专利名称：抗肿瘤铂(Ⅱ)配合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及具有良好水溶性、低毒和有效抗肿瘤活性的新型铂(II)配合物、其制备方法和以上铂(II)配合物中典型化合物的体外抗肿瘤性质。
二.
背景技术：
由于顺铂(Cisplatin)和卡铂(Carboplatin)在临床上的成功，人们已合成了数千个新的铂配合物并进行了抗肿瘤活性筛选，大约30个化合物进入了人体临床试验，其中奈达铂(Nedaplatin)于1995年在日本上市[1]，奥沙利铂(Oxaliplatin)于1996年在法国率先上市，最近还在欧洲及美洲的其它国家上市[2]，宋铂(Sunpla，SKI-2053R)于1999年在韩国上市[3]。
已经证实顺铂对各种人类肿瘤有效，具有广谱抗癌特性，但是其具有严重的有限剂量毒性，如肾毒、骨髓抑制、恶心呕吐和神经毒性。并且顺铂在水中溶解性差，也限制了它的应用。由于现有的顺铂类药物还没有完全达到水溶性良好、低毒和有效抗肿瘤活性的目标，因此设计与合成低毒和水溶性好的顺铂类化合物来改进抗肿瘤制剂仍是必要的。
三.
发明内容
本发明的目的是在于提供新型的顺铂(II)类配合物，这些配合物具有低毒、水溶性好、有效的抗肿瘤活性，用于治疗人类肿瘤。本发明公开一类具有有效抗癌活性铂(II)配位化合物，其特征是甲氧基乙酸根为配阴离子。该类化合物的组成由下面(1)、(2)、(3)式表示 式(1)中的R基团相同，分别为氢原子或C1-5烷基；式(2)中的环己二胺为1，2-反式环己二胺，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型；式(3)中的4，5-二(氨甲基)-2-烷基-1，3-二氧戊环所示R1和R2相同或不相同，分别为氢原子或C1-5烷基，或可与一碳原子联结形成环烷基，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型。本发明的铂配合物包括上述化学式所示的所有立体异构体及其混合物。
本发明的另一个目的是提供制备式(1)、式(2)和式(3)所示的铂(II)配合物的方法。在这些二价铂配合物的合成中，它们首先是由四氯合铂酸钾与相关的二胺(氨)配体作用得到含二卤素离子二胺配位的铂化合物，由式(4)代表。然后在避光通氮气条件下，通过方法A使用银离子除去二卤二胺(氨)合铂(II)的卤素离子，所得中间体与一价碱金属阳离子甲氧基乙酸盐作用得到顺-二(甲氧基乙酸根)二氨(胺)合铂(II)化合物；通过方法B使用甲氧基乙酸银盐与二卤二胺(氨)合铂(II)作用得到顺-二(甲氧基乙酸根)二胺(氨)合铂(II)化合物。
式(4a)和4(b)中的Hal代表Cl-、Br-和I-离子，其中式(4a)的R基团相同，分别为氢原子或C1-5烷基，式(4b)连在胺氮原子上的圆弧表示两个胺基由烷基相连。
由化学式(1)、式(2)和式(3)所代表的化合物都溶于水，其中R、R1、R2烷基的链越短，化合物的水溶性越好。
本发明还有一个目的是公开上述铂(II)配合物中典型化合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的体外抑制作用。
本发明有代表性的化合物包括顺-二(甲氧基乙酸根)·二氨合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·二异丙胺合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·(1，2-反式环己二胺)合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·[(1S，2S)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·[4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)；顺-二(甲氧基乙酸根)·[(4S，5S)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)。
消旋4，5-二(氨甲基)-2-R1R2-1，3-二氧戊环及其光学异构体按文献方法制备[4]。
本发明由下述实施例得到进一步的阐述，但这些说明并不是限制本发明。
按本发明所制备的化合物的结构已被不同的分析方法诸如元素分析、红外光谱、质子核磁共振光谱和阳离子电喷雾质谱所证实。以下为本发明方法制备一些代表性化合物的实施例。
实施例1用方法B合成顺-二(甲氧基乙酸根)·二氨合铂(II)顺-二碘二氨合铂(II)(0.4克，0.84毫摩尔)与新制的甲氧基乙酸银(0.33克，1.7毫摩尔)，加水(40毫升)混和，60℃下避光通氮气反应24小时，然后用硅藻土辅助过滤，将滤液浓缩，析出土白色固体，过滤，60℃下真空干燥，得产物0.12克(35％)。
IR(KBr)3279s，3222s，3124s，2989m，2901m，2827m，1662vs，1571vs，1466m，1423vs，1393vs，1335vs，1284s，1205s，1117vs，1015m，989m1H-NMR(D2O/TMS)δ3.34(m，6H)，4.02(m，4H)ESI-MS[M+Na]+＝430(100％)实施例2用方法B合成顺-二(甲氧基乙酸根)·二异丙胺合铂(II)顺-二碘二异丙胺合铂(II)(1.13克，2毫摩尔)与新制的甲氧基乙酸银(0.79克，4毫摩尔)，加水(100毫升)混和，40℃下避光通氮气反应18小时，用硅藻土辅助过滤，将滤液浓缩，析出白色固体，过滤，60℃下真空干燥，得产物0.35g(36％)。
IR(KBr)3451m，3207s，3106m，1630s，1449w，1384vs，1333m，1298m，1173m，1119s，1065m，1031m1H-NMR(DMSO-d6/TMS)δ1.25(m，12H)，3.22(m，6H)，3.36-3.85(m，6H)ESI-MS[M+Na]+＝514(100％)实施例3用方法A合成顺-二(甲氧基乙酸根)·[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)顺-二氯[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(1.10克，2.9毫摩尔)、硝酸银(0.99克，5.8毫摩尔)混合加入水(50毫升)，55℃下避光通氮气反应36h，硅藻土辅助过滤，滤液中加入甲氧基乙酸(0.52克，5.8毫摩尔)与氢氧化钠(0.23克，5.8毫摩尔)的水溶液，30℃下避光通氮气反应8小时，将溶液浓缩，析出大量浅黄色固体。过滤，用水、乙醇、乙醚反复洗涤，60℃下真空干燥，得产物0.89g(63％)。
IR(KBr)3449br，3218s，3111m，2937m，2861w，2821w，2362w，2342w，1633vs，1449w，1385s，1338m，1305m，1120s，1064w，1035w1H-NMR(D2O/TMS)δ1.08(m，2H)，1.08(m，2H)，1.82(m，2H)，2.16(m，2H)，3.12(m，6H)，3.42(m，2H)，3.66-3.78(m，4H)ESI-MS[M+Na]+＝510(100％)实施例4用方法B合成顺-二(甲氧基乙酸根)·[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)顺-二碘[(4R，5R)-4，5-二(氨甲基)-2-异丙基-1，3-二氧戊环]合铂(II)(1.25克，2毫摩尔)与新制的甲氧基乙酸银(0.79克，4毫摩尔)，加水(100毫升)混和，50℃下避光通氮气反应18h，用硅藻土辅助过滤，将滤液浓缩，析出白色固体，过滤，60℃下真空干燥，得产物0.30g(27％)。
IR(KBr)3449s，3206s，2964s，2825m，1617vs，1419s，1385s，1311m，1261w，1200s，1114vs，1014w，988m1H-NMR(D2O/TMS)δ0.95(d，6H)，1.91(m，1H)，3.35(m，4H)，33.39(m，6H)，3.99(m，4H)，4.04(m，2H)，5.34(d，1H)ESI-MS[M+Na]+＝570(55％)，[M-CH3OCH2COO-+H2O]+＝475(100％)
注因Pt元素丰度较高的同位素有194Pt、195Pt和196Pt，所以上述化合物ESI-MS质谱的准分子离子峰都有三个丰度较高的同位素峰。
四.顺-二(甲氧基乙酸根)·[(1R，2R)-1，2-反式环己二胺]合铂(II)(简略为SH-1)对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的体外抑制作用单体化合物疗效评价
实验方法台盼兰排染法，SRB比色法细胞株HL-60人白血病细胞，3AO人卵巢癌细胞，BEL-7402人肝癌细胞，A549人肺癌细胞。
实验设计药物浓度分为100，10，1，0.1，0.01(μg/ml)三组。根据疗效评价计算抑制率。观察在不同浓度下药物对肿瘤细胞生长的抑制情况，顺铂和卡铂作为参照。
有关化合物SH-1对四种肿瘤细胞的体外抑制率数据分见表1、表2、表3和表4。
表1.化合物SH-1对人白血病细胞(HL-60)的体外抑制作用率
表2.化合物SH-1对人卵巢细胞(3AO)的体外抑制作用率
表3.化合物SH-1对人肝癌细胞(BEL-7402)的体外抑制作用率
表4.化合物SH-1对人肺癌细胞(A459)的体外抑制作用率
化合物SH-1对相应的肿瘤细胞GI50值图见说明书附图。其中
图1为化合物SH-1对HL-60细胞GI50值，图2为化合物SH-1对3AO细胞GI50值，图3为化合物SH-1对BEL-7402细胞GI50值，图4为化合物SH-1对A549细胞GI50值。
五.参考文献[1]Shionogi，Drugs Fut.，1993，18，1085. Debiopharm，Sanofi-Synthelabo，Dr Reddy’s and Asta Medica.Pharma Projects.，May 2001，a1825～1837. S.E.Andrew，Curr.Opin.Oncol.，Endocr.Metab.Invest.Drugs.，2000，2，339. D.-K.Kim，G.Kim，J.Gam，Y.-B.Cho，H.-T.Kim，J.-H.Tai，K.H.Kim，W.-S.Hong and J.-G.Park，J.Med.Chem.，1994，37，1471.
权利要求
1.一类具有有效抗癌活性铂(II)配位化合物，其特征在于应用甲氧基乙酸根为配阴离子与铂胺配阳离子反应形成的新型铂(II)配位化合物，该类化合物的组成由下式表示 式(1)中的R基团相同，分别为氢原子或C1-5烷基；式(2)中的环己二胺为1，2-反式环己二胺，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型；式(3)中的4，5-二(氨甲基)-2-烷基-1，3-二氧戊环所示R1和R2相同或不相同，分别为氢原子或C1-5烷基，或可与一碳原子联结形成环烷基，两个手性碳原子(标有*号)的绝对构型都为R构型或S构型。本发明的铂配合物包括上述化学式所示的所有立体异构体及其混合物。
2.根据权利要求1所述铂(II)配合物的制备方法，其特征在于将式(4)代表的二卤素离子二胺配位的铂化合物在避光通氮气条件下，通过方法A使用银离子除去二卤二胺(氨)合铂(II)的卤素离子，所得中间体与一价碱金属阳离子甲氧基乙酸盐作用得到顺-二(甲氧基乙酸根)二胺(氨)合铂(II)化合物；通过方法B使用甲氧基乙酸银盐与二卤二胺(氨)合铂(II)作用得到顺-二(甲氧基乙酸根)二胺(氨)合铂(II)化合物。 式(4a)和4(b)中的Hal代表Cl-、Br-和I-离子，其中式(4a)的R基团相同，分别为氢原子或C1-5烷基，式(4b)连在胺氮原子上的圆弧表示两个胺基由烷基相连。
3.根据权利要求1所述的铂(II)配合物和根据权利要求2所述制备方法获得的铂(II)配合物的抗肿瘤活性，其特征在于这一类铂(II)配合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的有效抑制作用。
全文摘要
本发明公开了一类具有有效抗癌活性铂(II)配位化合物，其特征在于应用甲氧基乙酸根为配阴离子与铂胺配阳离子反应形成的新型铂(II)配位化合物，揭露了其制备方法和典型化合物对人体白血病细胞、卵巢癌细胞、肝癌细胞和肺癌细胞的体外抑制作用。该类化合物的组成由下式表示式(1)中的R基团相同，分别为氢原子或C
文档编号C07F15/00GK1569862SQ0313185
公开日2005年1月26日 申请日期2003年6月11日 优先权日2003年6月11日
发明者苟少华, 刘芸 申请人:南京大学