9-硝基喜树碱-环糊精包合物及其制备方法和含有该包合物的药物组合物的制作方法
【专利摘要】针对现有技术中9-硝基喜树碱溶解度差、生物利用度低的技术问题，本发明提供9-NC-环糊精包合物，其含有分子摩尔比为1:30~200的活性成分9-NC和包合剂β-CD或其衍生物；具体制备方法为：将9-NC丙酮饱和溶液滴加到CD溶液中，并在25~60℃下磁力搅拌至丙酮完全挥发；所得混悬液离心后取上清液进行冷冻干燥得9-NC-CD包合物粉末。同时本发明提供含有上述9-NC-CD包合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。本发明提供的包合物相比于9-NC游离药物溶解度增加300倍以上；同时包合物表现出更高的内酯稳定性与体外缓释效果；用X射线衍射分析与热分析法表明包合物中9-NC已完全被包合，进一步验证工艺的可靠性。由此，包合物可被开发成为液体制剂，也可改善9-NC固体制剂的体内吸收，提高生物利用度。
【专利说明】9-硝基喜树碱-环糊精包合物及其制备方法和含有该包合物的药物组合物
【技术领域】
[0001]本发明属于西药药剂领域，具体涉及9-硝基喜树碱-环糊精包台物及其制备方法和含有该包台物的药物组合物。
【背景技术】
[0002]9-硝基喜树喊(9-nitrocamptothecin, 9-NC)又名 rubitecan,是美国 Supergen公司研制的新型喜树碱衍生物，目前尚处于临床试验阶段，9-NC的临床前药理学研究显示该药是非常理想的抗肿瘤药物。喜树碱类药物在人和动物体内都存在着内酯型和羧酸盐型这两种形式的平衡(如图1)，而内酯型是公认的具有抗肿瘤效果的主要活性形式，羧酸盐型是无效形式[1]。
[0003]但是9-NC的难溶性、不稳定性、低生物利用度限制了其液体制剂如注射剂的开发，也是妨碍其效果的主要原因；静注以后，由于其难溶性会导致9-NC有效成分在血液中很快地降解。为提高9-NC的溶解度和生物利用度，有研究者将其制备成脂质体、有将9-NC载入纳米粒中、也有用ΗΡ-β -⑶为包台材料冷冻干燥法制备9-NC包台物。
[0004]其中，包台物是利用包台材料将药物分子容纳在自身的空穴中形成的分子囊。β_环糊精为常用的包台材料，它是由7个葡萄糖单元结合形成的截锥体的环状化台物，具有内腔疏水外壁亲水的特性。药物经包台后可以提高其溶解度、稳定性，提高药物的生物利用度，降低药物的刺激性与毒副作用。包台物可作为制剂的中间产物进一步制成胶囊、颗粒剂、片剂、软膏、栓剂、 注射剂、□服液等各种剂型。
[0005]蒋晔，沙先谊，张伟等采用冷冻干燥法制备了 9-硝基喜树碱羟丙基_β -环糊精冻干粉针剂(蒋晔，沙先谊，张伟等.9-硝基喜树碱羟丙基-环糊精冻干粉针剂的研究[C].2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集.2010.1-8)，其在水中溶解度达到
0.52mg.ml、
【发明内容】
[0006]针对现有制剂技术中无法解决9-NC溶解度差、生物利用度低的技术问题，本发明提供9-硝基喜树碱-环糊精包台物，目的在于提高9-NC的水溶性，使其能被开发成为液体制剂，从而适应临床上的不同需要；同时也可改善9-NC固体制剂的体内吸收，提高其生物利用度。
[0007]本发明提供的9-硝基喜树碱-环糊精包台物，含有活性成分9-硝基喜树碱和包台剂环糊精或者其衍生物，其中活性成分9-硝基喜树碱和包台剂β-环糊精或者其衍生物的分子摩尔比为1:30~200 ;其中，包台剂β -环糊精的衍生物选自羟丙基-环糊精、羟乙基-β -环糊精。2，6- 二甲基-β -环糊精、2，3，6-三甲基-β -环糊精、2，6- 二乙基-β -环糊精，2，3，6-三乙基-β -环糊精或麦芽糖基-β -环糊精。
[0008]作为本发明的进一步改进，活性成分9-硝基喜树碱和包台剂β -环糊精或者其衍生物的分子摩尔比为1:120~180。
[0009]作为本发明的更进一步改进，活性成分9-硝基喜树碱和包台剂β -环糊精或者其衍生物的分子摩尔比为1:120。
[0010]作为本发明的另一种改进，包台剂β -环糊精的衍生物是羟丙基-β -环糊精。
[0011]本发明还提供上述9-硝基喜树碱-环糊精包台物的制备方法，包括如下步骤:
[0012]I)将9-硝基喜树碱制成丙酮饱和溶液；
[0013]2)按照相应分子摩尔配比称取环糊精或其衍生物，并溶于水中制成环糊精溶液；
[0014]3)将9-硝基喜树碱丙酮饱和溶液缓慢逐滴滴加到环糊精溶液中，并在25~60°C下磁力搅拌至丙酮完全挥发得混悬液；
[0015]4)将制得的混悬液离心，取上清液进行冷冻干燥得9-硝基喜树碱-环糊精包台物粉末。
[0016]作为本制备方法的进一步改进，步骤(2)中所述环糊精溶液的体积为9-硝基喜树碱丙酮饱和溶液的40%~60%。
[0017]作为本制备方法的更进一步改进，上述包台剂环糊精的衍生物是羟丙基-β-环糊精，且其浓度为0507mmol/mL(即700mg/mL);步骤(3)中所述磁力搅拌温度为600C ;步骤(3)总经历时间 ，即包台时间为2h。
[0018]本发明同时保护用上述制备方法所制备所得的9-硝基喜树碱-环糊精包台物。
[0019]最后，本发明提供一种药物组合物，其含有上述9-硝基喜树碱-环糊精包台物和药学上可接受的赋形剂。
[0020]有益效果
[0021 ] 与现有技术相比，本发明所制备的9-NC- β -⑶包台物，使得9-NC在水中的溶解度大大提高:经测定，本发明提供的9-NC-HP-13 -CD包台物25°C条件下9-NC的溶解度高达
3.8455mg/mL,是现有文献报道中9-NC溶解度最高；为蒋晔，沙先谊，张伟等公开的包台物的溶解度0.52mg/mL (蒋晔，沙先谊，张伟等.9-硝基喜树碱羟丙基-β -环糊精冻干粉针剂的研究.)的7.395倍，更比游离药物的溶解度0.0127mg/mL增加了 300倍以上，效果意想不到的显著。本发明提供的包台物使9-NC溶解度大大提高，改善了单一成分的9-NC不溶于水的性质，提高9-NC的溶出度，从而提高生物利用度，其浓度完全符合临床注射用药的需求。
[0022]同时通过包台物的形式也显著提高了 9-NC的内酯稳定性，也即经环糊精包台具有稳定脂质体中9-NC内酯型的作用，从而使得两种形式之间的平衡向验证临床有效的形式内酯型比例提高的方向移动；同时本发明提供的9-NC环糊精包台物相较于游离9-NC药物具有显著的缓释效果，由此改善储存条件，延长储存有效期，更有利于其在制药中的后序操作，便于工业化大生产。
[0023]这可能是因为包合作用主要来源于范德华力，当9-NC分子嵌入β_环糊精或者其衍生物的内腔疏水而上下两端开口处亲水的分子空穴时，9-NC分子与β-环糊精或者其衍生物包台，不影响β_环糊精或者其衍生物的分子骨架结构，这就切断了活性分子与周围环境的联系，起到了保护和稳定的作用。
【专利附图】
【附图说明】[0024]图19-硝基喜树碱内酯型(左)和羧酸盐型(右)平衡
[0025]图29-NC:ΗΡ- β -⑶分子摩尔比与包台物中9-NC药物含量关系图(η=3)
[0026]图3X-射线衍射结果
[0027]图4DSC结果图
[0028]图59-NC包台物中药物内酯型比例的测定，其中A-总浓度的谱图，B-内酯型浓度的谱图，色谱图中峰1-内酯型谱图，峰2-羧酸盐型谱图。
[0029]图69-NC包台物与游离药物内酯稳定性的比较(η = 3)
[0030]图79-NC包台物与游离药物体外释放度的比较(η = 3)
【具体实施方式】
[0031]下面结合附图和实施例来进一步说明本发明，其中部分制备条件仅是作为典型情况的说明，并非是对本发明的限定。
[0032]实施例19-NC与羟丙基-β -环糊精(HP- β -CD)的相溶解度曲线实验
[0033]将不同量的HP-β -⑶溶解于3mLPBS(pH5.0)中，配制成一系列浓度的HP-β -⑶溶液，置于具塞试管中，每管中加入过量9-NC，分别在25°C、37°C >60°C恒温水浴振荡48h，取混悬液，12000rpm离心lOmin，取上清液，测定吸光度值，计算浓度。以9-NC的浓度(mmol/L)为纵坐标，HP-β-⑶的浓度(mmol/L)为横坐标，绘制25°C、37°C、60°C下的平衡相溶解度曲线，结果见表1。
[0034]表1不同温度下的相溶解度曲线
[0035]Table I Phase solubility curveunder different temperature
【权利要求】
1.9-硝基喜树碱-环糊精包合物，其特征在于:含有活性成分9-硝基喜树碱和包合剂环糊精或者其衍生物，其中活性成分9-硝基喜树碱和包合剂β-环糊精或者其衍生物的分子摩尔比为1:30-200，其中包合剂β-环糊精的衍生物是选自羟丙基-β-环糊精、羟乙基-β -环糊精、2，6- 二甲基-β -环糊精、2，3，6-三甲基-β -环糊精、2，6- 二乙基-β -环糊精，2，3，6-三乙基-β -环糊精或麦芽糖基-β -环糊精。
2.如权利要求1所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物，其特征在于:所述活性成分9-硝基喜树碱和包合剂β -环糊精或者其衍生物的分子摩尔比为1:12(Tl80。
3.如权利要求1所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物，其特征在于:所述活性成分9-硝基喜树碱和包合剂β -环糊精或者其衍生物的分子摩尔比为1:120。
4.如权利要求f3中任一项所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物，其特征在于:所述包合剂β -环糊精的衍生物是羟丙基-环糊精。
5.如权利要求f3中任一项所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物，其特征在于采用饱和水溶液法制备，具体步骤如下: (1)将9-硝基喜树碱制成丙酮饱和溶液； (2)按照相应分子摩尔配比称取环糊精或者其衍生物，并溶于水中制成环糊精溶液； (3)将9-硝基喜树碱丙酮饱和溶液缓慢逐滴滴加到环糊精溶液中，并在25飞(TC下磁力搅拌至丙酮完全挥发得混悬液； (4)将制得的混悬液离心，取上清液进行冷冻干燥得9-硝基喜树碱-环糊精包合物粉末。
6.如权利要求4所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物，其特征在于采用饱和水溶液法制备，具体步骤如下: (1)将9-硝基喜树碱制成丙酮饱和溶液； (2)按照相应分子摩尔配比称取环糊精或者其衍生物，并溶于水中制成环糊精溶液； (3)将9-硝基喜树碱丙酮饱和溶液缓慢逐滴滴加到环糊精溶液中，并在25飞(TC下磁力搅拌至丙酮完全挥发得混悬液； (4)将制得的混悬液离心，取上清液进行冷冻干燥得9-硝基喜树碱-环糊。
7.一种制备权利要求f 6中任一项所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物的方法，包括如下步骤: (1)将9-硝基喜树碱制成丙酮饱和溶液； (2)按照相应分子摩尔配比称取环糊精或者其衍生物，并溶于水中制成环糊精溶液； (3)将9-硝基喜树碱丙酮饱和溶液缓慢逐滴滴加到环糊精溶液中，并在25飞(TC下磁力搅拌至丙酮完全挥发得混悬液； (4)将制得的混悬液离心，取上清液进行冷冻干燥得9-硝基喜树碱-环糊精包合物粉末。
8.如权利要求7所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物的制备方法，其特征在于:步骤(2)中所述环糊精溶液的体积为9-硝基喜树碱丙酮饱和溶液的40%飞0%。
9.如权利要求7或8所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物的制备方法，其特征在于:所述包合剂β -环糊精的衍生物是羟丙基-环糊精，且其浓度为0.507mmol/mL ;步骤(3)中所述磁力搅拌温度为60°C ;步骤(3)总经历时间，即包合时间为2h。
10.一种药物组合物，其特征在于: 含有如权利要求1飞中任一项所述9-硝基喜树碱-环糊精包合物和药学上可接受的赋形剂。
【文档编号】A61K47/48GK103611166SQ201310673711
【公开日】2014年3月5日 申请日期:2013年12月11日 优先权日:2013年12月11日
【发明者】顾薇, 陈军, 杨希雄, 陆姗姗, 严旭 申请人:南京中医药大学