本发明涉及一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，属于妇科用药技术领域。
背景技术：
女性阴道是一个非常复杂的微生态系统，其是通过阴道的解刨结构、微生态菌群、局部免疫系统以及内分泌调节功能共同构成的。女性患上阴道感染性疾病主要受到病因、环境以及宿主这三个因素支配，但是其关键在于正常微生物菌群与宿主之间的相互关系。从临床医学方面来说，女性阴道微生态与阴道发生感染的关系极为密切。就目前来说，抗菌药物如甲硝唑等在临床上治疗细菌性阴道疾病的效果较好，但是仍然有一部分病例对药物产生耐药性，且药物也具有一定的毒副作用；此外，使用抗菌药物治疗只可将病原菌杀死，并不能恢复阴道微生态环境，因此采用此法治疗往往容易复发。雌激素也曾被广泛应用于阴道疾病治疗，但由于其作用范围广、副作用强，可导致乳腺癌等疾病，因此并非理想的治疗药物。
植物雌激素可视为人类和其他哺乳动物的外源性激素，直接参与机体的内分泌调节。一方面，一定剂量的植物雌激素在体内能够与雌激素受体结合，发挥雌激素样作用；从而促进阴道粘膜上皮增生，降低阴道pH值，达到修复阴道损伤、增加弹性的作用。据报道，植物雌激素中剂量时，可以产生一定的雌激素活性；高剂量时，可以活化因雌激素水平限制未能活化的雌激素受体，产生雌激素强效应；当植物雌激素使用足够的剂量时，可以产生与体内17β雌二醇相似的效能。虽然被称为植物雌激素，但是葛根异黄酮的化学本质并非激素类物质，其结构与女性体内的雌激素相似，因此可起到模拟、干扰、双向调节内分泌水平的生理作用。另一方面，植物雌激素并不会产生雌激素带来的不良副作用。
除了恢复阴道环境之外，治疗阴道疾病还需恢复阴道微生态平衡。乳酸菌是阴道微生态中最为常见的细菌，它是健康女性阴道中的常驻菌和优势菌，其在阴道分泌物中的分离率达到80%以上，对保持阴道微生态平衡发挥着非常关键的作用。对细菌性阴道疾病患者而言，需帮助其恢复乳酸菌的优势菌群地位，但关于乳酸菌阴道胶囊的安全性、适应性尚无明确定论，疗效并不稳定。因此，本发明从帮助阴道原生乳酸菌占领阴道生态位，从而抑制致病菌在阴道定植的角度出发，使用乳酸菌脂磷壁酸与阴道上皮细胞受体进行黏附，占领生态位点，从而抑制致病菌的黏附，恢复阴道乳酸菌的生长从而达到治疗疾病的目的。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，适合阴道疾病患者使用。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，其特征在于：包括以下重量份原料：乳酸菌脂磷壁酸1-5份、低聚麦芽糖10-50份、葛根粉20-100份、透明质酸5-50份、甘油5-10份、蒸馏水500-5000份。
优选的，包括以下重量份原料：乳酸菌脂磷壁酸3份、低聚麦芽糖50份、葛根粉50份、透明质酸30份、甘油10份、蒸馏水5000份。
一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，其制备步骤如下：
（1）乳酸菌脂磷壁酸：乳酸菌菌液离心收集菌体，置于液氮中冷冻1min后取出，室温放置90s，如此反复冻融3-5次以破碎菌体；加入菌体2倍体积的20%苯酚水溶液反应5min，再加入等量的95%苯酚水溶液，68℃下水浴30min，期间不断搅拌；取出后将反应液冷却至10℃，7000rpm离心15min；吸取上层溶液置于透析袋中，流水透析24-48h；再用蒸馏水静置透析24-48h，期间每隔6h换新蒸馏水；最后加入4% w/v的聚乙二醇6000，将溶液浓缩至原体积的1/4；加入5% w/v的Dnase I，37℃下酶解0.5-1h，80℃加热5-10min灭酶；8000rpm离心10-15min；取上清，加入2倍体积的丙酮，过夜沉淀，200rpm离心2min即可得到乳酸菌磷壁酸。
（2）乳酸菌脂磷壁酸凝胶的制备：将乳酸菌脂磷壁酸、低聚麦芽糖、葛根粉、透明质酸以及甘油按照上述比例充分混合，加入蒸馏水造粒10min，制成直径为5-8mm的凝胶。
植物雌激素：植物雌激素可视为人类和其他哺乳动物的外源性激素，直接参与机体的内分泌调节。一方面，一定剂量的植物雌激素在体内能够与雌激素受体结合，发挥雌激素样作用；从而促进阴道粘膜上皮增生，降低阴道pH值，达到修复阴道损伤、增加弹性的作用。据报道，植物雌激素中剂量时，可以产生一定的雌激素活性；高剂量时，可以活化因雌激素水平限制未能活化的雌激素受体，产生雌激素强效应；当植物雌激素使用足够的剂量时，可以产生与体内17β雌二醇相似的效能。虽然被称为植物雌激素，但是葛根异黄酮的化学本质并非激素类物质，其结构与女性体内的雌激素相似，因此可起到模拟、干扰、双向调节内分泌水平的生理作用；同时，植物雌激素并不会产生雌激素带来的不良副作用。
乳酸菌脂磷壁酸：乳酸菌脂磷壁酸具有低等电点的特性，在阴道环境中可形成较多的负电荷，通过静电引力与阴道上皮细胞受体进行黏附，占领生态位点，从而抑制致病菌的黏附，恢复阴道乳酸菌的生长从而达到治疗疾病的目的。此外，由于本发明中使用的脂磷壁酸来源于乳酸菌，乳酸菌本身就是女性阴道常驻微生物，因此不会产生不良反应。
本发明的优点在于：
首先，本发明使用比雌激素作用温和的植物雌激素用于阴道损伤的修复，避免了雌激素带来的不良副作用。植物雌激素可视为人类和其他哺乳动物的外源性激素，可直接参与机体的内分泌调节。一方面，一定剂量的植物雌激素在体内能够与雌激素受体结合，发挥雌激素样作用；从而促进阴道粘膜上皮增生，降低阴道pH值，达到修复阴道损伤、增加弹性的作用。另一方面，高剂量时，可以活化因雌激素水平限制未能活化的雌激素受体，产生雌激素强效应；当植物雌激素使用足够的剂量时，可以产生与体内17β雌二醇相似的效能。本发明中使用植物雌激素葛根异黄酮来对患有阴道疾病的女性阴道内分泌进行双向调节，不仅有益于阴道内环境的恢复，且避免了雌激素带来的副作用
其次，本发明使用乳酸菌脂磷壁酸来帮助原生乳酸菌生长，从而恢复阴道微生态平衡。乳酸菌是阴道微生态中最为常见的细菌，它是健康女性阴道中的常驻菌和优势菌，对保持阴道微生态平衡发挥着非常关键的作用。对细菌性阴道疾病患者而言，需帮助其恢复乳酸菌的优势菌群地位，但关于乳酸菌阴道胶囊的安全性、适应性尚无明确定论，疗效并不稳定。因此，本发明从帮助阴道原生乳酸菌占领阴道生态位，从而抑制致病菌在阴道定植的角度出发，使用乳酸菌脂磷壁酸与阴道上皮细胞受体进行黏附，占领生态位点，从而抑制致病菌的黏附，达到恢复阴道乳酸菌的生长从而达到治疗疾病的目的。本发明使用的脂磷壁酸来源于乳酸菌，乳酸菌本身就是女性阴道常驻微生物，因此不会产生不良反应。
具体实施方式
实施例1
一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，包括以下重量份原料：乳酸菌脂磷壁酸3份、低聚麦芽糖50份、葛根粉50份、透明质酸30份、甘油10份、蒸馏水5000份。
其制备步骤如下：
（1）乳酸菌脂磷壁酸：乳酸菌菌液离心收集菌体，置于液氮中冷冻1min后取出，室温放置90s，如此反复冻融4次以破碎菌体；加入菌体2倍体积的20%苯酚水溶液反应5min，再加入等量的95%苯酚水溶液，68℃下水浴30min，期间不断搅拌；取出后将反应液冷却至10℃，7000rpm离心15min；吸取上层溶液置于透析袋中，流水透析36h；再用蒸馏水静置透析36h，期间每隔6h换新蒸馏水；最后加入4% w/v的聚乙二醇6000，将溶液浓缩至原体积的1/4；加入5% w/v的Dnase I，37℃下酶解1h，80℃加热10min灭酶；8000rpm离心15min；取上清，加入2倍体积的丙酮，过夜沉淀，200rpm离心2min即可得到乳酸菌磷壁酸。
（2）乳酸菌脂磷壁酸凝胶的制备：将乳酸菌脂磷壁酸、低聚麦芽糖、葛根粉、透明质酸以及甘油按照上述比例充分混合，加入蒸馏水造粒10min，制成直径为5mm的凝胶。
实施例2
一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，包括以下重量份原料：乳酸菌脂磷壁酸1份、低聚麦芽糖10份、葛根粉20份、透明质酸5份、甘油5份、蒸馏水500份。
其制备步骤如下：
（1）乳酸菌脂磷壁酸：乳酸菌菌液离心收集菌体，置于液氮中冷冻1min后取出，室温放置90s，如此反复冻融3次以破碎菌体；加入菌体2倍体积的20%苯酚水溶液反应5min，再加入等量的95%苯酚水溶液，68℃下水浴30min，期间不断搅拌；取出后将反应液冷却至10℃，7000rpm离心15min；吸取上层溶液置于透析袋中，流水透析24h；再用蒸馏水静置透析24h，期间每隔6h换新蒸馏水；最后加入4% w/v的聚乙二醇6000，将溶液浓缩至原体积的1/4；加入5% w/v的Dnase I，37℃下酶解0.5h，80℃加热5min灭酶；8000rpm离心10min；取上清，加入2倍体积的丙酮，过夜沉淀，200rpm离心2min即可得到乳酸菌磷壁酸。
（2）乳酸菌脂磷壁酸凝胶的制备：将乳酸菌脂磷壁酸、低聚麦芽糖、葛根粉、透明质酸以及甘油按照上述比例充分混合，加入蒸馏水造粒10min，制成直径为5mm的凝胶。
实施例3
一种用于阴道疾病辅助治疗的乳酸菌磷壁酸凝胶，包括以下重量份原料：乳酸菌脂磷壁酸5份、低聚麦芽糖50份、葛根粉100份、透明质酸50份、甘油10份、蒸馏水5000份。
其制备步骤如下：
（1）乳酸菌脂磷壁酸：乳酸菌菌液离心收集菌体，置于液氮中冷冻1min后取出，室温放置90s，如此反复冻融5次以破碎菌体；加入菌体2倍体积的20%苯酚水溶液反应5min，再加入等量的95%苯酚水溶液，68℃下水浴30min，期间不断搅拌；取出后将反应液冷却至10℃，7000rpm离心15min；吸取上层溶液置于透析袋中，流水透析48h；再用蒸馏水静置透析48h，期间每隔6h换新蒸馏水；最后加入4% w/v的聚乙二醇6000，将溶液浓缩至原体积的1/4；加入5% w/v的Dnase I，37℃下酶解1h，80℃加热10min灭酶；8000rpm离心15min；取上清，加入2倍体积的丙酮，过夜沉淀，200rpm离心2min即可得到乳酸菌磷壁酸。
（2）乳酸菌脂磷壁酸凝胶的制备：将乳酸菌脂磷壁酸、低聚麦芽糖、葛根粉、透明质酸以及甘油按照上述比例充分混合，加入蒸馏水造粒10min，制成直径为5mm的凝胶。
实施例4
邀请60例细菌性阴道疾病患者参与为期18天的疗效评估试验；并签订受试协议。将患者随机分为试验组和对照组2组，每组30例；患者年龄为22-45周岁，病程7-120天。两组患者在年龄、病程、疾病性质方面无显著性差异，具有可比性（P＞0.05）。对照组采用传统药物甲硝唑进行治疗为期7天的治疗；试验组在甲硝唑治疗基础上加用本发明的乳酸菌磷壁酸凝胶，使用甲硝唑治疗7天后停药4天，在第12天开始每晚睡前置于阴道深部，每次一粒，连用7天。治疗期间不使用其他药物，并禁止性生活，不做阴道灌洗。
分别于治疗前、治疗后（对照组停用甲硝唑3天后或试验组停用本发明3天后）测定阴道pH值以及引阴道清洁度等指标。
疗效判定标准：
痊愈：阴道炎症状及体征消失，妇科专科检查充血等阴道炎病理表现消失，实验室检查阴性，阴道分泌清洁度Ⅰ度；
有效：阴道炎部分症状及体征消失，妇科专科检查充血等阴道炎病理表现明显减轻，实验室检查（+）或镜检白细胞（+），阴道分泌物清洁度Ⅱ-Ⅲ度；
无效：阴道炎症状与体征均未得到显著改善，甚至加重，或妇科专科检查充血等阴道炎病理表现仍明显存在，或实验室检查（+）或镜检白细胞（++），或阴道分泌物清洁度Ⅳ度。
治疗前，两组患者的pH值均高于健康阴道pH4.0-4.5的范围；治疗后，试验组30例患者阴道pH值均恢复至正常范围，对照组19例患者的pH恢复至正常范围，其余11例仍高于4.5；两组患者的阴道pH值比较如表1所示。
表1 两组患者的阴道pH值
试验组痊愈率、总有效率高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。试验表明，本发明可显著改善阴道环境，帮助阴道微生态的恢复，巩固甲硝唑的疗效。
表2 两组临床疗效对比
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。