依鲁替尼对flt3-itd突变的急性白血病的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药领域，特别是涉及依鲁替尼（PCI32765)的一种新用途。
【背景技术】
[0002] 急性髓细胞白血病（acute myelocytic leukemia，AML)或急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)包括所有非淋巴细胞来源的急性白血病。它是多能干细胞或已轻度分化的前体细 胞核型发生突变所形成的一类疾病，是造血系统的克隆性恶性疾病。流行病学调查显示，环 境、职业及遗传因素与AML的发病关系密切。发达国家的发病率高于发展中国家，西方国家 高于东方国家。世界各地年发病率为2. 25/10万人口，随年龄增加而发病率增高，50岁开始 明显上升，60~69岁达高峰，30岁以下为1/10万、75岁以上则高达17/10万。因此，AML实 际是一种中、老年病，占成人急性白血病的80%~90%，但仅占儿童急性白血病的15%~ 20%。同时，男性发病高于女性。
[0003] FLT3 (Fms-like tyrosine kinase 3)即 FMS 样酪氨酸激酶 3,与 c_Kit、c-FMS 和 F1DGFR 同属于 III 型受体酪氨酸激酶（receptor tyrosine kinase III，RTK III)家 族成员，其蛋白结构包括5个免疫球蛋白（Ig)样结构域组成的保外区，I个跨膜区，I个 近膜区（JM)，以及胞内由激酶插入区分隔而成的2个酪氨酸激酶（TK)区（S. D. Lyman 等，Oncogene, 1993, 8, 815-822)。1996年首先在AML细胞中发现了 FLT3突变，其突变类型 是内部串联重复（FLT3/ITD)。近年来，许多研究已经证实FLT3的激活突变在AML的发生及 疾病的进展中起到十分重要的病理作用。具有FLT3/ITD激活突变的AML患者通常具有外 周血白细胞计数高，临床预后较差，易复发等独特的临床特征，并且由于FLT3激活突变的 检测方法简单易行，故越来越多的研究者致力于将FLT3发展成为AML的常规检测手段用来 指导AML患者的治疗和预后的判断以及作为微小残留白血病的检测手段，并将其作为白血 病患者化疗药物的又一新的靶点。
[0004] 现已证实FLT3的激活突变主要有两种：内部串联重复（internal tandem duplication, ITD)和活化环中的点突变（point mutation in the activation loop, Tkd 点突变）。FLT3的这两种激活突变均能引起FLT3发生自动磷酸化进而导致FLT3发生配体 非依赖性的组成性激活，进一步激活其下游异常的信号转导，从而起到促进增殖和抑制凋 亡的作用，使得具有此突变表型的白血病患者临床预后较差。
[0005] 目前对FLT3基因突变的靶向抑制成为研究热点，主要为开发小分子酪氨酸激酶 抑制剂，通过与FLT3酪氨酸激酶竞争ATP结合位点而抑制其活性。目前已经进入临床的抑 制FLT3的激酶抑制剂有AC220等。
[0006] 依鲁替尼（Ibrutinib，也称为PCI32765)是一种布鲁顿酪氨酸激酶（Bruton's tyrosine kinase，BTK)的抑制剂，其可以以单独使用或者与其它治疗剂联合使用的方式用 于治疗自身免疫性疾病或病症、异种免疫性疾病或病症、癌症包括淋巴瘤以及炎性疾病或 病症。目前，还未见关于使用依鲁替尼（PCI32765)治疗携带FLT3/ITD突变型基因的急性 髓细胞白血病的相关报道。
【发明内容】
[0007] 鉴于前述的技术问题，发明人进行了广泛的研究。结果，发明人意外地发现，依 鲁替尼（PCI32765)这种布鲁顿酪氨酸激酶抑制剂能有效地治疗携带FLT3/ITD突变型基 因的急性髓细胞白血病。更具体地，发明人发现，依鲁替尼对携带FLT3/ITD突变型基因的 急性髓细胞白血病细胞如M0LM-13、MOLM-14、MV-4-11起到较强的抑制作用（IC50分别为 0· 47 μ Μ、(λ 66 μ Μ、(λ 33 μ M)，而依鲁替尼对携带FLT3WT (野生型）及FLT3 A680V突变型基 因的急性髓细胞白血病细胞都没有明显的抑制作用。因此依鲁替尼可适用于临床治疗携带 FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血病。
[0008] -方面，本发明涉及依鲁替尼（PCI32765)在制备用于治疗携带FLT3/ITD突变型 基因的急性髓细胞白血病癌患者的药物中的用途。
[0009] 在治疗过程中，该药物可以根据情况单独或与一种或多种其它的治疗剂组合使 用。可以通过注射、口服、吸入、直肠和经皮施用中的至少一种将包含依鲁替尼的药物施用 给携带FLT3/ITD突变基因的急性髓细胞白血病患者。其它的治疗剂可以选自以下药物：免疫抑制剂（例如他克莫司、环抱菌素、雷帕霉素、甲氨蝶岭、环磷酰胺、硫唑嘌呤、巯嘌呤、 麦考酚酯或FTY720)、糖皮质激素类药（例如泼尼松、醋酸可的松、泼尼松龙、甲泼尼龙、地 塞米松、倍他米松、曲安西龙、氢羟强的松龙、倍氯米松、醋酸氟氢可的松、醋酸脱氧皮质酮、 醛固酮）、非留体抗炎药（例如水杨酸盐、芳基烷酸、2-芳基丙酸、N-芳基邻氨基苯甲酸、 昔康类、考昔类或硫酰替苯胺）、变态反应疫苗、抗组胺药、抗白三烯药、β -激动剂、茶碱、 抗胆碱药或其它选择性激酶抑制剂（例如mTOR抑制剂、c-Met抑制剂）或her2抗体-药 物。另外，所提及的其它治疗剂还可以是雷帕霉素（Rapamycin)、克唑替尼（Crizotinib)、 他莫昔芬、雷洛昔芬、阿那曲唑、依西美坦、来曲唑、赫赛汀?(曲妥珠单抗）、格列卫?(伊马 替尼）、紫杉醇?(紫杉醇）、环磷酰胺、洛伐他汀、美诺四环素（Minosine)、阿糖胞苷、5-氟 尿嘧啶（5-FU)、甲氨蝶呤（MTX)、紫杉特尔? (多西他赛）、诺雷德?(戈舍瑞林）、长春新碱、 长春碱、诺考达唑、替尼泊苷、依托泊苷、健择?(吉西他滨）、埃博霉素（Epothilone)、诺唯 本、喜树碱、柔红霉素（Daunonibicin)、更生霉素、米托蒽醌、安B丫陡、多柔比星（亚德里亚 霉素）、表柔比星或伊达比星。或者，其它治疗剂也可以是细胞因子例如G-CSF(粒细胞集落 刺激因子）。或者，其它治疗剂也可以是，例如但不限于，CMF(环磷酰胺、甲氨蝶呤和5-氟 尿嘧啶）、CAF(环磷酰胺、亚德里亚霉素和5-氟尿嘧啶）、AC(亚德里亚霉素和环磷酰胺）、 FEC (5-氟尿嘧啶、表柔比星和环磷酰胺）、ACT或ATC (亚德里亚霉素、环磷酰胺和紫杉醇） 或CMFP (环磷酰胺、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶和泼尼松）。
[0010] 在另一方面，本发明还涉及一种药物组合物，其包含依鲁替尼（PCI32765)和药学 上可接受的载体或助剂。该组合物还可以进一步包含一种或多种其它的治疗剂。这里提及 的其它治疗剂如上文所限定。
[0011] 在又一方面，本发明涉及使用依鲁替尼治疗携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓 细胞白血病患者的方法。在治疗过程中，可以通过注射、口服、吸入、直肠或经皮将依鲁替尼 施用给携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血病患者。还可以根据情况将有效量的 依鲁替尼单独或与一种或多种其它的治疗剂组合使用。所提及的其它的治疗剂如上文所限 定。在治疗过程中，还可以将使用依鲁替尼（PCI32765)的化学疗法联合放射疗法进行施 用。
[0012] 在又一方面，本发明涉及一种抑制携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血 病细胞的方法，包括将所述细胞与依鲁替尼相接触。根据本发明，携带FLT3/ITD突变型基 因的急性髓细胞白血病细胞优选是选自M0LM-13、MOLM-14、MV-4-11、PL-21和MUTZ-Il中 的一种或多种。进一步优选地，将所述细胞与有效浓度至少为〇. 05 μ M的依鲁替尼相接触， 更优选依鲁替尼的量为至少〇. 1 μ Μ，进一步优选0. 3-10 μ Μ，例如0. 3-3 μ Μ。
【附图说明】
[0013] 图1示出PCI32765分别在MOLM-H(Ia)和0CI-AML-3(lb)细胞上对BTK信号通 路的影响。
[0014] 图 2 示出 PCI32765 分别在 M0LM-13(2a)、M0LM-14(2b)和 MV-4-ll(2c)细胞上对 FLT3/ITD相对密切相关的蛋白及相关信号通路的影响。
[0015] 图3示出细胞中与FLT3/ITD相对密切相关的蛋白。
[0016] 图 4 示出 PCI32765 分别对 M0LM-13(4a)、M0LM-14(4b)、MV-4-11 (4c)、 0CI-AML-3(4d)和NOMO-I (4e)的细胞凋亡的影响。
[0017] 图 5 示出 PCI32765 分另Ij 对 MOLM-14 (5a)、MV-4-11 (5b)、M0LM-13 (5c)、 0CI-AML-3(5d)和N0M0-l(5e)的细胞周期分布的影响。
【具体实施方式】
[0018] 在对本发明进一步说明之前，为了更好地理解本发明，对一些术语进行说明。
[0019] 定义
[0020] "依鲁替尼（Ibrutinib，也称为PCI32765) "是一种布鲁顿酪氨酸激酶（Bruton's tyrosine kinase，BTK)的抑制剂。作为一种小分子BTK抑制剂，它能够与BTK活性中心的 半胱氨酸残基共价结合，从而抑制其活性。依鲁替尼具有以下式（I)所示的结构：
[0021]
【主权项】
1. 依鲁替尼（PCI32765)在制备用于治疗携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血 病患者的药物中的用途。
2. 根据权利要求1所述的用途，其中依鲁替尼单独施用或者与一种或多种其它的治疗 剂组合施用。
3. -种药物组合物，包括依鲁替尼和药学上可接受的载体或助剂，以及任选的一种或 多种其它治疗剂。
4. 一种抑制携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血病细胞的非治疗方法，包括 将所述细胞与依鲁替尼相接触。
5. 根据权利要求4所述的方法，其中所述携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血 病细胞是选自M0LM-13、M0LM-14、MV-4-ll、PL-21和MUTZ-Il中的一种或多种。
6. 根据权利要求4或5所述的方法，其中将所述细胞与有效浓度至少为0. 05 ii M的依 鲁替尼相接触。
7. 依鲁替尼在制备用于抑制携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血病细胞的药 物中的用途。
8. 根据权利要求7所述的用途，其中所述携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血 病细胞是选自MOLM-13、MOLM-14、MV-4-ll、PL-21和MUTZ-Il中的一种或多种。
【专利摘要】本发明公开了依鲁替尼(PCI32765)的一种新用途，具体地，本发明发现依鲁替尼可以用于治疗急性髓细胞白血病，特别是携带FLT3/ITD突变型基因的急性髓细胞白血病。
【IPC分类】A61P35-02, A61K31-519
【公开号】CN104873515
【申请号】CN201410598948
【发明人】刘青松, 刘静, 吴宏, 胡晨, 王傲莉, 王文超, 陈程, 李希祥, 赵铮, 王黎, 王蓓蕾
【申请人】中国科学院合肥物质科学研究院
【公开日】2015年9月2日
【申请日】2014年10月30日