R7B是相互独立的烷基条件是，R2或者R3代表N＝N-NR7AR7B，以及虚线表示，化合物不仅包括乙烷衍生物而且包括乙烯衍生物，和它们的盐，溶剂化物以及这些盐的溶剂化物。
这个化合物VI可以例如通过氨基酸衍生物的重氮化作用获得，其通式为 其中R3是氢或者NH2以及R4是氢，甲基，乙基，CH2CO2H或者CH(CH3)CO2H，条件是R2或者R3代表NH2，以及R，R1，R2，R7A，R7B和虚线具有通式VI的图例中给出的含义，或者它们的盐和通过反应合成的重氮盐，其通式为[R5-N2]+Y-(VIII)其中R5是通式VII，其中两个残基R2和R3中的一个是(N2)+，分别地，其它的变量具有通式VII的图例中给出的含义，Y-是酸阴离子，和二烷基胺以及在必要时通过脱酸从已经获得的盐中得到。
将例如3，3’-二氨基-二乙基己烯雌酚(H.Hamacher，PotentielleAntineoplastika III，Arch.Pharm.311，184-195，Weinheim 1978)作为起始原料使用，那么反应可由如下图解通式2举例说明 通过进一步的3，3’-二-(二烷基三氮烯基)-二乙基己烯雌酚和1或者2个烷化剂相等物的反应，其通式为R6-Y (XI)其中R6是C1-C3-烷基，CH2CO2CH3或者CH(CH3)CO2CH3以及Y是烷化剂的一个分裂基团相应的烷基化产物可以获得；参见下文的图解通式3 如果以上图解通式3中的R6是例如CH2CO2CH3，那么二钠盐可以从二酯通过碱性水解获得，例如与NaOH(图解通式4)
其它的根据发明的化合物是例如三苯基乙烯衍生物，其通式为 其中R是氢，氯，氯甲烷或乙基，R1是OCH2CO2H或者OCH(CH3)CO2H，R2和R4是相互独立的氢，SO3H或者N＝N-NR7AR7B，R3和R5是相互独立的氢，OH，OCH3，OCH2CO2H，OCH(CH3)CO2H或者N＝N-NR7AR7B以及R7A和R7B是相互独立的烷基条件是，从R2到R5只有一个残基代表N＝N-NR7AR7B，和它们的盐，溶剂化物以及这些盐的溶剂化物。
根据发明的化合物XVI可以例如通过氨基酸衍生物的重氮化作用获得，其通式为
其中R2和R4是相互独立的氢，NH2或者SO3H，R3和R5是相互独立的氢，NH2，OH，OCH3，OCH2CO2H或者OCH(CH3)CO2H以及R和R1具有通式XVI的图例中给出的含义，条件是，从R2到R5只有一个残基代表NH2，或者它们的盐和通过反应合成的重氮盐，其通式为[R6-N2]+Y-(XVII)其中R6代表通式XVIa，其中R2到R5中的一个残基是(N2)+以及其它的变量具通式XVIa的图例中给出的含义，Y-代表酸阴离子，和二烷基胺以及在必要时通过脱酸从已经获得的盐中得到。
将例如氨基酸化合物XVIII作为起始原料使用，那么反应可用如下图解通式5举例说明
通过甲基酯XIX的碱性水解，钠盐XX可以根据反应图解6获得 典型方式显示，以上的癌症化学疗法可以从任意亲雌激素的化合物通过引入三氮烯基团制备，例如 Tr＝N＝N-NR7AR7Bsb＝-CH2CO2Na，-CH(CH3)CO2Na箭头显示三氮烯基团(Tr)和溶解基团(sb)的优先位置。
因此，更进一步的发明物体是雌激素和抗雌激素的制备方法，它们的每个分子至少与一个二烷基三氮烯基团核心取代，在其上至少一个二烷基三氮烯取代物被引入雌激素和抗雌激素活性化合物的一个或多个芳香族环中，但是4-(3，3-二甲基-1-三氮烯基-3-甲氧基-雌-1，3，5(10)-三亚乙基四胺-17-酮的制备除外。
在发明的范畴内生理学上合格的盐优先作为盐。
生理学上合格的盐，化合物I，II，VI，VII，XVI和XVIa的生理学上合格的盐优先，包括普通的碱基盐，例如碱性的金属盐(譬如钠盐和钾盐)，土地碱基盐(譬如钙盐和镁盐)以及铵盐，它们是由氨或者带1到16个C原子的有机胺衍生而来的，例如乙基胺，二乙基胺，三乙基胺，乙基二异丙基胺，一乙醇胺，二乙醇胺，三羟甲基氨基甲烷-羟基胺，二环己基胺，二甲基氨基乙醇，普鲁卡因，二苯甲基胺，N-甲基吗啉，二氢基松香基胺，精氨酸，赖氨酸，乙烯二胺和甲基哌啶。
在发明的范畴内这种形式的化合物被称为溶剂化物，它们通过协调在固体状态或者液体状态时与溶剂分子形成一个络合物。氢氧化物是溶剂化物的一个特殊形式，它们的协调是与水发生的。烷基本身和在二烷基胺和羧基烷氧基中的“烷基”和“烷”代表一个直线的或分支的烷基残基，通常带1到6，1到4或者1到3个碳原子，例如为甲基，乙基，n-丙基，异丙基，支链烃式-丁基，n-戊基，n-己基。
重氮化作用是已知的；参见例如Organikum，10.Ed.，VEB DeutscherVerlag der Wissenschaften，Berlin 1971，580-600。
酸阴离子在发明的范畴内特别是矿物酸，羧酸和磺酸的阴离子，例如盐酸，氢溴酸，硫磺酸，磷酸，甲烷磺酸，乙烷磺酸，甲苯磺酸，苯并磺酸，萘二磺酸，乙酸，丙酸，2-羟基丙酸，2，3-二羟基丁二酸，羟基丁二酸，2-羟基-1，2，3-丙烷三羟酸，反式丁烯二酸，顺式丁烯二酸和苯甲酸的盐。
烷化剂的分裂基团在发明的范畴内包括比如氯，溴化物和硫酸盐。
更进一步的发明物体是雌激素和抗雌激素，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代，用于治疗疾病。
更进一步的发明物体是雌激素和抗雌激素的用途，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代，用于抑制人体和动物的性器官肿瘤。
更进一步的发明物体是对抗人体和动物的性器官肿瘤的方法，通过应用足够量的雌激素和抗雌激素组的至少一个化合物，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代。
更进一步的发明物体是雌激素和抗雌激素的用途，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代，用于制备抑制人体和动物的性器官肿瘤的药物。
更进一步的发明物体是包含雌激素和抗雌激素组的至少一个化合物的药物，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代，在必要时和一个或者多个药理学上合格的佐剂或底物一起，以及它们的对上文中的提到的目的的用途。
根据发明的化合物可以是全身和/或局部有效力的。为了这个目的它们可以通过合适的方式应用，例如通过口的，肠胃外的，肺的，鼻的，舌下的，舌的，口腔的，直肠的，经皮的，结膜的，耳的方式或者作为植入物。
对于这些应用方式活化剂可以在合适的形式下给予。
适合于口服的是那些已知的应用形式，它们迅速地和/或在改良的给药方式下输送活化剂，例如片剂(没有包衣以及有包衣的片剂，譬如片剂或者含有抑制胃液的包衣的有包衣的片剂)，胶囊，糖衣药丸，颗粒，丸剂，粉末，乳状液，悬浮液，溶液和气雾剂。
肠胃外应用的执行可以避免再吸收步骤(通过静脉内的，动脉内的，心脏内的，脊柱内的或腔内的方式)或者包含再吸收步骤(通过肌肉内的，皮下的，皮内的，经皮肤的，或者腹膜内的方式)。适合于肠胃外应用的应用形式是，例如，注射和输注模式以溶液，悬浮液，乳状液，冻干物和无菌粉末的形式。
适合于其它的应用方式的形式是，例如，吸入药物模式(例如，粉末吸入器，喷雾器)，滴鼻剂/液，喷雾；通过舌的，舌下的或者口腔的方式应用的片剂或者胶囊，栓剂，耳朵和眼睛制剂，阴道胶囊，水悬浮液(洗剂，搅拌混合物)，亲脂的悬浮液，软膏，乳膏，乳，糊剂，分散粉末或植入物。
活化剂可以在已知的方式下被转化为提到的应用形式。它们可以通过使用惰性的，无毒性的，药学上合适的佐剂来完成。其中包括的是，例如，基质(譬如微晶的纤维素)，溶剂(譬如液态的聚乙烯二醇)，乳化剂(譬如十二烷基硫酸钠)，分散剂(譬如聚乙烯吡咯烷酮)，合成的和自然的生物聚合物(譬如白蛋白)，安定剂(譬如抗氧化剂例如抗坏血酸)，着色剂(譬如无机色素例如氧化铁)或者调味的和/或有气味的制剂。
通常推荐的给予的量在肠胃外应用的情况下数量是大约1到20mg/kg，优先大约2.5到10mg/kg体重，使达到有效的效果。在口服的情况下数量是大约1到70mg/kg，优先大约1到30mg/kg体重。
然而它可能被要求，在必要时，偏离提到的数量，而依照体重，运用方式，对活化剂的个体反应，配方类型和进行应用的时间点或者时间范围。因此，在某些情况下可能已经足够了，使用少于上文中提到的最少量，然而在另一些情况下必须超过提到的最高量。在大剂量运用的情况下推荐在一天中将剂量分配为若干独立剂量。
试验肿瘤的产生20个雌性Wistar大鼠用对二氨基联苯处理。第一次对二氨基联苯的剂量是150mg/kg；然后剂量降低到每周100mg/kg。接着剂量为每75mg/kg在间隔14天内。从中得出的总剂量为1.225mg/kg。
总共产生了29个乳房癌。经对二氨基联苯处理过的Wistar大鼠的平均寿命为325天。
在第一个肿瘤(大约0.5g)产生后对二氨基联苯的应用停止。接着乳房癌增长相对地快。肿瘤的大小是通过触觉确定的；有经验的实验员可以确定精确到0.1g。大于0.5g的肿瘤被用于试验。
在雌激素受体上通过根据发明的化合物抑制6，7-二氚-雌二醇的竞争抑制的证据在试验中使用的6，7-二氚-雌二醇具有0.5Ci/mmol的特异活性。
0.7mm厚和0.5cm2面积的组织样品是从大鼠的子宫癌和乳房癌组织通过组织刀具制备的。肿瘤为组织样品应有的最低重量为1.5g。
处理过的组织样品从子宫癌和乳房癌获得的组织样品被处理在生理盐水溶液中，其浓度分别为5，10，15，20，35和50mg/l根据发明的化合物。接着所有的组织样品被洗涤并且再一次培养在生理盐水溶液中一个小时，其中包含10-9Mol/l 6，7-二氚-雌二醇＝生理浓度。
对照组织样品如上，但未经处理，在生理盐水溶液中培养一个小时。
在培养后所有的组织样品被洗涤并放置在4％甲醛溶液里。接着它们被干燥，称重和烧。灰溶解在闪烁液体中并且活性是在液体闪烁计数器中确定的。灯闪光的次数是每mg灰干物质在确定的时间范围内合并的6，7-二氚-雌二醇量的度量并且因此是那些通过根据发明的化合物被替代的雌激素受体的量的间接度量。从根据发明处理过的大鼠中得到的灯闪光的次数和从未被处理过的大鼠中得到的灯闪光的次数的比率对于此发明的目的来说被称为“受体占用率“(意义被雌二醇占用)。因此，可以说比率越小，根据发明的化合物占用雌激素受体越强；在试验中使用的雌二醇只能占用未被占用的受体(被根据发明的化合物)。
在被检查过的组织中是自然的，每个组织样品的雌激素受体的量在一定的范围内有起伏。因而，比如乳房癌的邻近组织样品的雌激素受体的量(由于肿瘤组织的不同的密度)可能不同。因此推荐每次检查三个样品并计算平均值。
如果被选作试验的根据发明的化合物的量相对较多，那么可被根据发明的化合物占用的受体在第一次给量就已经被占用，增值不再表示显著的效果。
根据发明的化合物抑制乳房肿瘤细胞的细胞毒素效果的定性根据通过这个胸腺嘧啶试验肿瘤的生长可以容易地检查如果没有进一步的胸腺嘧啶合并入细胞，那么肿瘤的生长停止了。
未被处理过的和被根据发明的化合物处理过的大鼠被喂氚标记的胸腺嘧啶。
放射自显影照片显示在未被处理过的对照组的肿瘤组织中有许多标记过的细胞。通过氚标记的细胞可由许多黑色的点在放射自显影照片上识别(强烈的银色沉淀在照片板上)。这些点是肿瘤细胞快速增长的标志和合并的核苷胸腺嘧啶连接在那里的标志。
在大鼠被根据发明的化合物处理过的情况下小的肿瘤慢慢消失，当在大的肿瘤的情况下发生坏死。
患有乳房癌的大鼠，在20天内由根据发明的化合物20mg/kg每天处理，在喂氚标记的胸腺嘧啶后乳房癌在放射自显影照片上不再显示进一步的胸腺嘧啶的合并，也就是说，肿瘤细胞的生长至少停止了。
具体实施例方式
除非另外指出，在下文例子中给出的百分率是体重百分率；部分是体重部分。溶剂比率，稀释比率和液体/液体溶剂的给出浓度参考各个例子中的体积。
实例起始原料制备的实例(用“A”标记)和制备实例所有的制品都用薄层层析检查纯度(硅石60 F 254，Merck，Darmstadt)。所有的我们自己准备的起始材料和所有的根据发明的化合物都被纪录NMR-波谱；它们和假设的结构相匹配。
I.类固醇进行的反应的反应图解
作为起始原料使用的硝化雌激素酮，雌二醇和从中制备的氨基酸化合物是已知的或者可以由类似已知的方法制备(参见St.Kraychy，Am.Soc.81，1702(1959))。
实例A12-和4-硝基雌激素酮的制备 在40g雌激素酮在1000ml纯乙酸中构成的溶液中在35到40℃时搅拌下逐滴地慢慢加入16.48ml浓缩的硝酸。溶液被搅拌24小时。4-硝基雌激素酮沉淀为淡黄色的结晶，被吸附萃取和从乙醇中再结晶。
产出9g 4-硝基雌激素酮；熔点270℃。
滤出液与4000ml水混合，沉淀的半成品被吸附萃取和干燥(产出45g)。净化的执行是通过含铝氧化物的柱层析法(Woelm公司)，AKT.St.I酸。半成品在300ml苯中热熔(最多15g)并用移液管慢慢的加入到准备好的玻璃柱(高120cm，直径4.5cm)。接着在DC控制下用苯洗脱。溶液被缩减并且剩余的2-硝基雌激素酮被分离。
产出(从3个玻璃柱)25g 2-硝基雌激素酮；熔点180℃。
实例A22-硝基-3-甲氧基雌激素酮 在由从实例A1得到的16g 2-硝基雌激素酮，750ml乙醇和750ml 10％氢氧化钾的水溶液组成的溶液中于35℃在6个小时内在氮保护气氛中逐滴加入480ml二甲基硫酸盐。同时会保证溶液保持碱性；在必要时逐滴加入45％氢氧化钾的水溶液。溶液被一直搅拌直到保持淡黄色和碱性。接着溶液被冷却到大约5℃，沉淀物被吸附萃取并用稀释的氢氧化钾的水溶液和水洗涤，干燥和从乙醇/甲苯(1∶1)中再结晶。
产出15.7g；熔点154℃。
实例A33-甲氧基-4-硝基雌激素酮 由从实例A1得到的化合物可根据实例A2制备出标题中的化合物。
产出2.1g；熔点259℃。
实例A42-氨基-3-甲氧基雌激素酮 由从实例A2得到的5g 2-硝基-3-甲氧基雌激素酮，4g硫代硫酸钠，800ml丙酮和160ml 0.5N氢氧化钠组成的溶液被逆流加热35分钟，加入3.2g硫代硫酸钠在160ml 0.5N氢氧化钠中构成的溶液，合成的溶液被逆流加热50分钟。接着加入400ml水并且丙酮在减压下被排除。得到的悬浮液被冷却，结晶被吸附萃取，用水洗涤，干燥和从甲醇中再结晶。
产出4.2g；熔点155℃。
实例A53-甲氧基-4-氨基雌激素酮 由从实例A3得到的化合物可根据实例A4制备出标题中的化合物。
产出0.6g；熔点183℃。
实例A62-氨基-3-甲氧基雌激素
由从实例A4得到的1g 2-氨基-3-甲氧基雌激素酮，200ml甲醇和0.44g硼氢化钠组成的混合物在40到50℃在DC控制下搅拌至完全反应(14小时)。接着加入4ml纯乙酸并且甲醇在减压下被排除。残余物被热溶解在稀盐酸中，标题中的化合物用氢氧化钠沉淀，悬浮液被冷却，沉淀物被吸附萃取和干燥。
产出0.6g；熔点160℃。
实例A73-甲氧基-3-氨基雌激素 由从实例A5得到的化合物可根据实例A6制备出标题中的化合物。
产出0.4g；熔点176℃。
实例82-(1，1-二甲基三氮烯基)-3-甲氧基雌激素酮 在0到4℃0.55g亚硝酸钠在3ml水中构成的溶液被逐滴加入由从实例A4得到的2.3g 2-氨基-3-甲氧基雌激素酮，160ml水和1.2ml浓缩(37％)盐酸组成的溶液。接着获得的重氮盐溶液在0到4℃被迅速地转移到由从0.95g碳酸钠，1ml 40％水的二甲胺溶液和40ml水组成的溶液。在一个小时的搅拌时间之后固体物被吸附萃取，干燥和从少量甲苯中再结晶。
产出1.5g；熔点168℃。
实例93-甲氧基-4-(1，1-二甲基三氮烯基)-雌激素酮 由从实例A5得到的化合物可根据实例8制备出标题中的化合物。
产出1.5g；熔点142℃。
实例102-(1，1-二甲基三氮烯基)-3-甲氧基雌激素 由从实例A6得到的化合物可根据实例8制备出标题中的化合物。
产出3g；熔点135℃。
实例113-(1，1-二甲基三氮烯基)-雌激素酮
在由2.7g 3-氨基雌激素酮，40ml水和2ml浓缩盐酸(37％)组成的溶液中在0到4℃逐滴加入由0.7g亚硝酸钠和10ml水组成的溶液。接着获得的重氮盐溶液被转移到由1.2g碳酸钠，1.2ml 40％二甲胺的水溶液和20ml水组成的溶液。在一个小时的搅拌时间之后标题中的化合物被吸附萃取，干燥和从少量石油醚中再结晶。
产出2g；熔点168℃。
实例123-(1，1-二甲基三氮烯基)-雌激素 在由从实例11得到的1g 3-(1，1-二甲基三氮烯基)-雌激素酮在200ml甲醇中构成的溶液中加入0.44g氧化硼钠。溶液在40到50℃在DC控制下搅拌至完全反应(14小时)。接着加入4ml纯乙酸并且甲醇在减压下被排除。残余物在水中捻成细粉，标题中的化合物被吸附萃取和干燥。
产出1g；熔点138℃。
II.1，2-二苯乙烯实例中的1，2-二苯乙烯通过Wittig烯烃反应制备(G.Wittig，Angew.Chem.68，505)。
在通过Wittig烯烃反应合成硝基-1，2-二苯乙烯时第一次发现，如果对位取代苯甲醛调换为邻位取代苯甲醛，Wittig烯烃反应产出增加的顺式1，2-二苯乙烯部分。如果乙基乙酸盐基团位于乙醛基团的邻位，那么合成100％顺式1，2-二苯乙烯。
顺式部分明显依赖于乙醛的苯核心的取代的类型和大小。
作为起始原料使用的化合物是已知的或者可以用类似于已知的方法制备。
进行的反应的反应图解 R＝CH2CO2C2H5，CH(CH3)CO2C2H5
R＝CH2CO2C2H5；R1＝CH2CO2Me；Me＝H，Na，C2H5oder HN(CH2CH2OH)3实例A13(4-硝基苯甲基)-三苯基氯化磷[O2N-C6H4-CH2-P+Ph3]Cl-由263g(1mol)三苯基瞵，172g(1mol)4-硝基苯甲基氯化物和甲苯组成的溶液在沸腾温度搅拌15个小时。反应的混合物被冷却，结晶被吸附萃取和用甲苯洗涤。
产出344g；熔点280℃。
实例A14(2-甲酸基苯氧基)-乙基乙酸盐
在50℃在搅拌下将167g(1mol)溴基乙基乙酸盐逐滴加入由122g(1mol)2-羟基苯甲醛，1mol甲醇钠(在甲醇溶液里)和1.51乙腈组成的溶液，并且溶液在70℃被搅拌7个小时。接着反应溶液被转移入21冰水。分离出的油是用500ml二氯甲烷萃取的，有机相通过硫酸钠干燥并且二氯甲烷通过真空排除。剩下的油结晶。
产出180g；熔点48℃。
实例A15(4-甲酸基苯氧基)-乙基乙酸盐 化合物可以根据实例A14从4-羟基苯甲醛制备。
产出195g；熔点43℃。
实例A16{2-[(Z)-2-(4-硝基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐 在0到5℃由从实例A13得到的218g磷盐和0.5mol甲醇钠溶液被同时的按份加入(在各自的脱色作用后)由从实例A14得到的104g(0.5mol)乙醛和750ml乙醇组成溶液。在反应溶液的脱色作用之后，从不溶物中分离。滤出液不含溶剂并且残余物在400ml磷-反式-(二甲基酰胺)中捻成细粉。在0℃三苯基瞵化物从溶液中沉淀出，被吸附萃取。在滤出液中加入21冰水后沉淀出来的油用31苯萃取，溶剂被排除，残余物与500ml异丙醇搅拌并且在冷却后结晶产物被吸附萃取。
产出105g纯的顺式化合物；熔点70℃。
实例A17{2-[(E)-和{2-[(Z)-2-(4-硝基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐 E-Form Z-Form在0到5℃由从实例A13得到218g磷盐的和0.5mol甲醇钠溶液被同时的按份加入(在各自的脱色作用后)由从实例A15得到的104g(0.5mol)的乙醛和750ml乙醇组成的溶液。在反应溶液的脱色作用之后沉淀的结晶被吸附萃取并且从乙醇中再结晶。这里涉及的是纯的反式化合物。
产出51g；熔点118℃。
为了分离顺式部分，可以根据实例A16中叙述的进行。
产出48g；熔点59℃。
实例A18钠-2-[(E)-和-2-[(Z)-2-(4-硝基苯基)-乙烯基]-苯磺酸盐 E-FormZ-Form在83.2g(0.4mol)钠-苯甲醛-2-磺酸盐在500ml乙醇中构成的溶液中加入0.4mol甲醇钠(在甲醇溶液里)。合成的溶液在0℃在搅拌下逐滴加入由从实例A13得到的173g磷盐和400ml甲醇组成的溶液。在反应溶液的脱色作用之后溶剂被真空排除，残余物与300ml水混合并且低温吸附萃取。固体产物与1l二乙基醚混合，吸附萃取，在空气中干燥并接着与1.3l硝基甲烷煮沸，从不溶解的残余物中(反式化合物)吸附萃取。顺式化合物在冷却过程中结晶。
产出顺式化合物53g；熔点247℃(从硝基甲烷中)。
产出反式化合物20g；熔点323℃。
实例A19钠-2-[(E)-2-(4-氨基苯基)-乙烯基]-苯磺酸盐 在由从实例A18得到的16g顺式硝基化合物在60ml乙醇中构成的溶液中在80℃逐滴加入由17.5g Na2S·9H2O和20ml水组成的溶液并搅拌一个小时。接着溶剂被真空排除并且残余物从硝基甲烷中再结晶。
产出13g；熔点＞360℃。
实例A202-[(Z)-2-(4-氨基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐 16g氯化铵在60ml水中构成的溶液在最高30℃在搅拌下慢慢的逐滴加入由从实例A16得到的65.4g硝基化合物，800ml丙酮和200ml锌粉组成的混合物。接着溶液被搅拌20个小时。其后锌被吸附萃取并且用1l丙酮热洗涤。丙酮溶液被浓缩。残余物溶解在800ml水和25ml浓缩盐酸中，并且立刻用乙基乙酸盐萃取两次。接着溶液迅速地用氢氧化钠调节到弱碱并且立刻再一次用乙基乙酸盐萃取。有机相通过硫酸钠干燥，溶剂被真空排除。
产出55g，褐色的油。半成品被进一步加工。
实例A21{2-[(E)-4-(4-氨基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐 由从实例A17得到的反式硝基-1，2-二苯乙烯可根据实例A20制备出标题中的化合物。
产出45g，黄色结晶；熔点118℃。
实例A22{2-[(Z)-4-(4-氨基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐 由从实例A17得到的顺式硝基-1，2-二苯乙烯可根据实例A20制备出标题中的化合物。
产出35g，黄色的油。
实例23[4-((Z)-2-{4-[(1E)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙基乙酸盐
在由80ml水，600ml乙醇和60ml浓缩盐酸组成的50℃高温的混合物中迅速地转移入从实例A22得到的71g顺式氨基-1，2-二苯乙烯；混合物被剧烈地搅拌并且迅速地冷却到0℃。接着由18g亚硝酸钠和70ml水组成的溶液被立刻掺合并且在0℃搅拌一个小时。这个溶液接着被迅速地在剧烈地搅拌下在0℃掺合到由80g 40％二甲基胺水溶液，120g碳酸钠和1l水组成的混合物里。溶液在室温下搅拌一个小时，反应产物被吸附萃取，干燥并且作为半成品进一步加工。
产出63g。
实例24[4-((E)-2-{4-[(1E)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙基乙酸盐 由从实例A21得到的0.033mol反式氨基-1，2-二苯乙烯可根据实例23制备出标题中的化合物。
产出7g，熔点113℃。
实例25[2-((E)-2-{4-[(1Z)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙基乙酸盐 由从实例A20得到的0.2mol顺式氨基-1，2-二苯乙烯可根据实例23制备出标题中的化合物。淡黄色的油被作为半成品进一步加工。
产出55g。
实例26钠-[2-((Z)-2-{4-[(1E)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙酸盐 在由从实例25得到的35.3g三氮烯基-1，2-二苯乙烯酯和850ml乙醇组成的沸腾的溶液中掺合入50g 10％氢氧化钠溶液并且逆流进一步加热20分钟。接着加入300ml水和350ml饱和的氯化钠水溶液。标题中的化合物沉淀出来，被吸附萃取，干燥并且从乙腈中再结晶。
产出33g，浅褐色；熔点72℃。
实例27钠-[4-((Z)-2-{4-[(1Z)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙酸盐 在由从实例24得到的35.3g反式三氮烯基-1，2-二苯乙烯酯和850ml乙醇组成的沸腾的溶液中掺合入50g 10％氢氧化钠溶液并且逆流进一步加热20分钟。接着加入300ml水并且沉淀出来的钠盐被吸附萃取。
产出30g。
实例28[4-((Z)-2-{4-[(1Z)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙酸 5g从实例27得到的化合物被热溶解在由250ml磷酸-反式-(二甲基酰胺)和250ml水组成的混合物中。溶液接着被冷却到40℃并且被吸附萃取。滤出液被冷却到30℃并且和60ml纯乙酸掺合。在进一步的冷却过程中立刻加入50ml冰水和30ml纯乙酸。在10分钟后标题中的化合物被吸附萃取。
产出3g；熔点170℃。
实例29三乙醇铵-[4-((Z)-2-{4-[(1Z)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-乙烯基)-苯氧基]-乙酸盐 由从实例28得到的化合物作为10％的水溶液以三乙醇胺盐的形式递交给生物检验。
实例30钠-2-((Z)-2-{4-[(1E)-3，3-二甲基-1-三氮烯基)-苯基}-乙烯基)-苯磺酸盐-二水合物 在由从实例A19得到的15g顺式氨基-1，2-二苯乙烯，10ml水和24ml浓缩盐酸组成的溶液中在0℃逐滴加入由3.5g亚硝酸钠和5ml水组成的溶液，溶液被搅拌10分钟并且合成的重氮盐溶液被迅速地逐滴加入由30g碳酸钠，60ml水和7g 40％二甲基胺水溶液组成的溶液中。溶液被搅拌40分钟，结晶的反应产物被吸附萃取并且从乙腈中再结晶。
产出17g。
III.三苯基乙烯衍生物反应图解
实例A311-[溴基-(4-甲基苯基)-甲基]-4-甲基苯 在由100g二-(4-甲氧基苯基)-甲醇和46g氯化钙在1.71苯中的构成的悬浮液中引入溴化氢直至饱和。合成的盐被吸附萃取并且滤出液被缩减。
产出98g。
实例A32[二(4-甲氧基苯基)-甲基]-三苯基溴化磷 由从实例A31得到的溴化物可根据实例A13制备出标题中的化合物。
产出99g。
实例A331-[2，2-二(4-甲氧基苯基)-乙烯基]-4-硝基苯
由从实例A32得到的磷盐和4-硝基苯甲醛可根据实例A17制备出标题中的化合物。
产出14g。
实例A344-[1-(4-羟基苯基)-2-(4-硝基苯基)-乙烯基]-酚 在由从实例A33得到的150g化合物和300ml吡啶组成的混合物中逐滴加入380g浓缩盐酸。接着反应溶液被加热到150℃三个小时。然后溶液被倒入21冰水中，用盐酸调节到明显的酸性并且标题中的化合物被吸附萃取，用水洗涤和干燥。
产出110g。
实例A35{4-[1-[4-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)-苯基]-2-(4-硝基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐
由从实例A34得到的酚可根据实例A14制备出标题中的化合物。
产出14g。
实例A36{4-[1-[4-(2-乙氧基-2-氧代乙氧基)-苯基]-2-(4-氨基苯基)-乙烯基]-苯氧基}-乙基乙酸盐 由从实例A35得到的硝基化合物可根据实例A20制备出标题中的化合物。
产出13g。
实例A37二钠-(4-{2-(4-氨基苯基)-1-[4-(2-环氧-2-氧代乙氧基)-苯基]-乙烯基}-苯氧基)-乙酸盐 由从实例A35得到的13g酯，20ml水和5.3g氢氧化钾组成的混合物被逆流加热5个小时。接着生成的酒精被排除，结晶的残余物在50ml水中捻成细粉，吸附萃取和干燥。
产出10g。
实例A38二钠-(4-{2-{4-[(1E)-3，3-二甲基-1-三氮烯基]-苯基}-1-[4-(2-环氧-2-氧代乙氧基)-苯基]-乙烯基}-苯氧基)-乙酸盐 在由从实例A37得到的10g二钠盐，2g氢氧化钠，1.7g亚硝酸钠和50ml水组成的混合物中在0到5℃逐滴加入由100ml水，130ml二甲基甲酰胺和16ml浓缩盐酸组成的溶液。合成的重氮盐水溶液在0到5℃被加入由23g碳酸钠，14ml 40％二甲基胺的水溶液和50ml水组成的溶液中。接着混合物被缩减到干燥的状态。残余物被溶解在必要的量的水中并且和100ml饱和的氯化钠水溶液混合。结晶沉淀的标题中的化合物被吸附萃取和干燥。
产出5.7g。
权利要求
1.雌激素和抗雌激素，它们的每个分子至少被一个二烷基三氮烯基团核心取代，除了4-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-3-甲氧基-雌-1，3，5(10)-三亚乙基四胺-17-酮。
2.根据权利要求1所述的雌激素和抗雌激素，其特征在于，这些物质是如下团体的衍生物类固醇，1，2-二苯乙烯，己雌酚，苯基-1，2-二(2，6-二氯-苯基)-1，2-二(乙烯氨基乙烷)，三苯基乙烯，苯基苯并呋喃，苯基苯并噻吩，4，5-二-苯基-咪唑，2，3-二芳基哌嗪和4，5-苯基-2-咪唑啉。
3.根据权利要求1或者2所述的雌激素和抗雌激素的通式为 其中R1是氢，N＝N-NR7AR7B，O(CR8R9)nCO2H，CO2H或者SO3H，R2是OH，OCH3，N＝N-NR7AR7B或者O(CR8R9)nCO2H，R3是氢，N＝N-NR7AR7B，O(CR8R9)nCO2H，CO2H或者SO3H，R4和R6是相互独立的氢，O(CR8R9)nCO2H，(CR8R9)nCO2H或者C6H4OCH2CO2H以及R4此外是(CH2)10CON(C1-C4-烷基)2，R5是氢或者OH，R7A和R7B是相互独立的烷基，R8和R9是相互独立的氢，甲基，或者乙基，X是CO，CHOH或者C(OH)-C≡CH和n是1到10之间的一个正整数条件是，从R1到R3只有一个残基代表N＝N-NR7AR7B，和它们的盐，溶剂化物以及这些盐的溶剂化物。
4.根据权利要求1或者2所述的雌激素和抗雌激素的通式为 其中R是氢，甲基或者乙基，R1是氢，氯，甲基，乙基，CH2CO2H，CH(CH3)CO2H，OCH2CO2H，OCH(CH3)CO2H或者SO3H，R2是OH，OCH3，OCH2CO2H，OCH(CH3)CO2H或者N＝N-NR7AR7B，R3是氢，氯，优先在位置6，或者N＝N-NR7AR7B，R4是氢，甲基，乙基，CH2CO2H或者CH(CH3)CO2H和R7A和R7B是相互独立的烷基条件是，R2或者R3代表N＝N-NR7AR7B，以及虚线表示，化合物不仅包括乙烷衍生物而且包括乙烯衍生物，和它们的盐，溶剂化物以及这些盐的溶剂化物。
5.根据权利要求1或者2所述的雌激素和抗雌激素的通式为 其中R是氢，氯，氯甲烷或乙基，R1是OCH2CO2H或者OCH(CH3)CO2H，R2和R4是相互独立的氢，SO3H或者N＝N-NR7AR7B，R3和R5是相互独立的氢，OH，OCH3，OCH2CO2H，OCH(CH3)CO2H或者N＝N-NR7AR7B以及R7A和R7B是相互独立的烷基条件是，从R2到R5只有一个残基代表N＝N-NR7AR7B，和它们的盐，溶剂化物以及这些盐的溶剂化物。
6.根据权利要求1所述的雌激素和抗雌激素，其特征在于，这些物质是通式 的衍生物。
7.根据权利要求1到6所述的化合物的制备方法，其中至少一个二烷基三氮烯基取代物被引入雌激素和抗雌激素活性化合物的一个或多个芳香族环，雌激素和抗雌激素，它们的每个分子至少和一个二烷基三氮烯基团核心取代，用于治疗疾病。
8.根据权利要求7的化合物的用途，在于治疗人体和动物的性器官肿瘤。
9.人体和动物的性器官肿瘤的治疗方法，在于通过运用足够量的至少一个根据权利要求7的化合物。
10.根据权利要求7的化合物的用途，在于制备抑制人体和动物的性器官肿瘤的药物。
11.药物，其含有至少一个根据权利要求7的化合物，而在必要时与一个或多个药理学上合格的佐剂或底物一起。
12.根据权利要求11的药物的用途，在于在权利要求8到10中提到的目的。
全文摘要
本发明涉及二烷基三氮烯基支撑的雌激素和抗雌激素，它们适合作为治疗人体和动物的性器官癌的化疗药物使用。
文档编号A61K31/566GK1835964SQ200480015022
公开日2006年9月20日 申请日期2004年5月18日 优先权日2003年5月30日
发明者汉兹·福斯特尔 申请人:TriN股份有限公司