泳5min，第4 天只注射Adr不进行冰浴，以此制备血瘀模型。末次给药后0. 5小时于各组动物腹腔注射 300mg/kg水合氯醛麻醉，腹主静脉采血，于体外血栓形成仪上观察体外血栓形成情况，以血 栓长度、湿重、干重为指标。
[0106] 表5凝胶剂对大鼠体外血栓的影响（X土s)
[0107]
[0108]
[0109]
[0110] 注：与血瘀模型组比较AP < 0? 05，AAP < 0? 01，A"P < 0? 001。
[0111] 结果可见，本发明实施例制得的凝胶剂〇. 56、0. 28g/kg两个剂量给药组可明显抑 制大鼠体外血栓形成、血栓长度及血栓重量。其中，本发明提供的凝胶剂的〇. 56g/kg使用 效果明显好于对照组和妇宁栓给药组。
[0112] 2. 2对大鼠体内血栓的影响：
[0113] 取大鼠，随机分为18组，每组5只。空白对照组；对照组，0. 56g/kg剂量给药；妇 宁栓0. 56g/kg剂量给药组；凝胶剂0. 56、0. 28、0. 14g/kg三个剂量给药组。每天阴道给药 一次，连续给药5天。末次给药后0. 5小时于动物腹腔注射300mg/kg水合氯醛麻醉，背位 固定，分离右侧颈总动脉，用实验性体内血栓形成测定仪，远端置测温器，以2. 0mA直流电 刺激3min后，记录其堵塞时间，即血栓形成时间。结果如表6所示。
[0114] 表6凝胶剂对大鼠体内血栓的影响（X土s)
[0115]
[0116]
[0117] 由结果可见，本发明实施例制得的凝胶剂0. 56、0. 28mg/kg组对大鼠体内血栓形 成有明显的抑制作用。其中，本发明提供的凝胶剂的〇. 56g/kg使用效果明显好于对照组和 妇宁栓给药组。
[0118] 3、镇痛作用：
[0119] 3. 1对醋酸所致小鼠疼痛的影响
[0120] 取小鼠，随机分为18组，每组5只。空白对照组；对照组，0. 8g/kg剂量给药；妇宁 栓0. 8g/kg剂量给药组；凝胶剂0. 8、0. 4、0. 2g/kg三个剂量给药组。每天阴道给药一次，连 续给药5天。末次给药后0. 5小时各鼠ipO. 7%醋酸0. 2ml/只，记录5min~lOmin内小鼠 扭体反应次数。结果如表7所示。
[0121] 表7凝胶剂对醋酸诱发小鼠扭体反应的影响（X土 s)
[0122]
[0123] 由结果可见，本发明实施例制得的凝胶剂0. 8、0. 4g/kg组对醋酸造成小鼠扭体反 应次数增多有明显的抑制作用。其中，本发明提供的凝胶剂的〇. 8g/kg使用效果明显好于 对照组和妇宁栓给药组。
[0124] 3. 2对小鼠热板刺激性疼痛的影响
[0125] 用热板测痛仪1 (MGJ-8402型，55 ±0. 5°C )筛选痛阈在5秒-30秒之间的雌性小 鼠，随机分为17组，每组5只。空白对照组；对照组，0. 8g/kg剂量给药；妇宁栓0. 8g/kg剂 量给药组；凝胶剂0. 8、0. 4、0. 2g/kg三个剂量给药组。每天阴道给药一次，连续给药5天。 末次给药后0. 5、1、2、3、4、5小时测定小鼠痛阈值，结果如表8所示。
[0126] 表8凝胶剂对小鼠热板痛阈时间的影响（X土 s)
[0127]
[0128]
[0129] 由结果可见，本发明实施例制得的凝胶剂对热板引起小鼠疼痛有明显的镇痛作 用，且凝胶剂〇. 8g/kg剂量给药组作用时间可持续5小时。其中，本发明提供的凝胶剂的 〇. 8g/kg使用效果明显好于对照组和妇宁栓给药组。
[0130] 4、体外抑菌实验
[0131] 4. 1试管稀释法
[0132] ①细菌悬液的制备：将葡萄球菌斜面培养物接种肉汤培养基中，置37°C温箱中培 养过夜，使生长浊度达9 X 10sCFU/ml。
[0133] ②将本发明实施例1制得的凝胶剂高压处理后，稀释成10个不同浓度，使葡萄球 菌在不同浓度的凝胶剂中生长。
[0134] ③放37°C温箱培养18~24h观察结果，结果如表9所示。
[0135] 表9体外抑菌实验结果
[0136]
[0137]另外，实施例2-5制得的凝胶剂与实施例1结果一致。可见，无细菌生长的药物最 高稀释管的药物浓度即为MIC，因此，本发明实施例制得的凝胶剂的最小抑菌浓度可稀释至 1. 6父107倍。
[0138] 4. 2琼脂扩散法
[0139] 将葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于普通营养琼脂培养基上过夜。转种液体肉汤 培养基活化9亿/ml。将已活化好的菌株均取0. lml接种普通琼脂培养基上，用打孔器打 孔。将实施例1制得的凝胶剂高压处理后稀释五个不同浓度（g/ml :1、0. 5、0. 25、0. 125、 0.0125)和对照妇宁栓（lg/ml)分别加入孔内，每孔加药液50 iil，设两个平行孔，进行24 小时培养。结果如表10所不。
[0140] 表10凝胶剂体外抑菌实验
[0141]
[0142] 另外，实施例2-5制得的凝胶剂与实施例1结果一致。由结果可见，凝胶剂对金 黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用较为明显，抑菌环直径大于阳性对照药，最低抑菌浓度为 0.25g/ml〇
[0143] 药效学实验结果表明，本发明提供的凝胶剂能明显抑制二甲苯致小鼠耳廓炎症肿 胀，对糊剂造成子宫炎症的肿胀有明显抑制作用，对角叉菜胶引起的大鼠足肿胀有明显抑 制作用，对棉球造成大鼠肉芽肿胀有明显的抑制作用，说明凝胶剂有明显的抗炎作用；凝胶 剂可明显抑制血瘀大鼠体外血栓长度及血栓重量，可明显抑制大鼠体内血栓形成，说明该 药有明显的活血化瘀作用；凝胶剂对醋酸引起的小鼠扭体次数增多有明显的抑制作用，对 热板引起小鼠疼痛有明显的镇痛作用，说明凝胶剂有明显的镇痛作用。此外，该药还有明显 的体外抑菌作用。并且，本发明提供的凝胶剂效果明显好于对照组给药组和妇宁栓给药组。
[0144] 尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的 精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中 包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
【主权项】
1. 一种妇科用药物组合物，其特征在于，主要由以下原料制成，按重量份计，关黄柏 3~6份，苦参3~6份，白头翁2~4份，紫草2. 5~5份，百部1. 5~3份。2. 根据权利要求1所述的妇科用药物组合物，其特征在于，按重量份计，关黄柏3~4 份，苦参3~4份，白头翁2~3份，紫草2. 5~4份，百部1. 5~2. 5份。3.根据权利要求1-2任一项所述的妇科用药物组合物，其特征在于，所述原料还包括 冰片，按重量份计，所述冰片为0. 1-0. 3份。4.根据权利要求3所述的妇科用药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括用 于将所述药物组合物制成各种剂型的辅料。5.根据权利要求4所述的妇科用药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型为 凝胶剂，所述辅料包括凝胶基质。6. 根据权利要求5所述的妇科用药物组合物，其特征在于，所述凝胶基质为聚乙烯吡 咯烷酮、羧甲基纤维素钠中的任一种或两种； 按重量份计，所述凝胶基质为〇.45-0. 9份。7.根据权利要求5所述的妇科用药物组合物，其特征在于，所述辅料还包括保湿剂、稳 定剂中的任一种或两种。8. 根据权利要求7所述的妇科用药物组合物，其特征在于，所述稳定剂为乙醇、羟丙基 甲基纤维素、聚山梨酯80中的任一种或多种； 所述保湿剂为维他命E、山梨醇、甘油中的任一种或多种。9.权利要求5-8任一项所述的凝胶剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 取关黄柏、苦参、白头翁、紫草以及百部，加乙醇回流提取，得到提取液； 将所述提取液过滤，得到滤液，将所述滤液浓缩至相对密度为1. 20~1. 25(80~85°C)的清膏； 将所述辅料加入所述清膏内搅拌均匀，然后添加冰片，混匀即可。10. 根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述回流提取具体为： 将粉碎后的关黄柏、苦参、白头翁、紫草以及百部，加65%-75%乙醇回流提取三次，每 次加醇量分别为8-10、7-9、7-9倍，每次1-2小时，得到的液体合并，即得所述提取液。
【专利摘要】本发明涉及妇科药物领域，特别涉及一种妇科用药物组合物及其制备方法。一种妇科用药物组合物，主要由以下原料制成，按重量份计，关黄柏3～6份，苦参3～6份，白头翁2～4份，紫草2.5～5份，百部1.5～3份。本发明提供的妇科用药物组合物，方中君药选用关黄柏和苦参，相须为用，起到清热燥湿、杀虫止痒之功效；臣药选用白头翁、紫草，使清热解毒之力倍增，故共为臣药；佐药选用百部，对于感染虫邪的阴痒起效。这几种药材的活性成分相辅相成，相互协同增强作用，根除妇科炎症及其顽疾，效果显著。以醇提的手段提取其中的活性成分，方法简便，得到的清膏活性成分含量高，与其他辅料相容性好，易于制备成成品，并且安全，对人体无刺激。
【IPC分类】A61P15/02, A61P33/02, A61K36/904, A61P31/10, A61P31/04
【公开号】CN105056048
【申请号】CN201510474174
【发明人】周文艳
【申请人】阿里宏达盛康药业有限公司, 宿州亿帆药业有限公司
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月6日