无环的磺酰胺衍生物的制作方法

专利名称：无环的磺酰胺衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及无环的磺酰胺衍生物，用于治疗肥胖和进食问题。
背景技术：
现在对于提供治疗肥胖和进食问题的活性物质有越来越多的需求。近 年来已经在寻找用于治疗这些情况的新药学目标物方面进行了大量研究努 力。
发现最有希望的目标物之一是属于配位激活转录因子的核激素受体超
家族中的过氧化物酶增殖物激活受体(PPAR)，在脂肪和碳水化合物代谢 的调节中起到重要的作用。此外，人们发现，PPAR在饱食诱导、摄食控制、 身体脂肪调节以及糖尿病和心血管的疾病的治疗和预防中也起到重要作 用。
PPAR受体的三种亚型描述为PPARa、 PPARy和PPARS(Kota, B. P.等 尸Aarw"co/. 51 (2005): 85)。 PPARy亚型配体的活化提高了人体中的胰 岛素作用并降低了啮齿类糖尿病模型中循环葡萄糖的数量。脂肪组织中显 示的PPARy受体在调节活体外脂肪细胞的分裂有重要作用。尽管似乎 PPARS亚型在控制高血糖和高血脂中起重要作用，但对其的生物学特性还 知之甚少(Berger, J. y Moller， D.e. ^"ww. i ev. 53 (2002): 409; Berger， J. 等 /胸/. CTzem. 274 (1999): 6718-6725)。
PPARa亚型由其天然配体的活化与循环脂肪数量的控制有关。已经描 述了中链和长链的脂肪酸和类二十垸酸(Forman， B. M. et al.户roc. A^/. 俞ad Sc/. t/.S.A 94 (1997): 4312)，它们显著降低了血浆甘油三酯，中度降
低了与低密度脂蛋白(LDL)相关的胆固醇并产生饱食效应。因此，该受体家 族的ct亚型可认为是用于治疗与代谢变异相关的疾病如血脂异常 (dyslipidemias)、心血管病、糖尿病和肥胖的非常重要的治疗目标物 (Cheng, P.T.等i ev. Med 5 (2005): 741; Evans, R.M.等A^we
10 (2004): 1)。
血脂异常是脂类代谢异常，特征是一种或多种的脂类(例如胆固醇和 三酸甘油酯)和/或脱脂蛋白(例如A、 B、 C和E型)和/或脂蛋白(例如 低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和中密度脂蛋白(IDL))的 异常浓度。胆固醇分子通常被传送结合到LDL脂蛋白上。该组分数量的增 加与患冠心病的风险直接相关。较少量的胆固醇分子通过HDL脂蛋白传送， 它的主要功能是将沉积到动脉壁上的胆固醇浸出并将其传送到肝脏以通过 肠道被消耗。有人已经描述了，高数量的HDL-胆固醇与降低患冠心病的风 险有关。因此，在治疗血脂异常中，降低LDL-胆固醇的数量与增加HDL-胆固醇的数量一样重要(Gordon, T.等Med 62 (1977): 707. Stampfer; M丄等M五"g/做"A/ed" 325 (1991): 373; Kamiel, W.B. et al. j朋.肠簡/
90 (1979): 85-91)。目前，苯氧芳酸类(fibrate)衍生物，例如氯贝丁 酯(W002009682)、苯扎贝特(bezofibrate)和非诺贝特(phenofibrate) (WO 02015845)正在临床上通过结合到PPARoi亚型上来用于血脂异常的控制，从 而控制前述一些方法中暗含的一些转录因子(Linton, M.F. y Fazio, M. F. C群.掘m'osc/er. Rep. 2 (2000): 29)。
除了血脂异常的治疗外，双激动剂PPARa/Y对于治疗糖尿病II型有潜 在应用(Henke, B.R. / C&w. 47 (2004): 4118)。不同的格列酮(苯甲基 -2,4-噻唑垸二酮衍生物)已经获准将它们用于治疗糖尿病，其中包括(WO 03018010) isaglitazon、曲格列酮、罗格列酮、吡格列酮(Hulin, B.等C鮮e"f 尸/wr附.Dew'g". 2 (1996): 85)。在临床研究的发展中或不同阶段中的新分子 正显示出作为PPARa/y亚型的促进剂如KRP-297 (Murakami, K. 5/oc/ze附.《/ 353 (2001): 231、 一些噻唑(WO 01021602)和丙酸衍生物(WO 02069994)
的双活性。
最后，不同的研究路线都集中在研制PPARa亚型的选择剂例如丙酸 (phenilpropionic acid)衍生物 (Nombra, M.等《/■ Med. C/ 亂46 (2003): 3581)或者三唑和三唑酮LY518674的那些选择剂(Xu, Y.等Med C&w. 46 (2003):5121)以作为血脂谱和身体脂肪组分失调相关疾病的潜在治疗。
US 2004/0176426描述了具有下式的化合物
<image>image see original document page 10</image>其中A2和A3可以是垸基、杂烷基、环垸基、杂环垸基、环烯基、 杂环烯基、芳基、杂芳基、芳基垸基、(杂芳基)烷基、芳基(杂烷基)或 (杂芳基)杂垸基。83选自-氢、-亚烷基-(:(0)113、 -C(0)R3、亚烷基 -C(0)N(R3R4)、 -C(0)N(R3R4)、亚垸基-S(0)nN(R3R4)、 S(0)nN(R3R4)、亚烷 基-N(R3R4)、亚烷基-OR3和-C(0)OR3(其中R3和R4可以是氢、烷基、杂 垸基、环烷基及其他)；X是C、 S、或N; p是0-2的整数。
US 2004/0176426中所述的化合物可用于调节法尼酯X受体(FXR)。 根据US 2004/0176426， FXR与视黄醇类受体(维甲类X受体)(RXP)在 一些细胞类型中形成杂二聚物，细胞中FXR活性数量的变化对由RXR或 其他与RXR相互作用的蛋白质如PPARy和PPARa所调节的各种生物过程 具有广泛的影响。
然而，US 2004/0176426所述的所有可能的体系的化合物中，没有提及 无环的磺酰胺衍生物或它们在饱食诱导、摄食控制、身体脂肪调节以及脂 质代谢调节中或者用于糖尿病和心血管疾病治疗或预防中的活性。
US 4,171,223描述了不可扩散的硫醚化合物，能够与一级芳族氨基彩
色显影剂物质的氧化产物反应以释放出可扩散的具有下式的卤化银显影抑 制剂化合物-
N-十二烷基-磺酰胺作为合成上述化合物的中间体公开在同样的文献中。
US 4,218,357描述了具有下式的化合物<formula>formula see original document page 11</formula>
其中R选自由C广C3。垸基、4-10个碳原子的环烷基、6-14个碳原子的 芳基和取代芳基、或C,-C3o垸氧基及其它组成的组中；R,和R2独立地选 自氢和由CVC3o烷基、4-10个碳原子的环垸基、6-14个碳原子的芳基和取 代芳基组成的组中。
US 4,218,357中所述的化合物是用作聚合物添加剂的增塑剂。具体来 说，US4，218，357公开了作为适合增塑剂添加剂的下列化合物<formula>formula see original document page 11</formula>虽然该试剂在上述一些疾病的治疗中具有良好的结果，但仍有必要继 续寻找具有治疗潜能、更好的药动力性、毒性更低的替代化合物。


图1:溶液中hPPARa与共活化剂(CoA)的单配体激发的相互作用
图。对大肠杆菌表达的共活化剂GST-CoA和全长的活体外转移(35s)标记的 人体PPARa，在其各自配体存在和不存在下进行GST下拉检测。单独的 GST(-)可用作对照。沉淀和洗涤后，样品通过15%的SDS-PAGE凝胶电泳， 并用富士 (Fuji) FLA3000阅读器确定相对输入量的沉淀NR百分数。显示 出了代表性的凝胶。柱形代表至少三次实验的平均值，条形表示标准偏差 (SD)。使用双尾配对Student t检验进行统计分析并根据载体(vehicle)计 算了 p值(承p〈 0.05 and **p< 0.01). (A)化合物1-5; (B)化合物6-9; (C)化 合物10-12。
图2: OEA和同型物的竞争作用对来自MCF-7细胞的提取物进行荧 光素酶指示剂基因试验，该细胞短暂地转染有包含PPRE的人体ACO三副 本的荧光素酶指示剂结构，(A)野生型的人体PPARa表达载体也如所示地被 共同转染。用溶剂(DMSO)和不同浓度(*10_8、 "0-7、 **10-6和**10-5 M) 的OEA，化合物2或者*10_7、 **10-6和**10-5 M的大麻素(AEA,用作阴 性对照)、7(*10-8、 *10-7、 **10-6和**10_5 M)和12(*10-7、 **10_6和 **10-5 M)处理细胞16小时。(相对载体，*p< 0.05, (**)p< 0.01，相对载体 且无ACO时，#p< 0.01)。 (B)野生型的人体PPARa表达以及胞质基因编 码的全长T1F2也如所示地被共同转染。用溶剂(DMSO)和1(HiMWY14643、 1 OEA和其同型物2、 7和12。相对不过量表达任何蛋白质的溶剂诱 导细胞测量了相对的荧光素酶活性。柱形表达至少三次实验的平均值，条 形表示SD。(对于载体，*p<0.01，对于载体且无T1F2时，#p<0.01)。
图3:作为进食抑制剂的OEA同型物的活性。在不同剂量下合成的不 同化合物的离子腹腔注射(i.p.)后30、 60、 120和240分钟时测量了食源 性动物中的食物摄入。这里我们示出了化合物2(A)、 7(B)、 12(C)、 19(D) 和20 (E)的结果。2是不活化PPARa但降低摄食行为的化合物；7是潜在
的摄食抑制剂和潜在的PPARoc活化剂，最后，12既不活化PPARa，也不 抑制食物摄入。结果是每组至少三次测定的平均值土 SEM 。相对载体， ANOVA， (*)p<0.05、 (**)p<0.01、 (***) p< 0.001 。
图4:用7 (N-十八烷基-7V，-丙基磺酰胺)对体重增加和血浆甘油三酯 的慢性治疗作用。当与处理过载体的正常小鼠相比，用N-十八烷基-W'-丙 基磺酰胺(propylsulfamide)的慢性治疗(8天，lmg/kg i.p.每天)降低了体重 (A)和血浆甘油三酯含量(B)。化合物7的亚慢性(ll天)给药(lmg/kgi.p.) 降低了肥胖的Zucker鼠的累积相对增重(C)(每天g/kg体重)。结果是每 组至少三次测定的平均值土SEM 。相对载体，ANOVA， (*)p<0.05 。

发明内容
本发明人已经发现了一种新的分子，令人吃惊地是它们能够诱导饱食 并控制摄入，改变身体肥胖并调节脂类新陈代谢且可用于制备治疗或防止 糖尿病和心血管的疾病的药物。
因此，根据第一方面，本发明提供了式(I)的无环磺酰胺衍生物<formula>formula see original document page 13</formula>
其中R,和112可相同或不同， 当Ri和R2不同时，
Rj选自由直链C12-C2Q烷基和含有1、 2、 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和CrCV烷基组成的组中； 或者
当和112相同时，
或4个双键的直链d2-C20
Rj和R2都选自由直链C14-C2。垸基和具有1、 2、 3或4个双键的直 链<:14-<:2()烯基组成的组中；
只要
当^为正十二垸基时，R2不是氢；且
当Ri和R2相同时，它们不是Cw烷基基团；和其药学上可接受的盐、
溶剂化物和水合物。
根据第二方面，本发明提供了用作药剂的上述式(I)的化合物。
根据第三方面，本发明提供了上述式(I)的化合物在制造饱食诱导和 摄入控制、身体脂肪调整和脂类新陈代谢调节以及治疗或预防糖尿病和心 血管疾病的药物上的用途或者提供了一种用于饱食诱导和摄入控制、身体 脂肪调整和脂类新陈代谢调节以及用于治疗或预防糖尿病和心血管疾病的 方法，包括向需要这种治疗的病人施用有效治疗量的式(I)的化合物。
根据第四方面，本发明提供了一种药物组合物，包含有式(I)的化合 物和一种和多种药物上可接受的赋形剂。
根据第五方面，本发明提供了一种式(I)的化合物用于减少皮下脂肪 的化妆品中的用途。
发明详述
式I的化合物
如上所述，本发明的第一方面涉及一种式(I)的无环磺酰胺衍生物，
Ri、
N N H H
其中Ri和112可相同或不同， 当&和R2不同时，
R2
Rj选自由直链C12-C2Q垸基和含有1、 2、 3或4个双键的直链d2-C20 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和CrC4垸基组成的组中； 或者
当&和112相同时，
Ri和R2都选自由直链C14-C2。烷基和具有l、 2、 3或4个双键的直 链C,4-C2。烯基组成的组中； 只要
当Ri为正十二烷基时，R2不是氢；且
当Ri和R2相同时，它们不是Qs烷基基团；和其药学上可接受的盐、 溶剂化物和水合物。
"烷基"意指由碳和氢原子组成的烃链基团，不包含不饱和键，通过单 键连接到分子的其余部分上。
术语"烯基，，意指其中具有一个、两个、三个或四个碳-碳双键的烃链基 团，其可通过单键连接到分子的其余部分上。烯基基团的双键可结合到或 不结合到另一不饱和基团上。
"C『C2o"意指以下包含12-20个碳原子(即12、 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19或20个碳原子)的基团。相似地，"C14-C2。"意指包含14-20个碳 原子(即14、 15、 16、 17、 18、 19或20个碳原子)的基团。"C16-C20，i 指包含16-20个碳原子(即16、 17、 18、 19或20个碳原子)的基团。"C广C4" 意指包含l-4个碳原子(即1、 2、 3或4个碳原子)的基团，且"CV，意指含 有"x"个碳原子的基团。
对本领域的技术人员显然易见的是，可能的并且能获得的各种变形和 结构依赖于选择为起始原料的化合物、存在的官能团的相对结构、存在或 不存在手性中心以及依赖于所用的反应的综合。本发明涵盖了所有这种变 型(对映异构体、非对映异构物或互变异构体)和可能性。
本发明也提供了式(I)的化合物与生物和药物上可接受的无机和有机
酸的盐，其非限制性实例是硫酸盐；氢卤化物盐；磷酸盐；低烷烃磺酸盐； 芳基磺酸盐；含有一个或多个双键、芳基核或其它官能团如羟基氨基或酮 的d-C20脂族单-、二-或三元酸的盐；其中芳基核可以或不可以用基团如 羟基、低垸氧基、氨基、 一或二低垸氨基磺酰胺基取代的芳香酸盐。本发 明的范围内也包括三级氮原子与低烷基卤化物或硫酸盐以及三级氮原子的 氧化衍生物如N-氧化物的季盐。在制备剂量组合物中，本领域的技术人员 将会选择药物上可接受的盐。
术语"药物上可接受的盐"意指任何的盐，当给药到受者时，该盐能够 (直接或间接地)提供本文所述的化合物。然而，可以明白，非药物上可 接受的盐也落在本发明的范围内，因为那些可用于制备药物上可接受的盐。 盐的制备可通过现有技术中己知的方法进行。
例如，本文所提供化合物的药物上可接受的盐可以是酸加成的盐、碱 加成的盐或金属盐，它们可以通过传统的化学方法由含有碱或酸的部分的 母化合物合成。通常，这种盐例如通过在水中或有机溶剂中或者在两者的 混合物中使自由酸或碱形式的这些化合物的与化学计量的适当碱或酸反应 而制成。通常，优选的非水介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。 酸加成盐的实例包括无机酸加成的盐，实例如氢氯化物、氢溴化物、氢碘 化物、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐，和有机酸加成的盐，实例如醋酸盐、马 来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、乙二酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸 盐、苦杏仁酸盐、甲烷磺酸盐和对甲苯磺酸盐。碱加成盐的实例包括无机 盐实例例如铵，和有机碱盐实例例如乙二胺、乙醇胺、N,N-二亚烷基乙醇 胺、三乙醇胺、葡萄糖胺和碱性氨基酸盐。金属盐的实例例如包括钠、钾、 钙、镁、铝和锂盐。
本发明也提供了式(I)化合物的溶剂化物。本发明的术语"溶剂化物" 可被理解为意指任何形式的本发明的式(I)的化合物，其具有通过非共价 键合连接到它上的另一分子(很可能是极性溶剂)。溶剂化物的实例包括水 合物和醇化物，例如甲醇化物。
根据优选的实施方案，当R,和R2不同时，R2是CVQ垸基。 根据优选的实施方案，当I^和R2不同时，R2是丙基。 根据优选的实施方案，当R,和R2不同时，R2是氢。 根据另一优选的实施方案，当R和R2不同时，&是直链Ci6-C20烷
基或含有l、 2、 3或4双键的直链Q6-C2o烯基。
根据另一优选的实施方案，当&和R2不同时，Ri的烯基基团具有1
个双键。
根据另一优选的实施方案，式(I)的化合物选自下列之一 N-(顺式-9-十八烯)磺酰胺；
N-十八烷基磺酰胺；
N-十六烷基磺酰胺
N-十四烷基磺酰胺；
N-(顺式-9-十A烯)-N'-丙基磺酰胺；
N-十八烷基-N'-丙基磺酰胺；
N-十六烷基-N'-丙基磺酰胺；
N-丙基-N'-十四烷基磺酰胺；
N,N'-二(9-顺式-十八烯)磺酰胺；
N-(顺式-9-顺式-12-十八碳二烯酰基)磺酰胺；
N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)磺酰胺；
N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)-N，-丙基磺酰胺；
N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-十八碳二烯酰基)N，-丙基磺酰胺；
N-(反式-9-十八烯)磺酰胺；和
N-(反式-9-十八烯)-N，-丙基磺酰胺；
和其药学上可接受的盐，溶剂化物和水合物。
式(I)化合物的合成
根据流程1中所述的反应序列进行式(P化合物的制备。根据所述的 方法(Mc Dermott, S.D. y Spillane， W. / /"A 16 (1984): 49)，
1
虽然改变反应条件来提供式q)的化合物，但流程i中所述的合成路线包 括有式(n)的磺酰胺与式(in)的相应单基取代酰胺的反应。
其中Ri具有前述的含义的式(IV)的N-垸基氨磺酰的衍生物，根据Atkins 和Burgess的反应过程(Atkins, G M. Jr.; Burgess, E. M. / J附.CTzew. Soc. 94 (1972): 6135)由式(III)的相应酰胺与根据Kloek和Leschinsky所描述的 方法(Kloek, J. A.; Leschinsky, K. L. J Og. C/zem. 41 (1976): 4028)所原位制 备的式(IV)的N-烷基氨磺酰而制成。
流程1
式(I)化合物的用途
根据第二方面，本发明提供了一种用于药物的式(I)的化合物。
<formula>formula see original document page 18</formula>
其中Ri和112可相同或不同，
当&和R2不同时，
Rj选自由直链C12-C2G垸基和含有1、 2、 3或4个双键的直链d2-C20 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和Q-C4烷基组成的组中； 或者
当和112相同时，
Rj和R2都选自由直链C14-C2Q烷基和具有1、 2、 3或4个双键的直
链C^C2。烯基组成的组中；
和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。
根据第三方面，本发明提供了上述式(I)的无环磺酰胺衍生物化合物 的用途，
cx 力
(i)
其中R^和R2可相同或不同， 当和R2不同时，
Rj选自由直链C12-C2。烷基和含有1、 2、 3或4个双键的直链Cu-C20 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和CrC4烷基组成的组中； 或者
当&和R2相同时，
Ri和R2都选自由直链C14-C2()烷基和具有1、 2、 3或4个双键的直
链Cw-C2o烯基组成的组中；
和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物；
用于制造饱食诱导和摄入控制、身体脂肪调整和脂类新陈代谢调节以 及用于治疗或预防糖尿病和心血管疾病。
根据一优选的实施方案，上述疾病或情况通过过氧化物酶增殖物激活
受体的a亚型来调节。
正如本说明书中所使用的，"PPARa配体"是一种结合到人体PPARa和 共活化分子上以促进正如下文GST结合实验中所述转录过程的化合物。
根据一优选的实施方案，上述疾病或情况选择由糖尿病和心血管疾病 组成的组中。
根据一优选的实施方案，式(I)的化合物可用于制造饱食诱导和摄入 控制、身体脂肪调整和脂类新陈代谢调节用的药物。
根据又一优选的实施方案，本发明涉及式(I)的化合物和其药学上可 接受的盐、溶剂化物和水合物在制造用于防止或治疗肥胖病的药物上的用 途。
虽然肥胖是一种处在严重疾病起源的医学状态，但本领域的技术人员 容易明白，式(I)的化合物也可用于因爱美的减肥。
根据一优选的实施方案，式(I)的化合物可用于制造降低脂肪代谢障 碍的药物。
对于本发明的目的来说，脂肪代谢障碍可理解为一种医学状态，特征 在于身体脂肪组织的反常或变差状态。
本发明也提供了一种用于饱食诱导和摄入控制、身体脂肪调整和脂类 新陈代谢调节以及用于治疗或预防糖尿病和心血管疾病的方法，包括向需 要这种治疗的病人服用有效治疗量的式(I)的化合物。<formula>formula see original document page 20</formula>
其中和112可相同或不同，
当和R2不同时，
Ri选自由直链C12-C2()烷基和含有1、 2、 3或4个双键的直链CirC20 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和CVC4垸基组成的组中； 或者
当和112相同时，
Ri和R2都选自由直链C14-C2Q垸基和具有l、 2、 3或4个双键的直
链<:14-<:2()烯基组成的组中；
和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。 根据另一种情况，本发明涉及一种药物组合物，其包含
a) 式(I)的化合物
R1YSYR2 (i)
其中和R2可相同或不同， 当R!和R2不同时，
&选自由直链C12-C2C烷基和含有1、 2、 3或4个双键的直链C12-C20 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和CVC4垸基组成的组中； 或者
当&和R2相同时，
&和R2都选自由直链C14-C2Q垸基和具有1、 2、 3或4个双键的直
链d4-C2o烯基组成的组中；和
b) —种或多种药物上可接受的赋形剂。
术语"赋形剂"意指添加有活性成分的一种稀释剂、辅料、载体或赋形 物。这种药物赋形剂可是无菌液体，例如水和油剂，包括来源于石油、动
物、植物或人造的那些，例如花生油、豆油、矿物油芝、麻油等等。水或 水溶液、盐溶液和含水葡萄糖和丙三醇溶液优选用作载体，特别是对可注
射溶液。适当的药物载体描述在E.W. Martin的"Remington's Pharmaceutical Sciences"中。
制造本发明药物组合物用药的理想药物形式所必须的赋形剂和辅料将 和其他因素一起取决于选定的给药药物形式。药物组合物给药的所述药物 形式将根据本领域的技术人员已知的常规方法加以制造。不同活性成分给 药方法、所用的赋形剂和用于制造它们的方法可在"Tratado de Faraiacia Gal6nica", C. Fauh' i Trillo， Luzdn 5, S.A. de Ediciones, 1993中找至!j。
本说明书上下文中的术语"预防或治疗"意指服用本发明的化合物或组 合物以保护遭受糖尿病或心血管疾病或处于这些疾病的风险中的病人的健 康。这样的术语也包括服用本发明的化合物或组合物以预防、改善或消除 一种或多种与糖尿病或心血管疾病相关的症状。
在治疗需要时，对于其向受体，例如哺乳动物如人的用药来说，本发 明的药物组合物可通过任何适当的途径服用(经由)，例如口腔(如口腔、 舌下动脉等)、肠胃外(例如皮下注射、肌肉注射、静脉注射，肌内注射等)、 阴道、直肠、鼻子、表皮、眼睛等。
本发明的药物组合物可以以不同的制品形式用药。非限制性实例是口 服用药的制品，即药片、胶囊、糖浆或悬浮液。
通常，本发明中使用的化合物的有效给药量将会取决于选定化合物的 相对药效、待治疗的紊乱的严重性、或者年龄、重量或用药模式。然而， 通常活性化合物一天服用一次或多次，例如每天1、 2、 3或4次，通常每 天的总剂量在0.1-500 mg/kg/天的范围内。
本发明中所用的化合物也可与其他药物一起施用以提供综合治疗。其 他的药物可同时或不同时地形成相同组合物的一部分或者被提供为施用的 单独的组成。
化妆品用途
式(I)的化合物的脂肪调节性能可用于与不合意的脂肪累积相关的化 妆品状态的化妆品治疗中。
因此，如上所述，本发明的第五方面涉及了式(I)化合物的用于降低 皮下脂肪的化妆品用途，
<formula>formula see original document page 23</formula>
其中R,和R2可相同或不同， 当和R2不同时，
Ri选自由直链C12-C2Q垸基和含有1、 2、 3或4个双键的直链Cu-C20 烯基组成的组中；且
R2选自由氢和CH^烷基组成的组中； 或者
当Ri和&相同时，
Ri和R2都选自由直链C14-C2。烷基和具有1、 2、 3或4个双键的直 链<:14-(:2()烯基组成的组中；
和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。
根据一优选的实施方案，式(I)的化合物可用于降低皮下脂肪富集。 针对本发明的目的，皮下脂肪富集可理解为皮下脂肪突出到真皮中，
产生起伏的皮肤-皮下脂肪连接的脂肪组织而引起的皮肤凹陷。
正如包含的操作实施例所例示的，本发明的化合物可通过通常的有机
化学进行制备。以下的实施例显示用来例示本发明的一些特殊化合物的合
成并举例说明它们的生物性能。根据前文，下面的实施例部分并不旨在以
任何方式限制本说明书中所定义的本发明的保护范围。
实施例
本说明书中，使用的符号和约定与国际体系和当代科技文献，例如药
物化学期刊(the Journal of Medicinal Chemistry)中使用的那些保持一致。 如果没有另外说明，起始材料购自商品供应商并无额外纯化地加以使用。 具体来说，在实施例和贯穿整个说明书，使用了下列縮写g(克)；mg(毫 克)；kg (千克)；吗(微克)；1或L (升);ml或mL (毫升)；^或(微升)。mmo1 (毫摩尔)；mol (摩尔)；mp (熔点)；MS (质谱)；IP+ (离子粉碎)；Anal.(元素 分析)；TEA (三乙胺)MeOH (甲醇)；THF (四氢呋喃)；EtOH (乙醇)；CDC13 (氘化氯仿)；二DMSO(二甲亚砜)；GST (凝胶硫转移酶)；PBS (磷酸盐缓 冲液)；TIF2(转录中间因子2)。如果没有另外说明，所有温度以。C (摄氏度) 给出。
实施例l N-(顺式-9-十八烯)磺酰胺(1)，也称为N-油烯基磺酰胺的制备 向20ml水中的0.20g磺酰胺(2.1mmo1)的搅拌溶液在回流下经30 分钟滴加10mlEtOH的0.1mlN-油烯基磺酰胺(2.1 mmol)。搅拌并回流反 应混合物6小时。然后蒸发溶剂，使用CH2Cl2:MeOH/NH39.4:0.6作为洗脱 剂在层析柱中纯化白色固体；得到0.52g白色固体，收率为72%; mp = 68-70 0C;
NMR (300 MHz, CDC13) : 5.32 (m, 2H); 4.59 (br s, 2H); 4.38 (br s, 1H); 3.09 (q, J = 7.0 Hz, 2H); 1.97 (m, 4H); 1.55 (m, 2H); 1.24 (m， 22H); 0.85 (t， J =6.7 Hz, 3H)。
13C NMR (75 MHz, CDC13) : 129.9; 129.7; 43.6; 31.8; 29.7-26.6; 27.1; 27.2; 22.6; 14.1.
MS (ES+) [M+H]+ 347 (100%). Anal. (C18H38N2S02， 346.57): C， H, N, S。
实施例2 N-十八烷基磺酰胺(2)的制备
将50 ml THF (50 mL)中的0.270 g(l.O mmol) N-十八烷基磺酰胺和
0.100 g (1.0 mmol)的磺酰胺搅拌并回流51h。蒸发溶剂并使用 CH2Cl2:MeOH/NH39:l作为洗脱剂在层析柱中纯化粗提物。获得0.06 g白色 固体。收率18%; mp= 105-107 。C;
JH NMR (400 MHz, DMSO-d6) : 6.39 (br s, 2H); 6.33 (br s, 1H); 2.82 (m, 2H);
1.42 (m, 2H); 1.21 (bm, 30H); 0.83 (t, J= 6.8 Hz, 3H).
13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) : 42.7; 31.4; 29.1; 26.5; 22.2; 14.1;
MS (ES+) [M+H]+ 349 (100%). Anal. (C18H40N2SO2， 348.64): C, H, N, S。
实施例3 N-十六烷基磺酰胺(3)的制备
根据前述实施例1中所述的方法，使用0.5 g(2.0mmol)N-十六烷基磺 酰胺和0.195 g (2.0 mmol)的磺酰胺作为起始试剂制备标题中的化合物。获 得了 0.087 g白色固体。收率为16%; mp 102-104 °C.
力國画R (500 MHz, DMSO-d6) S: 2.83 (c, 2H, |j| = 6.8 Hz C//2NHS02);
1.43 (t， 2H, I /| = 6.8 Hz , Ci/2-CH2NHS02); 1.23 (s, 20H, -Ci/2-); 0.85 (t, 3H, =6.8Hz, CH2-Ci/3)。
13C-NMR (125 MHz， DMSO-d6) S: 42.5 (CH2NH); 31.3 (CH2-CH2NH); 29.0-28.7 (-CH2-); 26.4 (CH2-CH2-CH2NH); 22.1 (CH2-CH3); 13.9 (CH2-CH3)。 Anal (C16H36N2S02) % theor. (% found): C: 59.95 (59.68); H: 11.32 (11.04); N: 8.74 (8.65); S: 10.00 (9.91)。
实施例4 N-十四烷基磺酰胺(4)的制备
根据前述实施例1中所述的方法，使用0.43 g (2.0 mmol) N-十四烷基 磺酰胺和0.2g (2.0 mmol)的磺酰胺作为起始试剂制备标题中的化合物。获 得了 0.37 g白色固体。收率63%; mp 99-101 °C.
^-NMR (300 MHz, DMSO-d6) S: 2.83(c， 2H, | /| = 6.7 Hz C/f2NHS02); 1.42 (t, 2H， U| = 6.7 Hz , C 2-CH2NHS02); 1.22 (s， 22H, -C仏-);0.83 (t, 3H, Ul =7.0Hz， CH2-C//3)。
"C-NMR (75 MHz, DMSO-d6) 3: 42.5 (CH2NH); 31.4 (CH2-CH2NH);
29.0- 28.7 (-CH2-); 26.4 (CH2-CH2-CH2NH); 22.1 (CH2-CH3); 13.9 (CH2-CH3)。 Anal (C14H32N2S02) %理论值(％ found): C: 57.49 (57.25); H: 11.03 (10.97); N: 9.58 (9.47); S: 10.96 (11.21)。
实施例5 N-十二烷基磺酰胺(5)的制备 根据前述实施例1中所述的方法制备标题化合物。
iH-丽R (500 MHz, DMSO誦d6): 2.80 (c, 2H, Ul = 6.8 Hz CH2NHS02); 1.41 (t, 2H, U| = 6.7 Hz , CH2-CH2NHS02); 1.22 (s, 20H, -CH2-); 0.83 (t, 3H, U| =6.8Hz， CH2-CH3)。
13C-NMR(125 MHz, DMSO-d6) : 42.6 (CH2NH); 31.3 (CH2-CH2NH);
29.1- 28.7 (-CH2-); 26.4 (CH2-CH2-CH2NH); 22.1 (CH2-CH3); 13.9 (CH2-CH3)。 Anal (C12H28N2S02) %理论值(%发现)C: 54.51 (54.80); H: 10.67 (10.57); N: 10.59 (10.80); S: 12.13 (11.94)。
实施例6 N-(顺式-9-十八烯)-N'-丙基磺酰胺，也称为N-油烯基-N'-丙基磺 酰胺(6)的制备
将0.20 g (1.2 mmol)新蒸馏的N-丙基氨磺酰氯在氮气环境中于0 °C滴 加到胺和TEA的无水甲苯溶液中。在室温下搅拌反应混合物，并过滤白色 固体(TEA'HC1)，蒸干溶剂并在硅胶用CH2Cl2:MeOH/NH39:l通过柱层析 纯化粗提物，提供白色固体的所需产品(0.27g)。收率为58%; mp 82-83°C.。 &丽R (400 MHz， CDC13) S: 5.30 (m, 2H， C//=C//); 4.25 (br s, 2H, NH); 2.97 (m, 4H, C//2NHS02NHC /2); 1.97 (m, 4H， C//2CH=CHC /2); 1.54 (sextet， 2H, /= 7.3 Hz, C//2-CH3 (Pr)); 1.51 (m, 2H, C//2CH2NHS02); 1.21 (bm, 22H, -Ci/2-); 0.91 (t, 3H, / = 7.3 Hz, CH2-Ciy3 (Pr)); 0.84 (t， 3H, / = 6.6 Hz,
CH2-CZ/3(油烯)).
13C NMR (100 MHz, CDC13) 5: 129.9, 129.7 (C//=C^); 44.9 (NHS02NHCH2
(Pr)); 43.2 (油烯-CH2NHS02); 31.8 (CH2-CH2CH3); 29.8-28.9, 26.7 (-CH2-); 27.1， (CH2-CH=CH-CH2); 22.8 (CH2-CH3 (Pr)); 22.6 (CH2-CH3 (oleyl)); 14.1 (CH3(油烯));11.2 (CH3(Pr》.Anal (C21H44N2S02) %理论值(发现的百分比 %): C: 64.86 (65.06); H: 11.32 (11.60); N: 7.20 (7.34); S: 8.23 (8.33)。
实施例7 N-十八烷基-N'-丙基磺酰胺(7)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。起始试剂为0.54 g (2.0 mmol) N-十八烷基胺和0.31g (2.0 mmol)的N-丙基氨磺酰氯。获得了 0.06 g白色固体。收率31%;mpllO-112°C。
& NMR (400 MHz, CDC13) :3.01 (m， 4H); 1.53 (m, 4H); 1.24 (bm, 30H); 0.94 (t， 《/= 7.6 Hz， 3H); 0.86 (t， 6.8 Hz, 3H)
13C NMR (100 MHz, CDC13) : 45.0; 43.3; 31.9; 29.7-29.2， 26.7; 22.9; 22.6; 14.1; 11.2; MS (ES+) [M+H]+ 391 (100%). Anal. (C21H46N2S02, 3卯.67): C,
H, N, S。
实施例8 N-十六烷基-N，-丙基磺酰胺(8)的制备和获得
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。起始试剂为0.15 g(0.6mmol)N-十六烷基胺和0.10g (0.6 mmol)的N-丙基氨磺酰氯。获得了 0.15 g白色固体。收率70%;mp 108-110。C。
工H NMR (300 MHz, CDC13) 5: 4.06 (bm, 2H, Nif); 3.0 (m， 4H， Ci/2NHS02);
I. 55 (m， 4H, C/f2CH2NHS02); 1.23 (bm, 26H, -Ci/2-); 0.93 (t, 3H, Ul = 7.3 Hz, Ci73(Pr)); 0.86 (t, 3H, |/| = 6.6 Hz， C//3(十六烷基))。
13C NMR (75 MHz, CDC13) S: 44.9 (CH2NH (Pr)); 43.2 (CH2NHS02 (十六垸 基))；31.9 (CH2CH2CH3); 29.7-29.2， 26.7 (-CH2-); 22.9 (CH2-CH3 (Pr)); 22.6 (CH2CH3(十六烷基)；14.1 (CH3(十六烷基))；11.2 (CH2-CH3 (Pr)). Anal (C19H42N2S02) %理论值(发现的百分比％): C: 62.93 (62.71); H: 11.67 (11.90); N: 7.73 (7.49); S: 8.84 (9.12)。
实施例9 N-丙基-N'-十四烷基磺酰胺(9)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。起始试剂为 0.10g(0.5mmol)N-十四烷基胺和0.076g (0.5 mmol)的N-丙基氨磺酰氯。获 得了 0.092 g白色固体。收率55%;mp 105-107°C。
& NMR (300 MHz， CDC13) S: 4.08 (bm， 2H, N//); 3.0 (m, 4H, C/72NHS02);
1.55 (m, 4H， C /2CH2NHS02); 1.23 (bm, 22H， 0.93 (t, 3H， Ul = 7.3
Hz， Cf/3(Pr)); 0.85 (t, 3H, | /| = 6.4 Hz， C//3 (十四烷基))。
13C NMR (75 MHz, CDC13) 5: 44.9 (CH2NH (Pr)); 43.2 (CH2NHS02 (十四垸
基))；31.9 (CH2CH2CH3); 29.6-29.2, 26.7 (-CH2-); 22.9 (CH2-CH3 (Pr)); 22.7
(012013(十四垸基)；14.1 (CH3(十四烷基))；11.2 (CH2-CH3(Pr))。
Anal (C17H38N2S02) %理论值(发现的百分比％): C: 61.03 (60.87); H: 11.45
(11.68); N: 8.37 (8.09); S: 9.58 (9.86)。
实施例10 N- (l-金刚烷基)-N'-丙基磺酰胺(10)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。 & NMR (400 MHz, CDC13) 5: 4.05 (br s, 2H, N//); 3.02 (t， 2H, J = 7.1 Hz, C//2NHS02); 2.10 (m， 3H, //-3 (金刚烷基))；1.94 (m, 6H， H-2 (金刚烷基)); 1.66 (m, 6H,(金刚烷基))；1.60 (sextet, 2H, / = 7.3 Hz， / = 7.1 Hz, Cif2CH3 (Pr)); 0.96 (t， 3H, /= 7.3 Hz， C7/3 (Pr)).
13C NMR (100 MHz, CDC13) 5: 54.3 (C-l (金刚烷基))；45.2 (CH2NHS02 (Pr)); 42.7 (C-2 (金刚烷基))；35.9 (C-4 (金刚垸基))；29.4 (C-3 (金刚烷基))；22.7 (CH2-CH3 (Pr)); 11.3 (CH2-CH3 (Pr)).
Anal (C13H24N2S02) %理论值(发现的百分比％): C: 57.32 (57.11); H: 8.88 (8.70); N: 10.28 (9.98); S: 11.77 (11.85)。
实施例11 N- (l-金刚烷基)-N'-丙基磺酰胺(11)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。
'H NMR (400 MHz, CDC13) S: 4.18 (m, 1H, NH); 4.04 (d， 1H， |J| = 9.6 Hz, NH); 3.02 (c， 2H, |H| = 7.1 Hz, Ci/2NHS02); 2.94 (dc, 1H, U|CH3 = 6.8 Hz, |J|NH = 9.6 Hz, H(l)); 2.00 (ma， 3H, H(3)); 1.68 (d, 3H, |H| = 12.0 Hz, //(4ec)); 1.59 (d, 6H， |J| = 12.0 Hz， H(2)ec y H(4)ax); 1.57 (sextet, 2H, |J| = 7.3 Hz, CH2-CH3(Pr)); 1.42 (d, 3H, |J| = 12.0 Hz, H(2)ax); 1.17 (d, 3H， |J| = 6.7 Hz, CH3 (金刚烷基))；0.95 (t， 3H， |J|= 7.3 Hz, CH2-CH3 (Pr)). 13C NMR (100 MHz, CDCl3) Delta: 58.7 (C(l)(金刚烷基))；45.0 (NHCH2S02); 38.3 (C(4)(金刚烷基))；36.9 (C(2)(金刚垸基))；28.2 (C(3)(金刚垸基))；22.9 (CHrCH3 (Pr)); 11.3 (CH2-CH3 (Pr)); 15.4 (CH3(金刚烷基)).
Anal (C15H28N2S02)％理论值(发现的百分比％): C: 60.00 (60.18); H: 9.33 (9.61); N: 9.33 (9.36); S: 10.66 (10.91)。
实施例12 N-丙基-N'-金刚烷基磺酰胺(12)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。 !H NMR (400 MHz, CDC13) 5: 4.82 (d , 1H， U| = 7.6 Hz, NH (金刚烷基))； 4.47 (t, 1H， |J| = 6.1 Hz， NH (Pr)); 3.48 (d, 1H, Ul = 7.6 Hz, H(2)(金刚烷 基))；2.99 (c, 2H, Ul = 6.1 Hz， |J| = 7.1 Hz, CH2NHS02); 1.94 (ma, 2H， H(l) y H(3)(金刚垸基))；1.83 (m, 2H, H(4)ax y H(lO)ax(金刚烷基));1.81 (m, 2H， H(5) y H(7)(金刚烷基))；1.85-1.74 (m, 6H, H(8) y H(9)(金刚垸基));1.69 (2H， m, H(6)); 1.58 (m, 2H, H(4)ec y H(10)ec (金刚烷基))；1.57 (sextet, 2H, | J| = 7.3 Hz, |J| =7.1 Hz, CH2-CH3 (Pr)); 0.94 (t， 3H， |J| = 7.3 Hz， CH2-CH3 (Pr)).
13C NMR (100 MHz, CDC13) S: 57.7 (C(2)(金刚烷基))；44.9 (CH2NHS02); 37.3 (C(6), C(8) and C(9)(金刚烷基))；32.8 (C(3) y C(l)(金刚垸基))；31.3 (C(4) y C(IO)(金刚烷基))；26.9 (C(5) y C(7)(金刚垸基))；22.8 (CH2-CH3 (Pr)); 11.2 (CH2-CH3 (Pr))。
Anal (C13H24N2S02) %理论值(发现的百分比％): C: 57.32 (57.60); H: 8.88 (9.02); N: 10.28 (10.44); S: 11.77 (12.01)。
实施例13 N,N'-二(9-顺式-十八烯)磺酰胺，也称为N,N'-二油烯基磺酰胺 (13)的制备
在室温下将0.68ml的N-油胺(1.4mmol)滴加到2ml水中的0.20 g iV-丙基磺酰胺(1.4mmol)中。将五色混合反应物搅拌回流48小时，显示出橙 色。然后蒸发溶剂，使用CH2Cl2作为洗脱剂(eluyent)在层析柱中纯化粗 提物；获得0.12g白色固体(化合物l)和0.26 g白色固体(化合物13)。收 率(化合物13): 22%; mp 85-88°C。
iH-NMR (400 MHz， CDC13) S: 5.32 (m， 4H, Ci/=C//); 4.25 (bs, 2H, N//); 3.00 (m, 8H, Ci/2NHS02); 1.99 (m, 8H， C//2-CH=CH-C//2); 1.53 (sextet, /= 7,3 Hz, 4H， C^2CH3); 1.26 (bm, 44H); 0.87 (t, 3H, /= 7.3 Hz， C刷。 13C-NMR (100 MHz, CDC13) S: 129.9, 129.7 (CH-CH」；43.2 (CH2NHS02); 31.9 (CH2-CH2CH3); 29.7, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 27.2, 26.7 (-CH2); 22.6 (CH2-CH3); 14.0 (CH3)。
实施例14 N-(顺式-9-顺式-12-十八碳二烯酰基)磺酰胺(14)的制备
根据前述实施例1中所述的方法，使用0.044 g (0.16 mmol) N-(顺式-9-顺式-12-十八碳二烯酰基)胺和0.016g (0.16 mmol)的磺酰胺制备标题中的 化合物。获得了 0.007 g白色固体。收率12%;mp 55-57°C。 ^曙NMR (400 MHz, CDC13) S: 5.33 (m, 4H, C^=C//); 4.59 (bs, 2H， N//2); 4.36 (bs, 1H, N//); 3.10 (m, 2H, C//2NHS02); 2.76 (m, 2H, C=CH-C//2-CH=C); 2.03 (m, 4H， CH=CH-C//2CH2); 1.56 (m, 2H, Cf/2-CH2NHS02); 1.29 (m, 16H, -C//2-); 0.87 (t, 3H, | /| = 7.0 Hz, CH2-C//3)。
13C-NMR (100 MHz, CDC13，) 5: 130.2, 130.0, 128.1， 127.9 (CH=CH); 43.6 (CH2NH); 31.5 (CH2-CH2CH3); 29.1 (CH2-CH2NHS02); 27.2
(CH=CH-CH2CH2); 29.6-26.6 (-CH2-); 25.6 (C=CH-CH2-CH=C); 22.5 (CH2-CH3); 14.0 (CH2-CH3)。
实施例15 N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-dcosatetmenvl)磺酰胺(15) 的制备
根据前述实施例1中所述的方法，使用0.10 g (0.3 mmol)N-(顺式-5-顺 式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)胺和0.03g (0.3 mmol)的磺酰胺制备 标题中的化合物。收率14n/。；mp油。
^-NMR (400 MHz, CDC13) S: 5.37 (m, 8H, Ci/=Ci/); 4.60 (bs, 2H, N//2); 4.37 (bs， 1H, N//); 3.13 (m， 2H， C7f2NHS02); 2.81 (m, 6H, C=CH-Ci^2-CH=C); 2.07 (m， 4H, CH=CH-C//2CH2); 1.60 (m, 2H， C//2-CH2NHS02); 1.43 (m, 2H, Ci/2-CH2CH2NHS02); 1.30 (m, 6H, -Ci/r); 0.89 (t, 3H, U| = 6.8 Hz， CH2-CH3)。
13C-NMR(100 MHz, CDC13) 5: 130.7， 129.4, 128.6， 128.5, 128.2， 128.0, 127.8, 127.7 (CH=CH); 43.7 (CH2NH); 31.8 (CH2-CH2CH3); 29.8, 29.3 (CH2-CH2CH2CH3,CH2-CH2NHS02);27.4(CH=CH-CH2CH2); 26.8 (CH2-CH2CH2NHS02); 25.6 (C=CH-CH2-CH=C); 22.8 (CH2-CH3); 14.3 (CH2-CH3)。
实施例16 N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)-N'-丙基磺酰 胺(16)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。起始试剂为 0.35g (1.2mmol) N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)胺和 0.19g (1.2 mmol)的N-丙基氨磺酰氯。获得了 0.09 g黄色油。收率18%;m.p.油。
iH-NMR (400 MHz, CDC13) S: 5.34 (m， 8H, C//=C//); 4.25 (bs, 1H, N/Z((Pr)); 4.22 (bs, 1H, NH (amquidonyl)); 3.02 (m, 2H, C//2NHS02); 2.81 (m, 6H，
C=CH-Cf/2-CH=C); 2.07 (m, 4H, CH=CH-C/72CH2); 1.54 (m, 2H, Cf/2CH2NHS02); 1.57 (sextet, 2H, Ul = 7.3 Hz， Cif2CH3 (Pr)); 1.42 (m, 2H, C f2-CH2CH2NHS02); 1.29 (ma， 6H, -Ci/2-); 0.95 (t， 3H, Ul = 7.3 Hz, (Pr)); 0.89 (t, 3H, IJI = 7.0 Hz, Ci/3 (araquidonyl》。
13C-NMR(100MHz, CDC13) 5: 130.5, 129.4, 128.6， 128.5, 128.3, 128.1, 127.8, 127.5 (CH=CH); 44.9 (CH2NH (Pr)); 43.1 (CH2NHS02 (araquidonyl)); 31.5 (CH2-CH2CH3); 27.1 (CH=CH-CH2CH2); 29.3 (CH2-CH2CH2CH3); 26.8 (CH2-CH2CH2NH S02); 25.6 (OCH-CH2-CH=C); 22.8 (CH2-CH3 (Pr)); 22.5 (CH2-CH3 (araquidonyl)); 14.3 (CH2-CH3 (araquidonyl)); 11.2 (CH2-CH3 (Pr)).
实施例17 N-(顺式-9-顺式-12-十八碳二烯酰基)-N'-丙基磺酰胺(17)的制
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。起始试剂为 0.09g (0.35mmol) N-(顺式-9-顺式-12-十八碳二烯酰基)胺和0.05g (0.35 mmol)的N-丙基氨磺酰氯。获得了 0.02g白色固体。收率17%;mp 70-75°C。 iH-NMR (400 MHz, CDC13) S: 5.34 (m, 4H, C//=C^); 4.27 (sa， 1H， (Pr)); 4.25 (bs, 1H,丽(linoleyl)); 3.01 (m, 4H， C#2NHS02); 2.77 (m， 2H， OCH-C^2-CH=C); 2.05 (m， 4H, CH=CH-Ci72CH2); 1.60 (m, 4H, C 2-CH2NH); 1.29 (m， 16H, -C^r); 0.95 (t, 3H, Ul = 7,3 Hz, C巧(Pr)); 0.87 (t, 3H, Ul =6,7Hz, Ci^(亚油烯基)).
13C-NMR (100 MHz, CDC13) S: 130.2, 130.0， 128,0, 127.9 (CH=CH); 44.9 (S02NHCH2 (Pr)); 43.2 (亚油烯基-CH2NH); 31.5 (CH2-CH2CH3);) 29.1 (CH2-CH2NHS02); 27.2 (CH=CH-CH2CH2); 29.6-26.6 (-CH2-); 25.6 (C=CH-CH2-CH=C); 22.8 (CH2-CH3 (Pr)); 22.5 (CH2-CH3 (亚油烯基))；14.0 (CH3(亚油烯基))；11.2 (CH3(Pr))。
实施例18 N-(反式-9-十八烯)胺，也称为N-反油胺的制备
在氮气环境中于10°C向Et20中的反式-9-硬脂酸(lmol)搅拌溶液中 滴加LiAlH4 (6 mol)的Et20悬浮液。在10。C持续搅拌30分钟，然后将混 合物回流30分钟，之后使反应混合物冷却到室温。小心加入冰和H2S04 的混合物。分离有机相并用Et20提取，用NaHC03溶液和饱和NaCl溶液 清洗合成的有机相，并用MgS04干燥。经硅藻土过滤混合物并蒸发溶剂以 获得反式-9-十八-l-醇。
该醇溶解在吡啶中并在氮气环境下于0°C加入甲磺酰氯(1.5mo1)。搅 拌混合物4小时，然后倒入冷水中并用乙酸乙酯浸取。用1N的H2S04和 NaHC03饱和溶液清洗有机相，并经MgS04干燥，蒸发掉溶剂。
获得的甲磺酸盐衍生物溶解于无水二甲基甲酰胺中，并在室温加入 NaN3(5mol)。将反应混合物加热21小时，然后使其冷却到室温并且过滤。 用100ml的冷水冲洗过滤物。用乙酸乙酯浸取混合物并经MgS04干燥，蒸 发掉溶剂。使用己垸乙酸乙酯(6:1)作为洗脱液通过层析柱纯化粗提产物。
将得到的叠氮化合物溶解在Et20中，并在室温滴加LiAffiU(3mol)的 Et20溶液。反应混合物回流4小时，然后加入具有痕量水的Et20。过滤悬 浮液，用6M的HC1酸化，然后用10。/。的NaOH在Et20存在下碱化。合成 的有机相经MgS04干燥，蒸发掉溶剂，并用CH2Cl2:MeOH/NH3 (9:1)通过 层析柱纯化产物。收率Yield 44%; mp 28-30°C。
^-NMR (400 MHz, CDC13) S: 5.37 (m， 2H, H(9) y H(10)); 2.94 (m, 2H, H(l)); 1.95 (m, 4H， H(8) y H(ll)); 1.72 (m, 2H,H(2)); 1.26 (m, 22H, -Ci/2-); 0.88 (t, 3H, W =6.4Hz, CH2-C^3)0
13C-NMR (100 MHz， CDC13) 5: 130.5, 130.1 (C(9) y C(10)); 40.1 (C(l)); 32.6 y 32.5 (C(8) y C(ll)); 31.8 (C(16)); 29.7, 29.6, 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0, 28.9 (-CHr); 26.5 (C(3)); 22.7 (CH2-CH3); 14.1 (CH2-CH3). EM (ES+): [M+H]+ 268 (100%); (C20H37N， 267.49)。
实施例19 N-(反式-9-十八烯)磺酰胺(19)的制备
根据前述实施例1中所述的方法，使用0.112 g (1.1 mmol) N-反式-9-十八烯胺和0.312g (1.1 mmol)的磺酰胺作为起始试剂制备标题中的化合 物。获得了 0.240 g白色固体。收率63%; mp 88-90 。C。 !H-NMR (400 MHz, CDC13) S: 5.39 (m, 2H， H(9) y H(10)); 4.53 (ma, 2H, NH2); 4.29 (ma, 1H, NH); 3.14 (m, 2H, H(l)); 2.03 (m, 4H, H(8) y H(ll)); 1.53 (m, 2H, H(2)); 1.28 (m, 22H， -C//2-); 0.88 (t， 3H， | /| - 6.4 Hz, CH2-Ci/3)。 13C-NMR (100 MHz, CDC13) 130.5, 130.2 (C(9) y C(IO)); 43.6 (C(l)); 32.6 y 32.5 (C(8) y C(ll)); 31.8 (C(16)); 29.6， 29.5, 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0 (-CH2-); 26.6 (C(3)); 22.7 (CH2-CH3); 14.1 (CH2-CH3)。
EM (ES+): [M+H]+ 347 (100%).Anal.计算值((1811381^2802, 346.57): C: 62.38; H: 11.05; N: 8.08; S: 9.25; Found C: 62.38; H: 11.35; N: 8.18; S: 8.95。
实施例20 N-(反式-9-十八烯)-N'-丙基磺酰胺(20)的制备
根据前述实施例6中所述的方法制备标题中的化合物。起始试剂为 0.102 g (0.38 mmol)的N-反式-9-十八烯胺和0.021g (038 mmol)的N-丙基 磺酰氯和0.078 ml的TEA (0.57 mmol)。获得0.07g白色固体。收率48% ;mp 91-930C。
iH-NMR (400 MHz, CDC13) 5: 5.38 (m， 2H, H(9) y H(10)); 4.06 (bm， 2H, NH); 3.00 (m, 2H, H(l) y H(l，))； 1.95 (m, 4H， H(8) y H(ll)); 1.58 (sextet, 2H, H(2，)); 1.55 (m， 2H， H(2)); 1.26 (m, 22H, -C仏誦);0.95 (t, 3H, |/| = 7.3 Hz, CHrCi/3 (Pr)); 0.87 (t, 3H， W = 6.4 Hz， CH2-C//3).
13C-NMR (100 MHz, CDC13) S: 130.5, 130.2 (C(9) y C(IO)); 44.9 (C(l，))； 43.2 (C(l)); 32.6 y 32.5 (C(8) y C(ll)); 31.9 (C(16)); 29.7, 29.6， 29.5， 29.4, 29.3, 29.2, 29.1, 29.0 (-CH2-); 26.7 (C(3)); 22.9 (CHrCH3 (Pr)); 22.7 (CH2-CH3); 14.1 (CH2-CH3); 11.2 (CH3(Pr))。
EM (ES+): [M+H]+ 389 (100%). Anal.计算值(<:21!144^12802, 388.65): C: 64.86; H: 11.32; N: 7.20; S: 8.23. Found C: 64.58; H: 11.61; N: 7.50; S: 8.35。
生物试验
PPARa蛋白质与TIF2和GST融合蛋白质的活体外交互作用试验(GST下 拉试验)
通过GST沉淀法(也称为GST下拉法)是一种用于测定和评估蛋白质 间存在的物理相互作用的体外方法，可用于本发明以证实PPARa转录因子 和TIF2共激活剂的配体诱导相互作用(Macias-Gonzalez， M等J C&m. 277 (2002): 18501)。从PBS中4B琼脂糖-凝胶化树脂与单独的GST 或者与50%的GST-T1F2646.926中离心分离除去上层清液，并将封闭液加入到 沉淀相中以避免与PBS和牛血清蛋白(J/^/cW的非特异性结合，再次离心 分离。之后，将免疫沉淀缓冲液(50%)加入到沉淀相中。从琼脂糖-凝胶 树脂与GST或GST-TIF2的免疫沉淀缓冲液中取出50|iL，然后经30 °C时 20分钟和室温时40分钟加入20pL的预先培育有可能配体的35[S]标记 的PPAR-a;8pL的100。/。DMSO中的相同配体和22 的免疫沉淀缓冲液。 孵育后，不会导致与通过凝胶结合到琼脂糖上的GST- 11 2646_926融合的标 记蛋白质在以最大速度离心分离后用免疫沉淀缓冲液加以清洗。
一旦除去上层清液，带有结合到琼脂糖上的标记络合物的沉淀相用蛋 白质载体缓冲液再次悬浮(体积比1: 1)，并在约95。C搅拌5分钟，以最 大速度重新离心分离5分钟后，将琼脂糖树脂与带有35[S] PPAR-a的 GST-TIF2646.926相分离。然后，将不同样品的上层清液加入到凝胶中，并 在IOOV进行SDS-PAGE电泳约1小时。最后，使用富士 (Fuji)图像测量 软件用荧光i^/7/^L4^W阅读器定量凝胶并使之可视化。
如图1中所示，本发明的化合物显示出了 PPARa活性。
细胞转染和荧光素酶指示基因试验(RGA)
乳腺癌人体细胞MCF-7引种到6孔培养皿(105细胞/1111)中并培育在 无酚红的杜伯(Dulbecco)改良的依格(Eagle)培养液，供给5%的用碳处理过 的胎儿牛血清(FBS) (Macias-Gonzalez, M et al.細五M. 17 (2003): 2028)。
具有DNA胞质基因的脂质体通过在室温下，总体积100ixL下培育l吗 的带有荧光素酶的指示剂胞质基因和具有野型人体PPAR-a表达载体以及 10吗的N-l-(2,3-二油氧)-丙基-N,N,N-三甲基(来自Roche诊断学的 DOTAP) 15分钟而获得。用900 nL无酚红的DMEM稀释后，将脂质体加 入细胞中。细胞转染后4-5小时，加入补充有500fiL的15%碳处理过的FBS 的无酚红DMEM，这时PPAR-a配体(OEA, AEA和磺酰胺衍生物)或对照 溶剂(dmso)的不同浓度为l(T8、 l(T7、 10'6和1(T5m。
在用指示基因裂解缓冲液(Roche诊断学)开始刺激后，将细胞裂解 16小时，根据制造介绍(Roche诊断学)进行恒定发光信号的指示基因试 验或RGA荧光素酶试验。相对于蛋白质浓度标准化荧光素酶的活性并作为 配体刺激细胞的荧光素酶活性相对对照溶剂的比值计算诱导因子(Vaisanen， S. et al.她/尸/ 画腳/. 62 (2002):788)。
丙基取代的加入对PPARR产生更大的转录活性(图2A)。
WY14643包含来作为阳性对照，因为该低血脂苯氧芳酸类选择性的活 化PPARR 。在辅调节因子(coregulator )数量下，诱导PPRE (道1)上的PPARR 的基准水平几乎比OEA、 WY14643，和化合物7 (道2、 3和5)提高了6倍。 而化合物2和12的应用并没有提供诱导(道4和6)。 T1F2的过量表达导致基 准水平(道l )的显著增加和随后激动剂激励数值的极大提高(道7、 8和10)。 然而，化合物2和12的应用并不提供显著高的诱导(道9和11)。是无序。
食物摄入研究快速治疗
对于习惯该操作的饥饿24小时的雄性Wistar鼠，分析了不同化合物对喂 食行为的影响(Navarro， M et al. 1996 iVewrac/je附.67 (1996):1982. Rodriguez de Fonseca， F.等胸脏414 (2001):209. Fu, J等淑脏，425
(2003):90)。为此，在每次试验前48小时，老鼠放入单笼中，除去基底材料 (沙子或锯屑)并将很少的食物容器放入笼子4小时。该起始阶段以后，动 物挨饿24小时，总是可自由获得水源。在24小时忍耐后，确立不同的治疗 组(每组8-10只)并相应每个试验序列在它们的载体溶液中以lmL/kgi.p服 用不同剂量的磺酰胺，以及一个仅用载体治疗的对照组
1) 载体溶液中0.03mg/kg剂量的磺酰胺治疗的小组。
2) 用载体中3mg/kg剂量的磺酰胺治疗的小组。
3) 用载体中3 mg/kg剂量的相应磺酰胺的小组。
4) 用5。/。的tween80的生理血清载体治疗的对照组。
服用后15分钟，放入具有已知食物量(通常30-40g)和一瓶清水的容 器。在它们放入后的30、 60、 120和240分钟称量这些容器，以便控制每 个动物摄入的食物。
结果如图3所示。使用对饥饿动物的i.p.注射进行延伸的剂量-反应曲 线。这些氨磺酰衍生物不显示成瘾性能(cannabimeticproperties)且并不影 响脂肪酸氨基水解酶的活性(数据未示出)的事实使其成为研究它们对食 物摄入的影响并将它们与OEA的影响进行比较的合适选择对象。人们已经 发现，该天然存在的脂类通过活化核受体PPARR降低了食物的摄入。然而， 这并不总是正确。例如，化合物N-十八烷基磺酰胺(2)明显降低了食物摄 入，但并不活化PPAR受体调节的转录。
食品摄入研究慢性治疗
使用习惯该操作雌性Wistar鼠，进行化合物慢性治疗
为此，开始将鼠放入保留有基底材料(沙子或锯屑)的单笼中。在进
行试验的喂养条件适应阶段以后，根据所接受的治疗确立了三个不同的组 (每组N二8只)
1) 实施例6治疗的组，其载体溶液中有lmg/kg的剂量。
2) 用5。/。的tween80载体的生理血清治疗的小组。
3)用生理血清治疗的对照组。
试验的总持续时间为8天。有两次i.p.的不同溶液的日常用药(注射 体积1 mL/kg)，两次注射之间间隔12小时。每天在8:00用药之前，对每 只动物称重。在试验的全部时间中，每只动物的单重和血清的生化参数要 进行日常控制。
结果如图4所示。正如对PPAR受体激动剂所期望的，N-十八烷基-N'-丙基磺酰胺(7)在8天治疗后降低了体重(图4A)并显著降低了血桨甘 油三酯(图4B)。为了进一步开发该化合物的抗肥胖性能，我们使用了另 外的肥胖动物模型。对遗传肥胖的Zucker (fa/fa)鼠观察到了相同的效果， 每天服用化合物7 (lmg/kg, i.p.) ll天降低了体重增加(图4C)和食物摄 入。该新化合物的效用要大于PPARR天然配体的效用，因为已经描述了 OEA的低血脂效能仅在剂量大于5mg/kg时才存在，而发现N-十八垸基-N， 丙基磺酰胺(7)在低剂量(lmg/kg)时是有效的。
权利要求
1. 式(I)的无环磺酰胺衍生物，其中R1和R2可相同或不同，当R1和R2不同时，R1选自由直链C12-C20烷基和含有1、2、3或4个双键的直链C12-C20烯基组成的组中；且R2选自由氢和C1-C4烷基组成的组中；或者当R1和R2相同时，R1和R2都选自由直链C14-C20烷基和具有1、2、3或4个双键的直链C14-C20烯基组成的组中；只要当R1为正十二烷基时，R2不是氢；且当R1和R2相同时，它们不是C18烷基基团；和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。
2. 根据权利要求l所述的无环磺酰胺衍生物，其特征在于，当Ri和R2不 同时，112是CrC4烷基。
3. 根据权利要求2所述的无环磺酰胺衍生物，其特征在于，R2是丙基。
4. 根据权利要求l所述的无环磺酰胺衍生物，其特征在于，R2是氢。
5. 根据权利要求l、 2、 3或4任一项所述的无环磺酰胺衍生物，其特征 在于，当R^和R2不同时，R^是直链C16-C2G烷基和含有l、 2、 3或4 个双键的直链C^C2c烯基。
6. 根据前述任一项权利要求所述的无环磺酰胺衍生物，其特征在于，当 Ri和R2不同时，R,的烯基基团具有l个双键。
7. 根据权利要求l所述的无环磺酰胺衍生物，具有下列化学名称 N-(顺式-9-十八烯)磺酰胺；N-十八垸基磺酰胺； N-十六烷基磺酰胺N-十四垸基磺酰胺；N-(顺式-9-十八烯)-N'-丙基磺酰胺； N-十八烷基-N'-丙基磺酰胺； N-十六烷基-N'-丙基磺酰胺； N-丙基-N'-十四烷基磺酰胺；N,N'-二(9-顺式-十八烯)磺酰胺；N-(顺式-9-顺式-12-十八碳二烯酰基)磺酰胺；N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)磺酰胺；N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-eicosatetraenyl)-N，-丙基磺酰胺；N-(顺式-5-顺式-8-顺式-ll-顺式-14-十八碳二烯酰基)N'-丙基磺酰胺；N-(反式-9-十八烯)磺酰胺；和 N-(反式-9-十八烯)-N，-丙基磺酰胺； 和其药物上可接受的盐、溶剂化物和水合物。
8. —种用于药物的式(I)的化合物 <formula>formula see original document page 4</formula>(I)其中和112可相同或不同， 当&和R2不同时，Rj选自由直链C12-C2()烷基和含有l、2、3或4个双键的直链d2-C20 烯基组成的组中；且R2选自由氢和CVCV烷基组成的组中； 或者当和R2相同时，Rj和R2都选自由直链C14-C2Q垸基和具有1、 2、 3或4个双键的 直链<:14-<:2()烯基组成的组中；和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。
9. 一种式(I)的无环磺酰胺衍生物化合物的用途，<formula>formula see original document page 4</formula>(i)其中和！12可相同或不同， 当I^和R2不同时，Ri选自由直链Cl2-C2Q垸基和含有l、2、3或4个双键的直链d2-C20 烯基组成的组中；且R2选自由氢和CVC4垸基组成的组中； 或者当R！和R2相同时，Rj和R2都选自由直链C14-C2()烷基和具有1、 2、 3或4个双键的 直链C14-C2()烯基组成的组中；和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。用于制造饱食诱导和摄入控制、身体脂肪调整和脂类新陈代谢调节 的药物以及用于制造治疗或预防糖尿病和心血管疾病的药物。
10. 根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述疾病或情况通过过 氧化物酶增殖物激活受体的a亚型来调解。
11. 根据权利要求9或IO所述的用途，用于制造用于预防或治疗选自由 糖尿病和心血管疾病组成的组中的疾病或情况的药物。
12. 根据权利要求9所述的用途，用于制造饱食诱导和摄入控制、身体 脂肪调整和脂类新陈代谢调节用的药物。
13. 根据权利要求12所述的用途，用于制造预防或治疗肥胖的药物。
14. 根据权利要求9所述的用途，用于制造降低脂肪代谢障碍的药物。
15. 药物组合物，其包含 a)式(I)的化合物其中R,和112可相同或不同， 当R,和112不同时，Ri选自由直链C12-C2G烷基和含有l、2、3或4个双键的直链d2-C20 烯基组成的组中；且R2选自由氢和CrC4烷基组成的组中； 或者<formula>formula see original document page 5</formula>当和R2相同时，Ri和R2都选自由直链C14-C2q烷基和具有l、 2、 3或4个双键的直链CwC2()烯基组成的组中；和b)—种或多种药物上可接受的赋形剂。
16.—种用于饱食诱导和摄入控制、身体脂肪调整和脂类新陈代谢调节以 及用于治疗或预防糖尿病和心血管疾病的方法，包括向需要这种治疗的 病人施用有效治疗量的式(I)的化合物。其中&和&可相同或不同， 当和R2不同时，Rj选自由直链C12-C2Q烷基和含有1、2、3或4个双键的直链<:12-<:20 烯基组成的组中；且R2选自由氢和Q-Q烷基组成的组中；或者当Ri和112相同时，Ri和R2都选自由直链C14-C2()烷基和具有l、 2、 3或4个双键的 直链(314-<:2()烯基组成的组中；和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。
17.用于降低皮下脂肪的式(I)化合物的化妆品用途， 其中R^和112可相同或不同， 当I^和112不同时，Rj选自由直链C12-C2Q垸基和含有1、2、3或4个双键的直链(:12-(:20 烯基组成的组中；且R2选自由氢和d-C4垸基组成的组中；或者当和112相同时，&和R2都选自由直链C14-C2Q烷基和具有l、 2、 3或4个双键的 直链C14-C2。烯基组成的组中；和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物。 18.根据权利要求17的化妆品用途，用于降低皮下脂肪富集。
全文摘要
本发明涉及一种式(I)的无环磺酰胺衍生物，当其中R₁和R₂可相同或不同，当R₁和R₂不同时，R₁选自由直链C₁₂-C₂₀烷基和含有1、2、3或4个双键的直链C₁₂-C₂₀烯基组成的组中；且R₂是氢原子或C₁-C₄烷基；或者当R₁和R₂相同时，R₁和R₂为直链C₁₄-C₂₀烷基或具有1、2、3或4个双键的直链C₁₄-C₂₀烯基和其药学上可接受的盐、溶剂化物和水合物；可用于制造饱食诱导和摄入控制、身体脂肪调整和脂类新陈代谢调节的药物以及用于制造治疗或预防糖尿病和心血管疾病的药物。无环磺酰胺衍生物也可用于化妆品用途。
文档编号A61K31/16GK101395130SQ200780007195
公开日2009年3月25日 申请日期2007年1月26日 优先权日2006年1月27日
发明者卡罗琳娜·卡诺拉莫斯, 哈维尔·帕冯莫龙, 曼努埃尔·马西亚斯冈萨雷斯, 胡安·安东尼奥·派斯普罗斯珀, 费尔南多·安东尼奥·罗得瑞格雷德冯塞卡, 马里亚斯·皮拉·戈雅-拉萨 申请人:西班牙高等科研理事会;艾玛拜爱斯基金会高等生物技术和健康研究地中海研究所