Il-22二聚体在制备用于治疗胰腺炎的药物中的用图
【专利说明】IL-22二聚体在制备用于治疗胰腺炎的药物中的用途
[0001] 相关申请
[0002] 本申请要求中国专利申请No. 201310549648. X的优先权，所述申请全部内容通过 援引并入本文。 发明领域
[0003] 本发明涉及生物和医药技术领域。更具体地，本发明涉及IL-22二聚体在制备用于 治疗胰腺炎的药物中的用途。
[0004] 发明背景
[0005] 胰腺炎通常被认为是由于胰蛋白酶原被转化成胰蛋白酶，接着是胰腺泡细胞的自 我消化引起的。根据病程，胰腺炎可分为急性胰腺炎(AP)和慢性胰腺炎(CP)两种形式。
[0006] 急性胰腺炎的主要病因是胆石症(包括胆道微结石）、高甘油三酯血症和酒精等。 其他原因包括暴食、休克、妊娠、寄生虫感染、高脂血症、高钙血症、腮腺炎等。而且，如腹部 手术、内窥镜逆行胆管胰造影(ERCP)、内窥镜超声检查(EUS)等医源性因素，以及如氢氯噻 唑、依他尼酸、吲哚美辛、口服避孕药等药物性因素也与AP有关。另外，有许多患者病因不 明，称为特发性胰腺炎。
[0007] 急性胰腺炎是一种临床常见的疾病，急性胰腺炎的基本病变包括水肿、出血和坏 死。据报道，总体上，85%的患者具有间质性胰腺炎，15% (范围4-47%)具有坏死性胰腺炎。 在具有间质性胰腺炎的患者中，大约10%经历器官衰竭，但是在大多数中，它是瞬时的，死 亡率很低。在具有坏死性胰腺炎的患者中，33% (范围16-47%)具有感染性坏死（infected necrosis)，坏死性胰腺炎中器官衰竭的中值流行率为54% (范围29-78% )。与无菌性坏死 中器官衰竭的流行率(45-73%)相比，感染性坏死中器官衰竭的流行率(34-89%)相同或略 高。急性胰腺炎的总体死亡率为大约5%，间质性胰腺炎的死亡率为大约3%，坏死性胰腺炎 的死亡率为大约17% (感染性坏死中大约30%，无菌性坏死中大约12% )。在器官衰竭缺失 下的死亡率为〇,有单一器官衰竭为3% (范围0-8% )，有多系统器官衰竭为47% (范围28-69%)(Peter A.Banks等，Am J Gastroenterol, 101:2379-2400,2006)。目前，急性膜腺炎 的治疗是支持性的，而且由液体和盐置换及疼痛处理组成，临床上仍没有特异有效的治疗 药物。
[0008] 慢性胰腺炎是由各种致病因素引起的局限性或弥漫性胰腺炎症。复发性严重急性 胰腺炎可发展成慢性胰腺炎（厂/0)?/疋/6，]\^1；[116丨13.!16口31:08381：1'0611丨61'01087,38(5): 408-12，1991)。慢性胰腺炎发病的根本机制尚未完全阐明。目前的治疗主要包括补充胰蛋 白酶的替代疗法和治疗并发症(如疼痛处理）。
[0009] Feng等报道了 IL-22减轻小鼠中由娃皮素（cerulean)诱发的胰腺炎 (Int.J.Biol.Sci,8(2),249-257,2012)。
[0010] 本文中提到的所有出版物、专利、专利申请和已公布专利申请的全部公开内容在 此通过援引并入本文。
[0011] 发明概述
[0012] 本发明的一个目的是提供IL-22二聚体在制备用于预防和/或治疗胰腺炎的药物 中的用途。
[0013] 在本发明的一个方面中，提供了白介素-22(IL_22)二聚体在制备用于治疗和/或 预防胰腺炎的药物中的用途。
[0014] 在一些实施方式中，所述胰腺炎选自由急性胰腺炎、慢性胰腺炎、酒精性胰腺炎、 复发性胰腺炎、胆汁返流性胰腺炎、间质性胰腺炎、坏死性胰腺炎、和ERCP后胰腺炎组成的 组。
[0015] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体如式I所示：
[0016] M1-L-M2 I
[0017] 式中，
[0018] Ml是IL-22的第一单体，
[0019] M2是IL-22的第二单体，且
[0020] L是位于所述第一单体和所述第二单体之间的，连接所述第一单体和所述第二单 体的接头。
[0021] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体保持了IL-22的生物学活性，并且具有比所 述第一单体或所述第二单体任一的血清半衰期的2倍要长的血清半衰期。
[0022] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的血清半衰期比所述第一单体和/或所述第 二单体的血清半衰期的3倍、5倍或10倍要长。
[0023] 在一个优选的实施方式中，所述接头L选自由下述各项组成的组：
[0024] (i)3至50个氨基酸的短肽;和
[0025] (ii)式 II 的多肽：
[0026] -Z-Y-Z- II
[0027] 式中，
[0028] Y为载体蛋白，
[0029] Z为无、或1至30个氨基酸的短肽，且
[0030] 为化学键或共价键。
[0031]在一些实施方式中，为肽键。
[0032]在一些实施方式中，Z的长度是5-50个氨基酸残基。
[0033] 在一些实施方式中，Z包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 10的序列。
[0034] 在一些实施方式中，Z具有SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 10的序列。
[0035] 在一些实施方式中，所述载体蛋白包含至少两个能形成分子间二硫键的半胱氨 酸。
[0036] 在一些实施方式中，所述载体蛋白在IL-22单体的N端。
[0037] 在一些实施方式中，所述载体蛋白在IL-22单体的C端。
[0038] 在一些实施方式中，所述载体蛋白是清蛋白或人IgG的Fc片段。
[0039] 在一些实施方式中，Fc片段包含CH2和CH3域。
[0040] 在一些实施方式中，Fc片段包含SEQ ID N0:2或SEQ ID N0:9的序列。
[0041 ] 在一些实施方式中，Fc片段具有SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:9的序列。
[0042] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体由两个单体亚基形成，其中每一个单体亚基 包含一个IL-22域、一个二聚化域和一个任选的连接所述IL-22域和所述二聚化域的接头。
[0043] 在一些实施方式中，所述IL-22域为IL-22单体，所述二聚化域包含人免疫球蛋白 (如1861、1862、1863、或以64)的？(3片段，所述任选的接头为连接所述11^22单体和所述?(3片 段的肽，且所述二聚体通过两个二聚化域(如Fc片段)经由一个或多个二硫键连接而形成。
[0044] 在一些实施方式中，所述二硫键的数目为2至4。
[0045] 在一些实施方式中，每一个IL-22二聚体的所述单体亚基包含选自SEQ ID N0:4和 SEQ ID NO:6-8的氨基酸序列。
[0046] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的所述第一单体和所述第二单体是相同的。
[0047] 在一些实施方式中，所述第一单体和所述第二单体是不同的。
[0048] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的生物学活性选自由下述各项组成的组中 的一种或多种生物学活性：
[0049] (a)在体内降低淀粉酶和/或脂肪酶的水平，
[0050] (b)在体内减轻胰腺水肿，
[0051] (C)在体内抑制胰腺中腺泡细胞和/或脂肪细胞的坏死，
[0052] (d)在体内减轻制胰腺中炎症细胞的浸润。
[0053] 在本发明的另一个方面中，提供了一种用于预防和/或治疗胰腺炎的药物组合物， 所述药物组合物含有药学可接受载剂和式I的IL-22二聚体：
[0054] M1-L-M2 I
[0055] 式中，
[0056] Ml是IL-22的第一单体；
[0057] M2是IL-22的第二单体;且
[0058] L是位于所述第一单体和所述第二单体之间的，连接所述第一单体和所述第二单 体的接头。
[0059] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体保持了IL-22的生物学活性，并且具有比所 述第一单体或所述第二单体任一的血清半衰期的2倍要长的血清半衰期。
[0060] 在本发明的另一个方面中，提供了 IL-22二聚体在制备用于提高淀粉样蛋白A蛋白 (SAA)和/或C反应蛋白（CRP)的血清水平，和/或降低甘油三酯(TG)的血清水平的药物中的 用途。
[0061] 在本发明的另一个方面中，提供了一种治疗个体中的胰腺炎的方法，包含对个体 施用(如静脉内施用)有效量的IL-22二聚体。
[0062] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体包含两个单体亚基，其中每个单体亚基包含 一个IL-22域和一个二聚化域。
[0063] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的每个单体亚基包含通过任选的接头序列 连接于一个二聚化域的一个IL-22域。
[0064]在一些实施方式中，所述接头序列是大约5至大约50个氨基酸。
[0065] 在一些实施方式中，所述接头序列包含SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 10的序列。
[0066] 在一些实施方式中，所述接头序列具有SEQ ID NO: 1或SEQ ID NO: 10的序列。
[0067]在一些实施方式中，所述二聚化域包含至少两个能形成分子间二硫键的半胱氨 酸。
[0068]在一些实施方式中，所述二聚化域至少包含Fe片段的一部分。
[0069] 在一些实施方式中，所述Fe片段包含CH2和CH3域。
[0070] 在一些实施方式中，所述Fe片段包含SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:9的序列。
[0071] 在一些实施方式中，所述Fe片段具有SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:9的序列。
[0072] 在一些实施方式中，每个单体亚基的所述IL-22域具有SEQ ID N0:3的序列。
[0073] 在一些实施方式中，每个所述单体亚基具有选自SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:6-8的 序列。
[0074] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体静脉内施用。
[0075] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用量为大约2yg/kg至大约200yg/kg。
[0076] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用量为大约5yg/kg至大约80yg/kg。
[0077] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用量为大约10yg/kg至大约45yg/kg。
[0078] 在一些实施方式中，所述胰腺炎为急性胰腺炎。
[0079] 在一些实施方式中，所述胰腺炎为慢性胰腺炎。
[0080]在一些实施方式中，所述胰腺炎为间质性胰腺炎。
[0081 ]在一些实施方式中，所述胰腺炎为坏死性胰腺炎。
[0082]在一些实施方式中，所述胰腺炎为酒精诱发的胰腺炎。
[0083]在一些实施方式中，所述胰腺炎为复发性胰腺炎。
[0084]在一些实施方式中，所述胰腺炎为胆汁返流性胰腺炎。
[0085]在一些实施方式中，所述胰腺炎为ERCP诱发的胰腺炎。
[0086] 在一些实施方式中，所述个体具有升高的血清淀粉酶、升高的血清脂肪酶、升高的 尿液淀粉酶、或升高的C反应蛋白。
[0087] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用不多于大约每周一次。
[0088] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用不多于大约每月一次。
[0089] 在一些实施方式中，所述IL-22二聚体的施用不多于大约每三个月一次。
[0090] 在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体导致升高个体中血清淀粉样蛋白A 蛋白或C反应蛋白的水平。
[0091] 在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体导致抑制个体中甘油三酯。
[0092] 在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体未导致升高炎性细胞因子的水平。
[0093] 在一些实施方式中，所述炎性细胞因子选自TNF-a、IL-6、IL-10jPIL_8。
[0094] 在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体导致在体内降低淀粉酶和/或脂肪 酶的水平。
[0095] 在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体在体内减轻胰腺水肿。
[0096]在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体在体内抑制胰腺中腺泡细胞和/或 脂肪细胞的坏死。
[0097]在一些实施方式中，所述有效量的IL-22二聚体在体内减轻胰腺中炎症细胞浸润。 [0098] 在一些实施方式中，所述二聚化域在IL-22二聚体亚基的N端。
[0099] 在一些实施方式中，所述二聚化域在IL-22二聚体亚基的C端。
[0100]本领域技术人员清楚的是，本发明上文描述的和下文实施例中讨论的各技术特征 可以彼此组合，构成新的或甚至更好的技术方案。因此，本发明不应解读为限于本文中列出 的实施方式。
[0101] 附图简述
[0102] 图1是依照本发明的一种示例性的IL-22二聚体的示意图。图中，表示接头以及 标记为"IL-22"的椭圆形表示IL-22单体。
[0103]图2A和图2B是依照本发明的示例性IL-22二聚体的示意图。图中，表示氨基酸 接头以及标记为"IL-22"的椭圆形表示IL-22单体。图2A中，标记为"C"的椭圆形表示载体蛋 白，其中IL-22位于载体蛋白的N-末端。图2B中，标记为"Fc"的半椭圆形表示Fc片段(一种二 聚化域），显示通过两个Fc