干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个siRNA及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个siRNA及其应用，stealth?siRNA-69，stealth?siRNA-294，stealth?siRNA-319是以EV712A蛋白酶基因为靶序列化学合成的三个siRNA，其可以与EV71病毒2A蛋白酶基因区域有效的互补结合，将病毒核酸降解，从而达到抑制病毒复制扩增的目的。以siRNA为基础的RNAi因其基因沉默的高度特异性和高效性，为病毒感染类疾病的临床治疗开辟了新的途径。
【专利说明】干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个s iRNA及其应用
【技术领域】[0001]本发明涉及的是干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个siRNA及其应用，包括stealth siRNA_69stealth siRNA_294stealth siRNA-319。
【背景技术】
[0002]EV71病毒属于微小RNA病毒科肠道病毒A组,病毒基因组为单股正链RNA,大小约7500bp，病毒衣壳为二十面体立体对称球形结构，直径约为24-30nm，无包膜和突出。EV71感染主要引起手足口病，多发生于学龄前儿童，其临床症状主要表现为发热，手、足、口腔黏膜等部位出现疱疹，重症病例在发病1-5天后出现脑膜炎、脑炎、脑脊髓炎、肺水肿和循环障碍等症状，甚至死亡。1957年，加拿大首次报告手足口病，之后在欧洲、美洲和亚洲多个地区相继发生大流行。在我国，手足口病早有流行。1981年，上海首次报告了手足口病，2008年3月，安徽省阜阳市发生了较大规模的疫情，感染人数达176000人，并有23例死亡，随即在全国其他地区也出现了手足口病的疫情，引起了社会的恐慌。目前，尚无有效抵抗EV71的抗病毒药物，所以，寻找一种潜在有效的抗病毒方法是十分必要的。
[0003]RNA干扰是一种分子生物学上由双链RNA诱发的基因沉默现象，其机制是通过阻碍特定基因的翻译或转录来抑制基因表达。当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默。研究中导入的双链RNA分子为具有基因沉默功能的大小约21-25核苷酸的双链小RNA分子(称为siRNA)，由RNAaseIII家族中对双链RNA具有特异性的酶Dicer加工而成。
[0004]近些年已经报道过以EV71基因的其他区域比如vpl，vp2，5’UTR，3’UTR，2C, 3Cproand3Dpol为靶序列化学合成siRNR治疗病毒的文章，但还没有以2A蛋白酶基因作为抑制病毒复制的靶标，所以本发明的目的是探讨以EV712A蛋白酶基因为靶序列化学合成的三个siRNA是否具有潜在的抗病毒作用。
[0005]因此，现有技术存在缺陷，需要改进。
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足提供干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个siRNA及其应用。
[0007]本发明的技术方案如下:
[0008]干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个siRNA，包括如下表所示的三个siRNA:stealth siRNA-69、stealth siRNA-294、stealth siRNA-319:
[0009]
【权利要求】
1.干扰EV71病毒2A蛋白酶基因的三个SiRNA，其特征在于，包括如下表所示的三个siRNA:stealth siRNA-69、stealth siRNA-294、stealth siRNA-319:
2.权利要求1所述的三个siRNA的应用，其与EV71病毒2A蛋白酶基因区域有效的互补结合，将病毒核酸降解，从而达到抑制病毒复制扩增的目的。
【文档编号】A61K48/00GK103642808SQ201310646161
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年12月6日 优先权日:2013年12月6日
【发明者】陈建国, 刘海冰, 王胜军, 孔枕枕, 赵培培 申请人:陈建国, 刘海冰