专利名称：：一类新型的铂(Ⅱ)配合物及其抗肿瘤活性的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一类以3-氮杂-1，l-环丁二酸根及其衍生物为配体的新型钼(II)配合物及其制备方法，以及所述铂(n)配合物中一些典型化合物的体外抗肿瘤活性。二-技术背景二顺铂是全球广泛应用的抗肿瘤药物之一，但是由于在临床应用中存在着一些缺陷，例如较严重的毒副作用、抗肿瘤谱窄、水溶性较差和交叉耐药性等，因而促使人们设计和研究新的具有更高活性和低毒性的铂类抗癌药物。最近十几年来，基于对铂抗肿瘤药物耐药机理的深入研究，人们合成了大量的新型铂类配合物，如含有生物活性基团的钼(n)配合物，具有空间位阻的铂(n)配合物，含硫原子配位的铂(n)配合物，多核铂(n)配合物和具有口服活性的钼(iv)类配合物等。这些具有新型结构的铂类化合物突破了顺铂类经典构效关系的框架，为合成新的铂类抗肿瘤药物拓展了渠道。由于可能的抗肿瘤机理不同于经典的顺铂类药物，对具有新型结构的抗肿瘤铂化合物的研究可望得到高效、低毒、水溶性好、选择性高、与顺铂无交叉耐药的候选药物。三.
发明内容本发明以兼具水溶性和脂溶性的3-氮杂-l,l-环丁二酸根及其衍生物作为配体与金属铂(II)离子配位，设计与合成了一系列具有新型结构的铂(II)配合物，目的在于使其满足抗肿瘤药物所具有的低毒、水溶性好和有效的抗肿瘤活性，用于治疗人体肿瘤。本发明披露了一类具有新型结构的铂(n)配合物，其特征是以3-氮杂-i,i-环丁二酸根及其衍生物为配体，二价金属铂离子与3-氮杂-l，l-环丁二酸根配体中的叔胺氮原子和其中一个羧酸根中的氧原子配位成键，这类铂(ii)配合物的结构用式a)表示，，其中R!和R2可以相同或不相同，分别是氢原子、C!-8链状垸基或C3-6环状垸基，或通过Cw垸基链连接起来构成的链状二胺，或通过C3-6环状烷基连接起来构成的1,2-位环状二胺；当R!和R2通过Cw垸基链连接起来构成有立体异构的链状二胺时，这些立体异构体可以是光学异构体的左旋体、右旋体或混旋体；当R4和R2通过C^环状垸基连接起来构成有立体异构的1，2-位环状二胺时，这些立体异构体可以是几何异构的顺式、反式或顺反混合物，也可以是光学异构体的左旋体、右旋体或混旋体；R3可以是氢原子、烷基、环状烷基、未取代的芳香基或取代的芳香基；当R3含有取代的芳香基时，取代基可以在任意位置，可以为单个或多个取代基团。作为进一步的说明当式(1)中R！和R2同时为氢原子时，式(1)所示的配合物可由式(la)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(la)其中，R3同式(l)所定义；当式(l)中I^为氢原子或Ci-8链状垸基，R2为C3-6环状垸基时，式(l)所示的配合物可由式(lb)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式(lb)其中，Ri为氢原子或C^链状烷基，m=2-5，R3同式(l)所定义；当式(l)中R,和R2通过CM烷基链连接起来构成链状二胺时，式(l)所示的配合物可由式(lc)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中，n=2-4，R3同式(l)所定义；当式(l)中R!和R2通过C3-6环状烷基连接起来构成1,2-位环状二胺时，式(l)所示的配合物可由式(ld)表示，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(ld)其中，p=l-4，R3同式(l)所定义。本发明的另一个目的是提供式(i)所示的铂(n)配合物的制备方法。在这些铀(n)配合物的合成中，它们首先是由二价铂的四卤合铂酸盐与相应的胺(氨)配位作用得到含胺(氨)配位和卤素离子配位的铂(II)配合物，由式(2)表示，'<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(2)Hal其中，Hal代表C1—、Br-或r卤素离子，R！和R2同式(l)中对R！和R2的定义；然后在避光条件下，于水溶液中通过银离子除去式(2)中的卤素离子，再与式(3)所示的3-氮杂-1,1-环丁二酸或其衍生物的碱金属盐反应，生成式(l)所示结构的配合物；或者在避光条件下，于水溶液中通过式(4)所示的3-氮杂-l，l-环丁二酸或其衍生物的银盐除去式(2)中的卤素离子，反应生成式(1)所示结构的配合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>式(4)如Na+、K+等;R3同式(l)所定义；式(3)式(3)中，M为一价的碱金属阳离子，式(4)中，R3同式(l)所定义。本发明的铂(II)配合物除使用红外光谱、核磁氢谱、质谱和元素分析证实外，一些典型化合物的结构还经X-射线单晶衍射技术确定。相关化合物的分子结构见说明书附图1和图2。本发明还有一个目的是公开式(1)所示铂(II)配合物中一些典型化合物对人体肺癌细胞A549、人体肝癌细胞Bel7402和人体乳腺癌细胞MCF-7的体外抑制作用。相关化合物与阳性对照物对不同癌细胞的抑制作用见说明书附图3、图4和图5。四.图1是[N-(4-氟苄基)-3-氮杂-1，1-环丁二酸根]二氨合铂(II)(化合物IO)的分子结构；图2是(N-苄基-3-氮杂-1，l-环丁二酸根)(7尺2i-环己二胺)合铂(II)(化合物13)的分子结构；图3是化合物4、5、6、7、10、11和12对人肺癌细胞A549的生长抑制作用(细胞被化合物处理18小时后用流式细胞仪分析细胞凋亡数量)；图4是化合物4、5、6、7、10、11和12对人肝癌细胞Bel-7402的生长抑制作用(细胞被化合物处理18小时后用流式细胞仪分析细胞凋亡数量)；图5是化合物4、5、6、7、10、11和12对人乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用(细胞被化合物处理18小时后用流式细胞仪分析细胞凋亡数量)。五.具体实施例本发明由下述实施例得到进一步的说明，但这些说明并不是限制本发明。实施例1.(N-异丙基-3-氮杂-1，1-环丁二酸根)二氨合铂(II)的制备将二碘二氨合钿(II)(0.97g，2.0mmo1)和硝酸银(0.68g，4.0mmo1)混合，加入lOOmL水，在40'C避光下搅拌反应24h，过滤得澄清液。将配好的N-异丙基-3-氮杂-1，1-环丁二酸钠(0.46g，2.0mmol)的水溶液(50mL)加入到上述澄清液中，在50'C下避光搅拌反应24h，过滤。然后将滤液旋转蒸发浓縮，约剩5mL水时，有黄色固体出现，冷却放置5h，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得到淡黄色固体0.32g(产率38%)。IR(KBr):3407br，3245s,2979m，2640m,2473w,1615s,1385s,1082m,997m，862m，789m;iH-NMR(D20/TMS):S0.92-1.18(m,6H)，3.19-3.21(m，1H)，4.00-4.02(m，2H),4.19-4.28(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=415.3(100%)。实施例2.(N-正丁基-3-氮杂-1，l-环丁二酸根)二氨合铂(II)的制备(2)使用N-正丁基-3-氮杂-1,1-环丁二酸钠代替N-异丙基-3-氮杂-1,1-环丁二酸钠，按实施例1所述方法得到淡黄色固体，产率29%。IR(KBr):3430s,3261s,2963m,2876m，1616s,1385s，839m;^-NMR(D20/TMS):S0.78-0.83(m,3H),U9-1.47(m,4H)，2.59-3.24(m,2H)，3.91-4.4(m,4H);ESI-MSm/z:〖M+H]+=429.3(100%)。实施例3.(N-苄基-3-氮杂-i，l-环丁二酸根)乙二胺合铂(n)的制备(3)将二碘乙二胺合销(II)(1.45g，3.0mmoL)和硝酸银(1.02g，6.0mmo1)混合，加入100mL水，在40'C下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。将配好的N-苄基-3-氮杂-1，1-环丁二酸钠(0.84g，3.0mmo1)的水溶液(100mL)加入到上述澄清液中，在50'C下避光搅拌反应24h，过滤。然后将滤液旋转蒸发浓縮，约剩10mL水时，有白色固体出现，冷却放置3h，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得到白色微晶0.57g(产率39%)。IR(KBr):3372br,3169s，3075m,2967m,2884w,1646s,1578s，1456m，1409m，1361s，1289m,1187m，890w，850w,770m;iH隱NMR(D20/TMS):52.47-2.69(m,4H),3.80-4.15(m,4H)，4.21-4.41(m，2H)，7.41,7.60(m，5H);ESI-MSm/z:[M+H]+=486.3(100%)。实施例4.(N-苄基-3-氮杂-1,1-环丁酸根)，氨合铂(II)的制备使用N-苄基-3-氮杂-1,1-环丁二酸钠代替N-异丙基-3-氮杂-1,1-环丁二酸钠，按实施例l所述方法得到白色固体，产率63%。IR(KBr):3411br，3226s,3103m,2886w,1650s,1453m,1407s，1357s,880w,774m,741m;!H隱NMR(D20/TMS):53.87-3.91(m,4H),4.35-4.37(m,2H)，7.11-7.14(m,1H),7.19-7.21(m,1H)，7.38.7.39(m，1H)，7.48-7.50(m,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.7(100%)。实施例5.[N-(2-氯苄基)-3-氮杂-l,l-环丁二酸根]*二氨合铂(11)的制备将二碘二氨合钼(II)(0.48g，l.OmmoL)和硝酸银(0.34g,2.0mmoL)混合，加入100mL水，在35'C下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。将配好的N-(2-氯苄基)-3-氮杂-l,l-环丁二酸钠(0.31g，l.Ommol)的水溶液U00mL)加入到上述澄清液中，在40。C下避光搅拌反应36h,过滤。然后将滤液旋转蒸发浓縮，约剩10mL水时，有白色固体出现，冷却放置3h，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得到白色固体0.I5g(产率30%)。IR(KBr):3449br，3346m，3220m,3097m，2884m，1661s,1635m,1585m,1471s,1442m,1358s,884w,774m,750m;!H-NMR(D20/TMS):S3.96-4.01(m，4H),4.15-4.17(m，2H),7.35-7.45(m，3H),7.7,7.71(m,1H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=480.9(100%)，[M+H]+=497(30%)。实施例6.[N-(3-氯苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸根]二氨合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>(6)使用N-(3-氯苄基)-3-氮杂-l,l-环丁二酸钠代替N-(2-氯苄基)-3-氮杂-l,l-环丁二酸钠，按实施例5所述方法得到白色固体，产率56%。IR(KBr):3440br，3246m,3109m,1626m,1626m,1597s,1575s,1445m，1362s,883w,793m，735m;^隱NMR(D20/TMS):S3.95-4.00(m，4H)，4.46-4.64(m,2H)，7.35(m,3H)，7.45(m，1H);ESI隱MSm/z:[M+H〗+-496.9(100%),[M-NH3+H]+=480.6(60%)，[M+Na〗+=519.1(50%)。实施例7.[N_(4-氯苄基)-3-氮杂-1，1-环丁二酸根]二氨合铂(II)的制备CI使用N-(4-氯苄基)-3-氮杂-1,l-环丁二酸钠代替N-(2-氯苄基)-3-氮杂-l，l-环丁二酸钠，按实施例5所述方法得到白色固体，产率56%。IR(KBr):3495br，3233m，3104m，1645s，1615s，1574w，1557m，1495m，1437w,1361s，880m,836m，777m;!H-NMR(D20/TMS):S3.92-3.98(m,4H),4.41-4.43(m，2H),7.25-7.38(m，2H)，7.93-7.94(m，2H);ESI陽MSm/z:[M-NH3+H]+=479.9(100%)。实施例8.〔N-(2-氟苄基)-3-氮杂-l，l-环丁二酸根]*二氨合铂(11)的制备使用N-(2-氟苄基)-3-氮杂-1,卜环丁二酸钠代替N-(2-氯苄基)-3-氮杂-l，l-环丁二酸钠，按实施例5所述方法得到白色固体，产率52%。IR(KBr):3431br,3239s，3105m，2886w,1636s，1492m，1455s，1359s，854w,771m,744m;!H-NMR(D20/TMS):S3.87-3.91(m，4H),4.35-4.37(m，2H),7.11-7.14(m,1H),7.19-7.21(m,1H)，7.38陽7.39(m，1H),7.48-7.50(tn,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.7(100%),[M-NH3+H]+=463.8(55%)。实施例9.[N-(3-氟苄基)-3-氮杂-1,卜环丁二酸根]二氨合铂(II)的制备(9)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>将二碘二氨合钼(II)U.94g，4.0mmoD和硝酸银(1.36g,8.0rnmo1)混合，加入100mL水，在30'C下避光搅拌反应30h，过滤得澄清液。将配好的N-(3-氟苄基)-3-氮杂-l,l-环丁二酸钠(1.19g，4.0mmoD的水溶液(100mL)加入到上述澄清液中，在4(TC下避光搅拌反应24h，过滤。然后将滤液旋转蒸发浓縮，约剩35mL水时，冷却放置lh，有白色固体出现，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得到白色固体0.58g(产率30%)。IR(KBr):3425br，3252s,3107m，2882w，1654s,1654s，1591s，1490m，1450w，1365s,864w，778w，742m;!H-NMR(D20/TMS):S3.95-3.99(m，4H)，4.45-4.46(m，2H)，7.05-7.08(m，1H)，7.17-7,22(m，2H),7.34-7.38(m，1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=480.8(100°/。)，[M-NH3+H]+=463.3(60%)。实施例10.[N-(4-氟苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸根]二氨合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>使用N-(4-氟苄基)-3-氮杂-1，1-环丁二酸钠代替N-(2-氯苄基)-3-氮杂-l，卜环丁二酸钠，按实施例5所述方法得到白色固体，产率47%。IR(KBr):3516br，3208s,3104m，2884w,1648s，1618s,1598m，1566m,1512s,1365s，882m,779m:766m;!H-NMR(D20/TMS):S3.88-3.94(m，4H)，4.36-4.38(m,2H),7.08-7.11(m,2H),7.37-7.38(m:2H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=463.9(100%),[M+H]+=481.1(55%)。实施例11.[N-(4-甲基苄基)-3-氮杂-1，l-环丁二酸根]二氨合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>(11)将二碘二氨合铂(II)(0.97g,2.0mmol)和新制的N-(4-甲基苄基)-3-氮杂-1，1-环丁二酸银(0.93g，2.0mmo1)混合，加水500mL，在50'C下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓縮，约剩10mL水时，有白色固体出现，冷却放置3h，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得到白色固体0.52g(产率55%)。IR(KBr):3444br，3210s,3099m，2885w,1653s,1585w，1567m，1515w,1450w，1359s,883w,810m:771m;^-NMR(D20/TMS):53.87-3.97(m，4H)，4.32-4.70(m，2H)，7.21-7.22(m,2H)，7.26-7.27(m，2H);ESI掘m/z:[M+H]+=477.0(100%)。实施例12.[N-(4-甲氧基苄基)-3-氮杂-1，l-环丁二酸根]二氨合铀(ll)的制备(12)使用N-(4-甲氧基苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银代替N-(4-甲基苄基)-3-氮杂-l，l-环丁二酸银，按实施例ll所述方法得到白色固体，产率57%。IR(KBr):3420br,3254s,3106m,2882w,1659s，1611s,1558w，1516s，1364s,860m,770w,735m;!H-NMR(D20/TMS):S3.73-3.94(m,4H)，4.36陽4.39(m，2H),6.96-6.97(m，2H),7.30墨7.31(m,2H);ESI-MSm/z:[M-NH3+H]+=475.9(100%),[M+H]+=491.9(60%)。实施例13.(N-苄基-3-氮杂-1,l-环丁二酸根)(/尺M-环己二胺)合铂(II)的制备H2(13)将二氯.(/尺2i-环己二胺)合铂(n)(0.95g,2.5mmo1)和新制的N-苄基-3_氮杂-1，1-环丁二酸银(1.12g，2.5mmo1)混合，加水600mL，在5(TC下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓缩,约剩5mL水时出现白色微晶，冷却放置，过滤后得白色晶体0.56g(产率41%)。IR(KBr):3424br，3208m,3101m，2937m，2861w,1606s,1497w，1452m，1354s，848w，769w;iH-NMR(D20/TMS):S1.06-1.19(m，4H)，1.49(m,2H),1.87-189(m,1H),1.97-1.99(m,1H),2.33-2.35(m，2H)，3.90-4.05(m，4H)，4.32-4.34(m，2H)，7.35-7.44(m，4H);ESI-MSm/z:[M+H〗+=543.2(100%)。实施例14.[N-(3-氯苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸根]OS,2S-环己二胺)合铀(II)的制备Cl、H2(14)将二氯'Os;2S-环己二胺)合铂(II)(l.OOg，2.6mmo1)和新制的N-(3-氯苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银(1.27g，2.6mmo1)混合，加水600mL，在50。C下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓縮,约剩10mL水时出现白色固体。冷却放置，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得白色固体0.64g(产率42%)。IR(KBr):3421br,3194m，3053m，2839m，1634s，1596s，1492m,1447m,1356s，857m，812m;'H-NMR(D20/TMS):S0.99-1.13(m,4H),1.18-1.21(m,2H)，1.88-1.90(m,1H)，1.94-1.99(m,1H)，2.34-2.36(m，2H)，3.25-4.04(m，4H)，4.29-4.35(m,2H)，7.30-7.32(m,1H)，7.36陽7.44(m,3H);ESI-MSm/z:[M+H]+=577.2(100%),[M+Na]+=600.1(50%)。实施例15.[N-(4-氯苄基)-3-氮杂-l，l-环丁二酸根](反式-1，2-环己二胺)合铂(II)的制备ClH2(15)将二氯*(反式-1,2-环己二胺)合铂(II)(0.88g,2.3mmo1)和新制的N-(4-氯苄基)-3-氮杂-l,1-环丁二酸银(1.12g,2.3mmo1)混合，加水600mL，在50'C下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓縮,约剩10mL水时出现白色固体。冷却放置，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得白色固体0.60g(产率45%)。IR(KBr):3424br，3196m，3063m，2839m，2862w,1638s，1598s，1492m,1446m，1355s，857m,812m,727w;'H-NMR(D20/TMS):S1.04-1.20(m，4H)，L49(m,2H),1.88-1.96(m,1H)，1.984國1.99(m，1H),2.34-2.36(m，2H)，3.25-4.02(m,4H)，4.29-4.31(m，2H),7.33-7.35(m，2H),7.43-7.44(m，2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=578.1(100%)。实施例16.[N-(2-氟苄基)-3-氮杂-1,l-环丁二酸根]U凡2R-环己二肢)合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(16)将二氯*环己二胺)合铂(II)(1.13g，3.0mmo1)和新制的N-(2-氟苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银(1.39g,3.0mmo1)混合，加水600mL，在50'G下避光搅拌反应24h,过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓缩,约剩10mL水时出现白色固体，冷却放置，过滤后固体真空干燥，用水重结晶得白色固体0.76g(产率56%)。IR(KBr):3400br,3170m，3066m，2951m，2868w,1636s,1586w,1489m,1451m，1391w,1356s,764m，743m,711m;'H-NMR(D20/TMS):S1.09-1.24(m，4H)，1.50-1.52(m，2H)，1.94-1.96(m,1H),1.98-2.01(m,1H),2.37-2.39(m,2H)，3.85-4.06(m，4H),4.29-4.30(m，2H)，7.18-7.26(m,2H),7.41-7.46(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=561.1(100%),[M+Na]+=583.0(95%)。实施例17.[N-(3-氟苄基)-3-氮杂-l,l-环丁二酸根]US,2S-环己二膨合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>(17)将二氯.(仏2S-环己二胺)合铂(n)(1.21g,3.2mmo1)和新制的N-(3-氟苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银(1.49g，3.2mmo1)混合，加水600mL，在40'C下避光搅拌反应30h,过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓縮，约剩10mL水时出现白色微晶，冷却放置，过滤后得白色微晶0.79g(产率44%)。IR(KBr):3417br，3178m,3058m,2941m,2864w,1636s，1590s，1490m，1448m，1406w，1365s，768m，732m;iH陽NMR(D20/TMS):51.04-1.20(m,4H),1.49(m,2H)，1.87-1.90(m，1H),1.96誦1.99(m,1H)2.34-2.36(m,2H)，3.25-4.06(m，4H)，4.34陽4.35(m,2H)，7.13-7.20(m，3H)，7.41-7.45(m,1H);ESI-MSm/z:[M+H]+=561.2(100%),[M+Na]+=583.1(35%)。实施例18.[N-(4-氟苄基)-3-氮杂-l,卜环丁二酸根](反式-1，2--环己二胺)合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(18)将二氯(反式-l，2-环己二胺)合铂(H)(1.90g，5.0mmo1)和新制的N-(4-氟苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银(1.54g,5.0mmo1)混合，加水600mL，在50'C下避光搅拌反应36h，过滤得澄清液。然后旋转蒸发浓縮，约剩10mL水时出现白色微晶,冷却放置，过滤后得白色微晶0.82g(产率30%)。IR(KBr):3423br，3204m,3105m,2939m，2862w,1602s，1510s,1448m，1356s，864w，829w，706w;!H-NMR(D2。/TMS):S1.07-1.20(m，4H)，1.49(m,2H)，1.87-2.08(m，1H)，2.24-2.29(m,1H)2.35-2.37(m，2H),3.82-4.15(m，4H),4.22-4.33(m,2H)，7.11-7.17(m,2H),7.35-7.40(m,2H);ESI-MSm/z:[M+Na〗+=583.1(100%)。实施例19.[N-(4-甲基节基)-3-氮杂-l，l-环丁二酸根](iiUi-环己二胺)合铂(II)的制备<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>(19)使用N-(4-甲基苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银代替N-(2-氟苄基)_3-氮杂-1,1-环丁二酸银，按实施例16方法得到白色固体，产率41%。IR(KBr):3423br,3202m,3066m，2940m，2863m，1646s,1591s，1516w，1447m,1407m，1371s,858m，817w，736w;^-丽R(D2。/TMS):51.06-1,19(m，4H)，1.49(m,2H)，1.87-1.90(m，1H),1.96-1.99(m,1H)，2.35-2.37(m,2H)，3.78-3.83(m,4H)，4.25誦4.26(m，2H),7.00-7.31(m,4H);ESI-MSm/z:[M+H]+=557.2(100%)，[M+Na]+=579.0(55%)实施例20.[N-(4-甲氧基苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸根j环己二胺〗合铂(II)的制备H2(20)将二氯U及,2及-环己二胺)合铂(II)(1.52g，4.0mmoD和新制的N-(4-甲氧基苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸银(1.98g，4.0mmo1)混合，加水700mL，在40'C下避光搅拌反应24h，过滤得澄清液。然后旋转蒸发除水，蒸干得白色固体，用水重结晶得到白色固体0.72g(产率31%)。IR(KBr):3365s，3125m，3058m，2940m，2863w，1637s,1609s,1514s，1456w,1409w，1374m,824m,708w;'H-NMR(D20/TMS):S1.08-1.21(m，4H),1.50(m，2H)，1.91-1.94(m，1H)，1.98-2.01(m,1H),2.35-2.37(m，2H),3.78-3.83(m，4H),4.25-4.26(m，2H),7.00陽7.02(m,2H),7.30-7.32(m,2H);ESI-MSm/z:[M+H]+=573.2(100%),[M+Na]+=595.1(35%)。实施例21.[N-(3-氟苄基)-3-氮杂-1,1-环丁二酸根]氨环己胺合铂(II)的制备(21)将二氯一氨环己胺合铂(II)U.08g，2.8mmo1)和新制的N-(3-氟苄基)-3-氮杂-1，1-环丁二酸银(1.32g，2.8mmo1)混合，加水700mL，在50'C下避光搅拌反应24h,过滤得澄清液。然后旋转蒸发除水，蒸干得淡黄色固体，用水重结晶得到淡黄色固体0.65g(产率41%)。IR(KBr):3424br,3196s,3062m，2932m，2856m,11615,1489m,1449m,1357s,1184m,1055m，790w，768w;iH隱NMR(D20/TMS):S1.08-1.26(m,5H)，1.54墨1.70(m，3H)，2.27(m，2H)，2.61(m，1H)，3,80-4.27(m,4H),4.32-4.52(m,2H)，7.15-7.24(m，3H)，7.28-7.30(m,1H);ESI墨MSm/z:[M+H]+=563.3(100%)。实施例22.典型化合物的晶体结构测定将化合物10和化合物13的饱和水溶液室温放置数天，得到无色透明单晶体。使用Bruker公司SMART4KCCDX-射线衍射仪在293(2)K下进行结构测定。采用经石墨单色器单色化的MoKaa=0.71073A)射线，扫描方式co-2e。利用SAINT程序收集数据，晶胞和数据还原经SAINT软件完成，采用直接法解出结构，利用SHELX-97程序包对全部非氢原子坐标用基于FS的全矩阵最小二乘法进行修正，氢原子经理论加氢完成。化合物10的分子结构示于说明书附图1，晶体和结构修正数据见表la，主要键长和键角数据列于表lb。化合物13的分子结构示于说明书附图2，晶体和结构修正数据见表2a，主要键长和键角数据列于表2b。表la.化合物10的晶体和结构修正数据<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表lb.化合物10的主要键长和键角数据<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>表2b.化合物13的主要键长和键角数据<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>实施例23.典型化合物的体外抗肿瘤活性对--些典型化合物做了体外抗肿瘤活性测定，被筛选的癌细胞包括人体肺癌细胞A549、人体肝癌细胞Bel-7402和人体乳腺癌细胞MCF-7，所用的阳性对照物为顺铂、卡铂和奥沙利铂。具体的实验方法如下实验方法AnnexinV和PI法检测早期凋亡1、养至对数生长期的细胞(A546、MCF-7)，接种于24孔板(Costar)，8XIOV孔,用含10%的小牛血清(PAA)和青霉素、链霉素(Amresco)的DMEM培养基(GibcoBRL),在37r5%C02细胞培养箱中培养至细胞贴壁；2、用不同浓度的不同铂化合物处理；3、处理后继续培养18h,以未处理的细胞作阴性对照；4、将上清转移入离心管(其中含脱落的凋亡细胞)，与胰酶消化的细胞合并，离心收集细胞，2000rpm(约375g)，离心5min:5、用IOOuLbindingbuffer复悬细胞，加入2.5uLA騰xinV-FITC(晶美)；混匀，并且室温避光作用IOmin;6、PBS洗细胞1次，4°C，2000rpm(约375g)，5min;7、用100uLbindingbuffer复悬细胞；加入5uL25ug/ml的PI(晶美)应用液(用PBS配制)，避光作用5min，加入400uLPBS;8、用流式细胞仪(美国BD公司FACSCalibur型)进行分析，激发波长为488nm,每个样本均获取10000个细胞。一些典型化合物和相应的阳性对照物对不同癌细胞的抑制作用见说明书附图3、图4和图权利要求1、一类具有新型结构的铂(II)配合物，其特征是以3-氮杂-1，1-环丁二酸根及其衍生物为配体，二价金属铂离子与3-氮杂-1，1-环丁二酸根配体中的叔胺氮原子和其中一个羧酸根中的氧原子配位成键，其结构用式(1)表示，式(1)其中，R1和R2可以相同或不相同，分别是氢原子、C1-8链状烷基或C3-6环状烷基，或通过C2-4烷基链连接起来构成的链状二胺，或通过C3-6环状烷基连接起来构成的1，2-位环状二胺；当R1和R2通过C2-4烷基链连接起来构成有立体异构的链状二胺时，这些立体异构体可以是光学异构体的左旋体、右旋体或混旋体；当R1和R2通过C3-6环状烷基连接起来构成有立体异构的1，2-位环状二胺时，这些立体异构体可以是几何异构的顺式、反式或顺反混合物，也可以是光学异构体的左旋体、右旋体或混旋体；R3可以是氢原子、烷基、环状烷基、未取代的芳香基或取代的芳香基；当R3为取代的芳香基时，取代基可以在任意位置，可以为单个或多个取代基团。2、根据权利要求1所述铂(II)配合物的制备方法，其特征在于将式(2)代表的二卤素离子二胺(氨)配位的铂(II)配合物，在避光条件下，于水溶液中通过银离子除去式(2)中的卤素离子，再与式(3)所示的3-氮杂-l，l-环丁二酸或其衍生物的碱金属盐反应，生成式(l)所示结构的配合物；或者在避光条件下，于水溶液中通过式(4)所示的3-氮杂-l，l-环丁二酸或其衍生物的银盐除去式(2)中的卤素离子，反应生成式(1)所示结构的配合物；<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式(2)式(2)中，Hal代表Cr、Br—或r卤素离子，R,和R2同权利要求1中式(l)所定义:COOMCOOAg<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>式(3)式(4)式(3)中，M为一价的碱金属阳离子，如Na+、K+等；R3同权利要求l中式(l)所定义；式(4)中，R3同权利要求1中式(l)所定义。3、根据权利要求1所述的铂(II)配合物和根据权利要求2所述制备方法获得的铂(II)配合物的抗肿瘤活性，其特征在于这一类铂(II)配合物对人肺癌细胞、肝癌细胞和乳腺癌细胞的有效抑制作用。全文摘要本发明披露了一类3-氮杂-1，1-环丁二酸根及其衍生物为配体的新型铂(II)配合物及其典型化合物的抗肿瘤活性。文档编号A61K31/555GK101381380SQ20081015586公开日2009年3月11日申请日期2008年10月17日优先权日2008年10月17日发明者霞刘,苟少华申请人:东南大学