专利名称：石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒、和它的制造方法
技术领域：
本发明涉及治疗阿尔茨海默病，血管性痴呆等老年性痴呆的石杉 碱曱及其衍生物或其盐，尤其涉及石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释 纳米粒、和它的制造方法。
背景技术：
石杉碱曱(HuperzineA)，化学名为(5R，9R,llE)-5-氨基-ll-亚乙基 -5,6,9,10-四氢-7-曱基-5，9-亚曱环芳辛并-2(1印-吡啶酮，是从中草药千 层塔[Huperzia serrata(Thunb)Thev]中提取得到的酚性部分中获得的生 物碱，是一种高效、低毒和可逆性的乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)。 1993 年，美国FDA批准其为类胆^4能剂。药理试验证明，石杉石威曱和它的 一些衍生物对治疗阿尔茨海默病，血管性痴呆等其他老年性痴呆有效。 本发明涉及到的石杉碱曱及其衍生物分别为如下结构<formula>formula see original document page 6</formula>随着当今生活水平的改善以及医疗水平的日益提高，人的寿命不断延长，社会老龄化问题逐渐显现。在我国65岁以上的城镇居民的阿 尔茨海默病(Alzheimer' s disease, AD)的患病率为6. 9%， _接近欧洲 (6. 4 %)和日本(7. 0 %)。 AD已成为老年人群中继心血管病、恶性肿 瘤、中风之后的第四大"杀手"。心血管疾病的发病率在老年人群中居 高不下，由此引起的血管性痴呆等疾病不仅给患者及其家属带来极大 的痛苦，而且给社会和医疗保健系统带来沉重负担。在治疗这些疾病 的药物中，石杉碱曱及其衍生物或其盐具有极高的选择性抑制脑内乙 酰胆4^酯酶和增强脑内胆^5威能神经元的功能，此外还具有作用时间长、 易透过血-脑脊液屏障、口服生物利用度高以及不良反应少等多种优点。 石杉碱曱还具有多靶点作用，除抑制乙酰胆碱酯酶活性外，还可通过 抗氧化应激和抗细胞凋亡途径对神经元产生保护作用，对多种实验性 记忆损害均有改善作用。因此，石杉碱曱及其衍生物要优于加兰他敏、 多奈哌齐和他克林等其他治疗AD的药物。目前，有关石杉碱曱制剂的研究和专利有注射緩释微球制剂(CN 1194688.C);注射用长效微球混悬剂(CN 1723895.A);鼻腔给药制剂 (CN 1383824.A );经鼻腔脑靶向制剂(CN1621039.A);滴丸 (CN1493287 ); 口腔崩解片(CN 1568985 );緩释骨架片(CN 1751683.A);肠溶包衣缓释片(CN 1682719.A )。由于适用此药物制剂 的疾病属于慢性神经退行性疾病，需要长期进行药物治疗；而且患者 多为老年患者，减少给药次数，提高病人用药的依从性是我们选择剂 型应该着重考虑的问题之一。基于上述问题的考虑，本发明提供了 一种石杉碱曱及其衍生物或 其盐的緩释纳米粒，由于纳米粒粒径小，容易通过血脑屏障进入大脑，直接作用于脑内，因此其生物利用度大大提高；此外，药物通过载体材料或依靠载体材料的不断分解、融蚀，药物能緩緩地被释放进入体 内，血药浓度平稳且长久，能减少药物的副作用和给药次数，提高了 病人用药的依从性。发明内容本发明的目的是提供了一种石杉碱曱及其衍生物或其盐的缓释纳米粒。它的粒径在20~500nm，药物在体内可以緩慢释放，血药浓度 平稳且长久，能提高生物利用度并减少给药次数。另外，上述石杉碱曱及其衍生物或其盐，优选为，或它与盐酸、醋酸、磷酸、硫酸、乳酸、枸橼酸或马来酸结合成的盐。本发明的另 一 目的是提供石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米 粒的制备方法，本发明所述的緩释纳米粒配方及重量百分比为石杉碱曱及其衍生物或其盐0.05 ~ 45%载体材料4~99%乳化剂 0.1 ~ 65%这里所说的载体材料包括PLA、 PLGA 、聚乙二醇与聚乳酸共聚物、 聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物、大豆磷脂、大豆卯磷脂、卵磷脂、硬脂酸甘油酯中的一种或几种的混合物。乳化剂包括PVA、聚乙二醇 PEG、十二烷基硫酸钠、单甘油脂肪酸酯、三甘油脂肪酸酯、聚甘油 硬脂酸酯、脂肪酸山梨醇、聚山梨酯、卖泽、千泽、泊洛沙姆、阿拉 伯胶、西黄蓍胶、明胶、卵黄、海藻酸钠、胆酸钠、曱基纤维素中的 一种或几种的混合物。本发明的石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米粒，可用以下方 法制备(1 )取载体材料溶解在有机相中，与溶有乳化剂和石杉碱曱的水 相制成o/w型乳状液，在加入大量水后，油相中的有机相先被水萃取， 后被蒸发除去，原来的油滴逐渐变成聚合物和药物的纳米粒；(2)将载体材料溶解在非水溶液中，注入到搅拌的含石杉碱曱水 相，使聚合物的溶解度降低形成纳米粒；(3 )取DL-丙交酯/乙交酯共聚物混悬于水中，加入丙酮和二氯甲 烷，倒入搅拌的含石杉碱曱的PVA水溶液中，丙酮迅速扩散进入水相 使有机相滴粒径减小而成纳米粒；(4)先取PLA与聚乙二醇单曱醚合成两亲性嵌段共聚物，将它 与石杉碱曱分散于丙酮，蒸发得石杉碱甲固体基材，干燥，搅拌加水， 除去大粒子即得石杉碱曱緩释纳米粒；(5) 将PLA、溶于丙酮中，緩慢搅拌下加入含石杉4^曱的PVA 和高浓度盐的水相，由于水相含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/0 型乳状液，继续搅拌下加入水相，发生相转换，形成o/w型乳状液。 再加水，油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒；(6) 将类脂等溶于适宜的有机溶剂中，减压除去有机溶剂，形成 一层脂质薄膜，加入一定量的乳化剂水溶液和石杉碱曱，超声分散即 可制得粒径小而分布均匀的纳米粒；(7) 将脂质载体溶解有机溶液，然后加入含有乳化剂的水相中， 石杉碱曱溶解在水相中，在高速剪切力的搅拌下形成初分散体。将初 分散体于200-500个大气压下经高压乳匀机处理2~3次，即可得到 所需的纳米粒；(8) 将类脂溶于与水不互溶的有机溶剂中，加入到含有石杉碱曱 和乳化剂的水相中乳化，挥发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒o为延长石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米粒的存放时间，可 将本发明的纳米粒通过真空干燥或冷冻干燥制成粉末状纳米粒，提高 纳米粒的稳定性，为防止干燥工艺中纳米粒的聚集和粘连，可以加入 支架剂，这里支架剂选自蔗糖、乳糖、甘露醇、葡萄糖、海藻糖、右 旋糖苷、木糖醇、山梨醇、果糖中的一种或几种的混合物。本发明的石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米粒也可进一 步制 成注射制剂。本发明的石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米粒粒径在20 ~500nm之间，能显著延长药效，提供持续的治疗效果。实验证明，该 纳米粒能在较长时间内维持有效血药浓度。
图1为实施例1的石杉碱曱緩释纳米粒的粒径大小分布图。 图2为实施例19的石杉碱曱的缓释纳米粒体内药时的曲线图。
具体实施方式
下面将通过具体实施例进一步说明本发明，^f旦以下描述为非限制 性的，并不限制本发明的权利要求范围。实施例1取5g聚乳酸溶解于50m乙酸乙酯中制成有机相，取0.5g石杉碱 曱和4g聚乙烯醇溶于100ml水中制成水相，8000r/min高速搅拌乳化 10min中，制成0/W型乳状液，在加入400ml水后萃取乙酸乙酯，减 压蒸馏除去，形成石杉碱曱的纳米颗粒，加入20g甘露醇，冷冻干燥 即得。取制成的石杉碱甲纳米颗粒lg，加15ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其结果如图1，粒径在20 500nm 的范围，平均粒径为120mn。实施例210g的聚乳酸溶解在二氯曱烷20ml中，取0.1g石杉碱曱溶解在含 O.lg泊洛沙姆的60ml水中制成水相，5000r/min高速搅拌乳化15min 中，制成0/W型乳状液，在加入200ml水后萃取二氯曱烷，减压蒸馏除去，形成石杉碱曱的纳米粒，加入60g葡萄糖，冷冻干燥即得。取 制成的石杉石威曱纳米颗粒lg，力i3 10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS 粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在50~450nm的范围，平均粒 径为200nm。实施例320g的PLGA溶解在40ml 二氯曱烷中，取300mg石杉碱曱和2.51 g 海藻酸钠溶于80ml水中制成水相，5000r/min高速搅拌乳化10min中， 制成0/W型乳状液，在加入200ml水后萃取二氯曱烷，减压蒸馏除去， 形成石杉碱曱的纳米粒，加入10g甘露醇和15g木糖醇，冷冻干燥即 得。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，加50ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60 300nm的范围，平 均粒径为100nm。实施例4100g的聚乳酸溶解在100ml丙酮中，注入到含0.5g卖泽和500mg 石杉碱甲的搅拌的水溶液100ml中，使聚乳酸的溶解度降低形成纳米 粒，继续搅拌，减压使丙酮挥发，加入10g蔗糖和15g乳糖，冷冻干 燥即得。取制成的石杉碱曱纳米颗粒0.5g，加10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100 ~ 300nm的范围， 平均粒径为150nm。实施例510g的PLGA溶解于50ml丙酮中，注入到含l.Og胆酸钠和l.Og 石杉碱曱的水溶液80ni1中，搅拌，减压丙酮挥发，加入10g甘露醇和 2g右旋糖苷，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱曱纳米颗粒0.5g，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径 在100 ~ 400nm的范围，平均粒径为200nm。实施例6取2gPLGA溶解在20ml丙酮中，注入到含0.5g石杉碱曱和25mg 十二烷基硫酸钠的水溶液80ml，搅拌，减压使丙酮挥发，加入10g甘 露醇和2g山梨醇，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg,加 20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其 粒径在60 ~ 200nm的范围，平均粒径为80nm。实施例720ml丙酮和5ml 二氯甲烷，加入含l.OgDL-PLGA,倒入含10gPVA和120mg石杉碱曱的水溶液100ml中，搅拌，丙酮迅速扩散进入水相 使有机相滴粒径减小而成纳米粒，将二氯曱烷减压去除，加入10g甘 露醇和2g果糖，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，加 20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其 粒径在100 300nm的范围，平均粒径为220nm。实施例820ml丙酮和10ml 二氯曱烷加入含5gDL-PLGA10ml，倒入含 0.1 gPVA和1 OOmg石杉碱曱的水溶液150ml中，搅拌，丙酮迅速扩散 进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米粒，将二氯曱烷减压去除，加 入10g甘露醇和2g海藻糖，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱曱纳米颗 粒lg,力卩10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒 径大小，其粒径在40 400nm的范围，平均粒径为200nm。实施例935ml丙酮和0.5ml 二氯曱烷，加入4.5gDL-PLGA,倒入含200mg 石杉碱甲和2gPVA的水溶液100ml中，搅拌，丙酮迅速扩散进入水相 使有机相滴粒径减小而成纳米粒，将二氯曱烷减压去除，加入10g甘 露醇，冷冻干燥即得。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，加20ml水溶解， 在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100 ~ 300nm的范围，平均粒径为150nm。实施例10先取PLA与聚乙二醇单曱醚合成两亲性聚乙二醇与聚乳酸共聚 物，取此共聚物6g溶于丙酮10ml,加300mg石杉石威曱分散在其中， 吹氮气蒸发得石杉碱曱固体基材，干燥，加卖泽lg和水50ml，搅拌， 离心除去大粒子，加甘露醇3.5g,冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。 取制成的石杉碱甲纳米颗粒lg,加20ml水溶解，在NICOMP380ZLS 粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在150~400nm的范围，平均粒 径为250nm。实施例11先取PLGA与聚乙二醇单曱醚合成两亲性聚乙二醇与乙交酯丙交 酯共聚物，取此共聚物10g溶于丙酮50ml，取石杉碱曱120mg分散在 其中，吹氮气蒸发得石杉碱曱固体基材，干燥，搅拌加千泽lg和PBS 150ml,离心除去大粒子，加葡萄糖10g,冷冻干燥即得石杉碱曱緩释 纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，力。20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定^f义上测定其粒径大小，其粒径在150 ~ 350nm的范围， 平均粒径为100nm。实施例12将7g PLA溶于丙酮20ml中，緩慢搅拌下加入含200mg石杉碱曱、 2gPVA和6g氯化《美的水溶液lOml，由于水相含浓盐溶液使两相不混 容，开始形成W/0型乳状液，继续搅拌下加入水相50ml,发生相转换， 形成0/W型乳状液。再加水100ml,油滴中的丙酮向水相扩散，形成 纳米粒。加葡萄糖15g，冷冻干燥即得石杉碱曱缓释纳米粒。取制成的 石杉碱曱纳米颗粒lg,力卩20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测 定仪上测定其粒径大小，其粒径在80~400nm的范围，平均粒径为 120nm。实施例1315g PLA溶于20ml丙酮中，缓慢搅拌下加入含400mg石杉碱曱、 4g阿拉伯胶、4g西黄蓍胶和8g氯化镁的水溶液15ml，由于水相含浓 盐溶液使两相不混容，开始形成W/0型乳状液，继续搅拌下加入水相 80ml，发生相转换，形成0/W型乳状液。再加水160ml,油滴中的丙 酮向水相扩散，形成纳米粒。加甘露醇25g，冷冻干燥即得石杉碱曱緩 释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg,加15ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在90 ~ 350nm的范围， 平均粒径为200nm。实施例1410gPLA溶于丙酮20ml中，緩慢搅拌下加入含0.5g石杉碱曱、5g 聚山梨酯和6g氯化镁的水溶液10ml,由于水相含浓盐溶液使两相不混 容，开始形成W/0型乳状液，继续搅拌下加入水相40ml，发生相转换， 形成0/W型乳状液。再加水150ml,油滴中的丙酮向水相扩散，形成纳米粒。加右旋糖苷15g，冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉i成曱纳米颗粒lg，力。10ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径 测定仪上测定其粒径大小，其粒径在80~250nm的范围，平均粒径为 110nm。实施例15大豆磷脂8g和3gPLGA溶于25ml丙酮中，减压除去有机溶剂， 形成一层脂质薄膜，加入含0.6g千泽为乳化剂和100mg石杉碱甲的水 溶液50ml，超声分散，加甘露醇5g,冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米 粒。取制成的石杉石威曱纳米颗粒lg，加20ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100 300nm的范围，平 均粒径为150nm。实施例168g大豆磷脂、lg卯磷脂和5gPLGA溶于35ml乙酸乙酯中，减压 除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入含100mg石杉碱甲和lg明胶 的水溶液100ml，超声分散，加甘露醇7g，冷冻千燥即得石杉碱甲緩 释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg,加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100 ~ 300nm的范围， 平均粒径为150nm。实施例17将卵磷脂10g和10gPLGA溶于55ml 二氯甲烷中，减压除去有机 溶剂，形成一层脂质薄膜，加入含200mg石杉碱曱和5g脂肪酸山梨醇 的水溶液100ml，超声分散，加甘露醇15g，冷冻干燥即得石杉碱曱緩 释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，加15ml水溶解，在NICOMP380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在100 ~ 350nrn的范围， 平均粒径为250nm。实施例18卵磷脂15g和7gPLGA溶于25ml丙酮中，减压除去有机溶剂，形 成一层脂质薄膜，加入含300mg石杉碱曱和2g卵黄和3g胆酸钠的水 溶液100ml，超声分散，加甘露醇15g，冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳 米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，加25ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在80 ~ 400nm的范围，平 均粒径为250nm。实施例196g卵磷脂和5gPLGA溶于15ml乙醇溶液中，然后加入含有lg泊 洛沙姆和110mg石杉碱甲的水100ml中，高速剪切力搅拌下分散形成 初分散体。减压去乙醇，再将初分散体于200 ~ 500个大气压下经高压 乳匀机处理2 3次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇15g，冷冻干 燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg,力。10ml 水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径 在50 ~ 200nm的范围，平均粒径为90nm。实施例205g硬脂酸甘油酯溶解于25ml乙醇溶液中，然后加入含有0. 6g甲 基纤维素和500mg石杉碱曱的水100ml，高速剪切力搅拌，分散形成 初分散体。减压除乙醇，将初分散体于200 ~ 500个大气压下经高压乳 匀机处理2~3次，即可得到所需的纳米粒。加葡萄糖15g,冷冻千燥 即得石杉碱曱缓释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，力。20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径 在50 ~ 400nm的范围，平均粒径为110nm。实施例215g大豆磷脂和5gPLGA溶于15ml丙酮溶液中，然后加入含有 lOOmg石杉碱曱和O. 5g聚乙烯醇的水80ml中，在高速剪切力的搅拌 下分散形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200-500个大气 压下经高压乳匀机处理4 ~ 5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g， 冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg, 加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小， 其粒径在50 ~ 250nm的范围，平均粒径为120nm。实施例226g大豆卵磷脂和3gPLGA溶解于15ml的乙酸乙酯溶液中，然后 加入含有400mg石杉碱甲和0. 5g聚乙烯醇的水80ml中，在高速剪切 力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去乙酸乙酯，将初分散体于 200-500个大气压下经高压乳匀机处理4~5次，即可得到所需的纳 米粒。加甘露醇8g,冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石 杉碱曱纳米颗粒lg，加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定 仪上测定其粒径大小，其粒径在60~ 400nm的范围，平均粒径为 250亂实施例235g硬脂酸甘油酯溶解于25ml丙酮溶液中，然后加入含170mg石 杉碱曱和lg胆酸钠的水100ml，在高速剪切力的搅拌下分散，形成初 分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200 ~ 500个大气压下经高压乳匀机处理4 5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g，冷冻干燥即 得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg，力。10ml水溶 解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径在60 ~ 400nm的范围，平均粒径为160nm。实施例240.6g单甘油脂肪酸酯和5g卵磷脂溶解于25ml丙酮溶液中，然后 加入含有200mg石杉碱曱和2g卖泽的水100ml，在高速剪切力的搅拌 下分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200-500个大 气压下经高压乳匀机处理4-5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇 8g,冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒 lg,加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大 小，其粒径在50 300nm的范围，平均粒径为250nm。实施例251.5g三甘油脂肪酸酯和6g大豆卵磷脂溶解于35ml丙酮溶液中， 然后加入含150mg石杉碱甲的水溶液100ml，在高速剪切力的搅拌下 分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200-500个大气 压下经高压乳匀机处理4 ~ 5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g, 冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg， 加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小， 其粒径在40 ~ 200nm的范围，平均粒径为80nm。实施例262g聚甘油硬脂酸酯和5g硬脂酸甘油酯溶解于25ml丙酮溶液中， 然后加入含500mg石杉爿喊曱的水溶液100ml,在高速剪切力的搅拌下分散，形成初分散体。减压除去丙酮，将初分散体于200-500个大气 压下经高压乳匀机处理4 ~ 5次，即可得到所需的纳米粒。加甘露醇8g, 冷冻干燥即得石杉碱曱缓释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg， 加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小， 其粒径在150 ~ 400nm的范围，平均粒径为250nm。实施例27将6g大豆磷脂和5gPLA溶于丙酮15ml中，加入到含有100mg石 杉碱曱和4g阿拉伯胶的水溶液50ml中，超声乳化15分钟，减压挥发 有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。加8g甘露醇，冷冻干燥 即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱甲纳米颗粒lg，力。10ml 水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小，其粒径 在60-200nm的范围，平均粒径为100nm。实施例28将9g大豆卵磷脂和5gPLGA溶于25ml 二氯曱烷中，加入到含有 200mg石杉碱曱和0.8g泊洛沙姆的水溶液100ml中，搅拌乳化IO分钟， 减压挥发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。加甘露醇10g, 冷冻干燥即得石杉碱曱緩释纳米粒。取制成的石杉碱曱纳米颗粒lg, 加20ml水溶解，在NICOMP 380 ZLS粒径测定仪上测定其粒径大小， 其粒径在100 300nm的范围，平均粒径为150nm。实施例29以实施例19的方法制备石杉碱曱的緩释纳米粒，以狗为动物模型， 200昭/kg的剂量给药，1天内按规定时间采集血样，冷冻保存，用HPLC 进行检测。检测的色谱条件为检测波长307nm,色谱柱KromasilC18柱(4.6mm x 250mm, 5mm),流动相曱醇-水-三乙胺(60 : 40 : 0.02， 水乙酸调至pH6.0),柱温室温，流速lml/min，进样量20ml。结果如 图2,从图可见，血药浓度平稳，24小时内緩緩释药。
权利要求
1. 一种石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，其特征在于，粒径在20～500nm的范围。
2、 如权利要求1所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米粒， 其特征在于，所述石杉碱曱及其衍生物或其盐包括，<formula>formula see original document page 2</formula>或上述化合物与盐酸、醋酸、磷酸、硫酸、乳酸、枸橼酸或马来酸结 合成的盐。
3、 如权利要求1所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩释纳米粒， 其特征在于，其配方以重量百分比计为石杉碱曱及其衍生物或其盐0.05 ~ 45%载体材料4~99%乳化剂 0.1 ~ 65%。
4、 如权利要求3所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐的缓释纳米粒, 其特征在于，载体材料选自聚乳酸(PLA)、乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)、聚乙二醇与聚乳酸共聚物、聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物、大豆磷 脂、大豆卵磷脂、卵磷脂、硬脂酸甘油酯中的一种或几种的混合物。
5、 如权利要求3所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐的緩释纳米粒， 其特征在于，乳化剂选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙二醇(PEG)、十二烷 基硫酸钠、单甘油脂肪酸酯、三甘油脂肪酸酯、聚甘油硬脂酸酯、脂 肪酸山梨醇、聚山梨酯、卖泽、千泽、泊洛沙姆、阿拉伯胶、西黄蓍 胶、明胶、卵黄、海藻酸钠、胆酸钠、曱基纤维素中的一种或几种的 混合物。
6、 如权利要求1 5任意一项所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐的 緩释纳米粒，其特征在于可进一步制成注射制剂。
7、 一种制备权利要求3-5所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐的緩 释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备取载体材料溶解在有机相中，同溶有乳化剂和石杉碱甲的水相制成o/w型乳状液，在加入大量水后，油相中的有机相先被水萃取，后被蒸发除去，原来的油滴逐渐 变成聚合物和药物的纳米粒。
8、 一种制备根据权利要求3~5所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐 的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备将载体材料溶解到非 水溶液中，注入到搅拌的含石杉碱曱的水相中，使聚合物的溶解度降 低形成纳米粒。
9、 一种制备根据权利要求3~5所述的石杉碱曱及其衍生物或其盐 的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备取DL-丙交酯/乙交酯 共聚物混悬于水中，加入丙酮和二氯曱烷，倒入搅拌的含石杉碱曱的PVA水溶液中，丙酮迅速扩散进入水相使有机相滴粒径减小而成纳米 粒。
10、 一种制备根据权利要求3~5所述的石杉碱曱及其衍生物或其 盐的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备先取PLA与聚乙二 醇单曱醚合成两亲性嵌段共聚物，将它与石杉碱曱分散于丙酮，蒸发 得石杉碱甲固体基材，干燥，搅拌加水，除去大粒子即得石杉碱曱緩 释纳米粒。
11、 一种制备根据权利要求3 5所述的石杉碱曱及其衍生物或其 盐的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备将PLA、溶于丙酮 中，緩慢搅拌下加入含石杉碱曱的PVA和高浓度盐的水相，由于水相 含浓盐溶液使两相不混容，开始形成W/0型乳状液，继续搅拌下加入 水相，发生相转换，形成o/w型乳状液。再加水，油滴中的丙酮向水 相扩散，形成纳米粒。
12、 一种制备根据权利要求3~5所述的石杉碱曱及其衍生物或其 盐的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备将类脂等溶于适宜 的有机溶剂中，减压除去有机溶剂，形成一层脂质薄膜，加入一定量 的乳化剂水溶液和石杉碱曱，超声分散即可制得粒径小而分布均匀的 纳米粒。
13、 一种制备根据权利要求3~5所述的石杉碱曱及其衍生物或其 盐的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备将脂质载体溶解有 机溶液，然后加入含有乳化剂的水相中，石杉碱曱溶解在水相中，在 高速剪切力的搅拌下形成初分散体。将初分散体于200-500个大气压 下经高压乳匀机处理2 3次，即可得到所需的纳米粒。
14、 一种制备根据权利要求3~5所述的石杉碱曱及其衍生物或其 盐的緩释纳米粒的制备方法，是以如下步骤制备将类脂溶于与水不 互溶的有机溶剂中，加入到含有石杉碱曱和乳化剂的水相中乳化，挥 发有机溶剂后，类脂在水相中沉淀形成纳米粒。
15、 如权利要求7 14任意一项所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐 的緩释纳米粒的制备方法，其特征在于，通过冷冻干燥或真空干燥得 到粉末状纳米粒。
16、 如权利要求7 14任意一项所述的石杉碱甲及其衍生物或其盐 的緩释纳米粒的制备方法，其特征在于，加入支架剂进行冷冻干燥， 支架剂选自蔗糖、乳糖、甘露醇、葡萄糖、海藻糖、右旋糖苷、木糖 醇、山梨醇、果糖中的一种或几种的混合物。
全文摘要
本发明提供了一种石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒，它包括石杉碱甲及其衍生物或其盐和载体，载体包括了聚乳酸、乙交酯丙交酯共聚物、明胶、壳聚糖、聚乙二醇与聚乳酸共聚物、聚乙二醇与乙交酯丙交酯共聚物、大豆磷脂、大豆卵磷脂、卵磷脂、硬脂酸甘油酯等中的一种或几种的混合物。石杉碱甲及其衍生物或其盐的缓释纳米粒用于治疗阿尔茨海默病，血管性痴呆等老年性疾病。该缓释纳米粒能够延长药物作用时间、减少用药次数、提高石杉碱甲及其衍生物或其盐的生物利用度，降低该药的毒副作用，提高病人服药的依从性。
文档编号A61K47/34GK101264058SQ20071003800
公开日2008年9月17日 申请日期2007年3月13日 优先权日2007年3月13日
发明者李亚平, 陈伶俐, 顾王文 申请人:中国科学院上海药物研究所