利用β‑葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法及其应用与流程

文档序号:11126114阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于包括以下步骤:在发酵培养基中接种嗜热厌氧梭菌,并添加物质A进行厌氧发酵,物质A为β-葡萄糖苷酶和表面活性剂中的一种或两种;

所述的发酵培养基为以菇渣为碳源的培养基。

2.根据权利要求1所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的表面活性剂为Triton X-100;

所述的表面活性剂的添加量按终浓度为质量体积比0.25%计算;

所述的β-葡萄糖苷酶的添加量按每g菇渣配比10~11Uβ-葡萄糖苷酶计算。

3.根据权利要求2所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的表面活性剂的添加时间为发酵第82h添加;

所述的β-葡萄糖苷酶的添加时间为:发酵第0h和/或发酵第82h时添加。

4.根据权利要求1所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的发酵培养基的组成为A液、B液、C液、D液和E液按体积比40:2:1:1:1混合得到,pH值约为7.0,其中:

A液中含有60g/L的菇渣作为碳源;B液中含有柠檬酸钾50g/L、一水柠檬酸31.25g/L、硫酸钠25g/L、磷酸二氢钾25g/L和碳酸氢钠62.5g/L;C液中含有氯化铵75g/L、尿素250g/L和酵母抽提物50g/L;D液中含有六水氯化镁50g/L、氯化亚铁四水合物5g/L、二水氯化钙10g/L和L-半胱氨酸盐酸盐一水物50g/L;E液中含有二盐酸吡哆胺1g/L、对氨基苯甲酸0.2g/L、D-生物素0.1g/L、维生素B12 0.1g/L和维生素B1 0.2g/L;A液、B液、C液、D液、和E液中的溶剂为去离子水。

5.根据权利要求4所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的菇渣通过如下方法制备得到:将菇类生产后的废弃物用清水洗涤至中性后烘干至恒重,粉碎得到,菇类生产后的废弃物包括菇类的培养基以及被废弃的菇体。

6.根据权利要求1所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的厌氧发酵通过如下操作步骤实现:在能密封的发酵容器中加入发酵培养基,密封,抽真空,充惰性气体,灭菌,再接种嗜热厌氧梭菌进行厌氧发酵。

7.根据权利要求6所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的能密封的容器为血清瓶;

所述的惰性气体为氮气;

所述的充惰性气体的具体操作为:充0.01MPa氮气3次;

所述的灭菌的条件为:115℃灭菌20min;

所述的嗜热厌氧梭菌为嗜热厌氧梭菌ATCC 27405。

8.根据权利要求6所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的发酵的温度为55℃,摇床转速为150rpm,发酵的时间为168h收集氢气或发酵液;

所述的嗜热厌氧梭菌为处于对数生长期的嗜热厌氧梭菌,接种体积量为相当于发酵培养基体积的10%。

9.根据权利要求8所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法,其特征在于:

所述的处于对数生长期的嗜热厌氧梭菌通过如下步骤制备得到:将嗜热厌氧梭菌在种子液培养基中经活化和扩大培养,得到处于对数生长期的嗜热厌氧梭菌;

所述的种子液培养基组成为:A1液、B液、C液、D液和E液按体积比40:2:1:1:1混合得到,其中:

A1液中含有3g/L的纤维素作为碳源;B液中含有柠檬酸钾50g/L、一水柠檬酸31.25g/L、硫酸钠25g/L、磷酸二氢钾25g/L和碳酸氢钠62.5g/L;C液中含有氯化铵75g/L、尿素250g/L和酵母抽提物50g/L;D液中含有六水氯化镁50g/L、氯化亚铁四水合物5g/L、二水氯化钙10g/L和L-半胱氨酸盐酸盐一水物50g/L;E液中含有二盐酸吡哆胺1g/L、对氨基苯甲酸0.2g/L、D-生物素0.1g/L、维生素B12 0.1g/L和维生素B1 0.2g/L;A1液、B液、C液、D液、和E液中的溶剂为去离子水。

10.权利要求1~9所述的利用β-葡萄糖苷酶提高菇渣产氢和产糖的方法在微生物发酵领域中的应用。

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