专利名称：：15种复合氨基酸液体制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种15种复合氨基酸液体制剂及其制备方法。
背景技术：
：慢性肝病是一种慢性消耗性疾病，其又可引起患者营养代谢的紊乱，因此，营养不良在慢性肝病患者中十分常见。在所发生的营养不良中又以"蛋白质-能量型营养不良"类型最为常见。由于营养不良在慢性肝病患者中十分常见，且又与肝功能不良、罹患率及死亡率密切相关。因此给予慢性肝病患者的营养治疗就成为临床必须，而专为肝病患者设计的氨基酸制剂能很好地纠正因蛋白质摄入不当而造成的各种代谢并发症。向肝病患者提供氨基酸不能采用普通的平衡型氨基酸，必须按照肝病患者对氨基酸代谢的特点进行设计。根据Fischer的假性神经递质学说以及随后发展出来的氨基酸平衡失调学说，富含支链氨基酸的溶液可以纠正患者体内的氨基酸失衡状况，更重要的是支链氨基酸可以更多的进入脑中，从而减少芳香族氨基酸的进入，起到预防和治疗肝性脑病的作用。本发明的15种复合氨基酸注射剂的制备工艺中通常采用活性炭工艺去除药液的热原。但是由于活性炭带有电荷，进入液体后分散在注射用水中构成胶体溶液，能透过滤棒及滤膜，从而使制剂污染了新的微粒杂质，这种微粒不能在体内代谢，故可能引发肉芽肿、肺水肿、静脉炎、血栓、组织坏死、过敏、热原、肿瘤样反应等多种反应，存在严重影响输液人群身体健康的潜在危害。所以设计完善的制备工艺对提高产品质量和用药安全性方面有着重要的意义。
发明内容本发明的一个目的是提供一种制备15种复合氨基酸液体制剂的方法。本发明所提供的制备15种复合氨基酸液体制剂的方法，包括如下步骤将15种复合氨基酸和抗氧剂溶于注射用水中，混匀，得到溶液I，然后将溶液I进行过滤，得到15种复合氨基酸液体制剂；所述15种复合氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸、L-赖氨酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐和L-色氨酸组成。上述过程中，所述15种复合氨基酸和抗氧剂的质量份数可为L一脯氨酸6.4-9.6，L一丝氨酸4.0-6.0，L—丙氨酸6.16-9.24，L一精氨酸4.8_7.2，L—组氨酸1.92-2.88，L一色氨酸O.528-0.792，L一缬氨酸6.72-10.08，L一苏氨酸3.6-5.4，L一亮氨酸8.8-13.2，L—甲硫氨酸0.8-1.2，L—异亮氨酸7.2-10.8，L—苯丙氨酸0.8-1.2，L一赖氨酸醋酸盐6.88-10.32，L—半胱氨酸盐酸盐0-0.2，甘氨酸7.2-10.8，抗氧剂0.2-1.0。上述过程中，所述15种复合氨基酸和抗氧剂的质量份数具体可为L—脯氨酸7.2-8.8，L一丝氨酸4.5-5.5，L—丙氨酸6.93-8.47，L一精氨酸5.40-6.6，L一组氨酸2.16-2.64，L一色氨酸0.60-0.73，L—缬氨酸7.56-9.24，L一苏氨酸4.05-4.95，L一亮氨酸9.9-12.1，L一甲硫氨酸0.9-1.1，L一异亮氨酸8.1-9.9，L一苯丙氨酸0.9-1.1，L—赖氨酸醋酸盐7.74-9.46，L—半胱氨酸盐酸盐0.1-0.15，甘氨酸8.1-9.9，亚硫酸氢钠0.45-0.6。上述过程中，所述15种复合氨基酸和抗氧剂的质量份数再具体可为L—脯氨酸7.2，L—丝氨酸4.5，L—丙氨酸6.93，L—精氨酸5.40，L一组氨酸2.16，L—色氨酸0.60，L—缬氨酸7.56，L一苏氨酸4.05，L—亮氨酸9.9，L一甲硫氨酸0.9，L—异亮氨酸8.1，L—苯丙氨酸0.9，L—赖氨酸醋酸盐7.74，L一半胱氨酸盐酸盐0.1，甘氨酸8.1，亚硫酸氢钠0.45，或L—脯氨酸8.0，L一丝氨酸5.0，L一丙氨酸7.7，L一精氨酸6.0，L—组氨酸2.4，L一色氨酸0.66，L—缬氨酸8.4，L一苏氨酸4.5，L一亮氨酸11.0，L一甲硫氨酸1.0，L—异亮氨酸9.0，L一苯丙氨酸1.0，L一赖氨酸醋酸盐8.6，L—半胱氨酸盐酸盐0.1，甘氨酸9.0，亚硫酸氢钠0.5，或L—脯氨酸8.8，L—丝氨酸5.5，L一丙氨酸8.47，L—精氨酸6.6，L—组氨酸2.64，L一色氨酸0.73，L—缬氨酸9.24，L—苏氨酸4.95，L一亮氨酸12.1，L—甲硫氨酸1.1，L—异亮氨酸9.9，L一苯丙氨酸1.1，L一赖氨酸醋酸盐9.46，L一半胱氨酸盐酸盐0.15，甘氨酸9.9，亚硫酸氢钠0.6。上述过程中，所述将15种复合氨基酸和抗氧剂溶于注射用水中的方法可为先将15种复合氨基酸溶于注射用水中，再向其中加入抗氧剂。上述过程中，所述将15种复合氨基酸溶于注射用水中的方法可为将第一组氨基酸溶于90-95。C的注射用水中，混匀，得到溶液l;将所述溶液l的温度降至80-85°C，再向其中加入第二组氨基酸，混匀，得到溶液2;将所述溶液2的温度降至60-65。C，再向其中加入第三组氨基酸，混匀，得到溶液3;将所述溶液3的温度降至45-5(TC，再向其中加入第四组氨基酸，混匀，得到溶液4;此过程实际是将15种不同氨基酸分组、分温度段进行溶解的。所述第一组氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸和L-缬氨酸组成；所述第二组氨基酸由L-赖氨酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸组成；所述第三组氨基酸由L-甲硫氨酸、L-组氨酸和L-半胱氨酸盐酸盐组成；所述第四组氨基酸为L-色氨酸。上述过程所述方法中，在所述得到溶液I后、所述过滤前，包括先将所述溶液I的pH值调至5.5-6.5的步骤。所述溶液I的最适pH值范围具体可为5.8-6.0。所述溶液I的pH值具体可以用磷酸和冰醋酸的混合溶液来调节。上述过程中，所述方法中，在所述过滤前，包括将所述溶液I的温度降至大于等于4(TC小于等于45'C的步骤。所述降温步骤可在调节溶液IpH值之前或之后进行。上述过程中，所述过滤的方法可包括如下步骤将所述溶液I进行0.22ym孔径过滤，得到滤液a;再将滤液a进行截留分子量为10000道尔顿的超滤，得到滤液b;将滤液b进行0.22um孔径过滤，得到滤液c;将滤液c进行0.22nm孔径过滤，得到高剂量盐酸氨溴索液体制剂。上述过程中，先将溶液进行降温，然后进行过滤，实际上是一个冷却除杂精滤的过程。上述过程中，所述抗氧剂可为亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠。上述过程中，所述的所有步骤都是先用氮气置换出工艺中可能引入的氧气，然后在氮气保护下进行。所述氮气含量为》99.99%，氮气流量控制在0.lbar，并经0.22um孔径滤器过滤。上述过程中，所述方法中还可包括将所述15种复合氨基酸注射液进行灭菌的步骤；所述灭菌的方法是在115X:-12rC的条件下，热压灭菌15-50分钟。上述过程中，所述液体制剂具体可为注射剂。上述任一所述方法得到的15种复合氨基酸液体制剂也属于本发明的保护范围。本发明的15种复合氨基酸注射剂的制备方法中，所述15种氨基酸的称量分装均在洁净百级层流保护下进行，称量分装所用的塑料袋为药用无菌袋，可降低分装过程中引入细菌和微粒，分装前后向无菌袋中通入氮气置换出无菌袋中的氧气，然后在氮气保护下密封，使15种氨基酸原料在投料前处于无氧状态，避免氨基酸原料在投料前被氧化分解。所述15种氨基酸的溶解水为注射用水，投料前需先将注射用水煮沸，去除水中残留的氧，向注射用水中通入氮气，置换出水中的残留氧，然后向配制罐内通入氮气，置换出配制罐内的氧气，并始终保持配制罐内充满氮气，避免氨基酸在氧的存在下分解变色。所述15种氨基酸是按照溶解度及热稳定性不同分组、分温度段溶解，按照各种氨基酸的最适溶解温度溶解各种氨基酸，该方法有利于每种氨基酸都能够完全溶解，且在氨基酸的最适温度溶解可以克服部分氨基酸在高温容易氧化从而降解的缺陷；另外，还克服了成品低温时易析出结晶的缺陷。采用磷酸与冰醋酸的混合溶液调节溶液的PH值能够使氨基酸溶液更加稳定，氨基酸溶液在灭菌前后的PH值变化很小，与单用冰醋酸调节PH值比较，能够显著稳定药液在灭菌前后的PH值，使氨基酸溶液能够耐受高温灭菌。将溶解后的溶液的pH值调节在5.8-6.0，能够使氨基酸在水溶液中溶解后不易析出，使灭菌后的产品达到无色，且在其贮藏期内药液颜色不加深，从而提高制剂的稳定性。上述溶液中加入抗氧剂，能够防止氨基酸被氧化而降解，提高产品在贮藏期的稳定性。将上述溶液，采用冷却除杂精滤法，先将溶液的温度调节在45。C以下，使氨基酸中的某些大分子物质或杂质通过温度的降低而析出，使用0.22um滤器循环过滤，去除析出的大分子物质、药液中存在的细菌和颗粒以及不溶性杂质，使药液中的细菌的残存量大大降低，提高了制剂的稳定性。工艺中采用10000道尔顿分子量的超滤器超滤，去除了内毒素和原料中可能存在的大分子物质，提高了溶液的澄清度，进一步降低了灭菌前药液的微生物污染水平，提高了制剂的无菌保证水平，从而降低复合氨基酸注射液不良反应的发生率，7提高了产品的安全性。采用这样的配滤工艺，减少了杂质的引入，防止细菌的产生，提高了氨基酸在溶液状态下的稳定性。上述过滤后的药液采用二次充氮法封装入输液瓶或袋中，具体操作可为先向输液瓶或袋中充入氮气，置换出容器内的氧气，再灌入药液，然后再向容器中通入氮气，置换出容器内剩余部分的氧气，最后封口。上述步骤能够保证容器内没有氧气存在，防止氨基酸溶液因氧化分解而变色，提高了制剂的稳定性。最后的灭菌步骤中，采用的工艺条件是115。C-12rC，热压灭菌15-50分钟，使产品的无菌保证水平达到FO值为1030，提高产品的无菌保证水平，增加产品的安全性。本发明制备方法中没有引入活性炭，避免了使用活性炭后造成将活性炭微粒弓I入制剂中从而对人体产生危害，同时保证了制剂中有效成分的稳定性、成品的安全性。本发明的15种复合氨基酸注射液的制备方法，从氨基酸原料的称量到溶液的封装灭菌，所有的生产步骤都是用高纯氮气置换出氧气，然后在氮气保护下密封，使氨基酸避免氨基酸与氧气发生反应而分解变色；用磷酸与冰醋酸的混合溶液调节PH值在氨基酸的最适PH值5.8-6.0，能够使氨基酸溶液更加稳定，与单用冰醋酸调节PH值比较，能够显著稳定药液在灭菌前后的PH值，且使氨基酸溶液能够耐受高温灭菌；采用冷却除杂精滤法，能够使氨基酸中可能存在的大分子物质和杂质在低温时析出从而通过精滤去除，增加氨基酸溶液的稳定性和安全性；溶液中加入抗氧剂，能够防止氨基酸被氧化而降解，提高产品在贮藏期的稳定性；工艺中采用10000道尔顿分子量的超滤器超滤，去除了内毒素和大分子物质，提高溶液的澄清度，降低灭菌前药液的微生物污染水平；采用115°C-12rC、热压灭菌15-50分钟，使产品的无菌保证水平达到FO值为1030，提高产品的无菌保证水平，增加产品的安全性。实验证明，本发明方法得到的制剂，其微粒及细菌的含量低，贮藏期内产品透光率和溶液的颜色无变化，制剂透光率高、稳定性好；而且本发明方法生产的各批样品质量均符合质量标准，批间稳定，质量可靠；本发明方法工艺简单，便于生产操作和控制，适合大规模生产。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中所使用的15种氨基酸均购自天津天安药业股份有限公司。加速试验是在加速条件下进行，其目的是通过加速药物的化学或物理变化，探讨药物的稳定性，为制剂设计、包装、运输、贮存提供必要的资料。供试品有三批，在温度4(TC土2。C、相对湿度75%±5%的条件下放置6个月，分别于1、2、3、6个月取样进行检测。长期试验是在接近药物的实际贮存条件下进行，其目的是为制定药物的有效期提供依据。供试品三批，在温度《2(TC、相对湿度60%±10%的条件下放置24个月，分别于0、3、6、9、12、18、24个月取样进行检测。实施例l:15种复合氨基酸注射剂的制备(1000ml)一、15种复合氨基酸注射剂的制备按照下表1称量各种氨基酸原料及辅料，分装前后向药用无菌袋内充入氮气置换出袋内氧气，并在氮气保护下封口。表l、注射剂中各氨基酸的用量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>在无菌操作室中，用注射用水淋洗所有生产设备。将各种氨基酸按照上述表中的量进行配制。将注射用水煮沸5分钟，向注射用水中通入氮气5分钟，置换出水中的氧，再向罐内通入氮气置换出罐内的氧，并使配制过程始终在氮气保护下进行，将注射用水温度降至95°C，加入第一组氨基酸(L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液1;将溶液1边搅拌边降温至85°C，加入第二组氨基酸(L-赖氨酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液2;将溶液2边搅拌边降温至65X:，加入第三组氨基酸(L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐)，搅拌至完全溶解，得到溶液3;将得到溶液3边搅拌边降温至50'C，加入第四组氨基酸(L-色氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液4;再向溶液4中加入亚硫酸氢钠，得到溶液I;向溶液I中加入磷酸与冰醋酸的混合液，调节PH至6.0;将上述溶液I温度降低至45'C;然后将溶液I用0.22um滤器进行过滤，得到滤液a;将滤液a用截留分子量为10000道尔顿的超滤器超滤，得到滤液b;用注射用水将滤液b补加至1000ml，再用0.22ym滤器进行过滤，得到滤液c;再将滤液c用0.22um滤器过滤，得到滤液d。对滤液d进行如下指标检验，色氨酸含量、药液PH值、色泽、可见异物、细菌内毒素；检验合格，先向输液瓶或袋中通入氮气置换出瓶或袋内的氧气，然后将滤液d封装于输液瓶或袋中，再向容器内充入氮气置换出氧气，在氮气的保护下封口，再经115。C热压灭菌40分钟，即得到15种复合氨基酸注射剂。二、15种复合氨基酸注射剂的检测取按照步骤一所述方法制备的、不同批次的、保存不同时间的15种复合氨基酸注射剂进行如下检测。注射剂中色氨酸及其它各氨基酸的标示量如表1所示。1、含量测定对注射剂中色氨酸的含量检测，均按照如下方法进行。精密量取注射剂，向其中加入0.lmol/L氢氧化钠溶液稀释制成每lml中约含15yg色氨基酸的溶液，混匀，照分光光度法在280nm的波长处测定吸收度(A)，L-色氨酸d孔美02的吸收系数(E^。》为269(质量标准)，按下式计算。含色氨酸应为标示量的80.0%—120.0%。公式Em(供试品)供试品中色氨酸含量%=-xiooE、(标准)AX稀释倍数E:(供试品^-a式中A:供试品溶液测得的吸收度C:供试品溶液中色氨酸的百分比浓度(g/100ml)(即表l中相应的色氨酸标L:吸收池的光路长度(lcm)(2)供试品中各种氨基酸含量的测量按照下述步骤进行检测色谱条件色谱柱为氨基酸分析ODS柱，柱温25'C，采用二元梯度分析，流速1.0ml/min，检测波长360nm。梯度程序为:_时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)00.86112015153035558585706545<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>流动相A:乙腈-水(1:1)，使用同一容器量取，混合，用0.22um孔径滤膜过滤，超声脱气10-15分钟。流动相B:称取流动相B的固体成分(购自大连依利特分析仪器有限公司)4.lg，加水约950ml，用冰醋酸调PH值至6.4-6.8，加N，N-二甲基甲酰胺10ml，加水至1000ml，摇匀后静置片刻，用0.22pm孔径滤膜过滤，超声脱气10-15分钟。取实验一中制备的液体制剂，用衍生缓冲液稀释100倍(衍生缓冲液购自大连依利特分析仪器有限公司)，作为供试液；用高效液相色谱仪进行分离测定；另取相应的氨基酸对照品(购自大连依利特分析仪器有限公司)，制成相应浓度的对照品溶液，同法测定。分别取上述供试液和对照品各10ul，注入液相色谱仪，按外标法以峰面积计算各种氨基酸的含量。除L-盐酸半胱氨酸外，其余各种氨基酸均应为标示量的80.0%—120.0%。对照品浓度为<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>计算公式如下:供试品中各种氨基酸的含量％=-X100%对照品峰面积平均值X标示量检测结果如表l-l、表l-2、表l-3所示，结果表明，在加速实验和长期试验中，色氨酸的含量符合标准，其它各种氨基酸含量均符合要求。2、检测15种复合氨基酸注射剂中的透光度"透光度"的定义透光度是指给定波长的入射光未被反射和吸收，并穿过玻璃的那部分光。检测方法取注射剂，用紫外分光光度计进行检测，在430nm的波长处测定透光率。按照标准，其透光率(即透光度)应不低于97.0%。实验设2次重复，结果取平均数。检测结果如表l-l和表l-2所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中的"透光率"均大于99%，符合大于97.0%的要求。3、检测15种复合氨基酸注射剂中的"不溶性微粒"的含量"不溶性微粒"是指注射剂中的颗粒状杂质。标准要求为每lml15种复合氨基酸注射剂中含粒径大于10um小于25um的微粒不得超过25粒，每lml15种复合氨基酸注射剂中含粒径大于25ym小于50wm的微粒不得过3粒。检测方法采用光阻法测定。取5ml注射剂作为供试液，用水将取样杯外壁洗净，将5ml供试液置于取样杯中，超声处理(80120W)30秒脱气或静置适当时间脱气后，将取样杯置于取样器上，开启搅拌或手动缓缓转动，使溶液均匀(避免气泡产生)，然后进行检测。实验设3次重复，第一次数据不计，取后续测定结果的平均值，计算每个取样杯所含的微粒数；检测结果如表卜l和表l-2所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中的"不溶性微粒"的含量符合标准要求。4、检测15种复合氨基酸注射剂中的"可见异物"的含量"可见异物"是指注射剂中，目视可以观测到的、粒径大于5(Him的不溶性物质。检测方法采用灯检法检查，取装有本发明注射剂的瓶，擦净外壁，轻轻旋转和翻转瓶，使瓶中的药液中存在的可见异物悬浮(注意不使药液产生气泡)，将瓶置于灯检仪黑色背景下，在100015001x光照强度下轻轻翻转，目检视。实验设3次重复，检测结果如表1-l和表l-2所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中未检出可见异物。综上分析各指标表明，本发明得到的15种复合氨基酸注射剂中微粒、细菌及大分子物质含量均非常低。表l-l15种复合氨基酸注射剂加速试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表1-215种复合氨基酸注射剂长期试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表1-315种复合氨基酸注射剂长期试验氨基酸含量检测结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>L一甲硫氨酸(C^HuNOzS)0.9克0.9L一异亮氨酸(CeH13N02)8.1克8.1L一苯丙氨酸(GHuNOJ0.9克0.9L—赖氨酸醋酸盐(C6H14N202*C2H402)7.74克7.74L一半胱氨酸盐酸盐(C3H7N02S'HCl)0.1克0.1甘氨酸(GH具)8.1克8.1亚硫酸氢钠0.45克0.45在无菌操作室中，用注射用水淋洗所有生产设备。将注射用水煮沸5分钟，向注射用水中通入氮气5分钟，置换出水中的氧，再向罐内通入氮气置换出罐内的氧，并使配制过程始终在氮气保护下进行，将注射用水温度降至95°C，加入第一组氨基酸(L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液1;将溶液1边搅拌边降温至83°C，加入第二组氨基酸(L-赖氮酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液2;将溶液2边搅拌边降温至63r，加入第三组氨基酸(L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐)，搅拌至完全溶解，得到溶液3;将溶液3边搅拌边降温至48'C，加入第四组氨基酸(L-色氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液4;向溶液4中加入亚硫酸氢钠，混匀得到溶液I;向溶液I中加入磷酸与冰醋酸的混合液，调节PH至5.8;将上述溶液I温度降低至43"C;然后将溶液I用0.22um滤器进行过滤，得到滤液a;将滤液a用截留分子量为10000道尔顿的超滤器超滤，得到滤液b;用注射用水将滤液b补足至1000ml，再用0.22ym滤器进行过滤，得到滤液c;再将滤液c用0.22um滤器过滤，得到滤液d。对滤液d进行如下指标检验，色氨酸含量、药液PH值、色泽、可见异物、细菌内毒素；检验合格，先向输液瓶或袋中通入氮气置换出瓶或袋内的氧气，然后将滤液d封装于输液瓶或袋中，再向容器内充入氮气置换出氧气，在氮气的保护下封口，产品经12rc热压灭菌20分钟，即得到15种复合氨基酸注射剂。二、15种复合氨基酸注射剂的检测取按照步骤一所述方法制备的、不同批次的、保存不同时间的15种复合氨基酸注射17剂进行如下检测。注射剂中色氨酸及其它各氨基酸的标示量如表2所示。1、含量测定(1)色氨酸含量方法与实施例l中所述一致。实验设2次重复，结果取平均数。结果如表2-l、2-2、2-3所示。(2)氨基酸含量方法与实施例1中所述一致。实验设2次重复，结果取平均数。结果如表2-1、2-2、2-3所示，表明15种复合氨基酸注射剂的色氨酸含量及其它各种氨基酸含量在加速实验和长期实验中均未发生明显变化，符合要求，说明本发明制得的15种复合氨基酸注射剂稳定。2、检测15种复合氨基酸注射剂的透光度方法与实施例l中所述一致。实验设2次重复，结果取平均数。检测结果如表2-l、2-2、2-3所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中的"透光率"均大于99%，符合要求。3、检测15种复合氨基酸注射剂中的"不溶性微粒"的含量方法与实施例l中所述一致。实验设3次重复，第一次数据不计，取后续测定结果的平均值，计算每个取样杯所含的微粒数；检测结果如表2-l、2-2、2-3所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中的"不溶性微粒"含量少，符合要求。4、检测15种复合氨基酸注射剂中的"可见异物"的含量方法与实施例l中所述一致。实验设3次重复，检测结果如表2-1、2-2、2-3所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中未检出可见异物。综上分析各指标表明，本发明得到的15种复合氨基酸注射剂中微粒、细菌及大分子物质含量均非常低。表2-l15种复合氨基酸注射剂加速试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>实施例3:15种复合氨基酸注射剂的制备(1000ml)一、15种复合氨基酸注射剂的制备按照下表称量各种氨基酸原料及辅料，分装前后向药用无菌袋内充入氮气置换出袋内氧气，并在氮气保护下封口。表3、注射剂中各氨基酸的用量<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>在无菌操作室中，用注射用水淋洗所有生产设备。将注射用水煮沸5分钟，向注射用水中通入氮气5分钟，置换出水中的氧，再向罐内通入氮气置换出罐内的氧，并使配制过程始终在氮气保护下进行，将注射用水温度降至95"C，加入第一组氨基酸(L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液l;将溶液1边搅拌边降温至8(TC，加入第二组氨基酸(L-赖氨酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液2;将溶液2边搅拌边降温至6(TC，加入第三组氨基酸(L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐)，搅拌至完全溶解，得到溶液3;将溶液3边搅拌边降温至45'C，加入第四组氨基酸(L-色氨酸)，搅拌至完全溶解，得到溶液4;向溶液4中加入亚硫酸氢钠，混匀，得到溶液I;向溶液I中加入磷酸与冰醋酸的混合液，调节PH至5.9;将上述溶液I温度降低至4crc;然后将溶液I用0.22um滤器进行过滤，得到滤液a;将滤液a用截留分子量为10000道尔顿的超滤器超滤，得到滤液b;用注射用水将滤液b补足至1000ml，再用0.22um滤器进行过滤，得到滤液c;再将滤液c用0.22um滤器过滤，得到滤液d。对滤液d进行如下指标检验，色氨酸含量、药液PH值、色泽、可见异物、细菌内毒素；检验合格，先向输液瓶或袋中通入氮气置换出瓶或袋内的氧气，然后将滤液d封装于输液瓶或袋中，再向容器内充入氮气置换出氧气，在氮气的保护下封口，再经115'C热压灭菌50分钟，即得到15种复合氨基酸注射剂。二、15种复合氨基酸注射剂的检测取按照步骤一所述方法制备的、不同批次的、保存不同时间的15种复合氨基酸注射剂进行如下检测。注射剂中色氨酸及其它各氨基酸的标示量如表3所示。1、含量测定(1)色氨酸含量方法与实施例1中所述一致。实验设2次重复，结果取平均数。结果如表3-l、3-2、3-3所示。(2)氨基酸含量方法与实施例l中所述一致。实验设2次重复，结果取平均数。结果如表3-l、3-2、3-3所示，表明15种复合氨基酸注射剂的色氨酸含量及其它各种氨基酸含量在长期实验和加速实验中均未发生明显变化，符合要求，说明本发明制得的15种复合氨基酸注射剂稳定。2、检测15种复合氨基酸注射剂中的透光度方法与实施例l中所述一致。实验设2次重复，结果取平均数。检测结果如表3-1、3-2、3-3所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中的"透光率"均大于99%，符合要求。3、检测15种复合氨基酸注射剂中的"不溶性微粒"的含量方法与实施例1中所述一致。实验设3次重复，第一次数据不计，取后续测定结果的平均值，计算每个取样杯所含的微粒数；检测结果如表3-l、3-2、3-3所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中的"不溶性微粒"含量少，符合要求。4、检测15种复合氨基酸注射剂中的"可见异物"的含量方法与实施例l中所述一致。实验设3次重复，检测结果如表3-l、3-2、3-3所示。结果表明，本发明制得的15种复合氨基酸注射剂中未检出可见异物。综上分析各指标表明，本发明得到的15种复合氨基酸注射剂中微粒、细菌及大分子物质含量均非常低。表3-115种复合氨基酸注射剂加速试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>权利要求1、一种制备15种复合氨基酸液体制剂的方法，包括如下步骤将15种复合氨基酸和抗氧剂溶于注射用水中，混匀，得到溶液I，然后将溶液I进行过滤，得到15种复合氨基酸液体制剂；所述15种复合氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸、L-缬氨酸、L-赖氨酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、甘氨酸、L-甲硫氨酸、L-组氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐和L-色氨酸组成。2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述15种复合氨基酸和抗氧剂的质量份数为L—脯氨酸6.4-9.6，L一丝氨酸4.0-6.0，L—丙氨酸6.16-9.24，L一精氨酸4.8-7.2，L一组氨酸1.92-2.88，L一色氨酸0.528-0.792，L—缬氨酸6.72-10.08，L—苏氨酸3.6-5.4，L一亮氨酸8.8-13.2，L一甲硫氨酸0.8-1.2，L—异亮氨酸7.2-10.8，L一苯丙氨酸0.8-1.2，L—赖氨酸醋酸盐6.88-10.32，L—半胱氨酸盐酸盐0-0.2，甘氨酸7.2-10.8，抗氧剂0.2-1.0。3、根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述将15种复合氨基酸和抗氧剂溶于注射用水中的方法为先将15种复合氨基酸溶于注射用水中，再向其中加入抗氧剂。4、根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于所述将15种复合氨基酸溶于注射用水中的方法为将第一组氨基酸溶于90-95。C的注射用水中，混匀，得到溶液l;将所述溶液l的温度降至80-85"C，再向其中加入第二组氨基酸，混匀，得到溶液2;将所述溶液2的温度降至60-65'C，再向其中加入第三组氨基酸，混匀，得到溶液3;将所述溶液3的温度降至45-50°C，再向其中加入第四组氨基酸，混匀，得到溶液4;所述第一组氨基酸由L-精氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸和L-缬氨酸组成；所述第二组氨基酸由L-赖氨酸醋酸盐、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-丙氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸组成；所述第三组氨基酸由L-甲硫氨酸、L-组氨酸和L-半胱氨酸盐酸盐组成；所述第四组氨基酸为L-色氨酸。5、根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述得到溶液I后、所述过滤前，包括先将所述溶液I的pH值调至5.5-6.5的步骤；所述溶液I的pH值是用磷酸和冰醋酸的混合溶液来调节的。6、根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述过滤前，包括将所述溶液I的温度降至大于等于4(TC小于等于45r的步骤。7、根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于所述过滤的方法包括如下步骤将所述溶液I进行0.22um孔径过滤，得到滤液a;再将滤液a进行截留分子量为10000道尔顿的超滤，得到滤液b;将滤液b进行0.22ym孔径过滤，得到滤液c;将滤液c进行0.22nm孔径过滤，得到15种复合氨基酸液体制剂。8、根据权利要求1-7中任一所述的方法，其特征在于所述抗氧剂为亚硫酸氢钠或焦亚硫酸钠。9、根据权利要求1-8中任一所述的方法，其特征在于所述方法中均是先用氮气置换出引入的氧气，然后在通入氮气的条件下进行。10、由权利要求1-9中任一所述方法得到的15种复合氨基酸液体制剂。全文摘要本发明公开了一种15种复合氨基酸液体制剂及其制备方法。该方法包括如下步骤将15种复合氨基酸和抗氧剂溶于注射用水中，混匀，得到溶液I，然后将溶液I进行过滤，得到15种复合氨基酸液体制剂。本发明的15种复合氨基酸注射液的制备方法，采用分组、分温度段溶解及采用高纯氮气置换氧气等制备方法，克服了现有制剂中成品溶液颜色及透光率在贮藏期内变化较大且不良反应因素多的缺点。本发明方法工艺简单，便于生产操作和控制，适合大规模生产。文档编号A61K31/4164GK101627993SQ20091009024公开日2010年1月20日申请日期2009年8月3日优先权日2009年8月3日发明者辉侯,刘伟强,芦莉娜申请人:上海华源药业(宁夏)沙赛制药有限公司