99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法及应用与流程

本发明涉及一种靶向TSPO SPECT显像的分子影像探针，特别是涉及一种^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法及应用。

背景技术：

目前靶向TSPO的分子影像探针大多为¹⁸F的标记的行PET显像，如：¹⁸F-FEDAC等，但PET设备昂贵，检查费用高，而SPECT设备较便宜，普及较广，检查费较低，因此开发靶向TSPO SPECT显像的分子影像探针显得极其为重要和意义。

技术实现要素：

本发明目的在于克服现有技术的上述缺陷，提供一种适用SPECT设备，检查费较低的 ^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法，本发明还涉及其应用。

为实现上述目的，本发明^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法，其特别之处在于先向溶解在二甲基亚砜的试剂CB86加入敖合剂DTPAA，在室温下搅拌均匀，并反应数日后，加入ddH₂O，制得CB86-DTPA；具体是加入ddH₂O层析后，制得CB86-DTPA。

再向CB86-DTPA加入PBS缓冲液和新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置数10分钟后，加入新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应数10min，冷却至室温，经C18小柱纯化，即得^99mTc-CB86-DTPA。经试验证明：制得的此外周型苯二氮卓受体转运蛋白(TSPO)在炎症细胞中呈现高表达水平。试剂CB86是分子式为C26H43NO3的生化试验用试剂CB86。

制得的此TSPO表达量在一定程度上可以反映巨噬细胞聚集及激活程度，进而反映出炎症活动的过程。制得的^99mTc-CB86-DTPA应用于炎症动物显像，特别是应用于人炎症细胞或组织的显像，具有适用SPECT设备，检查费较低的优点。

作为优化，制得CB86-DTPA的纯度＞80％，即得^99mTc-CB86-DTPA的放射性纯度＞90％。

作为优化，即得^99mTc-CB86-DTPA的放射性浓度2.9MBq/nmol。

作为优化，所述先向溶解在二甲基亚砜的试剂CB86加入敖合剂DTPAA，在室温下搅拌均匀，并反应数日后，加入ddH₂O，制得CB86-DTPA是先向溶解在2ml二甲基亚砜的50mg CB86加入200mg敖合剂DTPAA，置于室温磁力加热搅拌器上摇匀，反应24h-36h后，加入2ml ddH₂O，制得CB86-DTPA。具体是加入2ml ddH₂O层析后，制得CB86-DTPA。

作为优化，所述置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀是置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀。

作为优化，所述向CB86-DTPA加入PBS缓冲液和新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置数10分钟后，加入新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应数10min，冷却至室温，经C18小柱纯化，制得^99mTc-CB86-DTPA是取200μl CBg6-DTPA加入500μl PBS缓冲液和20μl新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置30分钟后，加入10mCi新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应30min，冷却至室温，经C18小柱纯化，即得^99mTc-CB86-DTPA。

作为优化，所述摇匀是置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀。

作为优化，所述置于100℃振荡模块反应30min，冷却至室温是置于100℃振荡模块反应30min。取下小瓶，冷却至室温。

作为优化，所述PBS缓冲液是磷酸缓冲盐溶液。

本发明制备方法制得的^99mTc-CB86-DTPA应用于SPECT显像的分子影像探针。具体是应用于炎症动物显像，特别是应用于人炎症细胞或组织的显像。经试验证明：制得的此外周型苯二氮卓受体转运蛋白(TSPO)在炎症细胞中呈现高表达水平。制得的此TSPO表达量在一定程度上可以反映巨噬细胞聚集及激活程度，进而反映出炎症活动的过程。制得的^99mTc-CB86-DTPA具有适用SPECT设备，检查费较低的优点。

采用上述技术方案后，本发明^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法制得的 ^99mTc-CB86-DTPA应用于SPECT显像的分子影像探针，具体应用于炎症动物显像，特别是应用于人炎症细胞或组织的显像，具有适用SPECT设备，检查费较低的优点。

附图说明

图1是^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法制得的^99mTc-CB86-DTPA用高效液相色谱检测的色谱图；

图2是本发明^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法制得的^99mTc-CB86-DTPA在炎症小鼠Micro-SPECT/CT显像应用的显像图。

具体实施方式

本发明^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法是先向溶解在二甲基亚砜的试剂CB86加入敖合剂DTPAA，在室温下搅拌均匀，并反应数日后，加入ddH₂O，制得CB86-DTPA；再向CB86-DTPA加入PBS缓冲液和新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置数10分钟后，加入新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应数10min，冷却至室温，经C18小柱纯化，即 得^99mTc-CB86-DTPA。试剂CB86是分子式为C26H43NO3的生化试验用试剂CB86。

具体是制得CB86-DTPA的纯度＞80％，即得^99mTc-CB86-DTPA的放射性纯度＞90％。

更具体是即得^99mTc-CB86-DTPA的放射性浓度2.9MBq/nmol。

具体是所述先向溶解在二甲基亚砜的试剂CB86加入敖合剂DTPAA，在室温下搅拌均匀，并反应数日后，加入ddH₂O，制得CB86-DTPA是先向溶解在2ml二甲基亚砜的50mg CB86加入200mg敖合剂DTPAA，置于室温磁力加热搅拌器上摇匀，反应24h-36h后，加入2ml ddH₂O，制得CB86-DTPA。具体是加入2ml ddH₂O层析后，制得CB86-DTPA。

更具体是所述置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀是置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀。

具体是所述向CB86-DTPA加入PBS缓冲液和新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置数10分钟后，加入新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应数10min，冷却至室温，经C18小柱纯化，制得^99mTc-CB86-DTPA是取200μl CB86-DTPA加入500μl PBS缓冲液和20μl新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置30分钟后，加入10mCi新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应30min，冷却至室温，经C18小柱纯化，即得^99mTc-CB86-DTPA。

更具体是所述摇匀是置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀。

更具体是所述置于100℃振荡模块反应30min，冷却至室温是置于100℃振荡模块反应30min。取下小瓶，冷却至室温。

具体是所述PBS缓冲液是磷酸缓冲盐溶液。

最具体是：先向溶解在2ml二甲基亚砜DMSO的50mg试剂CB86加入200mg敖合剂DTPAA，置于室温1200rpm磁力加热搅拌器上摇匀，反应24h-36h后，加入2ml ddH₂O，即得CB86-DTPA，纯度＞80％。再取200μl CB86-DTPA加入500μl PBS缓冲液和20μl新鲜配制SnCl₂，摇匀，室温放置30分钟后，加入10mCi新鲜^99mTcO₄^-溶液，置于100℃振荡模块反应30min。取下小瓶，冷却至室温，经C18小柱纯化，即得^99mTc-CB86-DTPA，放射性浓度2.9MBq/nmol，放射性纯度＞90％。

合成^99mTc-CB86-DTPA的线路如下：

用HPLC高效液相色谱对产物^99mTc-DTPA-CB86鉴定，所用的梯度条件(流速为0.5ml/min)如下表所示：

^99mTc-CB86在HPLC高效液相色谱中的鉴定梯度

在此梯度下，如图1所示，该产物的出峰时间约为：25.7min。

本发明制备方法制得的^99mTc-CB86-DTPA应用于SPECT显像的分子影像探针。具体是应用于炎症动物显像，特别是应用于人炎症细胞或组织的显像。应用于炎症动物模型显像如图2所示：左侧下肢炎症组织有明显^99mTc-CB86-DTPA富聚。

即：^99mTc-CB86-DTPA在炎症Balb/c小鼠的Micro-SPECT/CT显像结果如图2所示，从图中可以看出，炎症部位的放射性摄取较对侧正常肌肉组织相比明显升高，在0.5h时间点已经可以清晰地看出放射性的浓聚。而且在0.5h、1.5h、3h时间点上，摄取随着时间的延长不断递增。在3h时间点，炎症部位的摄取最浓。

经试验证明：制得的此外周型苯二氮卓受体转运蛋白(TSPO)在炎症细胞中呈现高表达水平。制得的此TSPO表达量在一定程度上可以反映巨噬细胞聚集及激活程度，进而反映出炎症活动的过程。

采用上述技术方案后，本发明^99mTc标记靶向TSPO新型配体CB86的制备方法制得的 ^99mTc-CB86-DTPA SPECT显像的分子影像探针，具体应用于炎症动物显像，特别是应用于人炎症细胞或组织的显像，具有适用SPECT设备，检查费较低的优点。