89] 小肠黏膜损伤大体形态评分按Zhu等人介绍的方进行，具体标准如下：0分：无损 伤；1分：局部充血、水肿但未出现溃瘍；2分：有溃瘍，但没有明显炎症；3分：有溃瘍，仅有 一处出现炎症；4分：有多处溃瘍和炎症，溃瘍大小<lcm;5分：有多处溃瘍和炎症，至少有 一处溃瘍大小〉1cm。
[0090] 7)小肠黏膜组织学评分和形态学观察
[0091] 取小肠组织，4%多聚甲醒溶液固定，常规石腊包埋，行4ym切片，肥染色后光镜 观察组织学变化。并在光镜下，按化iu介绍的方法进行小肠黏膜组织学分级评分：0分： 小肠黏膜绒毛正常；1分：绒毛顶端上皮下出现囊状间隙，并伴有毛细血管充血；2分：上皮 下间隙扩大，固有层中度水肿，中央乳糜管扩张；3分：固有层明显水肿，肠黏膜上皮细胞变 性、坏死、脱落，少数绒毛顶端脱落；4分：上皮细胞层变性、坏死、脱落，部分绒毛脱落，固有 层裸露，毛细血管扩张、充血；5分：绒毛脱落，固有层崩解，出血或溃瘍形成。光镜下每样本 随机计数20个视野，每个视野按标准进行单独评分，20个视野的平均数为最后病理评分。
[0092] 8)统计学分析
[0093] 所有实验结果的数据W均数+标准差(^±s)表示，数据分析在SPSS13. 0统计软件 包上进行，W单因素方差分析（one-wayANOVA)进行多组间差异的比较，WDunnett-t检验 比较两组间均数的差异；P<〇. 05认为差异有统计学差异。
[0094] 试验结果 阳0巧]1) 一般情况
[0096] 造模前，各组大鼠一般情况好，被毛光泽，饮食、活动、精神状态均正常；造模3天 后，模型组大鼠形体消瘦，精神萎靡，懒动拱背，毛发枯黄、缺乏光泽，大便减少，部分大鼠消 瘦；用木瓜总=祗和齐墳果酸治疗后上述情况均有显著的改善。
[0097] 2)木瓜总=祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠小肠黏膜损伤大体 形态评分的影响
[0098] 由图4可见，正常组大鼠的小肠未出现肉眼可见损伤；模型组大鼠腹水较多，小肠 粘膜充血发红，局部增厚及多发溃瘍形成，部分肠管发生穿孔、坏死黑变；用木瓜总=祗和 齐墳果酸治疗后仅见少量或未见腹水；通过小肠黏膜损伤大体形态评分分析，模型组大体 形态评分明显升高，与正常组比较具有显著性差异（P< 0.01);用木瓜总S祗和齐墳果酸 治疗后，小肠黏膜损伤大体形态评分显著降低，与模型组比较具有显著性差异（P< 0. 05或 P< 0. 01)(见表 4)。
[0099] 表4木瓜总=祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠小肠黏膜损伤大 体形态评分的影响(穿始，拉=1巧 阳 100]
[0101]
阳10引 与模型组比较冲< 0. 05, *冲< 0. 01。 阳103] 3)木瓜总S祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠血液中SOD、GSH-Px 和MDA的影响
[0104] 由表5可知，模型组血液中S0D、GSH-Px活性明显下降，MDA含量显著升高，与正常 组比较具有显著性差异（P< 0. 01);用木瓜总=祗和齐墳果酸治疗后，S0D、GSH-Px活性明 显升高，MDA含量显著降低，与模型组比较具有显著性差异（P< 0. 05或P< 0. 01)，且具有 明显剂量依赖性。
[01化]表5木瓜总S祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠血液中SOD、GSH-Px和MDA的影响±s:，n=10) 阳 106]
阳107] 与模型组比较冲< 0. 05, *冲< 0. 01。
[0108] 4)木瓜总S祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠血液中IL-1P、 比-6、TNF-a及比-4、比-10含量的影响
[0109] 由表6可见，模型组大鼠血清中促炎因子IL-1P、IL-6和TNF-a含量显著升高， 而抗炎因子IL-4和IL-10含量明显降低，与正常组比较具有显著性差异；用木瓜总=祗和 齐墳果酸治疗后，血清中IL-1P、IL-6和TNF-a含量降低，IL-4和IL-10含量升高，与模 型组比较具有显著性差异（P<〇. 05或P<0. 01)。
[0110] 表6木瓜总S祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠血液中IL-1P、 比-6、TNF-a及比-4、比-10含量的影响（^n=IO) 阳 111]
阳11引注：与模型组比较*P< 0. 05,叩< 0. 01。
[0113] 5)木瓜总=祗和齐墳果酸对双氯芬酸钢致小肠黏膜损伤大鼠小肠粘膜组织形态 学的影响
[0114] 由图5可见，正常组大鼠小肠各层结构清晰，无水肿、充血，粘膜上皮细胞排列整 齐，表面光滑，肠腺规则，极向明显，无炎细胞浸润及溃瘍形成；模型组大鼠小肠高度水肿溃 瘍，上皮绒毛组织形态丧失，皱缩脱落，腺体结构素乱，杯状细胞减少，黏膜下固有层局部充 血、水肿，黏膜层内大量炎性细胞浸润；经木瓜总=祗和齐墳果酸治疗后，黏膜上皮及腺上 皮较光滑，腺体排列较规则，黏膜下无明显充血，腺管排列整齐，极向明显，黏膜层内少量炎 性细胞浸润。
[0115] 试验结论
[0116] 由木瓜总=祗及其中一个组分齐墳果酸对双氯芬酸钢致大鼠小肠黏膜损伤实验 可知，木瓜总S祗和齐墳果酸可提高小肠黏膜损伤模型大鼠血液中SOD、GSH-Px酶活性，增 强了内源性氧自由基清除系统的功能，降低脂质过氧化产物MDA的水平和血液中促炎因子 TNF-a、IL-1P和IL-6含量，升高血清中抗炎因子IL-4、比-10的含量，降低小肠黏膜损伤 大体形态评分和组织学评分，改善小肠粘膜组织形态学。实验结果表明：木瓜总=祗及齐墳 果酸对双氯芬酸钢致大鼠小肠黏膜损伤具有较好的治疗作用。
[0117] 综上所述，木瓜总=祗及其重要=祗组分齐墳果酸对吗I噪美辛致小鼠胃黏膜损伤 和双氯芬酸钢致大鼠小肠黏膜损伤均具有较好的治疗作用；两者均能可提高胃和小肠黏膜 损伤模型小鼠和大鼠血液中SOD、GSH-Px酶活性，增强了内源性氧自由基清除系统的功能， 降低脂质过氧化产物MDA的水平和血液中促炎因子TNF-a、IL-1P和IL-6含量，升高血清 中抗炎因子IL-4、IL-10的含量；降低胃溃瘍发生率和溃瘍指数，提高溃瘍抑制率；降低小 肠黏膜大体损伤评分和组织学评分，改善胃和小肠黏膜组织形态学。此发现为防治因使用 NSAI化引起的消化道并发症，特别是消化性溃瘍提供了一种有效、安全的药物。
[0118] 上述实施例和实验例对本发明对本发明做了具体说明。任何熟悉本专业的技术人 员可能利用上述掲示的技术内容加W变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方 案内容，依据本发明的技术实质对W上实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本 发明的保护范围内。
【主权项】
1. 一种木瓜总三萜及其组分在制备治疗消化道损伤的药中的中应用。2. -种木瓜总三萜及其组分在制备治疗非留体抗炎药致消化道损伤的药中的应用。3. -种木瓜总三萜及其组分在制备治疗非留体抗炎药致胃黏膜损伤的药中的应用。4. 一种木瓜总三萜及其组分在制备治疗非留体抗炎药致小肠黏膜损伤的药中的应用。5. 权利要求1-4任一项所述的木瓜总三萜的组分包括齐墩果酸、熊果酸、乙酰熊果酸、 白桦脂酸、山楂酸、乙酰坡模醇酸、委陵菜酸。6. 权利要求5所述的木瓜总三萜的组分，该组分为齐墩果酸。7. 权利要求1-6任一项所述的木瓜总三萜及其组分还包括在药学上可接受的盐，药学 可接受的盐包括对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐或乙磺酸盐。8. 权利要求1-6任一项所述的木瓜总三萜及其组分还包括药学可接受的药物中间体、 辅料及载体，其中，药学可接受的药物中间体包括苯甲酰基齐墩果酸，辅料包括复方胃溃疡 制剂辅料，载体包括BOP頂-齐墩果酸。9. 权利要求1-8任一项所述的木瓜总三萜自邹皮木瓜中提取得到，其组分自木瓜总三 萜中分离得到。
【专利摘要】本发明提供了一种木瓜总三萜及其组分(其组分包括齐墩果酸、熊果酸、乙酰熊果酸、白桦脂酸、山楂酸、乙酰坡模醇酸、委陵菜酸)，包括作为活性成分的以下木瓜总三萜及其组分或其药学可接受的盐在治疗消化道损伤的药物上的应用。其中，消化道损伤为非甾体抗炎药所引起的消化道损伤。结果表明，木瓜总三萜及其重要三萜组分齐墩果酸对吲哚美辛致小鼠胃黏膜损伤和双氯芬酸钠致大鼠小肠黏膜损伤均具有较好的治疗作用。此发现为防治因使用NSAIDs引起的消化道损伤，特别是消化性溃疡提供了一种有效、安全的药物。
【IPC分类】A61K36/732, A61K31/56, A61P1/00
【公开号】CN105213531
【申请号】CN201510661042
【发明人】贺海波, 张永峰, 石孟琼, 汪鋆植, 覃慧林, 刘呈雄, 周琴, 程凡, 邹坤, 张继红
【申请人】三峡大学
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月14日