氟康唑抑制癌症生长的用途的制作方法

专利名称：氟康唑抑制癌症生长的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用于治疗尤其是人或温血动物癌症和肿瘤的药物组合物，其中包含2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物。它可以和其它化疗剂和增效剂合用。该组合物还可用于治疗病毒感染。
背景技术：
癌症，包括白血病在内，是导致动物和人死亡的主要原因之一。白血病的确切病因还不清楚，但是大量研究已经证明了某些类型白血病和肿瘤的发生与某些活动例如吸烟或接触致癌物质相关。
已经证明，许多化疗剂对癌症、肿瘤或白血病有效，但并非所有类型的癌症和肿瘤细胞用这些药物都有效。不幸的是，许多这类药物同时杀伤正常细胞。人们对于这些化疗剂的确切作用机制并不总是了解的。
尽管在癌症和白血病治疗领域已经有所发展，但是目前主要的治疗方法仍然是放射和化疗以及骨髓移植。化疗方法被认为能够抗击尤其具有侵袭性的癌症。这类杀细胞性或细胞生长抑制性药物对生长指数高的癌症，即细胞分裂迅速的癌症尤其有效。迄今为止，肿瘤学家可使用的治疗剂主要包括激素，尤其是雌激素、孕酮和睾酮，以及由许多微生物产生的某些抗生素，烷化剂和抗代谢药。特别理想的是那些仅特异地作用于白血病、癌症和肿瘤细胞而不影响到正常细胞的细胞毒药物。不幸的是，还没有找到这类药物，而只能代之以使用特别针对迅速分裂的细胞(同时包括病变的和正常的细胞)的药物。
显然，开发出因某种独特的特异性而针对癌症或白血病细胞的物质将是一大突破。或者，对白血病或癌症细胞具有细胞毒性但是对正常细胞仅有轻度作用的物质也是人们所需的。所以，本发明的目的之一是提供一种具有治疗白血病作用但是对正常血细胞作用温和或者无作用的药物组合物。
更具体的说，本发明的目的之一是提供一种包含本文所述的药用载体和2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物的组合物，以及一种治疗癌症、白血病和肿瘤的方法。
将2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物与具有杀伤肿瘤作用的其它化疗剂合用是一种新的疗法。2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物还可以单独或在增效剂存在下用于治疗病毒感染。
发明概述本发明提供了一种用于治疗患有白血病的哺乳动物，尤其是温血动物和人的药物组合物，其中包含药用载体和有效量的2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇(氟康唑)及其衍生物。2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇具有以下结构式

通过口服、直肠给药、局部给药或非肠胃道给药、或静脉给以有效量，这些组合物可被用于抑制人或动物体内白血病、肿瘤和癌症细胞的生长。这些组合物对健康细胞没有显著的作用。
增效剂和化疗剂一样，也可以和2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物合用。
这些组合物对于抗流感病毒尤其有效。
详细说明A.定义本文中，“包含”指在本发明的药物组合物中可以结合使用多种成份。相应的，“主要由…构成”和“由…构成”包涵在“包含”之中。
本文中，“药学上认可”的成份是适用于人和/或动物，而且与合理的疗效/风险比相应，没有过度的不良副作用(例如毒性、刺激性和过敏反应)的成份。
本文中，“安全有效量”指在按照本发明方法使用时，某成份的用量足以产生所需的疗效，而且与合理的疗效/风险比相应，没有过度的不良副作用(例如毒性、刺激性和过敏反应)。显然，具体的“安全有效量”会根据以下因素而不同具体有待治疗的病情，患者的身体情况，待治疗哺乳动物的种类，疗程，同时进行的治疗的特性(如果有的话)，以及具体使用的配方和化合物及其衍生物的结构。
本文中，“2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇衍生物”包括其酯、醚和药学上认可的盐。
本文中，“药物加成盐”是2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇与有机或无机酸形成的盐。这类优选的酸加成盐是氯化物、溴化物、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、磺酸盐、甲酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。
本文中，“药用载体”指药学上认可的用于向动物或人传送抗白血病药物的溶剂、悬浮剂或赋形剂。载体可以是液体或者固体的，并且根据预定的给药方案来选择。
本文中，“癌症”或“白血病”指在哺乳动物中发现的，攻击正常健康血细胞或产生血细胞的骨髓的所有类型的癌症或肿瘤或恶性疾病。
本文中，“病毒”包括在温血动物中致病的病毒，包括HIV、流感病毒、鼻病毒、疱疹等。
本文中，“2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物”包括酯、醚和加成盐。
本文中，“增效剂”是与2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物合用的物质，例如曲普利啶及其顺式异构体或1H-苯并咪唑-2-丙酸。增效剂能够作用于免疫系统，或者增强药物的疗效。
本文中，“化疗剂”包括与DNA相作用的药物、抗代谢药、与微管蛋白相作用的药物，激素类药及其它，例如天冬酰胺酶或羟基脲。B. 2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物具有以下结构式

它是按照Richardson的美国专利4,404,216(1983)中所述的方法制备的。
其衍生物包括丙醇基的低级羧酸酯，例如乙酸、丙酸、丁酸、戊酸和己酸酯。特别好的是7个碳原子以下的羧酸的酯，最好的是丙酸酯。芳香族羧酸，例如水杨酸、苯甲酸以及相关的酸也可以用于酯化丙醇基团。7个碳原子以下的烷基醚也是有用的衍生物。
药物加成盐是2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇与有机或无机酸形成的盐。这类较好的酸加成盐是氯化物、溴化物、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、磺酸盐、甲酸盐、酒石酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、抗坏血酸盐等。
这类化合物属于具有以下结构式的更为一般的一类杀真菌剂

其中R1是可任意取代的烷基、环烷基、芳基、(2，4-二氯苯基)或芳烷基，Y1和Y2是＝CH-或＝N-；以及它们的盐或金属配合物和醚或酯。虽然这些物质可有效地治疗真菌病，但是其中有些已发现具有致畸性。所以，本文中，表现出这种性质的物质是不适用的。C.化疗剂通常将化疗剂分类为与DNA相作用的药物，抗代谢药、与微管蛋白相作用的药物，激素类药和天冬酰胺酶或羟基脲之类的其它药物。每一类化疗剂还可以根据活性类型或化合物类型进一步区分。与2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物合用的化疗剂包括所有这些类型中的成员。有关化疗剂及其给药方法的详细论述可参见在此引用参考的Dorr.等的《癌症化疗手册》(Cancer Chemotherapy Handbook)第2版，第15至34页，Appleton &Lange(Connecticut，1994)。
与DNA相作用的药物包括烷化剂，例如顺铂、环磷酰胺、六甲蜜胺；DNA链断裂剂，例如博来霉素；嵌人性拓扑异构酶II抑制剂，例如放线菌素D和阿霉素；非嵌入性拓扑异构酶II抑制剂，例如依托泊甙和替尼泊甙；和DNA小沟结合剂普卡霉素。
烷化剂与细胞DNA、RNA和蛋白质分子，与较小的氨基酸、谷胱甘肽之类化合物形成共价化学加成物。通常，这类烷化剂与某种细胞组分中的亲核性原子，例如核酸、蛋白质、氨基酸或谷胱甘肽中的氨基、羧基、磷酸酯、巯基反应。这些烷化剂在癌症治疗中的机制和作用并不完全清楚。典型的烷化剂包括氮芥类，例如苯丁酸氮芥、环磷酰胺、Isofamide、氮芥、美法仑、乌拉莫司汀；氮丙啶，例如塞替派；甲磺酸酯，例如白消安；亚硝基脲，例如卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星；铂配合物，例如顺铂、卡铂；生物还原性烷化剂，例如丝裂霉素和丙卡巴肼，达卡巴嗪和六甲蜜胺；DNA链断裂剂，其中包括博来霉素；DNA拓扑异构酶II抑制剂，其中包括嵌入剂，例如安吖啶、放线菌素D、柔红霉素、阿霉素、伊达比星和米托蒽醌；非嵌入剂，例如依托泊甙和替尼泊甙；DNA小沟结合剂是普卡霉素。
抗代谢药通过两种主要机制之一干扰核酸的生成。此类药物中有些抑制作为DNA合成直接前体的三磷酸脱氧核糖核苷的生成，由此抑制DNA的复制。这类化合物中有些与嘌呤和嘧啶足够类似而可以在核苷酸合成途径中取而代之。这些类似物然后可以取代它们的正常对等物进入DNA和RNA。本文中适用的抗代谢药包括叶酸拮抗剂，例如甲氨喋呤和三甲曲沙；嘧啶拮抗剂，例如氟尿嘧啶、氟脱氧尿苷、CB3717、阿扎胞苷、阿糖胞苷、氟尿苷；嘌呤拮抗剂，包括巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、氟达拉滨、喷司他丁；糖修饰类似物，包括Cyctrabine、氟达拉滨；核糖核苷酸还原酶抑制剂，包括羟基脲。
与微管蛋白相作用的药物通过结合微观蛋白上的特殊位点起作用，微观蛋白是一种通过聚合形成细胞微管的蛋白质。微管是重要的细胞结构单元。当相作用的药物与蛋白质结合时，细胞就不能形成微管。与微管相作用的药物包括长春新碱和长春碱这两种，生物碱和紫杉醇。
激素类药也可以用于治疗癌症和肿瘤。它们被用于激素敏感性肿瘤，而且通常衍生自天然来源。其中包括
雌激素，结合雌激素和炔雌醇和己烯雌酚，氯烯雌醚和Idenestrol；孕酮类，例如羟孕酮己酸酯、甲羟孕酮和甲地孕酮；雄激素，例如睾酮，睾酮丙酸酯；氟甲睾酮，甲睾酮；肾上腺皮质甾类衍生自天然皮质醇或氢化可的松。使用它们是因为它们的抗炎作用，以及其中有些具有的抑制有丝分裂和阻断DNA合成的能力。这类化合物包括泼尼松、地塞米松、甲泼尼龙和泼尼松龙。
促黄体生成素释放激素类药或促性腺素释放激素拮抗剂主要用于治疗前列腺癌。其中包括醋酸壳丙瑞林和乙酸戈舍瑞林。在试验中，它们阻止甾体的生物合成。
抗激素类药包括抗雌激素药，例如他莫昔芬；抗雄激素药，例如氟他胺；和抗肾上腺药，例如米托坦和氨鲁米特。
羟基脲似乎主要通过抑制核糖核苷酸还原酶起作用。
天冬酰胺酶是一种在肿瘤内将天冬酰胺转化成无功能的天冬氨酸并由此阻断蛋白质合成的酶。
紫杉醇是一种较好的化疗剂。D.增效剂“增效剂”是改善或加强药物组合物的效力或者作用于免疫系统的任何物质。这类增效剂之一是曲普利啶及其顺式异构体，它们被与化疗剂和2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物合用。有关曲普利啶可参见美国专利5,114,951(1992)。另一种增效剂是丙考达唑，1H-苯并咪唑-2-丙酸；[β-(2-苯并咪唑)丙酸；2-(2-羧基乙基)苯并咪唑；propazol]。丙考达唑是一种非特异性主动免疫保护剂，抗病毒和细菌感染，可以与本文的组合物合用。当它仅与2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物合用，或者与化疗剂合用时可有效治疗癌症、肿瘤、白血病和病毒感染。
丙酸及其盐和酯也可以与本发明的药物组合物合用。
在本文组合物中还可以加入抗氧化剂类维生素，例如维生素A、C和E，以及β-胡萝卜素。E.剂量在本发明方法中可以使用任何合适的剂量。化合物和载体的类型以及用量将随温血动物或人的种类，体重，有待治疗的癌症或肿瘤或病毒感染的类型有很大不同。通常，对2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物或化疗剂来说，合适的剂量在约每千克体重1毫克至约每千克体重1000毫克之间。较好的是使用每千克体重约15至800毫克。通常，人用剂量低于小型温血动物，例如小鼠。一个剂量单位可包含一种单一化合物或与其它化合物或其它癌症抑制剂的混合物。这种剂量单位还可以包含稀释剂、扩充剂、载体、脂质体等。剂量单位可以是固体或凝胶形式的，例如丸剂、片剂、胶囊等，或者是适于口服、直肠给药、局部给药、静脉注射或非肠胃道给药，或注射于骨髓内或周围的液体形式。2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物与化疗剂的范围和比例取决于有待治疗的癌症或肿瘤的类型和具体使用的化疗剂。F.给药剂型化疗剂、2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物，和任选的增效剂通常与药学上认可的载体混合在一起。这种载体可以是固体或液体的，其类型通常根据采用的给药类型来选择。有效药物可以以片剂或胶囊，脂质体的形式共同给药，或者以混合的粉末或液体形式。合适的固体载体的实例包括乳糖、蔗糖、明胶和琼脂。胶囊或片剂配制方便，而且易于吞咽和咀嚼；其它固体剂型包括颗粒剂和疏松粉剂。片剂可以包含合适的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、赋味剂、助流剂和助熔剂。合适的液体剂型包括在水、药学上认可的脂肪和油，醇或其它有机溶剂，其中包括酯中形成的溶液或悬浮剂，乳剂、糖浆剂或酏剂、悬浮剂、溶液剂和/或非泡腾性颗粒剂再生而成的悬浮液，和由泡腾性颗粒剂再生而成的泡腾剂。这种液体剂型可以包含例如合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、助悬剂、稀释剂、甜味剂、增稠剂和助熔剂。口服剂型可以任选地包含赋味剂和着色剂。非肠胃道和静脉剂型还包含使之与选用的注射或给药系统类型相配伍的矿物质和其它物质。
1975年9月2日授权于Robert的美国专利3,903,297中描述了可用于配制本发明口服剂型的药学上认可的载体和赋形剂的具体实例。以下参考文献中描述了用于制造本发明所用剂型的技术和组成7《现代制药学》(7 ModernPharmaceutics)，第9和第10章(Banker & Rhodes编，1979)；Lieberman等，《药物剂型片剂》(Pharmaceutical Dosage FormsTablets)(1981)；和Ansel，《药物剂型导论》Introduction to(Pharmaceutical Dosage Froms)第2版)1976。G.治疗方法治疗方法可以是任何在治疗具体的癌症或肿瘤类型中有效的合适方法。治疗方法可以是口服、直肠、局部、非肠胃道或静脉给药，或注射到肿瘤或癌症内。使用有效量药物的方法还取决于有待治疗的白血病、癌症、肿瘤或病毒。据信，对温血动物给予化合物的较好的方法是非肠胃道治疗，即通过静脉、皮下或肌内使用与合适的载体、附加的一种或多种抑癌化合物或协助给药的稀释剂配制在一起的2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物。
除了使用化疗剂和增效剂之外，2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物还可以与杀真菌剂、除草剂或其它抗病毒药合用。较好的除草剂和杀真菌剂包括多菌灵、fluoconazole、苯菌灵、草甘膦和propicodazole。
当该药物组合物被用于治疗病毒感染时，它们可以与其它抗病毒药合用。利用人流感病毒进行的抗病毒评价使用收到时为5至7周龄的雌性CD小鼠(Charles River Breeding Laboratories，Portage，MI)。在测试开始时，小鼠约为6至9周龄，重约20至28克。研究中使用的各鼠，年龄相差不超过10天。将每6个小鼠关在一个有垫草的笼内。让小鼠自由进食鼠食5002(PMI，St.Louis Missouri)。令其自由进食淡水。
用人流感毒株AT2/Taiwan/1/64攻击小鼠。该毒株保存在约-70℃。在感染性攻击之前，先将病毒的冷冻保藏物融化合并在生理盐水缓冲液中稀释至合适的浓度。用氟烷麻醉小鼠，鼻内给以50微升的病毒攻击剂量。
按照以下浓度和体积使用供试物质。在第1天至第14天，每组10个小鼠以供试物经口灌洗。生理盐水对照动物(10个)接受与供试物给药小鼠相应体积的生理盐水。按照24小时的间隔来完成供试物的给药。在第0天，第二次给以供试物或生理盐水约4小时后，各鼠用据计算可造成约90％死亡率的感染剂量的病毒于鼻内攻击。在感染性攻击后的21天内，每日观察动物的致死率或濒死率。供试物剂量(毫克/千克)死亡百分比氟康唑 350 0氟康唑 70030％生理盐水 - 100％金刚烷胺 75 0％人肿瘤集落形成单位的体外试验将取自患者的实体瘤切成2至5毫米的小片，立即放置在加10％经热灭活的新生牛血清加1％青霉素/链霉素的McCoy氏培养基5A中。4小时内，用剪机械解离这些实体瘤，并在压力下滤过100号的不锈钢筛网和25号针头，然后用前述McCoy氏培养基洗涤。利用常规技术获取腹水、胸水、心包液和骨髓。将这些体液或骨髓置于无菌容器中，容器中已含每毫升恶性体液或骨髓10单位无肝素的防腐剂。在以150×g离心10分钟后，收集细胞，并用加10％经热灭活的小牛血清的McCoy氏培养基5A洗涤。利用台盼蓝法在血细胞计数仪上测定细胞悬浮液的活力。
将克隆用的细胞悬浮在用富集CMRL1066培养基配制的0.3％琼脂中，培养基中已补充了15％经热灭活的马血清、青霉素(100单位/毫升)、链霉素(2毫克/毫升)、谷酰胺(2毫摩尔浓度)、胰岛素(3单位/毫升)、天冬酰胺(0.6毫克/毫升)和HEPES缓冲液(2毫摩尔浓度)。为了进行连续暴露试验，将每一供试化合物加入上述混合物中。在35毫米培养皿中将细胞铺在表层琼脂上，该层下有一层用于防止成纤维细胞生长的琼脂。为每一个数据点制备3块平板。将平板放在37℃的培养箱中，在第14天取出，计数各板上的集落数。将3个经化合物处理的平板中形成的集落(定义为50个细胞)数与3个对照平板上的比较，然后可将各化合物浓度下的存活集落百分比制成表。用3个阳性对照平板来测定存活率。用200微克/毫升正钒酸钠作为阳性对照。如果阳性对照中的集落数低于非处理对照的30％，可对试验进行评价。
在连续暴露试验或单剂量试验中，0.5和5.0微克/毫升的氟康唑抗肿瘤无效(分别为0/3和0/13)。在连续暴露试验中，50.0微克/毫升的氟康唑对于肺非小细胞癌和卵巢癌尤其有效。总共有4/13出现50％或以下的存活率。
权利要求
1.一种治疗癌症、肿瘤和病毒感染的药物组合物，其中包含约1毫克/千克体重至800毫克/千克体重选自下组物质的一种物质，该组包括2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物和它们的混合物以及药学上认可的载体。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中还包含安全有效量的化疗剂。
3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述的化疗剂选自与DNA相作用的药物、抗代谢药、与微管蛋白相用作的药物、激素类药、天冬酰胺酶或羟基脲。
4.根据权利要求1、2或3所述的药物组合物，其中所述的化疗剂选自天冬酰胺酶、羟基脲、顺铂、环磷酰胺、六甲蜜胺、博来霉素、放线菌素D、阿霉素、依托泊甙、替尼泊甙和普卡霉素。
5.根据权利要求1、2或3所述的药物组合物，其中所述的化疗剂选自紫杉醇、甲氨喋呤、氟尿嘧啶、氟脱氧尿苷、CB3717、阿扎胞苷、阿糖胞苷、氟尿苷、巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、氟达拉滨、喷司他丁、Cyctrabine和氟达拉滨。
6.根据权利要求1、2、3、4或5所述的药物组合物，其中还包含增效剂。
7.一种治疗温血动物癌症或肿瘤的方法，该方法包括给以安全有效量的权利要求1、2、3、4、5或6所述的组合物。
8.一种治疗温血动物病毒感染的方法，该方法包括给以安全有效量的权利要求1、2、3、4、5或6所述的组合物。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其中通过口服或经肠、静脉、经腹腔、或向肿瘤内注射所述的2-(2，4-二氟苯基)-1，3-双(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-2-醇及其衍生物。
全文摘要
本发明公开了一种治疗哺乳动物癌症或肿瘤的药物组合物,其中包含2－(2,4－二氟苯基)－1,3－双(1H－1,2,4－三唑－1－基)丙－2－醇及其衍生物。可以将某种化疗剂和增效剂一样与2－(2,4－二氟苯基)－1,3－双(1H－1,2,4－三唑－1－基)丙－2－醇及其衍生物合用。2－(2,4－二氟苯基)－1,3－双(1H－1,2,4－三唑－1－基)丙－2－醇及其衍生物还可以用于治疗病毒感染,或者单独使用,或者与其它抗病毒药物和增效剂合用。
文档编号C07D249/08GK1195288SQ96196682
公开日1998年10月7日 申请日期1996年7月30日 优先权日1995年8月4日
发明者J·B·卡姆登 申请人:普罗克特和甘保尔公司