专利名称：苝醌类化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在制备抗真菌药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是茈醌类化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在 制备抗真菌药物中的应用。
背景技术：
据报道茈醌类化合物自然界产量很低，如竹红菌素只产生于两种菌株中竹红菌 Hypocrella bambusae和竹黄菌Shiraia bambusicola。茈醌类化合物是天然光敏色素， 具有良好的光敏抗肿瘤、抗菌、抗病毒等活性，临床作为光敏剂应用于光动力疗法治疗皮肤 肿瘤疾病。近年来研究发现此类化合物具有优良光敏杀肿瘤细胞和抑制艾滋病毒HIV-1 的作用，且可作为新型光活化农药和潜在的光电转换材料。茈醌类化合物Hypocrellin B， Hypocrellin C作为重要的天然光敏色素，在医药、食品和材料领域研究和应用前景十分广
阔，它们的化学结构式分别如下但至今未见它们具有抗真菌活性的报道。
发明内容
本发明对Hypocrellin B或Hypocrellin C提供一种制备抗菌药物的新用途。经体外抗真菌试验，表明化合物Hypocrellin B和或Hypocrellin C均具有很强 的抗真菌活性，因此可用于制备抗真菌药物。本发明为研制新的抗真菌药物提供了先导化合物。
具体实施例方式本发明所用的Hypocrellin B 或 Hypocrellin C 由内生真菌 PeniciIlium chrysogenum的发酵物制备，内生真菌Penicillium chrysogenum的发酵物由由德国不伦 瑞克大学提供。他们从西班牙戈梅拉岛采集蒺藜科植物Fagonia cretica，从该植物上分 离并鉴定得到黄霉菌菌株，然后将黄霉菌于1. 5 %麦芽提取物室温培养28天，得到发酵液 12L，用乙酸乙酯萃取得到浸膏19. 8g。利用他们提供的19. 8g，经正向柱色谱和凝胶柱色谱 纯化后，得到Hypocrellin B和Hypocrellin C单体，化合物的波谱数据如下表1，2 :表1.化合物Hypocrellin B的屮和13C核磁共振波谱数据(CDC13，500MHz/125MHz) 表2.化合物HypocrelIin C 的1H和 13C 核磁共振波谱数据(CDCl3, 500MHz/125MHz) 本发明所用的实验用菌株为
1)白念珠菌(Candida albicans) SC5314 ；
2)新生隐球菌(Cryptococcus neoformans) BLS108 ；
3)红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)；
4) ^ββ · (Aspergillus fumigatus)。
阳性对照药为
1)TBR(Terbinafine)；
2)KCZ(Ketoconazole)；
3)AMB(Amphotericin B)；
4)FCZ(Fluconazole)。
实验方法如下
(1)菌液制备
实验前，用接种圈从4°C保存的SDA培养基上挑取新生隐球菌、白念珠菌等球状菌
少量，接种至ImlYEPD培养液，于35°C，250rpm振荡培养，活化16h，使真菌处于指数生长期后期。取该菌液至ImlYEPD培养液中，用上述方法再次活化，16h后用血细胞计数板计数，以 RPMI1640培养液调整菌液浓度至1 X IO3 5 X IO3个/ml。(2)药液制备受试样品分别用DMSO配成6. 4mg/ml的溶液，-20°C保存，实验前将药液取出置 35°C温箱融化备用。(3)药敏板制备取无菌96孔板，于每排1号孔加RPMI1640 IOOml作空白对照；3 12号孔各加新 鲜配制的菌液IOOml ；2号孔分别加菌液200ml和受试化合物溶液2ml。2 11号孔10级 倍比稀释，使各孔中的药物终浓度依次分别为64,32,16,8,4,2,1,0.5,0. 25和0. 125 μ g/ ml，各孔中DMSO含量均低于；12号孔不含药物，作阴性对照。各药敏板于35°C培养。(4) MIC 值判定四种真菌分别于35°C培养24h和72h后，用酶标分析仪于620nm测各孔OD值。与 阴性对照孔比，以OD值下降80%以上的最低浓度孔中的药物浓度为MIC8tl (真菌生长80% 被抑制时的样品浓度)。当样品的MIC8tl值超过测定浓度范围时，按以下方法进行统计=MIC8tl 值高于最高浓度64μ g/ml时，计为> 64μ g/ml ；MIC8tl值为最低浓度或在最低浓度以下时， 不作区别，均计为< 0. 125 μ g/ml。上述实验均平行操作2到3次，当MIC8tl值能准确重复或只差一个浓度时才被接 受，并以较高浓度作为MIC8tl值；当MIC8tl值相差两个浓度以上时，则需重新实验，直到符合 要求为止。结果见表4:表4 Hypocrellin B 和 C 的抗真菌试验(MIC8tl μ g/ml) 由表4可见，化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C对四种真菌均具有很强的 抑制作用，且Hypocrellin B对真菌抑制作用强于Hypocrellin C。Hypocrellin B对红色 毛癣菌的抑制作用强于阳性对照药AMB和FCZ，因此可用于制备抗真菌药物。
权利要求
苝醌类化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在制备抗真菌药物中的应用，它们的化学结构式分别如下FSA00000168675200011.tif
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，是苝醌类化合物Hypocrellin B或Hypocrellin C在制备抗真菌药物中的应用。它们的化学结构式分别如下。经体外抗真菌试验，表明化合物Hypocrellin B和Hypocrellin C均具有很强的抗真菌活性，因此可用于制备抗真菌药物。本发明为研制新的抗真菌药物提供了先导化合物。
文档编号A61K31/122GK101879150SQ20101020792
公开日2010年11月10日 申请日期2010年6月23日 优先权日2010年6月23日
发明者刘宝姝, 孙鹏, 孟丽媛, 张文, 易杨华, 李玲, 汤华 申请人:中国人民解放军第二军医大学