一种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，该仁青常觉由珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等一百余味组成。通过药理实验发现，仁青常觉能显著延长白血病模型小鼠的生存时间达3倍以上，使模型小鼠T细胞亚群比例恢复正常，IL-2，IL-6，IFN-γ等细胞因子分泌水平回升，恢复肿瘤导致的免疫抑制。仁青常觉还能提高P388白血病小鼠化疗后自然杀伤细胞（NKC）、白介素-2(IL-2)的活性，使化疗导致的免疫抑制逐渐恢复，从而对白血病的治疗及免疫功能重建、防治肿瘤化疗所致的免疫抑制。
【专利说明】一种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，属于医药领域。
【背景技术】
[0002]白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他组织和器官，同时正常造血受抑制。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛。据报道，我国各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位。由于白血病细胞源于血液系统，又具有肿瘤细胞的特点，所以人们习惯上称为血癌。白血病的分布是世界性的，占癌症总发病率的5%左右,发病以儿童和青年居多。我国白血病患者约为3-4人/10万人口，男性多于女性。在我国各年龄组恶性肿瘤的死亡率中白血病占第6位(男性)和第8位(女性)，在儿童及35岁以下的人群中则占第I位。
[0003]仁青常觉系藏族验方，成方于公元八世纪，最早是藏王、班禅、达赖以及达官贵人专用药，历经一千多年的应用历史，现如今，仁青常觉收载于《中国药典》(2010版)一部中。仁青常觉由珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等一百余味药组成，功能为清热解毒、调和滋补。用于“隆、赤巴、培根”各病，陈旧性胃肠炎、溃疡，“木布”病，萎缩性胃炎，各种中毒症；梅毒，麻风，陈旧热病，炭疽，疖痛，干黄水，化脓等。现代药效学研究结果表明，本品具有抗炎、抑制溃疡形成、促进溃疡愈合等作用。急性毒性试验，长期毒性试验结果表明，本品无明显毒性。临床应用结果表明，本品治疗消化系统疾病，如各种急慢性胃炎、慢性萎缩性胃炎、消化性溃疡、肝硬化、化疗后消化道不良反应等方面显示良好疗效，并且有良好的保健作用，是藏医保健药品之一。
[0004]仁青常觉的功能 主治、文献、专利等方面均未发现其可用于治疗白血病的研究。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用。
[0006]本发明是通过如下技术方案实现的:
[0007]—种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，所述仁青常觉为《中华人名共和国药典》2010年版第一部573页收载品种仁青常觉。
[0008]本发明的仁青常觉制剂，是按仁青常觉原料药配方，采用30-80%浓度乙醇提取获得的提取物制成的制剂。
[0009]本发明的仁青常觉制剂，是按仁青常觉原料药配方，采用水提取获得提取物制成的制剂。
[0010]仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，尤其是仁青常觉及其制剂在制备通过提高NKC、IL-2、IL-6、IFN-y活性治疗白血病药物中的应用。
[0011]所述的应用为仁青常觉及其制剂与化学药或中药或天然药物在制备治疗白血病药物中的应用。
[0012]所述的应用为仁青常觉及其制剂与化学药或中药或天然药物组成的药物在制备通过提高NKC、IL-2、IL-6、IFN-Y活性治疗白血病药物中的应用。
[0013]本发明的仁青常觉制剂，其特征在于，按仁青常觉原料药配方，制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或口服液体制剂。
[0014]为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型是加入药学上可接受的辅料，例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂等，填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、鹿糖等，崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等，润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等，粘合剂包括淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等，甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等，矫味剂包括:甜味剂及各种香精，防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等。
[0015]有益效果:在仁青常觉的应用治疗领域，人们熟知其清热解毒、调和滋补的作用，熟知其用于“隆、赤巴、培根”各病，陈旧性胃肠炎、溃疡，“木布”病，萎缩性胃炎，各种中毒症；梅毒，麻风，陈旧热病，炭疽，疖痛，干黄水，化脓等的治疗。
[0016]本发明克服了上述应用方面的技术偏见，通过药理实验发现，仁青常觉能显著延长白血病模型小鼠的生存时间达3倍以上，使模型小鼠T细胞亚群比例恢复正常，IL-2，IL-6，IFN-Y等细胞因子分泌水平回升，恢复肿瘤导致的免疫抑制。仁青常觉还能提高P388白血病小鼠化疗后自然杀伤细胞(NKC)、白介素-2(IL-2)的活性，使化疗导致的免疫抑制逐渐恢复，从而对白血病的治疗及免疫功能重建、对于防治肿瘤化疗所致的免疫抑制具有积极的意义。`【具体实施方式】
[0017]下述实施例用于举例说明本发明仁青常觉及其制剂的制备，但其不能对本发明的范围构成任何限制。
[0018]实施例1仁青常觉的制备
[0019]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方:
[0020]取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味加工制成丸剂，每丸重lg。
[0021]上述方法制备的仁青常觉为市售的仁青常觉(金诃藏药股份有限公司生产，国药准字 Z63020078)。
[0022]实施例2仁青常觉片的制备
[0023]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方:
[0024]取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味加工制成片剂。
[0025]实施例3仁青常觉胶囊的制备[0026]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方:
[0027]取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味加工制成胶囊剂。
[0028]实施例4仁青常觉颗粒的制备
[0029]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方:
[0030]取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味加工制成颗粒剂。
[0031]实施例5仁青常觉片剂
[0032]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方，取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味，加30%浓度乙醇提取，回收乙醇，浓缩干燥，提取物粉碎成细粉，按照常规制剂方法制成仁青常觉片剂。
[0033]实施例6仁青常觉颗粒剂
[0034]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方，取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味，加80%浓度乙醇提取，回收乙醇，浓缩干燥，提取物粉碎成细粉，按照常规 制剂方法制得仁青常觉颗粒，分装即得。
[0035]实施例7仁青常觉胶囊剂
[0036]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方，取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味，加水提取，滤过，浓缩干燥，提取物粉碎成细粉，按照常规制剂方法制成仁青常觉胶囊。
[0037]实施例8仁青常觉口服液
[0038]按《中国药典》(2010版)一部收载的仁青常觉配方，取珍珠、朱砂、檀香、降香、沉香、诃子、牛黄、人工麝香、西红花等药味，加水提取，滤过，浓缩，按照常规制剂方法制成仁青常觉口服液。
[0039]实施例9仁青常觉片剂
[0040]取仁青常觉(国药准字Z63020078，生产批号:20120922)，加30%浓度乙醇提取，回收乙醇，浓缩干燥，提取物粉碎成细粉，按照常规制剂方法制成仁青常觉片剂。
[0041]实施例10仁青常觉颗粒剂
[0042]取仁青常觉(国药准字Z63020078，生产批号:20120922)，加80%浓度乙醇提取，回收乙醇，浓缩干燥，提取物粉碎成细粉，按照常规制剂方法制得仁青常觉颗粒，分装即得。
[0043]实施例11仁青常觉胶囊剂
[0044]取仁青常觉(国药准字Z63020078，生产批号:20120922)，加水提取，滤过，浓缩干燥，提取物粉碎成细粉，按照常规制剂方法制成仁青常觉胶囊。
[0045]实施例12仁青常觉口服液
[0046]取仁青常觉(国药准字Z63020078，生产批号:20120922)，加水提取，滤过，浓缩，按照常规制剂方法制成口服液。
[0047]下面通过实验例来说明仁青常觉及其制剂在治疗白血病方面的药效。
[0048]实验例1:仁青常觉对L615白血病小鼠的药效试验
[0049]1、造模方法:在无菌条件下取L615白血病小鼠脾制成25%生理盐水细胞悬液，给成年L615小鼠皮下接种，结果均发生白血病，用发病小鼠脾瘤细胞在同系小鼠连续移植，建立稳定的L615白血病模型。
[0050]L615白血病细胞株的建立:去L615白血病小鼠的脾，在Hanks液内将脾剪碎，使白血病细胞游离出来，通过离心收集游离细胞，然后用RPMI1640培养液(含10%小牛血清)稀释成8*10_6/ml的细胞液，在37°C下培养。培养20d发现培养物中有贴壁的棱形细胞，其周围有增殖的圆形细胞小岛。将两种形态不同的细胞分开培养时，梭形细胞可以正常贴壁生长，而悬浮细胞生长缓慢；再将两种细胞重新混合培养，两种细胞生长旺盛，45d后，将悬浮生长的圆形细胞再次单独培养，一直传到12代，细胞生长良好，从而建立此细胞株。[0051]2、仁青常觉治疗白血病药效试验。
[0052]材料:昆明种小鼠(山东省实验动物中心)。仁青常觉(金诃藏药股份有限公司，批号:20110809)，仁青常觉-1、仁青常觉-2、仁青常觉-3 (分别为按本发明实施例9、实施例10、实施例11方法制备得到的仁青常觉片、仁青常觉颗粒、仁青常觉胶囊，批号分别为:20120920、20120921、20120922)，环磷酰胺(江苏恒瑞医药股份有限公司)，标准重组人白介素-2 (北京双鹭药业股份有限公司)，Yackl及IL-2依赖细胞株CTLL (中国科学院上海生命科学院细胞资源中心)，RPMI1640细胞培养液及胎牛血清(华美生物工程公司)；四甲基偶氮唑盐(MTT)，十二烷基磺酸钠及刀豆球蛋白，二甲基甲酰胺为(Sigma公司产品)；加样器，CO2培养箱，ELX-800酶标仪(美国Bio-Tek公司);96孔平底细胞培养板，Epics流式细胞仪(美国Beckman公司)。
[0053]方法:按上述方法造模。实验分组第一组为正常对照组，20只小鼠，常规饲养Iw后，腹腔注射生理盐水0.2ml/d，生理盐水灌胃0.3ml,上、下午各I次。第2组为模型组，常规饲养Iw后，接种L615白血病细胞，接种后处理同正常对照组。第3组为西药组，20只常规饲养一周后，接种L615白血病细胞，接种后第3天开始ip环磷酰胺，200mg/kg，l次/d。第4组-第7组分别为仁青常觉组、仁青常觉-1组、仁青常觉-2组、仁青常觉-3组，分别取20只常规饲养Id后，接种L615白血病细胞，接种后第3天分别给予仁青常觉、仁青常觉-1、仁青常觉_2、仁青常觉-3灌胃，各0.3ml (含药量折算至药材均为300mg)，上、下午各I次。以上各组动物每组取10只于第5天处死，取脾脏进行相关免疫指标检测，余下各动物进行生存期观察。
[0054]观察指标:①生存期观察。②T细胞亚群测定。③IL-2，IL-6，IFN- Y活性测定。
[0055]统计学方法:数据以x 土S:表示，采用Microsoft Excel进行t检验。
[0056]结果:
[0057]生存期:仁青常觉各组生存期较模型组和西药组明显延长，统计学有显著差异P〈0.01，见表 I。
[0058]表1各实验组生存期比较
[0059]
【权利要求】
1.一种藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于，所述的藏药仁青常觉制剂是按仁青常觉原料药配方，采用30-80%浓度乙醇提取获得的提取物制成的制剂。
3.根据权利要求1所述的藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于，所述的藏药仁青常觉制剂是按仁青常觉原料药配方，采用水提取获得提取物制成的制剂。
4.根据权利要求1所述的藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于，所述的应用为藏药仁青常觉及其制剂在制备提高NKC、IL-2、IL-6、IFN-Y活性治疗白血病的药物中的应用。
5.根据权利要求1所述的藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于，所述的应用为仁青常觉及其制剂与化学药或中药或天然药物在制备治疗白血病药物中的应用。
6.根据权利要求1~5任一项所述的藏药仁青常觉及其制剂在制备治疗白血病药物中的应用，其特征在于，所述的藏药仁青常觉制剂是按仁青常觉原料药配方，加入药学上可接受的辅料 ，按常规方法制备成的胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或口服液体制剂。
【文档编号】A61K36/88GK103623143SQ201310664069
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年12月9日 优先权日:2013年12月9日
【发明者】张义智, 邵成雷, 单玉刚, 马宏伟, 刘玉芹 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司