木瓜总三萜及其组分在制药中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体设及木瓜中总=祗及其组分在治疗消化道损伤中 应用。
【背景技术】
[0002] 非酱体抗炎药（nonsteroidalanti~inf1ammatory化ugs,NSAIDs)是临床上广泛 使用的一类抗炎药物，是很多骨关节疾病如类风湿关节炎、骨关节炎的一线治疗药物；近年 来，发现非酱体抗炎药可W降低结肠癌的发病率，加之越来越多的人长期服用低剂量阿斯 匹林W预防屯、脑血管疾病及非处方用药的增加，使得NSAWs成为了世界上应用最多的药 品之一，在中国其用量仅次于抗感染药物。随着其临床的广泛应用，的胃肠道并发症也越来 越受到人们关注。有研究证实在美国和英国发生的药物不良反应中，有21 %和25 %的药物 不良反应与应用NSAH)s有关，该不良反应包括诸如恶屯、、烧屯、、消化不良等症状，又包括消 化性溃瘍及其严重并发症，如出血、穿孔、胃排空障碍等，甚至可导致部分患者死亡。当前随 着人口的老年化，NSAms的使用越来越频繁，NSAI化相关性上消化道出血也越来越多，有 资料显示，使用NSAI化者，上消化出血的风险增加4-6倍。尽管出现了新型NSAIDs，但其 胃肠道安全性是否真如大家期望的那样高，运一点尚存有争议。近来就有研究者发现，运 类药物可能同传统的NSAWs-样，也会影响胃溃瘍的愈合；虽然当前临床上比较多的采用 侣、秘、&受体括抗剂及质子累抑制剂来保护胃粘膜，但往往存在疗效不持久、停药后容易 复发，且所需费用大，副反应也大，长期使用受到了限制。因此积极寻求因广泛使用NSAIDs 而导致的消化道损伤，特别是消化性溃瘍已十分迫切。
【发明内容】
[0003] 本发明本发明提供了一种提取的木瓜总=祗及其组分在治疗非酱体抗炎药致消 化道损伤中应用，具体地是通过W下技术方案实现：
[0004] a)提供皱皮木瓜中木瓜总=祗及其组分（齐墳果酸、熊果酸、乙酷熊果酸、白枠脂 酸、山植酸、乙酷坡模醇酸、委陵菜酸等等）或其生成可接受的盐： 阳0化]
[0006] b)从皱皮木瓜中提取的木瓜总=祗及其组分，包含所述的木瓜总=祗和其组分， W及药学可接受的药物中间体、辅料及载体。
[0007] C)将木瓜总=祗及其中一个组分齐墳果酸应用于非酱体抗炎药引起的消化道损 伤的药物上的应用。
[0008] d)木瓜总=祗及其中一个组分齐墳果酸应用于非酱体抗炎药引起的胃粘膜损 伤的药物上的应用；研究发现木瓜总=祗和齐墳果酸可提高胃黏膜损伤模型小鼠血液中 SOD、GSH-Px酶活性，增强了内源性氧自由基清除系统的功能，降低脂质过氧化产物MDA的 水平和血液中促炎因子TNF-a、IL-1P和IL-6含量，升高血清中抗炎因子IL-4、比-10的 含量，抑制H7K+-ATPase活性，降低溃瘍发生率和溃瘍指数，提高溃瘍抑制率，进而改善胃 黏膜组织形态学。实验结果表明：木瓜总=祗及其重要=祗组分齐墳果酸对吗I噪美辛致小 鼠胃黏膜损伤具有较好的治疗作用。
[0009] e)木瓜总=祗及其中一个组分齐墳果酸应用于非酱体抗炎药引起的小肠黏膜 损伤的药物上的应用；研究发现木瓜总=祗和齐墳果酸可提高小肠黏膜模型大鼠血液中 SOD、GSH-Px酶活性，增强了内源性氧自由基清除系统的功能，降低脂质过氧化产物MDA的 水平和血液中促炎因子TNF-a、IL-1P和IL-6含量，升高血清中抗炎因子IL-4、比-10的 含量，降低小肠黏膜大体损伤评分和组织学评分，改善小肠黏膜组织形态学。实验结果表 明：木瓜总=祗及其重要=祗组分齐墳果酸对双氯芬酸钢致大鼠小肠黏膜损伤具有较好的 治疗作用。
【附图说明】
[0010] 图1木瓜总S祗的提取，及木瓜总S祗的组分的分离工艺。
[0011] 图2为木瓜总=祗和齐墳果酸对吗I噪美辛致胃黏膜损伤小鼠胃外观形态的影响 (A:正常组，B:模型组，C:木瓜总S祗lOOmg/kg剂量组，D:齐墳果酸lOOmg/kg剂量组）。
[0012] 图3木瓜总=祗和齐墳果酸对吗I噪美辛致胃黏膜损伤小鼠胃黏膜组织形态学的 影响（A:正常组，B:模型组，C:木瓜总S祗lOOmg/kg组，D:齐墳果酸lOOmg/kg组）。
[0013] 图4为木瓜总=祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠小肠黏膜外观 形态的影响（A:正常组，B:模型组，C:木瓜总S祗lOOmg/kg剂量组，D:齐墳果酸lOOmg/ kg剂量组）。
[0014] 图5木瓜总=祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠小肠粘膜组织形 态学的影响（A:正常组，B:模型组，C:木瓜总S祗lOOmg/kg组，D:齐墳果酸lOOmg/kg组）。
【具体实施方式】 阳〇1引 实施例1
[0016] 皱皮木瓜中提取木瓜总S祗，具体通过W下方法制备：
[0017] 1)皱皮木瓜预处理
[0018] 皱皮木瓜近成熟的果实洗尽、切片晒干，取0. 005kg保存，剩下的于48°C恒溫鼓风 箱中干燥至恒重，净重5. 0kg。
[0019] 。皱皮木瓜脱色
[0020] 样品用粉碎机粉碎，过20目筛，用石油酸为溶剂按6:1的液固比，在60°C条件下脱 色3次，每次2小时，得到脱色后木瓜粗粉4. 26kg(见图1)。
[0021] 3)脱色后木瓜粗粉回流提取
[0022] 将上述2)所得脱色木瓜粗粉用乙酸乙醋为溶剂按5:1的液固比，在50~80°C条 件下回流提取3次，每次2小时，合并提取液，用布氏漏斗过滤提取液后，在60°C条件下，用 旋转蒸发仪浓缩，随后在通风楓中挥干至无乙酸乙醋味，得浸膏，称重得浸膏1.26kg(见图 1)。
[0023] 4)木瓜乙酸乙醋浸膏脱色
[0024]将上述3)所得浸膏用石油酸为溶剂按15:1的液固比，在60°C条件下脱色3次，每 次1小时，合并过滤液，在50°C条件下，用旋转蒸发仪浓缩，随后在通风楓中挥干至无石油 酸味，得到较为精致的木瓜乙酸乙醋浸膏，称重得浸膏0. 64kg(见图1)。
[00巧]5)木瓜总S祗分离
[00%] 将上述4)所得的精致木瓜乙酸乙醋浸膏用无水乙醇为溶剂并加活性炭进行再次 脱色，其中的无水乙醇：精致木瓜乙酸乙醋浸膏：活性炭按100:1:1，在30°C条件下脱色2 次，每次0. 5小时，合并过滤液，在60°C条件下，用旋转蒸发仪浓缩，随后在通风楓中挥干至 无乙醇味，得木瓜总S祗白色的固体粉末，称重得粉末0. 18kg，用香草醒-高氯酸显色法测 定其纯度为85. 78%，相比较木瓜原药材其总=祗得率约为3. 04% (见图1)。
[0027] 6)齐墳果酸分离
[0028] 将上述4)所得的木瓜总=祗用无水乙醇结晶2次，即得无色齐墳果酸针状晶体， 称重得晶体0. 18kg，用HPLC测定其纯度为97. 61 %，相比较木瓜原药材其齐墳果酸得率约 为1. 18% (见图1)。
[0029] 实施例2
[0030] 下面结合具体的实验例，具体说明木瓜总=祗及其中一个重要组分齐墳果酸应用 于非酱体抗炎药引起的胃黏膜损伤的药物上的应用。
[0031] 试验方法 阳0巧 1)实验动物 阳03引 S峡大学实验动物中屯、提供，SPF级雄性昆明小鼠90只，体重18~22g，实验动物 质量合格证号：SCXK(鄂）2011-0012;动物饲养于普通级动物室干燥、通风、安静的环境，5 只/笼。
[0034]。仪器和试剂
[0035]WFZUV-2100型紫外可见分光光度计：上海尤尼柯仪器有限公司；全波长酶标仪： 瑞±了6〇曰11公司；TP1020型脱水机：德国Leica公司；ULTRACUTR型超薄切片机：奥地利莱 卡公司；CS-V1型摊片烤片机：孝感市宏业医用仪器有限公司；DMR型多功能显微镜及图像 分析系统，德国Leica公司；OlympusKX41型倒置显微镜。
[0036]吗I噪美辛：Sigma曰1化ich公司，使用前用0. 5%簇甲基纤维素钢配制成2. 5mg/ mL;木瓜总S祗和其组分齐墳果酸为我们分离制备得到，使用前前用0. 5%簇甲基纤维素 钢配制成相应浓度的溶液；H7K+-ATPase、S0D、GSH-Px和MDA试剂盒：南京建成生物制品研 究所；TNF-a、比-1 0、比-6及比-4、比-10ELISA检测试剂盒：深功化科为生物技术有限公 司。
[0037] 3)实验分组及给药
[0038] 取昆明小鼠90只随机分成9组：空白对照组、胃黏膜损伤模型组、木瓜总S祗组 (25和lOOmg/kg)、齐墳果酸组（25和lOOmg/kg)，空白对照组和溃瘍模型组给予同容积 0. 5%簇甲基纤维素钢溶液，每天灌胃给药1次，连续7天，模型组和给药组于第4天开始灌 胃给予吗I噪美辛50mg/kg(2. 5mg/mL)，连续3天，于末次给药的次日进行试验。 W39] 4)血液中SOD