专利名称：一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法
技术领域：
本发明涉及一种从银杏叶浸膏中提取纯化聚戊烯醇的方法。
背景技术：
聚戊烯醇polyprenol亦称聚异戊烯醇(polyi soprenol)，是异戊二烯单体(异戊 烯基)链接成直链状的多聚化合物的总称，在自然界广泛存在。弱极性，易溶于有机溶剂。 聚戊烯醇是长链脂肪醇，结构中含有多个非共轭双键，具有非常强烈的吸收自由基的性能。 存在于哺乳动物体内的聚戊烯醇类化合物被称为多萜醇，它是生物膜中糖蛋白合成时重要 的糖载体，但其含量极低，而银杏叶中聚戊烯醇含量可占干叶重的1 2%，被认为是合成 动物多萜醇最合适的中间体。银杏叶中聚戊烯醇类化合物对人体无毒，可作为免疫活性物 质，用于治疗因免疫缺陷造成的疾病，并具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用，具有广阔的医药保 健应用前景。聚戊烯醇浸膏通常是用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇或超临界二氧化碳等中弱极性 溶剂提取银杏叶得到，聚戊烯醇在浸膏中的含量大约在5-20%范围。聚戊烯醇与多种复杂 的化学成分存在于银杏叶及其浸膏中，分离提存难度大，步骤多，而且精制效果有限。由于 聚戊烯醇是长链聚异戊烯基醇，极性弱，与浸膏中的蜡质物质物理化学性质极为相似，这就 给聚戊烯醇的分离提存带来极大的挑战。发明专利CN01113696. 0利用溶剂沉析、萃取和硅胶柱层析等方法对聚戊烯醇进 行精制，可得到纯度为95%的聚戊烯醇产品；发明专利CN200410041670. 4利用二级分子蒸 馏的方法，可以得到75-95%的聚戊烯醇产品；发明专利CN200410074088. 8利用超临界二 氧化碳分级分离的方法，得到含量为80%聚戊烯醇产品；溶剂沉析和硅胶柱层析法可以除 去产品中的大部分极性物质，而对于和聚戊烯醇物化性质(包括极性)接近的蜡质物质的 作用十分有限；分子蒸馏具有清洁、绿色等优点，但是其理论基础是按物质的分子自由程的 差别进行分离，由于蜡质物质和聚戊烯醇的分子量都具有一个分布较广的范围，使得其分 子自由程的交集很大，所以，仅凭分子蒸馏很难将产品中的蜡质物质分离出去，另外，分子 蒸馏必需在高真空和较高温度下进行，会增加破坏产品中的聚戊烯醇的结构可能性；超临 界二氧化碳分级分离的是根据不同的温度和压力下，超临界二氧化碳对不同物质的溶解度 变化不同而进行分离提纯的，这往往要求被分离的物质在极性或分子量等参数具有一定的 差别，但是银杏叶浸膏中的蜡质物质和聚戊烯醇都是极性极弱而且分子量具有较广的分布 范围的物质，所以，超临界二氧化碳分级分离虽然可以得到80%含量的聚戊烯醇，但是以牺 牲工艺的收率为代价。可以看出，现有的工艺过程中，没有针对产品中的蜡质物质的分离的 步骤，所以，其产品中还含有一定量的蜡质物质，要想得到纯度较高的聚戊烯醇产品，必需 经过复杂的工艺过程，而且工艺收率往往很低。使得聚戊烯醇的产业化生产受到限制。
发明内容
本发明的目的是提供一种工艺简单，收率在80%以上，纯度在98%以上的聚戊烯醇的制备方法。本发明是以弱极性溶剂提取的银杏叶浸膏为原料，通过皂化、尿素柱层析、结晶等 工艺，得到纯度在98%以上的聚戊烯醇产品，并大大提高其聚戊烯醇的收率。尿素柱层析法主要是一种用来分离提纯脂肪酸的方法。我们在实验中发现，尿素 固定相对蜡质物质具有较强的吸附作用，而对于双键个数较多的聚戊烯醇基本没有吸附作 用，这样可以利用蜡质物质和聚戊烯醇的吸附差别将它们分离开来，由于尿素是一种极性 较大的物质，它同样对于浸膏中的极性物质具有强的吸附作用，所以，可以同时除去浸膏中 极性较强的杂质和极性弱的蜡质物质，得到含量高的聚戊烯醇产品，再经过结晶，含量可以 达到98%以上，而且尿素柱层析过程的收率高(大于90%)，工艺总体收率(尿素柱层析和 结晶)大于80%。本发明具体操作步骤如下(1)浸膏皂化聚戊烯醇浸膏在醇碱溶液中，充分搅拌，在30_80°C下皂化0. 5_4h， 反应液用酸中和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将尿素溶于负载溶剂中，加入载体，使尿素负载在载体 上，除去溶剂，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后将皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用流动 相勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩 蒸干；(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，饱和溶 液，冷冻结晶，过滤，干燥得到聚戊烯醇。如步骤(1)所述的聚戊烯醇浸膏是指用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇、超临界二氧 化碳提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量在5-20衬％的聚戊烯醇浸膏；如步骤(1)所述的醇碱 溶液指的是醇碱溶液是l_40wt%的氢氧化钠或氢氧化钾的甲醇，1_40衬％的氢氧化钠或氢 氧化钾的乙醇溶液，浸膏与醇碱溶液的质量比为1-10 10。如步骤(1)所述的酸是指任何种类的液体酸，优选盐酸或硫酸。如步骤(2)所述的负载溶剂是指40-95%的甲醇-水溶液、40_95%的乙醇-水溶 液、甲醇或乙醇。如步骤(2)所述的载体是指任何有一定机械强度、稳定的固体粉末，优选硅胶、氧 化铝或活性炭；如步骤⑵所述的尿素载体的质量比为0. 1-10 1 ；如步骤(3)所述的流动相是指任何可以溶解聚戊烯醇而不溶解尿素的溶剂，优选 石油醚、正己烷、氯仿或乙酸乙酯；本发明具有如下特点1、采用尿素柱层析法，操作条件温和，工艺收率高，工艺总收率80%以上。产品纯 度高，聚戊烯醇的含量达到98%以上，工艺简单，运行成本低。2、尿素层析柱可以重复利用。3、生产周期短，批量大，便于产业化。
具体实施例方式实施例1
(1)浸膏皂化将超临界二氧化碳提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为20衬％的 IOg聚戊烯醇浸膏，在1衬％的IOOg KOH-甲醇溶液，充分搅拌，在30°C下皂化4h，反应液用 盐酸中和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于甲醇中，在甲醇溶液中加入IOg活性炭， 旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用石油醚 勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 8wt%，工艺总收率82wt%。实施例2(1)浸膏皂化将石油醚提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为15衬％的20g聚戊烯 醇浸膏，在5衬％的IOOg KOH-乙醇溶液，充分搅拌，在40°C下皂化3. 5h，反应液用硫酸中 和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于甲醇中，在甲醇溶液中加入IOOg硅胶， 旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用正己烷 勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的乙醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 6wt%，工艺总收率82wt%。实施例3(1)浸膏皂化将丙酮提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为IOwt %的50g聚戊烯醇 浸膏，在30衬％的IOOg NaOH-甲醇溶液，充分搅拌，在50°C下皂化3h，反应液用盐酸中和， 浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于80wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入200g氧化铝，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用氯仿勻 速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的乙腈，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到99. 6wt%，工艺总收率86wt%。实施例4(1)浸膏皂化将乙醇提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为聚戊烯醇浸 膏在20衬％的IOOg KOH-甲醇溶液，充分搅拌，在70°C下皂化lh，反应液用盐酸中和，浓缩 得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于70wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入600g硅胶，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用乙酸乙酯勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 5wt%，工艺总收率82wt%。实施例5(1)浸膏皂化将乙醇提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为聚戊烯醇浸 膏，在35wt %的IOOg KOH-甲醇溶液，充分搅拌，在60°C下皂化1. 5h，反应液用硫酸中和，浓 缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于60wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入800g硅胶，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用石油醚 勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的乙醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 6wt%，工艺总收率84wt%。实施例6(1)浸膏皂化将乙醇提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为5衬％的IOOg聚戊烯醇 浸膏，在40衬％的IOOg NaOH-甲醇溶液，充分搅拌，在80°C下皂化0. 5h，反应液用盐酸中 和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOg尿素溶于50wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中加 入IOOg氧化铝，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用正己烷 勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的乙腈，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到99. 5wt%，工艺总收率86wt%。实施例7(1)浸膏皂化将丙酮提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为IOwt %的60g聚戊烯醇 浸膏，在15wt %的IOOg KOH-乙醇溶液，充分搅拌，在30°C下皂化4h，反应液用盐酸中和，浓 缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将50g尿素溶于40wt%的乙醇水溶液中，在甲醇溶液中加 入80g氧化铝，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用石油醚 勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 8wt%，工艺总收率82wt%。实施例8(1)浸膏皂化将丙酮提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为15衬％的40g聚戊烯醇
6浸膏，在20衬％的IOOg NaOH-乙醇溶液，充分搅拌，在40°C下皂化3h，反应液用硫酸中和， 浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将30g尿素溶于95%的甲醇水溶液中，在甲醇溶液中加入 60g硅胶，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用乙酸乙 酯勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的乙醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 5wt%，工艺总收率86wt%。实施例9(1)浸膏皂化将石油醚提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为20衬％的20g聚戊烯 醇浸膏，在8wt %的IOOg NaOH-乙醇溶液，充分搅拌，在30°C下皂化4h，反应液用盐酸中和， 浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于90wt%的甲醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入50g活性炭，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用氯仿勻 速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的乙腈，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到99. 5wt%，工艺总收率88wt%。实施例10(1)浸膏皂化将正己烷提取银杏叶得到的聚戊烯醇含量为10衬％的60g聚戊烯 醇浸膏，在15wt %的IOOg KOH-乙醇溶液，充分搅拌，在60°C下皂化3h，反应液用硫酸中和， 浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将IOOg尿素溶于80wt%的甲醇水溶液中，在甲醇溶液中 加入80g活性炭，旋转蒸干，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用正己烷 勻速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干。(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇，饱和溶液，冷冻结晶，过 滤，干燥，得到的聚戊烯醇的含量达到98. 2wt%，工艺总收率85wt%。
权利要求
一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于包括如下步骤(1)浸膏皂化聚戊烯醇浸膏在醇碱溶液中，充分搅拌，在30 80℃下皂化0.5 4h，反应液用酸中和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；(2)尿素固定相的制备将尿素溶于负载溶剂中，加入载体，使尿素负载在载体上，除去溶剂，制得固定相；(3)尿素柱层析将制得的固定相装柱，然后将皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用流动相匀速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干；(4)结晶尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，饱和溶液，冷冻结晶，过滤，干燥得到聚戊烯醇。
2.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤 (1)所述的聚戊烯醇浸膏是用石油醚、正己烷、丙酮、乙醇或超临界二氧化碳提取银杏叶得 到的聚戊烯醇含量在5-20wt%的聚戊烯醇浸膏。
3.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤 (1)所述的醇碱溶液是l_40wt%的氢氧化钠或氢氧化钾的甲醇，1-40衬％的氢氧化钠或氢 氧化钾的乙醇溶液。
4.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤 (1)所述的聚戊烯醇浸膏与醇碱溶液的质量比为1-10 10。
5.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤(1)所述的酸是液体酸。
6.如权利要求5所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于液体酸 为盐酸或硫酸。
7.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤(2)所述的负载溶剂是40-95wt%的甲醇-水溶液、40-95wt%的乙醇-水溶液、甲醇或乙
8.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤 (2)所述的载体是硅胶、氧化铝或活性炭。
9.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤(2)所述的尿素载体的质量比为0.1-10 1。
10.如权利要求1所述的一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法，其特征在于步骤(3)所述的流动相是石油醚、正己烷、氯仿或乙酸乙酯。
全文摘要
一种分离精制银杏浸膏中聚戊烯醇的方法是聚戊烯醇浸膏在醇碱溶液中，充分搅拌，在30-80℃下皂化0.5-4h，反应液用酸中和，浓缩得到皂化后聚戊烯醇浸膏；将尿素溶于负载溶剂中，加入载体，使尿素负载在载体上，除去溶剂，制得固定相；将制得的固定相装柱，然后将皂化后聚戊烯醇浸膏上柱，用流动相匀速注入层析柱进行洗脱，收集不同时段的洗脱分，将富含聚戊烯醇的洗脱分合并，浓缩蒸干；尿素柱层析后的聚戊烯醇溶于回流中的甲醇、乙醇或乙腈中，饱和溶液，冷冻结晶，过滤，干燥得到聚戊烯醇。本发明具有操作条件温和，工艺收率高，产品纯度高，工艺简单，运行成本低的优点。
文档编号C07C29/76GK101967083SQ20101029154
公开日2011年2月9日 申请日期2010年9月20日 优先权日2010年9月20日
发明者侯相林, 邓天昇, 韩蕊蕊 申请人:中国科学院山西煤炭化学研究所