Tnf受体相关因子5（traf5）在治疗脂肪肝和ⅱ型糖尿病中的功能和应用的制作方法

Tnf受体相关因子5（traf5）在治疗脂肪肝和ⅱ型糖尿病中的功能和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了TNF受体相关因子5（TRAF5）在治疗脂肪肝和Ⅱ型糖尿病中的功能和应用。通过高脂饮食诱导的模型研究TRAF5基因的功能，发现HFD饲养的TRAF5基因敲除小鼠的体重、空腹血糖水平均低于WT小鼠；通过腹腔注射葡萄糖耐量实验发现TRAF5基因敲除小鼠对葡萄糖耐受能力明显增强；小鼠肝脏大体外观、肝脏重量、肝脏/体重比及脂质成分病理染色结果均说明HFD组的TRAF5-KO小鼠脂肪肝病变明显好转，脂质蓄积显著减少，表明TRAF5基因敲除具有能够显著改善脂肪肝、Ⅱ型糖尿病的作用。针对该作用，其可作为筛选治疗脂肪肝和/或Ⅱ型糖尿病的药物靶标，其抑制剂可用于制备治疗脂肪肝和/或Ⅱ型糖尿病的药物。
【专利说明】TNF受体相关因子5 (TRAF5)在治疗脂肪肝和II型糖尿病 中的功能和应用

【技术领域】
[0001] 本发明属于基因的功能与应用领域，特别涉及一种TNF受体相关因子5 (TRAF5) 作为药物靶标在筛选治疗脂肪肝和II型糖尿病疾病的药物中应用，以及TRAF5的抑制剂在 制备和/或筛选预防、缓解和/或治疗脂肪肝和II型糖尿病疾病的药物中应用。

【背景技术】
[0002] 随着老龄人口的增加，都市化的生活以及生活方式的改变，肥胖、非酒精性脂肪肝 病、代谢综合征和糖尿病等代谢异常人群剧增，现已经成为全球性的公众健康的重要危害。 糖尿病是一种严重危害人类健康的慢性代谢性疾病。在过去的二三十年里，糖尿病患者数 量已经翻倍，对全球人类的健康是一个极为严重的威胁。在2010年，世界范围内2. 85亿人 口患有糖尿病，其中90%的患者为II型糖尿病（type 2 diabetes mellitus, T2DM),预计到 2030年患者的数量将增加到4. 39亿，这意味着在全球20-79岁成年人中将会有7. 7%是糖 尿病患者。当前儿童，青少年及青年人群中II型糖尿病及II型糖尿病前期发病率剧增，这也 意味着在未来的糖尿病的发病人群将扩大，防治难度将会大增。
[0003] 糖尿病疾病本身，同时加上它可怕的且不易逆转的并发症对患者的生活质量和生 命健康影响极大，也是当前临床与研究界的重要难题。糖尿病慢性并发症是导致糖尿病患 者致死致残的主要原因，不仅累及心脑血管、肾脏、视网膜、神经等重要脏器和组织，肝脏也 是其重要的靶器官之一。肝脏是糖代谢最主要的器官之一，是物质代谢的中枢，它具有许多 重要的生理功能，如葡萄糖的合成和分解，脂质合成和分解，胆汁合成和分泌等。肝脏是人 体生化工厂，脂质由肝脏合成和输出。随着糖尿病病程的延长，发生肝脏病变的危险性及其 病变程度也随之增加。糖尿病性肝损伤是指糖尿病引起的肝脏组织学和功能变化，是糖尿 病的一种慢性并发症。糖尿病的早期诊断，防治糖尿病慢性并发症对减轻患者负担尤为重 要。
[0004] 肿瘤坏死因子（TNF)受体相关因子家族（TNF receptor-associated factor，TRAF) 是一类结构相似的衔接蛋白，作为细胞内信号分子在TNFR超家族、Toll样/白介1受体 (Toll/IL-1 rec印tor，TIR)超家族和RIG样受体（RLR)家族上游信号传导中发挥重要作 用。目前哺乳动物中TRAF家族共有7个成员，分别为TRAF1-7。TRAF包含一个大约230氨 基酸长的C末端特征性TRAF结构域，介导TRAF蛋白形成同源或异源二聚体或结合其他衔 接分子及信号传导分子。该结构域可分为高度保守的近C端（TRAF-C)和差异较大的近N 端（TRAF-N)两个亚结构域，这种差异决定TRAF在特定环境和细胞类型下结合不同的受体 或信号活化物。除TRAF1以外，TRAF2-7还包含一个高度保守的N末端指环结构域（RING finger domain)。TRAF具有调控宿主防御、炎症、和自身免疫等重要生物学功能，并在细胞分 化、增殖、凋亡发挥重要作用。TRAF5被认为是调控TNFR超家族的受体，它可能是应对病毒 感染天然反应的关键分子。TRAF5在LMP1介导的c-Jun激酶的激活以及诱导的p38 MAPK 的激活中发挥重要作用；可通过⑶40和肿瘤坏死因子β受体从而激活NF-κΒ;在B淋巴 细胞中还可以调控TLR信号通路；还可参与病毒性感染后的T细胞增殖和天然免疫信号通 路以及在动脉粥样硬化中的JNK的激活（1，2,3)。研究表明TRAF5基因敲除小鼠可减小血 脑屏障（ΒΒΒ)破坏和炎症，从而保护脑缺血再灌注引起的损伤（4) ;TRAF5通过MEK-ERK1/2 信号通路在主动脉弓缩窄引起的心肌肥厚中发挥重要作用（5)，而TRAF5在脂肪肝、糖尿病 中的作用尚无报道。
[0005] 参考文献： 1. Shirakata M，Imadome KI，Okazaki K, Hirai Κ. 2001. Activation of TRAF5 and TRAF6 signal cascades negative ly regulates the latent replication origin of Epstein - Barr virus through p38 mitogen - activated protein kinase. J Virol 75:5059 - 5068. 2. Kraus ZJ，Nakano H，Bishop GA. 2009. TRAF5 is a critical mediator of in vitro signals and in vivo functions of LMP1, the viral oncogenic mimic of CD40. Proc Natl Acad Sci USA 106:17140 - 17145. 3. Buchta CM， Bishop GA. TRAF5 negatively regulates TLR signaling in B lymphocytes. J Immunol. 2014 Jan 1;192 (1):145-50. 4. Wang L， et al. Tumor necrosis factor receptor-associated factor 5 is an essential mediator of ischemic brain infarction. J Neurochem(2013)， 126(3) :400-14. 5. Bian Z et al. Disruption of tumor necrosis factor receptor associated factor 5 exacerbates pressure overload cardiac hypertrophy and fibrosis. J Cell Biochem(2014)， 115(2):349-58。


【发明内容】

[0006] 为解决上述现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种TRAF5基因的表 达与脂肪肝、II型糖尿病之间的相互关系，提供一个用于治疗脂肪肝和/或II型糖尿病的 的靶基因 TRAF5的新用途，进而把TRAF5基因应用于脂肪肝和/或II型糖尿病的治疗。
[0007] 本发明的目的通过下述技术方案实现： 本发明以野生型C57小鼠与TRAF5基因敲除小鼠为实验对象，通过高脂饮食诱导的肥 胖小鼠模型（diet induced obesity，DI0)研究TRAF5基因的功能，结果发现高脂饲料（High fat diet，HFD)饲养的TRAF5基因敲除小鼠的体重及空腹血糖水平均低于对照组WT小鼠， 进一步通过腹腔注射葡萄糖耐量实验发现TRAF5基因敲除小鼠对葡萄糖的耐受能力明显 增强。从小鼠肝脏大体外观、肝脏重量、肝脏/体重比以及脂质成分病理染色结果等均说明 HFD组（Highfat diet，高脂饮食）的TRAF1 K0小鼠脂肪肝病变明显好转，脂质蓄积显著减 少。这表明TRAF5基因敲除会显著改善脂肪肝、II型糖尿病的发生，TRAF5基因具有恶化脂 肪肝、II型糖尿病的作用，为研究防治脂肪肝、II型糖尿病的新靶点和新策略提供了理论依 据和临床基础。
[0008] 因此，TRAF5基因可作为药物靶点，构建TRAF5基因过表达的体外细胞模型或动物 模型，用于筛选预防、缓解和/或治疗脂肪肝、II型糖尿病的药物；TRAF5基因也可作为基因 治疗中的靶基因，设计并制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝、II型糖尿病的药物和/或生物 学试剂，通过基因工程技术达到预防、缓解和/或治疗脂肪肝、II型糖尿病的目的。例如以 TRAF5为靶基因，设计可干扰TRAF5表达的双链siRNA，通过化学方法合成以后，注射入人 体通过RNA干扰的方法使TRAF5基因沉默来治疗脂肪肝、II型糖尿病；还可以设计并构建 TRAF5的突变体，注射后进入细胞，竞争TRAF5原形的作用底物，从而抑制TRAF5的功能，起 至IJ治疗目的；此外，还可以以TRAF5为靶点设计小分子化合物抑制剂，利用TRAF5基因过表 达的体外细胞模型或动物模型，通过筛选，发现其中能够特异性抑制TRAF5的分子，从而为 脂肪肝、II型糖尿病的治疗提供新的治疗性分子。
[0009] 针对TRAF5的上述功能，提供TRAF5作为药物靶标在筛选保护肝脏功能的药物中 的应用。
[0010] 针对TRAF5的上述功能，提供TRAF5作为药物靶标在筛选预防、缓解和/或治疗脂 肪肝和或II型糖尿病的药物中的应用。
[0011] 针对TRAF5的上述功能，提供TRAF5的抑制剂在制备保护肝脏功能的药物中的应 用。
[0012] 针对TRAF5的上述功能，提供TRAF5的抑制剂在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝 和或II型糖尿病的药物中的应用。
[0013] 一种保护肝功能的药物，包含TRAF5的抑制剂。
[0014] 一种治疗脂肪肝和或II型糖尿病的药物，包含TRAF5的抑制剂。
[0015] 所述的TRAF5的抑制剂优选为TRAF5基因的siRNA、TRAF5基因的RNA干扰载体， TRAF5的抗体及其他能够抑制TRAF5表达的抑制剂中的一种。
[0016] 本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果： (1)本发明发现TRAF5基因的新功能，即TRAF5基因能够恶化脂肪肝、II型糖尿病疾病 的作用。
[0017] (2)基于TRAF5基因在恶化脂肪肝、II型糖尿病中的功能，为脂肪肝、II型糖尿病 的药物提供靶标。
[0018] (3) TRAF5的抑制剂可用于制备保护肝功能和治疗脂肪肝、II型糖尿病的药物。

【专利附图】

【附图说明】
[0019] 图1是WT和TRAF5-K0小鼠的体重、空腹血糖结果图；A为小鼠体重结果图；B为 空腹血糖水平统计图（** Φ < 〇· 01 VS WT NC 组，# :p < 0· 05 vs WT HFD 组，## :p < 0· 01 vs WTHFD 组）。
[0020] 图2是WT和TRAF5-K0小鼠通过腹腔注射葡萄糖耐量结果图；A为通过腹腔注射葡 萄糖后不同时间点小鼠血糖水平统计图；B为各组小鼠糖耐量曲线下面积（area under the curve，AUC)比较图（林：p < 0· 01 vs WT NC 组，## :p < 0· 01 vs WT HFD 组）。
[0021] 图3是TRAF5-K0和WT小鼠的肝脏大体外观结果图；A为肝脏大体结果图；B为肝 脏重量、肝脏重量与小鼠本身体重比值统计柱状图（## :p < 0. 01 vs WT HFD组)。
[0022] 图4是WT和TRAF5-K0小鼠的肝脏组织HE和油红0染色图。

【具体实施方式】
[0023] 下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限 于此。
[0024] 实验用动物及饲养： 实验动物种属，性别，周龄及来源：C57BL/6 (WT)小鼠和TRAF5-K0小鼠，雄性，8周龄。 C57BL/6小鼠购自北京华阜康生物科技有限公司；TRAF5基因敲除小鼠（TRAF5-K0,购自日 本 RBRC 公司，货号：RBRC02573)。
[0025] 实验动物饲料配方：高脂饲料（High fat diet, HFD)(购自北京华阜康生物科技 有限公司，货号D12942):热量百分比：蛋白质20%，碳水化合物20%，脂肪60% ;总的热量质 量比5. 24kcal/g。低脂饲料（Normal chow, NC)(购自北京华阜康生物科技有限公司，货号 D12450B):热量百分比：蛋白质20%，碳水化合物70%，脂肪10% ;总的热量质量比3. 85kcal/ g°
[0026] 动物饲养及环境条件：所有的实验小鼠均饲养在武汉大学心血管病研究所SPF级 动物房(许可证号：SYXK(鄂):2009-0053)。每12小时交替照明，温度24±2°C，湿度40-70%， 小鼠自由饮水进食。
[0027] 实施例1小鼠脂肪肝、II型糖尿病模型（diet induced obesity, DI0)获得 (1)实验动物分组：选用8周龄，雄性，WT小鼠和TRAF5-K0小鼠，分别给与两种特殊饲 料 D12942 高脂饲料（High fat diet，HFD)和 D12450B 低脂饲料（Normal chow，NC)饲养，即 WT NC组，K0 NC组，WT HFD组，K0 HFD组共4个组别。
[0028] (2)高脂饲料诱导模型操作流程： 采用WT和K0小鼠，建立DI0模型，进行表型相关分析，明确TRAF5基因对脂肪肝、II型 糖尿病发挥的作用。选用8周龄，雄性，WT小鼠和TRAF5-K0小鼠，分别给与两种特殊饲料 D12942高脂饲料和D12450B低脂饲料饲养，即WT NC组，K0 NC组，WT HFD组，K0 HFD组共4 个组别。每周均详细记录小鼠摄食量，小鼠空腹体重和空腹血糖每隔4周检测1次。实验 第18周，进行腹腔注射葡萄糖实验（IPGTT)，以评价小鼠机体对葡萄糖耐受能力。第20周 终末取材，取出小鼠肝脏拍照，称重，然后一部分置于甲醛溶液中固定或0.C.T冰冻切片包 埋剂（Tissue Freezing Medium)包埋作为病理分析用。
[0029] 实施例2小鼠体重、血糖水平测定 (1)小鼠空腹体重，食量检测 ①禁食：上午8:00将待实验小鼠禁食(不禁水)，下午2:00开始实验操作。
[0030] ②称重：分别在第0周、4周、8周、12周、16周、20周称重，将一塑料小桶放在动态 电子天平上，抓起小鼠，放入称量小桶中，测量体重记录数据。饲料量检测：待称体重操作完 成后，给小鼠加饲料，并在动态电子天平上记录小鼠的饲料量。
[0031] (2)空腹血糖水平检测实验 将所有待实验的小鼠从上午8:00至下午2:00间禁食(不禁水)，即禁食6小时后开始 实验操作。
[0032] ①血糖仪准备：检查血糖仪(美国强生公司，0NET0UCH)电池，按右侧开关，将试纸 正确放入左侧插槽，屏幕显示与血糖试纸条相应代码的数字，随后显示滴血图案，提示血糖 仪进入待测状态。
[0033] ②固定小鼠：右手抓鼠尾，左手持一块毛巾，将毛巾对折，用拇指和食指捏住毛巾 对折处，将鼠头部和身体包入手掌内的毛巾，拇指和食指在将鼠尾根部固定。
[0034] ③剪尾：眼科剪迅速在距鼠尾末端0. 1-0. 2cm处剪下鼠尾，待血滴自行流出。
[0035] ④血糖检测：将血糖仪试纸边缘轻触血滴，血液浸入试纸，血糖仪倒计时5秒显示 读数。
[0036] II型糖尿病损伤严重程度的评估指标主要包括体重、血糖等水平，血糖变化结果 如图1所示，WT小鼠在给与HFD饲料饲养后，从第4周开始体重明显高于其NC饲料组，给 与TRAF5-K0小鼠20周的HFD饲料和NC饲料饲养后，从第4周开始HFD组的TRAF5-K0小 鼠体重明显低于HFD组的WT小鼠体重，一直持续到第20周（见图1A);经空腹血糖检测发 现在HFD组的小鼠从第4周、8周、12周、16周、20周的空腹血糖水平明显较相应NC对照组 升高，且HFD组的TRAF5-K0小鼠空腹血糖水平要明显低于WT小鼠空腹血糖水平(见图1B)。 表明敲除TRAF5基因后可显著影响了小鼠在HFD饲养状态下的糖代谢稳态，TRAF5基因敲 除能显著改善小鼠的糖代谢稳态，这些结果表明TRAF5在高脂诱导引起的II型糖尿病模型 中起到重要作用。
[0037] 实施例 3 葡萄糖耐量实验（intraperitoneal glucose tolerance test，IPGTT) 实验第18周，进行腹腔注射葡萄糖实验（IPGTT)，以评价小鼠机体对糖耐受能力。
[0038] (1)在测血糖之前，先测量小鼠的空腹体重，根据10 μ L/g计算葡萄糖的注射体 积。
[0039] (2)先检测葡糖糖注射前即0分钟时空腹血糖，在检测完毕后迅速经腹腔注射葡 萄糖液。
[0040] (3)腹腔注射操作方法：①固定小鼠；抓起小鼠，左手的小指和无名指抓小鼠的尾 巴，另三手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下，将小鼠腹部充分暴露。②进针定位及注 射：从腹部一侧进针右手持注射器，将尖端与小鼠腹部成45°的夹角，进针，回抽，注射时 针头在腹部皮下穿行一小段距离，穿过腹中线后在腹部另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓 缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。
[0041] (4)分别于腹腔注射后15分、30分、60分、120分钟时间点剪尾测小鼠血糖值，并 记录血糖数值和检测时间。
[0042] 进一步通过腹腔注射葡萄糖耐量实验（intraperitoneal glucose tolerancetests，IPGTT)来评估各组小鼠对葡萄糖的处理能力，在实验第18周，通过注射 1. 0g/kg体重的葡萄糖后，HFD组的WT小鼠和TRAF5-K0小鼠血糖水平在15分钟时间点剧 增达到峰值，随着时间推移至注射后60分钟，两组小鼠血糖水平稍微下降，但仍处于高于 空腹血糖水平（〇分钟时血糖)，在2小时时恢复至空腹血糖水平，且TRAF5-K0小鼠血糖水平 从0分钟至2小时一直处于低于WT小鼠的血糖水平（图2A)。比较各组小鼠血糖曲线下面 积（area under the curve，AUC)，发现 WT 小鼠 HFD 组的 AUC 显著高于 NC 组，TRAF5-K0 HFD 组的AUC显著低于WT HFD组的AUC (图2B)，表明TRAF5基因敲除能够显著促进糖代谢稳 态。
[0043] 实施例4肝脏大体外观及肝脏组织脂质成分测定 (1)终末肝脏组织取材 1)小鼠称重后，迅速脱颈处死。仰卧固定小鼠，用蒸馏水将小鼠胸部，腹部毛发润湿。
[0044] 2)用一镊子钳夹小鼠腹部正中皮肤，沿腹部正中向头部剪开皮肤至剑突下，向尾 端剪开皮肤，逐层暴露皮下筋膜，肌肉等，打开腹腔，充分暴露各脏器。
[0045] 3)迅速找到并取下小鼠的肝脏，将取下的肝脏标本置于灭菌纱布上，拭干肝脏表 面上残留血液，将肝脏置于无菌培养皿中，迅速拍照，称重。
[0046] 4)石蜡标本：切取部分肝脏置于10%中性福尔马林中固定。冰冻标本：切取部分 肝脏，置于有0CT的锡纸模具中包埋，放在干冰上冰冻固定。
[0047] 2.肝脏组织处理及病理染色相关实验 1)肝脏脱水，透明，浸蜡 切取10%中性福尔马林中固定好的部分肝叶组织于标记的包埋框内，在小流量流水冲 洗30分钟以上。按照以下流程在机器上设置以下程序，①脱水：75%酒精（45分钟）一75% 酒精（45分钟）一85%酒精（45分钟）一85%酒精（45分钟）一95%酒精（45分钟）一95%酒 精（45分钟）一无水酒精（1小时）一无水酒精（1小时）；②透明：二甲苯（1小时）一二甲苯 (1小时）；③浸蜡（65°C):石蜡（1小时）一石蜡（1小时)。待组织冲洗完毕后，将包含组织 的包埋框装进机器篮筐内，启动上述程序。上述程序完成后，取出组织包埋框送病理室包埋 组织，同时清洗机器备用。
[0048] 2)肝脏组织切片 使用切片机切片(切片厚度5 μ m)。
[0049] 3 )肝脏组织苏木精-伊红（HE )染色 将肝脏组织石蜡切片放入65°C烘箱（30分钟）一二甲苯中（5分钟X3次）一100%酒 精（1分钟）一90%酒精（1分钟）一70%酒精（1分钟）一蒸馏水洗一苏木素（5分钟）一自来 水洗去切片上的浮色一1%盐酸酒精（1至3秒)一自来水洗数下一Scott促蓝液(碳酸氢钠 〇. 35g，硫酸镁2g，蒸馏水100mL) (1分钟）一自来水洗数下一伊红（1分钟）一蒸馏水洗去 切片上的浮色一70%酒精一下一90%酒精一下一100%酒精（30秒X3次）一二甲苯（2分 钟X3次）一在二甲苯未干时封片，拍照。
[0050] 4)肝脏组织油红0染色 ①将冰冻肝脏组织切片在通风橱中风干30分钟，4%多聚甲醛固定10分钟；置于双蒸 水中稍洗10分钟，以除去组织表明的多聚甲醛。
[0051] ②以60%异丙醇处理1分钟。
[0052] ③用油红0 (公司sigma，货号00625,浓度0· 5克/100mL 100%异丙醇)染色30分 钟。
[0053] ④之后以60%异丙醇漂洗1分钟X 3次，直至背景干净。
[0054] ⑤用Mayer' s苏木素染液（5滴）淡染细胞核。
[0055] ⑥水漂洗，稀碳酸锂水溶液中促蓝，充分水洗，水洗至细胞核蓝化。
[0056] ⑦用甘油明胶封片，拍照。
[0057] 肝脏大体外观测定结果见图3所示，通过大体取材拍照，观察到在HFD组的 TRAF5-K0小鼠的肝脏体积稍较HFD组的WT小鼠的肝脏小，且TRAF5-K0小鼠肝脏色泽较红， 油脂较少(如图3A)。在HFD组的TRAF5-K0小鼠无论肝脏重量还是肝脏重量与小鼠本身体 重比值均较HFD组的WT小鼠低（如图3B)。进一步通过组织切片，进行HE和油红0染色， 显微镜下观察各组小鼠肝脏组织在高脂饮食饲养条件下发生了显著的病理改变。通过肝脏 HE染色，可以观察到在HFD饲养条件下，WT小鼠和TRAF5-K0小鼠肝脏组织均有脂肪沉积， 可以看到NC组小鼠的肝细胞发生脂肪变性、空泡化且融合连成片状，肝脏细胞形态已几乎 完全破坏，而TRAF5 K0组小鼠的肝细胞形态较为完整（如图4上)。通过肝脏油红0染色来 检测肝组织中脂质，可以发现在HFD组的WT小鼠的肝门静脉周围呈大片红色，说明有大量 的脂质沉积，而在HFD组的TRAF5-K0小鼠的肝门静脉周围则有较少脂质沉积，在NC饲料饲 养的两组小鼠脂质沉积最少（如图4下)。这些结果说明TRAF5-K0基因敲除小鼠的脂肪肝 明显改善。
[0058] 上述结果显示TRAF5-K0小鼠在HFD的诱导下发生的脂肪肝、II型糖尿病明显比WT 组小鼠好转。这些结果表明TRAF5基因能显著促进糖代谢紊乱、促进肝脏脂质形成和脂肪 肝形成。本发明结果说明TRAF5基因在脂肪肝、II型糖尿病疾病模型中有着重要的恶化作 用。
[0059] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的 限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1. TRAF5作为药物靶标在筛选保护肝脏功能的药物中的应用。 2. TRAF5作为药物靶标在筛选预防、缓解和/或治疗脂肪肝和或II型糖尿病的药物中 的应用。 3. TRAF5的抑制剂在制备保护肝脏功能的药物中的应用。
4. 一种保护肝脏功能的药物，其特征在于：包含TRAF5的抑制剂。 5. TRAF5的抑制剂在制备预防、缓解和/或治疗脂肪肝和或II型糖尿病的药物中的应 用。
6. -种预防、缓解和/或治疗脂肪肝和或II型糖尿病的药物，其特征在于：包含TRAF5 的抑制剂。
7. 根据权利要求3或5所述的应用或权利要求4或5所述的药物，其特征在于：所述 的TRAF5的抑制剂包括TRAF5基因的siRNA、TRAF5基因的RNA干扰载体、TRAF5的抗体。
【文档编号】A61K48/00GK104056271SQ201410322095
【公开日】2014年9月24日 申请日期:2014年7月8日 优先权日:2014年7月8日
【发明者】李红良, 张晓东, 汪涛, 杜成 申请人:武汉大学