专利名称：：重组人血管内皮抑制素在制药中的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及生物制品
技术领域：
，具体涉及重组人血管内皮抑制素的制药用途，该药物可用于子宫内膜异位症的治疗。
背景技术：
：正常的子宫内膜覆盖于子宫体腔面，如因某种因素使子宫内膜在身体其他部位生长，即可成为子宫内膜异位症。子宫内膜异位症是一种具有侵袭性的妇科常见病，可侵入包绕盆腔的腹膜、悬吊子宫的韧带、子宫的近邻一膀胱、直肠，以及大网膜、阑尾、小肠、腹壁切口，远及肝脏、胆嚢、肾脏、肺脏、胸腔、四肢肌肉及骨骼等脏器，甚至有发生在前庭大腺内的异位病灶，有时输卵管壁亦可以被累及。近年来该病的发病率具有明显上升的趋势。子宫内膜异位症临床表现有通经、慢性盆腔痛、原发或继发不孕、月经失调、性交痛、肠功能改变及泌尿系统症状等。子宫内膜异位症不孕发生率高达30%~40%,给妇女的身心健康带来较大伤害。人血管内皮抑制素(endostatin)是胶原XVIII羧基端的一段分子量大小为20kDa的酶切产物，具有抑制血管内皮细胞增殖、迁移，和体内血管生成的活性，是目前已知最强的内源性血管形成抑制因子。重组人血管内皮抑制素是利用DNA重组工程技术，以原核或真核表达载体，将人血管内皮抑制素基因经克隆、表达和纯化得到的有血管生成抑制活性形式的蛋白质。中国发明专利(专利公开号为CN1324818A,公开日为2001年12月5日，发明名称为"生产内皮抑制素的方法")提供了一种改良的，以更高的产率和更简单的纯化工艺生产重组人内皮抑制素的方法。该发明利用DNA重组工程技术，以大肠杆菌表达系统，以简单的方法和较低的成本大批量生产N末端带有(Met)GlyGlyXaaHisHisHisHisHis附加氨基酸序列的人血管内皮抑制素(其中Xaa代表中性氨基酸或不存在)，不仅保留了endostatin的完全的生物学活性，而且没有产生因加入附加N端序列所致的体内免疫性。上述附加氨基酸序列不仅提高了内皮抑制素结构基因的转录和翻译起始效率，有利于重组蛋白的纯化，而且附加氨基酸序列的结构也增加了重组蛋白的稳定性。激素疗法和手术是现有技术用于治疗子宫内膜异位症的两种主要治疗方式。使用激素的副反应较多，如毛发增多、声音变粗、水肺、体重增加等，常常导致中途停药，影响疗效，从而限制了这些药物的临床应用。手术治疗疗程短，尤其对重症者、纤维化多、粘连紧密、药物不易奏效的病例比较适用。但即使有限的外科治疗也可导致生育率显著下降，而且多达40%的患者在五年内还需再;欠手术，单用手术不能期望能治愈该疾病。
发明内容子宫内膜异位症是育龄期妇女的常见病和多发病，虽为良性，但其发生、发展却与胂瘤类似，存在明显的新生血管依赖性。有研究证实，子宫内膜异位在腹腔内生成，必须由新生血管提供足够的血供，患者腹腔液中血管生成因子的活性也明显增高，用腹腔镜观察发现典型的异位内膜病灶周围有新生的毛细血管围绕。这些证据提示我们，新生血管的生长不仅是子宫内膜异位症的一个重要病理表现，也可能在发病过程中起着重要作用。从这个机制上考虑，如果能用某些治疗手段特异性地抑制异位病灶新生血管的增殖，则可能为治疗子宫内膜异位症带来新的突破。为了克服子宫内膜异位症传统疗法副反应大、复发率高的缺陷，本发明提供了重组人血管内皮抑制素的一种制药用途，具体是使用重组人血管内皮抑制素制备治疗子宫内膜异位症的药物的制药用途，该药物具有特异性强、无毒、无耐药性的优点。本发明的技术解决方案涉及重组人血管内皮抑制素在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。本文中所述重组人血管内皮抑制素保留了endostatin的完全的生物学活性，可运用基因工程手段获得，通过将人的血管内皮抑制素基因或将改构的人血管内皮抑制素基因构建到大肠杆菌(￡.CoH)或毕赤酵母(Piciiiapa^oris)表达系统中，经过发酵、分离、纯化等手,殳得到。本发明中优选的重组人血管内皮抑制素是在人血管内皮抑制素编码氨基酸序列的起始氨基酸Met后依次添加0-4个任意氨基酸和2-8个组氨酸序列。其制备方法同中国发明专利(专利公开号为CN1324818A，公开日为2001年12月5日，发明名称为"生产内皮抑制素的方法")。上述重组人血管内皮抑制素的起始氨基酸Met可能被切除，原因是在表达宿主中蛋白翻译后加工过程中可能被删除。本发明优选的重组人血管内皮抑制素的氨基酸序列如SEQIDN0:1NO:2相同，该序列构成的蛋白质的制备方法和上述公开专利的制备实施例相同。上述治疗子宫内膜异位症的药物的制剂可以是注射液或冻干制剂。所述述药物的活性组分可以是重组人血管内皮抑制素、PEG修饰的重组人血管内皮抑制素或重组人血管内皮抑制素孩i球。所述PEG的分子量是5000-30000,PEG通过共价键(如琥珀酰亚氨基或巯基)与重组人血管内皮抑制素相连。所述重组人血管内皮抑制素微球是通过基质材料与重组人血管内皮抑制素混合制备而成，其基质材料可以是聚乳酸羟基乙酸嵌段共聚物(PLGA),聚乙醇酸(PLA)等。上述治疗子宫内膜异位症的药物中还含有保护剂和pH值调节剂。所述保护剂选自多元醇、糖类、氨基酸、表面活性剂，人血白蛋白、EDTA和NaCl。所述药物的pH值范围是4.0-8.5。本发明中所述治疗子宫内膜异位症的药物可与手术或激素类药物联合应用。本发明还公开了一种治疗子宫内膜异位症的重组人血管内皮抑制素注射液，其特征在于它是由重组人血管内皮抑制素和药用辅料配制而成按每毫升注射液计含有重组人血管内皮抑制素lmg~10mg、甘露醇5mg~80mg，pH调节剂调节pH值为4.0~8.5。本发明的实施例中还公开了重组人血管内皮抑制素冻干制剂的制备工艺，该工艺制得的冻干制剂产品稳定性好，能够长期保存。冻干制剂使用时需要溶于注射用水中，使用量根据病变程度酌情使用。本发明适用于各种原因引起的子宫内膜异位症的治疗，治疗剂量可根据病情酌情加减，一般采用病变局部注射或静脉注射的方法应用。为了更好的说明本发明，下面结合药物实验、动物实验以及临床实验说明其在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的用途。在下文的实验例以及制备实施例中所使用的重组人血管内皮抑制素具有SEQIDN0:1所示的氨基酸序列。如无特殊说明，下文中所涉及的实验用材料均可通过商业途径获得。1、子宫内膜异位症鸡胚绒毛尿嚢膜模型实验将子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织(lmmxlmmxlmm)接种于8天胎龄的鸡胚绒毛尿嚢膜上的相对无血管区，建立子宫内膜异位症鸡胚绒毛尿嚢膜模型，分设接种组、接种治疗组(重组人血管内皮抑制素)和空白组，前两组各20枚。接种24h后，以无菌明胶海绵为载体，接种组每只给予生理盐水20ja1/d，接种治疗组每只每天给予重组人血管内皮抑制素5|ag/20)al，空白组另设空白载体组和单纯空白组，各10枚，不接种子宫内膜组织，空白载体组以无菌明胶海绵为载体，给予生理盐水20|Lil/d,单纯空白组则在开窗后即予无菌贴膜封口，用以排除胚蛋开窗后污染、操作技术等非处理因素对实验结果的干扰。接种72h后加入固定液固定15min，剪下鸡胚绒毛尿嚢膜，平铺于滤纸并摄片。显孩i镜下计数载体盘周围5mm范围的血管分支点数。部分鸡胚绒毛尿嚢膜用10%曱醛固定，石蜡包埋，切片，HE染色，.光镜观察。结果接种组鸡胚绒毛尿嚢膜血管生成反应明显增强，血管数目显著高于对照组；接种治疗组血管数目显著低于接种组(见表1);接种治疗组病灶在光镜下可见明显坏死，重组人血管内皮抑制素能明显抑制子宫内膜异位病灶形成。表1血管内皮抑制素对子宫内膜异位病灶血管生成的抑制作用分组__血管分支点数4妄种组2035.2±5.14'空白载体组1021.6±3.89"单纯空白组1018.6±2.76^妄种治疗组_^_19.4±3.65_*P<0.01,4妻种组和空白载体组、单纯空白组及接种治疗组相比寿交；**P>0.05,空白载体组和单纯空白组相比较。结论子宫内膜异位症在位子宫内膜能明显促进鸡胚绒毛尿嚢膜的血管生成，重组人血管内皮抑制素能显著抑制子宫内膜异位病灶的血管形成，并抑制子宫内膜的生长，说明抗血管途径是治疗子宫内膜异位症的有效策略之一。2、子宫内膜异位症鼠模型实验取子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织，减成l2mn^大小，每15小块加200nlPBS配成组织悬液。选取雌性重度复合性免疫缺陷病(severecombinedimmtmodefieiencydisease,SCID)小鼠50支，6~8周龄,体重2025g，随机分成5组(见表2),SPF(specificpathogenfree)条件饲养。小鼠用乙醚麻醉后，消毒腹部，取脐下正中穿刺点，用16号注射器针头将组织悬液接种于小鼠皮下。接种后第2天，于小鼠腿部肌肉注射O.02ml(lmg/ml)苯曱酸雌二醇，以促进种植内膜的生长。接种后第3周开始给予用药(见表2),连续注射2周。每隔2天以游标卡尺测量皮下病灶的长和宽，根据公式体积V(mm3)=0.52_x长x宽H十算病灶体积。末次注射24小时后，全部处死实验动物，异位病灶称重后多聚甲醛固定。病灶标本常规石蜡包埋，切片，苏木精-伊红(HE)染色，光镜观察腺体、间质和上皮的变化；采用免疫组化检测微血管密度，微血管密度(microvasculardensity,MVD)的i十算参照文献。结果用药前各组异位病灶生长情况基本相同，用药后治疗组病灶体积增长緩慢，并且用药后期病灶体积有缩小趋势。治疗组病灶重量及体积低于对照组(P〈0.05),见表2。标本HE染色，光镜下可见治疗组腺体萎缩，结构不完整，间质伴有不同程度的坏死。表2血管内皮抑制素对小鼠异位病灶重量与体积的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注与生理盐水对照组比，*P<0.05血管内皮细胞标记抗原CD34免疫组化染色(TjaimaW,VanMarckE,WeylerJ,etal.Quantificationandprognosticrelevanceofangiogenicparametersininvasivecervicalcancer.BrJCancer,1998,78(2):170~174.)定位于血管内皮细胞，呈棕黄色，微血管有的形成管腔，有的仅为单个内皮细胞或内皮细胞簇。接种4周异位病灶MVD(14.76/个/HPF(高倍视野))比1周MVD(4.23个/HPF)显著增加(P<0.05)。对照组MVD为14.76±3.22个/HPF,治疗组MVD为5.34±1.86个/HPF，差异有统计学意义(P<0.05)。结论重组人血管内皮抑制素具有抑制子宫内膜异位症病灶生长和血管生成的作用。上述药物试验及动物实验研究表明子宫内膜异位症在位子宫内膜能明显促进鸡胚绒毛尿嚢膜的血管生成，重组人血管内皮抑制素能显著抑制子宫内膜异位病灶的血管形成，并抑制子宫内膜的生长，病灶在光镜下可见明显坏死；重组人血管内皮抑制素能抑制小鼠子宫内膜异位症病灶生长和血管生成，光镜下可见治疗组腺体萎缩，结构不完整，间质伴有不同程度的坏死。以下通过临床疗效观察来进一步阐述本发明药物的有益效果。病例一女，28岁，已婚。结婚2年半同居未孕，痛经，经前半月乳房胀痛、拒按，体温曲线呈单相，提示不排卵。妇检、B超等检查，诊断为子宫内膜异位症，右侧卵巢巧克力嚢肿，证属胞宫瘀阻而不孕。使用重组人血管内皮抑制素注射液，每天一次，每次7.5mg重组人血管内皮抑制素，连续使用14天后，痛经明显减轻，乳房胀痛程度减轻，时间缩短为4天，停经36天，尿妊娠试验阳性，诊断为早孕，后生产一男婴。病例二女，43岁，已婚。痛经，月经紊乱，血暗红，淋漓不尽，确诊为子宫内膜异位症。使用重组人血管内皮抑制素注射液，每天一次，每次7.5mg重组人血管内皮抑制素，连续使用14天后，宫血停止，腹痛消失。用重组人血管内皮抑制素注射液治疗的297例子宫内膜异位症的临床疗效情况统计如下病例选择子宫内膜异位症患者297例，年龄18-45岁，平均34岁，病程最短l年，最长18年，已婚255例，已婚不孕102例，异位部位后穹窿性包块121例，子宫骶韧带15例，主韧带12例，一侧及双侧附件嚢性包块18例，符合中国中西医结合研究会妇产科专业委员会第三届学术会议修定的子宫内膜异位症的诊断标准。静脉滴注本品，治愈96例，治愈率32.3%,其中手术后用本品，治愈率83.3%;显效142例，有效55例，有效率98.7°/;无效4例。无毒副作用或其他不良反应发生，表明该药在临床使用安全有效，特别是手术后用药，治愈率高。本发明的有益效果是1)挖掘了重组人血管内皮抑制素的新的适应症的治疗用途，开拓了一个新的应用领域。2)本发明的重组人血管内皮抑制素特异抑制异位病灶新生血管的增殖，安全无毒，无耐药性，预示着有很好的应用前景。3)本发明的重组人血管内皮抑制素联合手术或其它药物治疗的效果显著，治愈率高。在手术后使用重组人血管内皮抑制素可使残存的病灶萎缩、消退、有效控制子宫内膜异位症的复发。具体实施例方式下面的实施例可以使本专业技术人员更全面的理解本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例1配制含有重组人血管内皮抑制素的注射液，使其每毫升含有血管内皮抑制素5mg、甘露醇40mg,加入浓度为40mM醋酸钠调节pH值为5.5。过滤除菌，无菌灌装，每支3ml。用法与用量每天一支，注入300500ml生理盐水或葡萄糖注射液中，静脉滴注3~4个小时。实施例2使用30mMpH5.5土0.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制151.5ml浓度为9.9mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入20°/。甘露醇60ml及20y。蔗糖溶液7.5ml，补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩沖液2.98ml,加入注射水至300ml。经O.22lim微孔滤膜除菌过滤，分装于预灌封注射器中，于4'C保存。实施例3:使用30mMpH5.5±0.5左右的醋酸一醋酸钠緩沖体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制90.9ml浓度为9.9mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入20%甘露醇60ml，补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠缓冲液4.20ml，加入注射水至300ml。经0.22Hm微孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-40°C，保持3-4小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-20。C，保持8小时，继续加热升高温度至25°C,保持6小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。实施例4:使用30mMpH5.5±0.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制151.5ml浓度为9.9mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入20%甘露醇60ml及20%蔗糖溶液15ml,补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲液2.98ml,加入注射水至300ml。经0.22jam微孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-40°C,保持4-5小时,抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-25。C,保持10小时，继续加热升高温度至30°C,保持4小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。实施例5:使用30mMpH5.5±0.5左右的醋酸一醋酸钠缓冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制97.8ml浓度为30.61mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入20%甘露醇60ml及20%_^糖溶液60ml,补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲液4.04ml,加入注射水至300ml。经0.22jum微孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-45°C,保持6小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-30°C，保持6小时，再加热升高温度至-25。C,保持6小时，继续加热升高温度至25。C,保持8小时，至真空度变化不大时真空压塞后取出，轧盖。实施例6:使用30mMpH5.5±0.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制147ml浓度为30.61mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入20%甘露醇60ml、20%蔗糖溶液60ml及20。/。海藻糖溶液30ml，补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲液3.06ml,加入注射水至300ml。经0.22nm孩i孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-45。C,保持2-4小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-3(TC,保持12小时，继续加热升高温度至3(TC,保持6小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。实施例7:使用10mMpH6.0±0.5左右的柠檬酸-柠檬酸钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制30ml浓度为9.9mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入2°/。甘氨酸15ml、吐温-800.I5ml,补加1.0MpH6.5左右的柠檬酸-柠檬酸钠緩冲液2.70ml，加入注射水至300ml。经0.22laiM鼓孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-4(TC,保持2-4小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-3(TC，保持8小时，继续加热升高温度至30。C,保持8小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。.实施例8:使用10mMpH7.0±0.5左右的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制73.5ml浓度为30.61mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入2%EDTA30ml、20%甘露醇溶液30ml及20%蔗糖溶液7.5ml，补加1.5MpH7.0±0.5左右的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠緩冲液2.26ml,加入注射水至300ml。经0.22jam微孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至_45°C，保持8小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-30°C,保持12小时，继续加热升高温度至25°C，保持10小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。实施例9:使用30mMpH5.5±0.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制15ml浓度为9.9mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入10°/谷氨酸15ml及10y。苏氨酸15ml,补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲液5.7ml,加入注射水至300ml。经0.22jum微孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-4(TC,保持4-5小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-25。C，保持10小时，继续加热升高温度至30。C，保持4小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。实施例10:^f吏用30mMpH5.5±0.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲体系对纯化后的重组人血管内皮抑制素蛋白溶液超滤透析配制151.5ml浓度为9.9mg/ml的重组人血管内皮抑制素溶液，加入20%人血白蛋白溶液30ml，补加1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲液2.98ml,加入注射水至300ml。经0.22|im微孔滤膜除菌过滤，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品温度下降至-4(TC,保持4-5小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至一15°C,保持10小时，继续加热升高温度至20。C，保持10小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。实施例lh称取重组人血管内皮抑制素微球(PLGA包合)30g，内包合重组人血管内皮抑制素3g,加入20%甘露醇60ml,20。/。蔗糖溶液15ml加入1.5MpH5.5左右的醋酸一醋酸钠緩冲液6.Oml，加入注射水至300ml，分装于西林瓶中，加丁基胶塞，药液置于冻干箱内，制品溫度下降至-40°C,保持4-5小时，抽真空，隔板加热，使制品温度升高至-25°C,保持IO小时，继续加热升高温度至3(TC,保持4小时，至真空度变化不大时，真空压塞后取出，轧盖。序列表<110>山东先声麦得津生物制药有限公司<120>重组人血管内皮抑制素在制药中的应用<130>MP071322<160>1<170>Patentlnversion3.3<210>1<211>192<212>PRT<213>Artificial<220><223>重组人血管内皮抑制素<400>1MetGlyGlySerHisHisHisHisHisHisSerHisArgAspPheGin151015ProValLeuHisLeuValAlaIxuAsnSerProIxuSerGlyGlyMet202530ArgGlylieArgGlyAlaAspPheGinCysPheGinGinAlaArgAla354045ValGlyLeuAlaGlyThrPheArgAlaPhelxuSerSerArgLeuGin505560AspLeuTyrSerlieValArgArgAlaAspArgAlaAlaValProlie65707580ValAsnLeuLysAspGluLeuLeuPheProSerTrpGluAlaLeuPhe859095SerGlySerGluGlyProLeuLysProGlyAlaArgliePheSerPhe100105110AspGlyLysAspValLeuArgHisProThrTrpProGinLysSerVal115120125TrpHisGlySerAspProAsnGlyArgArglxuThrGluSerTyrCys130135140GluThrTrpArgThrGluAlaProSerAlaThrGlyGinAlaSerSer145150155160LeuLeuGlyGlyArgLeuLeuGlyGinSerAlaAlaSerCysHisHis165170175AlaTyrlieValLeuCyslieGluAsnSerPheMetThrAlaSerLys180185190权利要求1、重组人血管内皮抑制素在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。2、权利要求l所述的应用，其特征在于所述重组人血管内皮抑制素是在人血管内皮抑制素编码氨基酸序列的起始氨基酸Met后依次添加0-4个任意氨基酸和2-8个组氨酸序列。3、—又利要求2所述的应用，其特征在于所述重组人血管内皮抑制素的起始氨基酸Met可以被切除。4、权利要求2所述的应用，其特征在于所述重组人血管内皮抑制素的氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。5、权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于所述治疗子宫内膜异位症的药物的制剂是注射液或冻干制剂。6、权利要求5所述的应用，其特征在于所述药物的活性组分是重组人血管内皮抑制素、PEG修饰的重组人血管内皮抑制素或重组人血管内皮抑制素微球。7、权利要求6所述的应用，其特征在于所述PEG的分子量是5000-30000，PEG通过共^K定与重组人血管内皮抑制素相连。8、权利要求6所述的应用，其特征在于所述重组人血管内皮抑制素微球是通过基质材料与重组人血管内皮抑制素混合制备而成。9、权利要求5所述的应用，其特征在于所述药物中还含有保护剂和pH值调节剂。10、权利要求9所述的应用，其特征在于所述保护剂选自多元醇、糖类、氨基酸、表面活性剂，人血白蛋白、EDTA和NaCl。11、权利要求9所述的应用，其特征在于所述药物的pH值范围是4.0-8.5。12、权利要求1所述的应用，其特征是所述治疗子宫内膜异位症的药物可与手术或激素类药物耳关合应用。全文摘要本发明涉及重组人血管内皮抑制素在制药中的应用，具体公开了重组人血管内皮抑制素在制备治疗子宫内膜异位症的药物中的应用。重组人血管内皮抑制素能够特异抑制异位病灶新生血管的增殖，安全无毒，无耐药性，联合手术或其它药物治疗的效果显著，治愈率高，具有很好的应用前景。文档编号A61K38/17GK101219207SQ20081000606公开日2008年7月16日申请日期2008年2月1日优先权日2008年2月1日发明者武刘,静姜,鹏朱,罗兴洪申请人:山东先声麦得津生物制药有限公司