一种多烯磷脂酰胆碱注射液及其制备方法
【专利摘要】本发明属于药物制剂领域，具体而言涉及一种多烯磷脂酰胆碱注射液及其制备方法。本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液包含多烯磷脂酰胆碱、增溶剂、防腐剂和稳定剂，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂选自氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液与不加入稳定剂的对照相比，高温灭菌和长期存储后稳定性都显著增加，而且处方和工艺都较简单，便于工业化生产。
【专利说明】一种多烯磷脂酰胆碱注射液及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药物制剂领域，具体而言涉及一种稳定的多烯磷脂酰胆碱注射液及其制备方法。
【背景技术】 [0002]多烯磷脂酰胆碱是从大豆磷脂中提取出来的一种高纯度磷脂酰胆碱，含有大量的不饱和脂肪酸，主要为亚油酸(约占70%)、亚麻酸和油酸，由于富含多种不饱和脂肪酸，故称为多烯磷脂酰胆碱。多烯磷脂酰胆碱为人体内不能合成的“必需”磷脂，是一种肝细胞膜保护剂，能治疗多种急慢性肝脏疾病。各种肝病均存在肝细胞膜与细胞线粒体超微结构损伤并伴磷脂丢失以及细胞呼吸与能量合成不足，采取补充外源性磷脂，将不饱和磷脂引入肝细胞膜结构内，替代内源性饱和磷脂，可使膜流动性与跨膜转运系统活性增强，受损的膜结构因之得以恢复。多烯磷脂酰胆碱为目前疗效较为肯定的保肝药物。目前，该药物有胶囊剂和注射液两种剂型。
[0003]多烯磷脂酰胆碱注射液为磷脂类药物，和其他磷脂一样，具有热不稳定的特点，高温灭菌过程以及长期存储过程中都会发生不同程度的磷脂水解，由此引起三大问题:1)主药多烯磷脂酰胆碱的含量下降；2)毒性物质溶血磷脂酰胆碱的生成；3)磷脂的水解导致产品PH值下降。
[0004]实际上，磷脂水解生成溶血磷脂酰胆碱和游离脂肪酸是导致产品pH值下降的主要原因，因此，控制磷脂水解是控制产品PH降低的根本手段。然而，磷脂在高温或长期存储过程中水解的控制是磷脂类药物研发中广泛存在的难题。
[0005]为提高多烯磷脂酰胆碱的稳定性，将注射液剂型改为冻干粉针剂型是一种被普遍认为有效的手段。已有众多研究者进行了尝试，例如以下中国专利或专利申请:CN201010264516.9、 CN200510030631.9、 CN200610009780.1、 CN200510094998.7、CN200510021089.0、CN200510057457.7、CN200510037429.9、CN200610003436.1、CN200510021636.5等。然而，与注射液剂型相比，冻干制剂的生产周期更长、生产成本明显增高，且需要额外加入冻干保护剂；另外，冻干制剂在临床使用前需要用溶媒复溶，操作繁琐，且容易引起药液污染。
[0006]因此，开发一种稳定性好的多烯磷脂酰胆碱注射液，对于降低生产成本、简化生产操作、确保临床用药安全均具较高的实用价值。有研究者致力于多烯磷脂酰胆碱注射液的开发，例如中国专利申请CN200510105183.4公开了一种提高多烯磷脂酰胆碱稳定性的大输液，其由处方量的多烯磷脂酰胆碱、营养剂、维生素、助溶剂、抗氧剂、等渗剂、防腐剂、活性炭和注射用水组成；中国专利CN200710050223.9公开了一种澄明度好、稳定性强的多烯磷脂酰胆碱注射液，其由处方量的多烯磷脂酰胆碱、苯甲醇、甘氨胆酸或胆酸或吐温-80、乙醇或丙二醇或甘油、氢氧化钠或碳酸钠、2，6_ 二叔丁基对甲酚、叔丁基-4-羟基茴香醚和维生素E组成。但上述注射液处方较复杂，带来了诸如成本、安全性和质控等方面的问题，因此仍需研究新的处方来解决多烯磷脂酰胆碱不稳定的技术问题。
【发明内容】
[0007]出乎意料地， 申请人:发现在多烯磷脂酰胆碱注射液中加入氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷时，可显著提高多烯磷脂酰胆碱在高温灭菌和长期储存过程中的稳定性。
[0008]本发明的一个方面在于提供一种多烯磷脂酰胆碱注射液，其包含多烯磷脂酰胆碱、增溶剂、防腐剂和稳定剂，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂选自氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。
[0009]本发明的增溶剂优选为去氧胆酸或去氧胆酸钠，更优选为去氧胆酸。
[0010]本发明的防腐剂优选为苯甲醇。
[0011]本发明的氨基酸包括非蛋白质氨基酸和蛋白质氨基酸。优选的，氨基酸为蛋白质氨基酸，包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸或缬氨酸中的一种或一种以上。更优选地，本发明的氨基酸为甘氨酸或精氨酸或者它们的混合物。
[0012]除上述组分外，本发明的多烯磷脂酰胆碱亦可包括其他药学上可接受的组分。这些组分包括但不限于氯化钠、氢氧化钠、核黄素、核黄素磷酸钠、维生素E、维生素E醋酸酯、维生素C、维生素C棕榈酸酯、BHA (叔丁基对羟基茴香醚，叔丁基-4-羟基茴香醚，丁基羟基茴香醚)、BHT (2，6- 二叔丁基-4-甲基苯酚，2，6- 二叔丁基对甲酚)、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、EDTA(乙二胺四乙酸)、EDTA 二钠和EDTA钙钠。任选地，可加入一种或多种这些组分。
[0013]本发明多烯磷脂酰胆碱注射液的各组分的含量不特别限制，本领域技术人员可根据临床用量、各组分的特性等进行合宜地选择。应该理解，所选择的特定含量是优选的含量，并不旨在说明其他含量不能达到本发明的技术效果。
[0014]在本发明的一个优选的实施方案中，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱220-275份、增溶剂120-200份、防腐剂30-60份、稳定剂1_40份，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂指氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱220-275份、去氧胆酸或去氧胆酸钠120-200份、苯甲醇30-60份、氨基酸或三羟甲基氨基甲烷1-40份。更优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱220-275份、去氧胆酸120-200份、苯甲醇30-60份、甘氨酸或精氨酸或三羟甲基氨基甲烷1-40份。
[0015]在本发明另一个优选实施方案中，本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱220-250份、增溶剂125-175份、防腐剂40-50份、稳定剂10-30份，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂指氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱220-250份、去氧胆酸或去氧胆酸钠125-175份、苯甲醇40-50份、氨基酸或三羟甲基氨基甲烷10-30份。更优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱220-250份、去氧胆酸125-175份、苯甲醇40-50份、 甘氨酸或精氨酸或三羟甲基氨基甲烷10-30份。[0016]在本发明再另一个优选实施方案中，本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱230-245份、增溶剂140-160份、防腐剂45-50份、稳定剂15-25份，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂指氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱230-245份、去氧胆酸或去氧胆酸钠140-160份、苯甲醇45-50份、氨基酸或三羟甲基氨基甲烷15-25份。更优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱230-245份、去氧胆酸140-160份、苯甲醇45-50份、甘氨酸或精氨酸或三羟甲基氨基甲烷15-25份。
[0017]在本发明还一个优选实施方案中，本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱232.5份、增溶剂140-160份、防腐剂45-50份、稳定剂15-25份，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂指氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱232.5份、去氧胆酸或去氧胆酸钠140-160份、苯甲醇45-50份、氨基酸或三羟甲基氨基甲烷15-25份。更优选地，多烯磷脂酰胆碱注射液包含如下组分和含量(重量份):多烯磷脂酰胆碱232.5份、去氧胆酸140-160份、苯甲醇45-50份、甘氨酸或精氨酸或三羟甲基氨基甲烷15-25份。
[0018]在本发明又一实施方案中，本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液除了包含上文所述的组分和含量(重量份)外，还包含如下组分和含量(重量份):氯化钠6-25份，优选8-20份，更优选10-18份；核黄素或核黄素磷酸钠(以核黄素计)0.1-2份，优选0.3-1份，更优选0.35-0.6份；氢氧化钠11-30份，优选11-25份，更优选15-20份。
[0019]本发明的另一个方 面提供一种多烯磷脂酰胆碱注射液的制备方法，其包括以下步骤:
[0020](I)在氮气保护下，向60%~95%配制量的注射用水中加入各组分，搅拌均匀，必要时适当加热；
[0021](2)向步骤⑴溶液中加入0.01%~I % (以重量计)的活性炭吸附15~30min，之后进行脱炭处理；
[0022](3)如有必要，用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至7.5~9.5 ;
[0023](4)加水至配制量；
[0024](5)过滤，于氮气覆盖下灌封，灭菌，视检合格，即得。
[0025]其中步骤(1)中的各组分可同时加入，也可先加入一部分，然后再加入剩余组分。此外，各组分的加入顺序不特别限制，例如可最先加入多烯磷脂酰胆碱，也可最后加入多烯磷脂酰胆碱。部分组分也可在步骤(2)的脱炭后加入。
[0026]其中步骤(5)中也可先灭菌，再在氮气覆盖下灌封，此外步骤(5)中也可不进行灭菌步骤。
[0027]另外，应该理解，该方法中的部分步骤可以互换，例如可按⑴、(3)、⑷、(2)、(5)的顺序进行制备，但并不仅限于此种互换方式，本领域的技术人员可根据具体情况合意地进行选择。
[0028]本发明的多烯磷脂酰胆碱注射液与不加入稳定剂的对照相比，高温灭菌和长期存储后稳定性都显著增加，而且处方和工艺都较简单，便于工业化生产。[0029]本发明不限于本文所述的特定方法学、方案和试剂，因为它们可变化。另外，本文使用的术语是仅用于描述特定实施方案的目的而不旨在限制本发明的范围。除非文中明确指示，否则措辞“包含”和“包括”将解读为开放式的而不是封闭式的
【具体实施方式】
[0030]下面结合具体实施例对本发明进行进一步的描述，然而，本发明中这些和其他实施例仅用于阐明并不限制本发明的范围。同样，本发明不限于本文描述的任何具体优选的实施方案。本领域技术人员应该理解，对本发明技术特征所作的等同替换，或相应的改进，仍属于本发明的保护范围之内。
[0031]实施例1
[0032]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸150g、精氨酸17.8g、氯化钠16g、苯甲醇48.2g、氢氧化钠15g和核黄素磷酸钠0.45g (以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0033]实施例2
[0034]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸160g、精氨酸19.6g、氯化钠18g、苯甲醇50g、氢氧化钠16.3g和核黄素磷酸钠0.60g (以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0035]实施例3·[0036]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸140g、三羟甲基氨基甲烷15g、氯化钠10g、苯甲醇47.6g、氢氧化钠16.Sg和核黄素磷酸钠0.50g (以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0037]实施例4
[0038]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸150g、甘氨酸25g、氯化钠16g、苯甲醇45g、氢氧化钠20g和核黄素磷酸钠0.35g(以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0039]实施例5
[0040]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸140g、甘氨酸18.8g、氯化钠15g、苯甲醇47.3g、氢氧化钠15.5g和核黄素磷酸钠0.35g(以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min,脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。[0041]实施例6
[0042]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸150g、三羟甲基氨基甲烷15.6g、氯化钠16g、苯甲醇48g、氢氧化钠16.3g和核黄素磷酸钠0.45g(以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0043]实施例7
[0044]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱220g、去氧胆酸120g、精氨酸lg、氯化钠6g、苯甲醇30g、氢氧化钠IIg和核黄素磷酸钠0.1g (以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min,脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0045]实施例8
[0046]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱245g、去氧胆酸160g、三羟甲基氨基甲烷25g、氯化钠18g、苯甲醇50g、氢氧化钠20g和核黄素磷酸钠0.60g(以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1 %活性炭吸附30min,脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0047]实施例9:
[0048]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱275g、去氧胆酸200g、精氨酸40g、氯化钠25g、苯甲醇60g、氢氧化钠30g和核黄素磷酸钠2.0g (以核黄素计)，搅`拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0049]对照实施例
[0050]以制备5L多烯磷脂酰胆碱注射液为例，在氮气保护下，向70%配制量的注射用水中加入多烯磷脂酰胆碱232.5g、去氧胆酸150g、氯化钠16g、苯甲醇48.2g、氢氧化钠15g和核黄素磷酸钠0.45g(以核黄素计)，搅拌均匀；加入0.1%活性炭吸附30min，脱炭；用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节PH至9.0 ;加水至配制量；过滤，于氮气覆盖下分装灌封，121°C灭菌12min，视检合格，即得。
[0051]实施例10多烯磷脂酰胆碱注射液的高温加热稳定性
[0052]按照实施例1-9以及对照实施例中的处方和方法，制备多烯磷脂酰胆碱注射液10批。将每批注射液在121°C灭菌12min，比较灭菌前后多烯磷脂酰胆碱(PPC)含量、主要杂质溶血磷脂酰胆碱(LPC)含量和溶液pH值的变化，其中PPC含量和LPC含量均按PPC标示量 46.5mg/mL 为 100% 计算。
[0053]
【权利要求】
1.一种多烯磷脂酰胆碱注射液，其包含多烯磷脂酰胆碱、增溶剂、防腐剂和稳定剂，其中所述增溶剂选自去氧胆酸、去氧胆酸钠、去氢胆酸、去氢胆酸钠、胆酸或胆酸钠，其中所述稳定剂选自氨基酸或其钠盐或者三羟甲基氨基甲烷。
2.权利要求1的多烯磷脂酰胆碱注射液，其包含如下组分和含量:多烯磷脂酰胆碱220-275份、增溶剂120-200份、防腐剂30-60份、稳定剂1_40份，其中含量是重量份。
3.权利要求2的多烯磷脂酰胆碱注射液，其包括如下组分和含量:多烯磷脂酰胆碱220-250份、增溶剂125-175份、防腐剂40-50份、稳定剂10-30份，其中含量是重量份。
4.权利要求3的多烯磷脂酰胆碱注射液，其包括如下组分和含量:多烯磷脂酰胆碱230-245份、增溶剂140-160份、防腐剂45-50份、稳定剂15-25份，其中含量是重量份。
5.权利要求4的多烯磷脂酰胆碱注射液，其包括如下组分和含量:多烯磷脂酰胆碱232.5份、增溶剂140-160份、防腐剂45-50份、稳定剂15-25份，其中含量是重量份。
6.权利要求1-5中任一项的多烯磷脂酰胆碱注射液，其还包括如下组分和含量:氯化钠6-25份、核黄素或核黄素磷酸钠0.1-2份、氢氧化钠11-30份,其中含量是重量份,其中核黄素磷酸钠含量以核黄素计。
7.权利要求1-6中任一项的多烯磷脂酰胆碱注射液，其中所述增溶剂选自去氧胆酸或去氧胆酸钠，其中所述稳定剂选自蛋白质氨基酸或三羟甲基氨基甲烷，其中所述防腐剂选自苯甲醇。
8.权利要求7的多烯磷脂酰胆碱注射液，其中所述增溶剂是去氧胆酸。
9.权利要求7的多烯磷脂酰胆碱注射液，其中所述蛋白质氨基酸选自甘氨酸或精氨酸或者它们的混合物。·
10.一种制备权利要求1-9中任一项的多烯磷脂酰胆碱注射液的方法，其包括以下步骤: (1)在氮气保护下，向60%~95%配制量的注射用水中加入各组分，搅拌均匀，必要时适当加热； (2)向步骤(1)溶液中加入0.01%~1%的活性炭吸附15~30min，之后进行脱炭处理，其中活性炭含量是重量份； (3)如有必要，用氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液调节pH至7.5~9.5 ; (4)加水至配制量； (5)过滤，于氮气覆盖下灌封，灭菌，视检合格，即得。
【文档编号】A61K9/08GK103705446SQ201210391320
【公开日】2014年4月9日 申请日期:2012年10月8日 优先权日:2012年10月8日
【发明者】程艳菊, 张勇 申请人:正大天晴药业集团股份有限公司