专利名称：负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法
技术领域：
本发明涉及的是一种药物技术领域的制备方法，具体涉及一种负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法。
背景技术：
缓、控释技术是指在一个特定的体系内，采取某些措施来减小某种活性制剂的释放速度，从而在某段时间内，体系中的活性制剂可以维持有效浓度。缓、控释型药剂研究中仍存在一些问题，主要是载体材料的选择，譬如如何处理药物释放速度与稳定性的关系，如何降低载体材料的毒副作用等。
普罗布考(丙丁酚，probucol)主要作为降胆固醇及抗动脉粥样硬化药，对动脉粥样硬化有很好的预防和治疗作用，但口服吸收量不足10％，长期用药可造成蓄积。因此有必要提高其生物利用度，消除其药物蓄积，达到缓慢稳定释放。目前常用乙基纤维素对药物进行包裹，以达到药物缓释的目的，乙基纤维素是纤维素链中的部分羟基被乙氧基取代的纤维素衍生物，在药剂中有多种用途。
经对现有技术的文献检索发现，李药兰等在《中国药材》(2000年35卷5期281-285页)发表了题为“茶多芬缓释微囊的制备研究”的论文，以乙基纤维素为囊材，采用乳液溶剂挥发技术制备茶多芬缓释微囊，该微囊有一定的缓释作用，但微囊突释量较大，药物的释放速度不稳定。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，使其减少药物初期突释，有效延长药物的释放时间，并使其达到稳定释放。
本发明是通过如下技术方案实现的，本发明采用十二烷基硫酸钠的水溶液作为水相，采用载体材料乙基纤维素和亲油性药物普罗布考的二氯甲烷溶液作为油相，20～40℃水浴磁力搅拌下将油相加入水相中，乳化2～4小时后，除去二氯甲烷，得到乙基纤维素微纳米粒子，将其用蒸馏水洗涤至中性，常温减压干燥固化，得到负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，该粒子粒径分布较窄，在100-800微米范围内，其粒径范围随乙基纤维素粘均分子量的减小而逐渐向纳米级分布，粒子成球性好，表面圆整。
所述的水相中，十二烷基硫酸钠的浓度为0.1～1％(w/v)。
所述的油相中，乙基纤维素的粘均分子量为7000～50000，浓度为1～50mg/ml，不同粘均分子量的乙基纤维素的制备方法为将分子量为50000的乙基纤维素，以95％的乙醇溶解后，用34％硝酸回流降解1～4小时。
所述的油相中，普罗布考的浓度为0.1～10mg/ml。
将油相加入水相的过程中，如果采用搅拌等方式可以促使油相与水相的混合更加完全，油相加入水相的过程中，油相快速注入水相也比油相缓慢滴入水相更能使两者混合完全。本发明通过调节乙基纤维素的粘均分子量和投料比来控制负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的粒径分布、药物包封率大小、稳定释放时间的长短，以满足多种需求，例如，可以通过减小油水体积得到粒径较小的缓释微球，或通过降低乙基纤维素的粘均分子量可以得到纳米级的缓释微纳米粒子，或通过增大药物投料浓度提高药物包裹量，但这种方式同时会造成包封率下降，对药物包封率、缓释性的调控，可满足应用于对药物释放量和缓释时间等的不同要求；对药物微球粒径的调控，可满足不同部位给药的各种要求。
本发明操作简单，获得的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，粒子无粘连、成球性好、表面圆整，释放稳定且缓释性能可调，粒径随着乙基纤维素粘均分子量的降低而逐渐减小，可达纳米级。
图1本发明实施7中负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的粒径分布图。
图2本发明实施例8中负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的粒径分布3本发明实施例9中负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的粒径分布4以不同材料/药物投料比制备的微纳米粒子的体外释放曲线图5以不同粘均分子量的乙基纤维素制备的微纳米粒子的体外释放曲线
具体实施例方式
下面结合附图对本发明的实施例作详细说明本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
实施例1将3g乙基纤维素溶于60ml 95％的乙醇中，加入34％HNO3溶液20ml，回流1h后，冷却至室温，再加入300ml的蒸馏水，溶液中有白色沉淀产物生成，抽滤，沉淀用蒸馏水多次洗涤，至洗出液的pH为7.0，40℃烘干，得到白色粉末状低分子量的乙基纤维素，其粘均分子量为37560。
实施例2将3g乙基纤维素溶于60ml、95％的乙醇中，加入34％HNO3溶液20ml，回流2.5h后，冷却至室温，再加入300ml的蒸馏水，溶液中有白色沉淀产物生成，抽滤，将沉淀用蒸馏水反复洗涤，至洗出液pH 7.0，40℃烘干，得到白色粉末状低分子量的乙基纤维素，粘均分子量为20198。
实施例3将3g乙基纤维素溶于60ml、95％的乙醇中，加入34％HNO3溶液20ml，回流4h后，冷却至室温，再加入300ml的蒸馏水，溶液中有白色沉淀产物生成，抽滤，将沉淀用蒸馏水反复洗涤，至洗出液pH 7.0，40℃烘干，得到白色粉末状低分子量的乙基纤维素，粘均分子量为7394。
实施例4取20mg乙基纤维素，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg，在20℃水浴中以250rpm的转速搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.1％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中，继续搅拌，将水浴温度由10℃逐渐降至室温，保持2h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子。
实施例5取20mg乙基纤维素，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg，在30℃水浴中以250rpm的转速搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中，继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子。
实施例6取20mg乙基纤维素，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg，在40℃水浴中以250rpm的转速搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有1％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中，继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持4h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子。
实施例7取20mg乙基纤维素，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg，在30℃水浴中以250rpm的转速搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中，继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，其包封率为61.9％。
实施例8取500mg乙基纤维素，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg(材料/药物投料摩尔比为1)，在30℃水浴中，250r·min-1搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中。继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，其包封率为86.2％。
实施例9取1000mg乙基纤维素，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg(材料/药物投料摩尔比为25)，在30℃水浴中，250r·min-1搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中。继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥得负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，其包封率为99.5％。
实施例10取20mg乙基纤维素(粘均分子量为50000)，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg(材料/药物投料摩尔比为50)，在30℃水浴中，250r·min-1搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中。继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h。过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得到负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，如图1所示，该载药粒子粒径分布为100～700微米，分布较宽。
实施例11取20mg乙基纤维素(粘均分子量为20000)，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg，在30℃水浴中，250rpm搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中。继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得到负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，如图2所示，该载药粒子粒径分布为100～400微米，分布较窄。
实施例12取20mg乙基纤维素(粘均分子量为7000)，溶于20ml二氯甲烷中，再分别依次加入普罗布考粉末20mg，在30℃水浴中，250r·min-1搅拌20min，将所得溶液在搅拌下，加入含有0.5％(w/v)十二烷基硫酸钠的100ml蒸馏水中。继续搅拌，将水浴温度由30℃逐渐降至室温，保持3h，过滤，将微囊用水洗涤至滤液呈中性后，室温减压干燥，得到负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，如图1所示，该载药粒子粒径分布为100～800纳米，分布较宽。
实施例13将按照不同投料比制备的微纳米粒子置于盛有5ml磷酸盐缓冲溶液(PBS，pH7.4)的试管中，在37℃恒温下磁力搅拌，每隔一定时间将试管中的悬浮液在室温下超速离心30min，取出3ml上层清液，同时补充3ml新鲜溶液。在药物最大吸收波长处测定吸光度，代入标准曲线方程，计算各时间点的药物浓度，绘制出如图4所示的药物体外累积释放曲线，实验结果表明随着药物投料量的增加，普罗布考突释量增大，释放时间缩短。
实施例14将用不同粘均分子量的乙基纤维素制备的微纳米粒子置于盛有5ml磷酸盐缓冲溶液(PBS，pH7.4)的试管中，在37℃恒温下磁力搅拌，每隔一定时间将试管中的悬浮液在室温下超速离心30min，取出3ml上层清液，同时补充3ml新鲜溶液。在药物最大吸收波长处测定吸光度，代入标准曲线方程，计算各时间点的药物浓度，绘制出如图5所示的药物体外累积释放曲线，实验结果表明随着乙基纤维素粘均分子量的增加，普罗布考的体外释放行为区别不大，分子量的影响主要体现在对微纳米粒子粒径分布上。
权利要求
1.一种负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征在于，采用十二烷基硫酸钠的水溶液作为水相，采用乙基纤维素和普罗布考的二氯甲烷溶液作为油相，将油相加入水相中，乳化后，除去二氯甲烷，得到乙基纤维素微纳米粒子，将其用蒸馏水洗涤至中性，常温减压干燥固化，得到负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子。
2.根据权利要求1所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的水相中，十二烷基硫酸钠的质量体积百分比浓度为0.5％。
3.根据权利要求1所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的油相中，普罗布考的浓度为0.1～10mg/ml。
4.根据权利要求1所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的乙基纤维素，其粘均分子量为7000～50000。
5.根据权利要求4所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的乙基纤维素，其制备方法为将分子量为50000的乙基纤维素，以95％的乙醇溶解后，用34％硝酸回流降解1～4小时。
6.根据权利要求4所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的乙基纤维素，其在油相中的浓度为1～50mg/ml。
7.根据权利要求1所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，将油相加入水相，是在30℃水浴中伴以搅拌的条件下进行。
8.根据权利要求1所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的乳化，时间为3小时。
9.根据权利要求1所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，其特征是，所述的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子，其粒径分布在100-800微米范围内。
全文摘要
一种负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子的制备方法，属于药物的控、缓释制剂领域。本发明采用十二烷基硫酸钠的水溶液作为水相，采用乙基纤维素和普罗布考的二氯甲烷溶液作为油相，将油相加入水相中，乳化后，除去二氯甲烷，得到乙基纤维素微纳米粒子，将其用蒸馏水洗涤至中性，常温减压干燥固化，得到负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子。本发明操作简单，获得的负载普罗布考的乙基纤维素微纳米粒子无粘连、成球性好、表面圆整、释放稳定且缓释性能可调，且其粒径随着乙基纤维素粘均分子量的降低而逐渐减小，可达纳米级。
文档编号A61J3/00GK101032448SQ20071003913
公开日2007年9月12日 申请日期2007年4月5日 优先权日2007年4月5日
发明者万锕俊, 张悦粤, 高礼, 李慧丽 申请人:上海交通大学