苯并三环类衍生物、其制备方法与用途与流程

本发明属于药物合成领域，具体涉及一类新型的苯并三环类衍生物、其制备方法、包括该衍生物的药物组合物、及其用途。所述苯并三环类衍生物对hh信号通路具有抑制活性，可作为分子靶向药物在抗肿瘤领域中应用。

背景技术：

分子靶向抗肿瘤药物是当今研究抗肿瘤药物的主流趋势，而靶向hedgehog(hh)信号通路的抗肿瘤药物是这一领域的研究热点。hedgehog(hh)信号转导通路广泛存在于人体中，它主要参与了胚胎的发育与形成，是一个经典的控制胚胎发育的信号转导途径。在成年后，heghehog信号通路除了参与组织的维持和修复外，一直处于抑制状态。而异常激活hedgehog信号传导可引起多种肿瘤的发生，如基底细胞癌(bcc)、髓母细胞瘤、肺癌、胰腺癌等。因此hedgehog信号通路的研究对临床治疗以及新型抗癌药物的研发具有重要作用。hh信号传导通路由hh配体、12次跨膜蛋白ptch、下游7次跨膜smo蛋白以及信号转录因子gli家族4部分组成，脊椎动物的shh、dhh和ihh3个同源基因可以编码类似的分泌蛋白即hh配体，其本身并不具有活性，但可以通过自身催化加工的能力经修饰后产生生物学活性。hh配体活化后可以与细胞膜上的受体ptch(patched)和smo(smoothened)发挥信号转导作用。ptch是一种12次跨膜蛋白，有2个细胞外结合域和1个细胞内结合域。在没有配体激活的情况下，这种膜蛋白可抑制它下游的smo蛋白的活性。smo蛋白是具有7个疏水跨膜区的信号转导蛋白，是gpcrf家族的受体之一。激活的smo蛋白将信号向下游传导，激活转录因子gli基因家族，包括gli1、gli2和gli3。

鉴于hh信号通路与肿瘤及肿瘤干细胞的发生、发展的密切关系，围绕hh信号通路抑制剂的研究成为热点，且目前已有多个涉及hh信号通路的化合物上市或处于临床研究阶段。靶向hh信号通路的小分子抑制剂根据其作用靶点大约分3类：靶向其配体hh的小分子抑制剂，如：robotikinin(nat.chem.biol.2009,5,154-156)；靶向转录因子gli的小分子抑制剂，如：gant61(pnas.2007,104,8455-8460)和三氧化二砷(pnas.2010,107,13432-13437)等；靶向其受体smo蛋白的小分子抑制剂，这是目前靶向hh信号通路抑制剂开发最多和最成功的靶点，其代表化合物有：gdc-0449(bioorg.med.chem.lett.2009,19,5576-5581)、lde225(acsmed.chem.lett.2010,1,130–134)、nvp-leq506(chemmedchem2013,8,1261-1265)、pf-04449913(acsmed.chem.lett.2011,3,106-111.)等，其中gdc-0449和lde225作为治疗中晚期基底细胞癌(basalcellcarcinoma，bcc)的抗肿瘤药物已经成功上市。

目前，已经上市的gdc-0449和lde225都存在着原发性耐药和继发性耐药的问题，同时还产生多种副作用。而我国国内对靶向hh信号通路抑制剂的研发还处于初级阶段，仅恒瑞的环咪德吉处于临床一期研究。因此，研发一类结构新颖，性质优良，同时具有我国自主知识产权的靶向hh信号通路的抗肿瘤药物具有重要的意义。

技术实现要素：

本发明的一个目的是提供一类通式(i)所示的苯并三环类衍生物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体、或其药学上可接受的盐。通过对所述苯并三环类衍生物的靶向hh信号通路抑制作用的研究，发现其具有抑制hedgehog信号通路的作用，从而可以用于分子靶向抗肿瘤药物。

本发明的再一目的为提供制备上述苯并三环类衍生物的方法。

本发明的再一目的为提供包含治疗有效量的选自上述苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的用于分子靶向抗肿瘤的药物组合物。所述药物组合物任选可以进一步包含药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

本发明的再一目的是提供上述苯并三环类衍生物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体、药学上可接受的盐、或药物组合物在制备用于分子靶向抗肿瘤药物中的用途。

本发明的再一目的为提供一种用于分子靶向抗肿瘤的药物组合物，其包含治疗有效量的选自上述苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分以及其他药学上可接受的治疗剂，特别是其它抗肿瘤药物。所述药物组合物任选可以进一步包含药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

本发明的再一目的为提供一种抗肿瘤的方法，所述方法包括给需要该治疗的患者给药治疗有效量的选自根据本发明的苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种，或根据本发明的包含治疗有效量的选自根据本发明的苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。

根据本发明的第一方面，其提供了一种通式(i)所述的苯并三环类衍生物、其外消旋体、对映异构体、非对映异构体或它们的药学上可接受的盐：

其中：

n为0或1；

r1为c1-c4烷基、或c3-c8环烃基；优选地，r1为c3-c8环烃基；更优选地，r1为c3-c6环烃基；更优选地，r1为环丙烷或环己烷；

r2为取代或未取代的c1-c4烷基、取代或未取代的c3-c8的环烃基、取代或未取代的包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烃基，其中，在r2被进一步取代的情况下，r2上的所述取代基选自c1-c4烷基、羟基、氨基、c1-c3烷氧基、包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烃基、c6-c10芳基、包含一个以上的选自o、n或s原子的5-10元杂芳基，在r2上的所述取代基中，所述包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烃基、c6-c10芳基、包含一个以上的选自o、n或s原子的5-10元杂芳基还可进一步被r3所取代；r3选自羟基、氨基、c1-c4酰氨基、卤素、氰基、c1-c3卤代烷基、c1-c3烷氧基、c1-c4烷氧羰基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c4酰基、羟基取代的c1-c4酰基、羟基取代的c1-c4烷基；

优选地，r2为取代或未取代的c1-c4烷基、取代或未取代的包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烷基，其中，在r2被进一步取代的情况下，r2上的所述取代基选自c1-c4烷基、羟基、包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烷基、c6-c10芳基、包含一个以上的选自o、n或s原子的5-10元杂芳基，在r2上的所述取代基中，所述包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烷基、c6-c10芳基、包含一个以上的选自o、n或s原子的5-10元杂芳基还可进一步被r3所取代；r3选自c1-c3烷氧基、c1-c4烷氧羰基、c1-c4酰基、羟基取代的c1-c4酰基、羟基取代的c1-c4烷基；

或者，优选地，r2选自

优选地，r2为羟乙基、羟丙基、甲基哌啶基、吡啶基甲基、叔丁氧羰基哌啶基甲基、羟乙酰基哌啶基甲基、甲氧基苄基；

更优选地，r2为羟乙基、(r)-1-羟基丙-2-基、1-甲基哌啶-4-基、3-吡啶基甲基、1-叔丁氧羰基哌啶-4-基甲基、2-羟乙酰基哌啶-4-基甲基、4-甲氧基苄基；

x，y各自独立但不同时为ch2、nr4，所述r4选自-so2r5、-cor5、-conr5；

r5选自取代或未取代的c1-c4烷基、取代或未取代的c3-c8环烃基、取代或未取代的包含一个以上的选自o、n或s原子的3-8元杂环烃基、取代或未取代的的c6-c10芳基、取代或未取代包含一个以上的选自o、n或s原子的5-10元杂芳基，在r5被进一步取代的情况下，r5上的取代基为c1-c4烷基、羟基、氨基、c1-c4酰氨基、卤素、氰基、c1-c4烷氧基、c1-c3卤代烷基、c1-c3卤代烷氧基中的一个或多个的取代基；

优选，r5为取代或未取代的噻吩基、取代或未取代的吡唑基、环己烷基、取代或未取代的哌嗪基、取代或未取代的苯基，在r5被进一步取代的情况下，r5上的取代基为c1-c4烷基、c1-c4的酰氨基、卤素、氰基、c1-c4烷氧基、c1-c3的卤代烷基、c1-c3的卤代烷氧基中的一个或多个的取代基；

更优选地，r5为甲基、环己烷基、噻吩基、氯噻吩基、氯苯基、二氯苯基、二氟苯基、乙酰胺基苯基、二甲氧基苯基、三氟甲基苯基、三氟甲氧基苯基、甲基-1h-吡唑基、甲基哌嗪基；

更优选地，r5为甲基、环己烷基、噻吩-2-基、5-氯噻吩-2-基、4-氯苯基、2,4-二氯苯基、2,4-二氟苯基、4-乙酰胺基苯基、3,4-二甲氧基苯基、4-三氟甲基苯基、4-三氟甲氧基苯基、1-甲基-1h-吡唑-3-基、4-甲基哌嗪-1-基。

在本发明一个优选的实施方案中，所述通式(i)的化合物为由以下通式之一表示的化合物：

其中，r1，r2和r4与其在通式(i)中的限定相同。

在本发明的一个优选的实施方案中，所述通式(i)的化合物优选选自下列化合物中：

或其外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其药学上可接受的盐。

本发明的苯并三环类衍生物可含有一个或多个手性中心，并因此可以产生能够根据绝对立体化学定义为(r)-型或(s)-型的对映异构体、非对映异构体和其他立体异构体形式。除非另有说明，本发明意在包括所有这些可能的异构体，包括所有可能的光学异构体和非对映异构体混合物和纯的或部分纯的化合物。

用于测定对映体的量的适当的方法为本领域技术人员所熟知。例如手性固定基础(stationarybase)上的hplc和使用手性位移试剂的nmr光谱研究。

本发明中，术语“药学上可接受的盐”是指化合物与药学上可接受的阴离子的有机酸形成的有机酸盐，包括但不限于对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、苹果酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、抗坏血酸盐、乳酸盐、马来酸盐等；也可形成合适的无机盐，包括但不限于盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等。

在本发明中，术语“卤素”指是f、cl、br或i。

在本发明中，术语“c1-c4烷基”指主链上具有1至4个碳原子的直链或支链烷基，代表性的例子如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。

在本发明中，术语“c3-c8环烃基”指单环、并环、螺环的3-8个碳原子的环烃基，环中可含非饱和键。

在本发明中，术语“3-8元杂环烃基”指包括单环、并环、螺环在内，且环中至少包含一个n、o、s杂原子的3-8元环，环中可含非饱和键。

在本发明中，术语“c1-c3烷氧基”指主链上具有1至3个碳原子的直链或支链烷氧基，代表性的例子如甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基等。

在本发明中，术语“c1-c3卤代烷基”指基团上的一个或多个氢原子被相同或不同的卤素原子取代的c1-c3烷基，代表性的例子如三氟甲基等。

在本发明中，术语“c1-c3卤代烷氧基”指基团上的一个或多个氢原子被相同或不同的卤素原子取代的c1-c3烷氧基，代表性的例子如三氟甲氧基等。

在本发明中，术语“芳基”是指由碳原子构成的芳香性环，可以是具有5-7个环原子的单环芳基，或者具有7-10个环原子的双环芳基。

在本发明中，术语“杂芳基”是指在环中含有1-6个杂原子作为环成员的芳环。杂原子是指氮、氧或硫。杂芳环可以是具有5-7个环原子的单环杂芳基，或者具有7-9个环原子的双环芳杂环，其非限制性的例子包括噻吩、噻唑、吡唑、咪唑、吡啶、吡嗪、嘧啶，苯并咪唑，苯并恶唑、苯并噻唑等。

在本发明中，术语“取代”可以指单取代，也可以是多取代。

在本发明中，术语“异构体”是指具有相同分子式，但原子排列和构象不同非不同化合物。此外，本发明所述的术语“立体异构体”是指对于本发明的给定化合物来说可存在的任何各种立体异构构型并且包括几何异构体。

在本发明的第二方面，还提供了一种制备上述通式(i)所示的苯并三环类衍生物的方法，所述方法之一：

方法一：

其中，r1、r2、r4、r5和n与其在通式(i)中的限定相同；

方法一包括如下步骤：

步骤a：原料水解后，将得到的酸与r2-nh2缩合得到中间体，再通过叔丁基二甲基氯硅烷(tbscl)保护羟基得到化合物a；所述的水解反应可在例如，乙醇和水混合溶剂中，在碱性条件(如氢氧化锂)下进行；

步骤b：化合物a经过还原条件，优选硼烷甲基硫醚(bh3.dms)的存在下，还原酰胺得到化合物b；

步骤c：将化合物b与缩合，再经氟化物盐，优选氟化铯的催化下关环得到化合物c；

步骤d：将化合物c经硝基还原反应后，再与r1cocl反应生成化合物d；所述的硝基还原反应可在例如，铁粉、氯化铵的条件下进行；

步骤e：化合物d脱去苄基得到化合物e；

步骤f：化合物e与磺酰氯r5so2cl、酰氯r5cocl或异氰酸酯r5nco反应得到化合物f；

或者方法二：

其中，r1、r2、r4、r5和n与其在通式(i)中的限定相同；

方法二包括如下步骤：

步骤i：原料水解后，将得到的酸与r2-nh2缩合得到中间体，再通过叔丁基二甲基氯硅烷(tbscl)保护羟基得到化合物i；所述的水解反应可在例如，乙醇和水混合溶剂中，在碱性条件(如氢氧化锂)下进行；

步骤j：化合物i经过还原条件，优选硼烷甲基硫醚(bh3.dms)的存在下，还原酰胺得到化合物j；

步骤k：将化合物j与缩合，再经氟化物盐，优选氟化铯，催化下关环得到化合物k；

步骤l：化合物k经硝基还原反应后，再与r1cocl反应生成化合物l；所述的硝基还原反应可在例如，铁粉、氯化铵的条件下进行；

步骤m：脱去化合物l的叔丁氧羰基(boc)保护基，再与磺酰氯r5so2cl、酰氯r5cocl或异氰酸酯r5nco反应得到化合物m。

方法三：

根据方法一的步骤a-f制备得到化合物f，然后，在r2为时，在步骤f后还包括下述步骤g：

其中，r6为甲基或无；

步骤g：化合物f脱掉对甲氧基苄基(pmb)保护基得到化合物g，所述脱保护反应可优选在2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(ddq)、二氯甲烷条件下进行。

方法四：

根据方法一的步骤a-f制备得到化合物f，然后，在r2为时，在步骤f后还包括下述步骤h：

步骤h：化合物f脱掉叔丁氧羰基(boc)保护基并与羟基乙酸缩合得到化合物h，所述脱保护反应可优选在三氟醋酸、二氯甲烷条件下进行。

本发明所述的苯并三环类衍生物通过荧光素酶报告基因(gli-lucreporter)实验检测其对hh信号通路的抑制活性。结果显示，本发明中化合物显示出较好的的hh信号通路的抑制活性，其中部分化合物的ic50在100nm以下，可进一步开发成为新型的hh信号通路抑制剂，用于治疗与hh信号通路密切相关的肿瘤。

因此，在本发明的第三方面，还提供了一种药物组合物，它含有治疗有效量的选自本发明所述的苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分，以及任选的药学上可接受的载体、赋形剂和/或稀释剂。

优选地，该组合物还进一步包括其他药学上可接受的治疗剂，特别是其他抗肿瘤药物。

在本发明第四方面，提供了根据本发明的苯并三环类衍生物或其药学上可接受的盐、和包含该衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备靶向hh信号通路抑制剂中的用途。

在本发明第五方面，提供了根据本发明的苯并三环类衍生物或其药学上可接受的盐、和包含该衍生物或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备用于抗肿瘤的药物中的用途。本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐可以单独给药，或者与其他药学上可接受的治疗剂联合给药，特别是与其他抗肿瘤病药物组合。

在上述的组合物或者用途中，所述治疗剂包括但不限于：作用于dna化学结构的药物抗肿瘤药如顺铂，影响核酸合成的抗肿瘤药物如甲氨蝶呤(mtx)、5-氟尿嘧啶(5fu)等，影响核酸转录的抗肿瘤药物如阿霉素、表阿霉素、阿克拉霉素、光辉霉素等，作用于微管蛋白合成的抗肿瘤药物如紫杉醇、长春瑞滨等，芳香化酶抑制剂如氨鲁米特、兰特隆、来曲唑、瑞宁德等，细胞信号通路抑制剂如表皮生长因子受体抑制剂伊马替尼(imatinib)、吉非替尼(gefitinib)、埃罗替尼(erlotinib)、拉帕替尼(lapatinib)等。待组合的各成分可同时或顺序地给予，以单一制剂形式或以不同制剂的形式给予。所述组合不仅包括本发明的化合物和一种其它活性剂的组合，而且包括本发明的化合物和两种或更多种其它活性剂的组合。

在本发明的第六方面，提供了一种抗肿瘤的方法，所述方法包括向需要该治疗的患者给药治疗有效量的选自根据本发明的苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种，或根据本发明的包含治疗有效量的选自根据本发明的苯并三环类衍生物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。

在本发明中，所述肿瘤非限制性地包括肝癌、肺癌、乳腺癌、基底细胞癌，髓母细胞瘤横纹肌瘤、小细胞肺癌、胃癌、大肠癌、胰腺癌、b细胞淋巴瘤、骨髓癌和纤维肉瘤等；优选为基底细胞癌，髓母细胞瘤横纹肌瘤、小细胞肺癌、胃癌、大肠癌、胰腺癌、b细胞淋巴瘤等。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

化合物的¹hnmr数据测试使用varianmercury-500hz、varianmercury-400hz或varianmercury-300hz核磁共振，用氘代氯仿(cdcl3)或氘代氯仿和氘代甲醇(cdcl3+cd3od)的混合溶剂为溶剂，以四甲基硅烷(tms)为内标，化学位移单位为ppm。比旋光由p-1030(a012360639)自动旋光仪测定。所有反应溶剂均按常规方法进行纯化。柱层析用硅胶(200-300目)为青岛海洋化工分厂生产；tlc硅胶板为烟台化工厂生产的hsgf-254型薄层层析硅胶板，薄层层析使用的层析板厚度为0.2±0.03mm。采用紫外、碘、高锰酸钾等方法显色。减压蒸除有机溶剂在旋转蒸发仪中进行。2-氟-3-硝基苯甲酸，2,6-二甲基吡啶等原料通常是从市售来源可获得的，比如aldrichchemicalsco.和acrosorganics，有机溶剂石油醚(沸程60-90℃)，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲醇均为分析纯，由上海泰坦科技股份有限公司或者国药集团化学试剂有限公司提供，所用试剂和溶剂除特别说明外，均未经特别处理。

在上述讨论和下述实施例中，下列缩写具有如下含义。如果某一缩写没有定义，则它具有通常被接受的含义。

ddq为2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌；

hatu为2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯；

hoat为1-羟基-7-偶氮苯并三氮唑；

ecdi为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；

hobt为1-羟基苯并三唑；

tbsotf为叔丁基二甲硅基三氟甲磺酸酯；

bh3.dms为硼烷甲基硫醚；

dipea为n,n-二异丙基乙胺；

dmf为n,n-二甲基甲酰胺；

dmso为二甲基亚砜；

thf为四氢呋喃；

pd/c为钯碳。

实施例1和2、化合物1和2的合成

化合物a1的制备

原料顺式-1-苄基-3-羟基-4-哌啶甲酸乙酯(2mmol)溶于乙醇(5ml)和水(5ml)中，加入lioh.h2o(3mmol)，室温搅拌2小时，稀盐酸调ph＝5，加水，二氯甲烷萃取，有机相水洗，无水硫酸钠干燥，旋干。粗产物用二氯甲烷溶解，加入hatu(6mmol)，hoat(2mmol)和dipea(6mmol)，搅拌10分钟后，加入(r)-1-(4-甲氧苄氧基)-2-丙胺)(2mmol)，室温搅拌过夜。加水，有机相水洗，干燥，旋干。再将粗产物溶于二氯甲烷中，0℃条件下加入tbsotf(2mmol)，保持0℃反应30分钟。水洗反应液，有机相干燥，柱层析(石油醚/乙酸乙酯)，得油状液体a1(54％)，未经纯化直接投下一步。

化合物b1的制备

化合物a1(2mmol)溶于thf(10ml)中，加入bh3.dms(6mmol)，50℃搅拌5小时，冷却至室温，加入甲醇淬灭，旋干溶剂，加入甲醇(10ml)和10％的酒石酸钠钾溶液(10ml)，回流过夜。反应液加水，二氯甲烷萃取，有机相干燥，旋干得无色油状液体b1，直接用于下一步反应。

化合物c1的制备

2-氟-3-硝基苯甲酸(2mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入hatu(6mmol)，hoat(2mmol)和dipea(6mmol)，搅拌10分钟后，分别加入b1(2mmol)，室温搅拌过夜。反应液加水，有机相水洗，干燥，旋干。所得粗产物溶于dmf(10ml)中，加入氟化铯(4mmol)，80℃搅拌至原料反应完全，反应液加水，乙酸乙酯萃取，有机相多次水洗，旋干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯)，得淡黄色油状液体c1(74％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.71–7.66(m,1h),7.59–7.56(m,1h),7.37–7.30(m,4h),7.23–7.18(m,3h),6.97–6.92(m,1h),6.88–6.81(m,2h),4.88(q,j＝6.8hz,0.5h),4.56(s,1h),4.50(d,j＝11.2hz,0.5h),4.42(q,j＝5.6hz,1h),4.36(d,j＝11.2hz,1h),4.13–4.07(m,1h),3.79(s,3h),3.63–3.57(m,2h),3.48(d,j＝5.4hz,0.5h),3.35(d,j＝13.2hz,0.5h),3.30–3.22(m,2h),3.09(dd,j＝15.2,4.8hz,0.5h),3.00(dd,j＝12.6,2.8hz,0.5h),2.95–2.88(m,1.5h),2.03–1.91(m,2h),1.82(d,j＝13.2hz,0.5h),1.77–1.66(m,1h),1.52(d,j＝12.4hz,0.5h),1.38–1.34(m,2h),1.23(d,j＝7.0hz,1.5h)。

化合物d1的制备

化合物c1(1mmol)溶于乙醇(5ml)中，加入水(2ml)，铁粉(7mmol)，氯化铵(10mmol)，回流反应1小时。过滤，滤液减压蒸馏，残液溶于二氯甲烷，碳酸氢钠洗涤。二氯甲烷相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得淡黄色固体。所得粗产品溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入环丙基甲酰氯(1mmol)，搅拌1小时，反应液水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得白色固体d1(76％)，未经纯化直接投下一步。

化合物e1的制备

化合物d1(1mmol)溶于乙醇中(5ml)，加入pd/c(0.5mmol)，氢气条件下50℃加热反应7小时，过滤，旋干滤液的化合物e1，未经纯化直接投下一步。

化合物f1的制备

化合物e1(0.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入对氯苯磺酰氯(0.6mmol)和2,6-二甲基吡啶(1mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体f1(69％)，直接投下一步。

化合物1和2的制备

化合物g1(0.3mmol)溶于按照j.am.chem.soc.2013,135,9675-9680配制的ph＝7的磷酸盐缓冲溶液(2ml)和二氯甲烷(2ml)中，加入ddq(0.45mmol)，室温搅拌过夜。反应液加水，二氯甲烷萃取，有机相干燥，旋干，柱层析得白色固体的非对应异构体化合物1和化合物2。

化合物1(白色固体，23％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(s,1h),8.55(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.72(d,j＝8.4hz,2h),7.52(d,j＝8.4hz,2h),7.19(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),6.95(t,j＝8.0hz,1h),4.71(s,1h),4.20–4.10(m,2h),3.99(d,j＝12.8hz,1h),3.85–3.81(m,1h),3.69–3.64(m,1h),3.49–3.40(m,2h),3.09(dd,j＝15.2,4.8hz,1h),2.67–2.58(m,2h),2.09–1.96(m,2h),1.90–1.80(m,1h),1.57–1.53(m,1h),1.32(d,j＝6.8hz,3h),1.06–1.04(m,2h),0.88–0.82(m,2h)。[α]²d⁰＝+29(c＝0.052,chcl3)。

化合物2(白色固体，19％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.73(s,1h),8.57(dd,j＝8.0,1.6hz1h),7.71(d,j＝8.4hz,2h),7.52(d,j＝8.4hz,2h),7.14(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),6.96(t,j＝8.0hz,1h),4.93–4.87(m,1h),4.78(s,1h),4.12(d,j＝13.2hz,1h),4.02(d,j＝12.8hz,1h),3.88(dd,j＝11.6,2.4hz,1h),3.51(q,j＝10.4hz,1h),3.39–3.32(m,1h),3.26–3.16(m,2h),2.64–2.56(m,2h),2.05–1.96(m,2h),1.89–1.80(m,1h),1.59–1.56(m,1h),1.19(d,j＝6.8hz,3h),1.07–1.05(m,2h),0.88–0.84(m,2h)。[α]²d⁰＝-29(c＝0.055,chcl3)。

实施例3、化合物3的合成

化合物c3的制备

采用2-(4-甲氧苄氧基)乙胺代替(r)-1-(4-甲氧苄氧基)-2-丙胺，并根据实施例1中从顺式-1-苄基-3-羟基-4-哌啶甲酸乙酯原料合成化合物c1的方法合成化合物c3(白色固体，75％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.70(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.61(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.40–7.31(m,4h),7.24–7.19(m,3h),6.98(t,j＝8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.8hz,2h),4.48–4.40(m,3h),4.01–3.95(m,1h),3.80–3.76(m,4h),3.69–3.63(m,2h),3.45–3.36(m,3h),3.28(dd,j＝15.2,4.8hz,1h),3.11(d,j＝12.6hz,1h),2.97(d,j＝11.2hz,1h),2.08–1.93(m,3h),1.83–1.73(m,1h),1.41(d,j＝13.2hz,1h)。

化合物3的制备

采用c3代替c1，并根据实施例1中从c1合成化合物1和2的方法合成化合物3(白色固体，75％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.71(s,1h),8.55(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.73(d,j＝8.4hz,2h),7.52(d,j＝8.4hz,2h),7.23(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),6.97(t,j＝8.0hz,1h),4.57(s,1h),4.25(d,j＝13.2hz,1h),4.03(d,j＝12.8hz,1h),3.92–3.82(m,3h),3.58–3.44(m,2h),3.22(dd,j＝15.2,4.8hz,1h),3.06–3.04(m,1h),2.77(d,j＝13.2hz,1h),2.68–2.62(m,1h),2.07–1.85(m,3h),1.62–1.57(m,1h),1.07–1.04(m,2h),0.90–0.84(m,2h)。

实施例4、化合物4的制备

化合物4的合成

采用环己基甲酰氯代替环丙基甲酰氯，并根据实施例3中从化合物c3合成化合物3的方法合成化合物4(白色固体，47％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3+cd3od)δ8.56(d,j＝8.1hz,1h),8.39(s,1h),7.72(d,j＝8.4hz,2h),7.54(d,j＝8.4hz,2h),7.21(d,j＝8.1hz,1h),6.97(t,j＝8.1hz,1h),4.58(s,1h),4.20(d,j＝13.2hz,1h),4.00(d,j＝12.1hz,1h),3.93–3.78(m,3h),3.57–3.43(m,2h),3.21(dd,j＝15.0,4.5hz,1h),2.67(d,j＝13.2hz,1h),2.59–2.47(m,2h),2.04–1.97(m,3h),1.89–1.78(m,3h),1.67–1.48(m,4h),1.44–1.23(m,4h)。

实施例5、化合物5的合成

化合物c5的制备

采用4-氨基-1-甲基哌啶代替(r)-1-(4-甲氧苄氧基)-2-丙胺，并根据实施例1中从顺式-1-苄基-3-羟基-4-哌啶甲酸乙酯原料合成化合物c1的方法合成化合物c5(白色固体，56％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.70(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),7.62(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),7.42–7.33(m,4h),7.28–7.24(m,1h),6.99(t,j＝8.0hz,1h),4.60–4.49(m,2h),3.70(d,j＝13.6hz,1h),3.45(d,j＝13.6hz,1h),3.36–3.27(m,2h),3.21–3.17(m,1h),3.03–3.00(m,3h),2.37(s,3h),2.29–2.00(m,5h),1.98–1.76(m,4h),1.72–1.68(m,1h),1.47–1.44(m,1h)。

化合物5的制备

采用c5代替c1，并根据实施例1中从c1合成化合物f1的方法合成化合物5(白色固体，78％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.68(s,1h),8.54(d,j＝8.0hz,1h),7.72(d,j＝8.4hz,2h),7.52(d,j＝8.4hz,2h),7.17(d,j＝8.0hz,1h),6.97(t,j＝8.0hz,1h),4.62–4.55(m,2h),4.25(d,j＝13.2hz,1h),4.03(d,j＝12.8hz,1h),3.34–3.30(m,2h),3.00–2.92(m,2h),2.71(d,j＝13.2hz,1h),2.60(t,j＝12.0hz,1h),2.33(s,3h),2.21–2.14(m,2h),1.97–1.83(m,4h),1.70–1.54(m,4h),1.08–1.04(m,2h),0.88–0.83(m,2h)。

实施例6、化合物6的合成

化合物c6的制备

采用3-氨甲基吡啶代替(r)-1-(4-甲氧苄氧基)-2-丙胺，并根据实施例1中从原料合成化合物c1的方法合成化合物c6(白色固体，59％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.58–8.56(m,2h),7.79(dd,j＝8.1,1.8hz,1h),7.71–7.63(m,2h),7.37–7.18(m,6h),7.02(t,j＝8.1hz,1h),5.34(d,j＝14.7hz,1h),4.45(s,1h),4.19(d,j＝14.7hz,1h),3.68(d,j＝13.5hz,1h),3.46–3.38(m,2h),3.21–2.97(m,3h),2.14–2.04(m,2h),1.84–1.77(m,2h),1.43–1.40(m,1h)。

化合物6的制备

采用c6代替c1，并根据实施例1中从c1合成化合物f1的方法合成化合物6(白色固体，88％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(s,1h),8.60–8.55(m,3h),7.74–7.70(m,3h),7.53(d,j＝8.4hz,2h),7.30–7.28(m,2h),7.01(t,j＝8.0hz,1h),5.29(d,j＝14.8hz,1h),4.49(d,j＝2.4hz,1h),4.29–4.20(m,2h),4.01(d,j＝12.4hz,1h),3.48(dd,j＝14.8,11.2hz,1h),3.09(dd,j＝15.2,3.6hz,1h),2.71–2.59(m,2h),2.00–1.94(m,1h),1.91–1.86(m,2h),1.56–1.53(m,1h),1.08–1.04(m,2h),0.87–0.83(m,2h)。

实施例7和实施例8、化合物7和化合物8的制备

化合物c7的制备

除了采用1-叔丁氧羰基-4-氨甲基哌啶代替(r)-1-(4-甲氧苄氧基)-2-丙胺以外，根据实施例1中从顺式-1-苄基-3-羟基-4-哌啶甲酸乙酯原料合成化合物c1的方法合成化合物c7(白色固体，66％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.64(dd,j＝7.8,1.8hz,1h),7.57(dd,j＝7.8,1.8hz,1h),7.30–7.26(m,4h),7.20–7.14(m,1h),6.94(t,j＝7.8hz,1h),4.37(s,1h),4.12–4.05(m,3h),3.62(d,j＝13.5hz,1h),3.41–3.33(m,2h),3.15–2.93(m,3h),2.67–2.51(m,3h),2.11–2.04(m,2h),1.85–1.75(m,3h),1.57–1.54(m,1h),1.39(s,9h),1.22–1.13(m,3h)。

化合物e7的制备

除了采用c7代替c1以外，根据实施例1中从c1合成化合物e1的方法合成化合物e7(白色固体，71％)。e7未经纯化直接用于下一步反应。

化合物7的制备

化合物e7(0.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入2-噻吩磺酰氯(0.6mmol)和2,6-二甲基吡啶(1mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体7(71％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.54(s,1h),8.48(d,j＝7.8hz,1h),7.56(d,j＝4.5hz,1h),7.51(d,j＝4.5hz,1h),7.13(d,j＝7.8hz,1h),7.07(t,j＝4.5hz,1h),6.92(t,j＝8.1hz,1h),4.45(s,1h),4.21(d,j＝13.2hz,1h),4.13–3.93(m,4h),3.47–3.39(m,1h),3.06–2.99(m,1h),2.73–2.58(m,4h),2.46(dd,j＝13.2,7.2hz,1h),1.89–1.83(m,4h),1.59–1.56(m,3h),1.39(s,9h),1.14–1.07(m,2h),1.01–0.98(m,2h),0.83–0.77(m,2h)。

化合物8的制备

化合物7(0.7mmol)溶于二氯甲烷中(5ml)，加入三氟醋酸(14mmol)，室温搅拌5小时。反应液用碳酸氢钠水溶液中和，二氯甲烷萃取，有机相再水洗，干燥，旋干得粗产品(92％)。所得粗产品(0.1mmol)溶于二氯甲烷(1ml)中，加入羟基乙酸(0.15mmol)，ecdi(0.15mmol)，hobt(0.15mmol)，三乙胺(0.2mmol)，室温搅拌6小时，反应液旋干直接柱层析得白色固体8(白色固体，82％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.60–8.43(m,2h),7.57–7.51(m,2h),7.13–7.06(m,2h),6.92(t,j＝8.1hz,1h),4.51–4.48(m,1h),4.43(s,1h),4.29–3.94(m,5h),3.59–3.44(m,3h),3.04–2.85(m,2h),2.74–2.58(m,3h),2.47(dd,j＝13.6,7.2hz,1h),2.03–1.84(m,3h),1.73–1.53(m,4h),1.20–1.11(m,2h),1.01–0.96(m,2h),0.82–0.78(m,2h)。

实施例9、化合物9的合成

化合物c9的制备

除了采用4-甲氧基苄胺代替(r)-1-(4-甲氧苄氧基)-2-丙胺以外，根据实施例1中从顺式-1-苄基-3-羟基-4-哌啶甲酸乙酯原料合成化合物c1的方法合成化合物c9(白色固体，86％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.74(dd,j＝7.8,1.8hz,1h),7.57(dd,j＝7.8,1.8hz,1h),7.31–7.25(m,3h),7.20–7.15(m,4h),6.95(t,j＝7.8hz,1h),6.81(d,j＝8.4hz,2h),5.12(d,j＝14.4hz,1h),4.39(s,1h),4.16(d,j＝14.4hz,1h),3.75(s,3h),3.60(d,j＝13.5hz,1h),3.38–3.22(m,2h),3.13–3.00(m,2h),2.90(d,j＝11.1hz,1h),2.04–1.94(m,2h),1.74–1.67(m,2h),1.37–1.23(m,1h)。

化合物e9的制备

除了采用c9代替c1以外，根据实施例1中从c1合成化合物e1的方法合成化合物e9。e9未经纯化直接用于下一步反应。

化合物9的制备

化合物e9(0.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入甲基磺酰氯(0.6mmol)和2,6-二甲基吡啶(1mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体9(91％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(s,1h),8.54(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.29–7.25(m,3h),6.97(t,j＝8.0hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,2h),5.10(d,j＝14.4hz,1h),4.45(s,1h),4.34(d,j＝14.4hz,1h),4.23(d,j＝14.0hz,1h),3.96(d,j＝12.8hz,1h),3.81(s,3h),3.38(dd,j＝14.8,11.2hz,1h),3.07(dd,j＝14.8,4.4hz,1h),2.92–2.80(m,5h),1.99–1.92(m,1h),1.86–1.71(m,2h),1.48–1.44(m,1h),1.06–0.99(m,2h),0.85–0.80(m,2h)。

实施例10、化合物10的制备

除了采用环己基磺酰氯代替甲基磺酰氯以外，根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物10(白色固体，76％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ9.03(s,1h),8.57(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),7.30–7.28(m,3h),6.99(t,j＝8.0hz,1h),6.89(d,j＝8.4hz,2h),5.12(d,j＝14.4hz,1h),4.40–4.33(m,2h),4.21(d,j＝14.4hz,1h),4.01–3.97(m,1h),3.83(s,3h),3.40(dd,j＝14.8,11.6hz,1h),3.09–3.00(m,2h),2.96–2.89(m,2h),2.14–2.04(m,3h),1.93–1.73(m,5h),1.47–1.41(m,3h),1.34–1.19(m,3h),1.07–1.03(m,2h),0.84–0.79(m,2h)。

实施例11、化合物11的制备

采用4-甲基-1-哌嗪磺酰氯代替甲基磺酰氯，并根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物11(白色固体，88％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.85(s,1h),8.56(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.28–7.24(m,3h),6.97(t,j＝8.0hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,2h),5.12(d,j＝14.4hz,1h),4.40(s,1h),4.31(d,j＝14.4hz,1h),4.22(d,j＝14.8hz,1h),3.96(d,j＝13.6hz,1h),3.81(s,3h),3.37(dd,j＝14.8,10.8hz,1h),3.19(t,j＝4.8hz,4h),3.07–2.99(m,2h),2.91(t,j＝12.4hz,1h),2.48(t,j＝4.8hz,4h),2.32(s,3h),2.05–1.99(m,1h),1.81–1.78(m,2h),1.41–1.36(m,1h),1.04–0.99(m,2h),0.82–0.78(m,2h)。

实施例12、化合物12的制备

采用4-氯苯磺酰氯代替甲基磺酰氯，并根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物12(白色固体，84％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.72(s,1h),8.56(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.71(d,j＝8.4hz,2h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.29(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.23(d,j＝8.4hz,2h),6.99(t,j＝8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.4hz,2h),5.09(d,j＝14.4hz,1h),4.48(s,1h),4.28(d,j＝14.4hz,1h),4.24–4.20(m,1h),3.97(d,j＝12.6hz,1h),3.82(s,3h),3.42–3.36(m,1h),3.08(dd,j＝15.2,4.0hz,1h),2.65–2.54(m,2h),2.00–1.94(m,1h),1.88–1.72(m,2h),1.50–1.47(m,1h),1.06–1.04(m,2h),0.88–0.82(m,2h)。

实施例13、化合物13的制备

采用2,4-二氯苯磺酰氯代替甲基磺酰氯，并根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物13(白色固体，86％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.86(s,1h),8.57(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),8.03(d,j＝8.4hz,1h),7.55(d,j＝2.0hz,1h),7.39(dd,j＝8.4,2.0hz,1h),7.28(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.24(d,j＝8.6hz,2h),6.99(t,j＝8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.6hz,2h),5.11(d,j＝14.4hz,1h),4.47(s,1h),4.31(d,j＝14.6hz,2h),3.97(d,j＝12.6hz,1h),3.82(s,3h),3.44–3.38(m,1h),3.08(dd,j＝15.2,3.6hz,1h),2.95(dd,j＝14.4,1.6hz,1h),2.88–2.81(m,1h),2.09–2.03(m,1h),1.91–1.79(m,2h),1.50–1.43(m,1h),1.06–1.03(m,2h),0.82–0.78(m,2h)。

实施例14、化合物14的制备

采用3,4-二甲氧基苯磺酰氯代替甲基磺酰氯，并根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物14(白色固体，91％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.76(s,1h),8.57(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),7.40(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),7.30–7.28(m,1h),7.24–7.21(m,3h),7.01–6.95(m,2h),6.85(d,j＝8.4hz,2h),5.13(d,j＝14.4hz,1h),4.49(s,1h),4.27–4.21(m,2h),3.99–3.94(m,7h),3.78(s,3h),3.42–3.35(m,1h),3.08(dd,j＝15.2,4.0hz,1h),2.63–2.52(m,2h),2.02–1.97(m,1h),1.85–1.76(m,2h),1.52–1.47(m,1h),1.07–1.04(m,2h),0.88–0.83(m,2h)。

实施例15、化合物15的制备

采用对乙酰氨基苯磺酰氯代替甲基磺酰氯，并根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物15(白色固体，56％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.79(s,1h),8.54(dd,j＝8.1,1.6hz,1h),8.24(s,1h),7.69(s,4h),7.30–7.27(m,1h),7.22(d,j＝8.4hz,2h),6.97(t,j＝8.0hz,1h),6.85(d,j＝8.4hz,2h),5.13(d,j＝14.4hz,1h),4.47(s,1h),4.26–4.20(m,2h),3.95(d,j＝12.4hz,1h),3.78(s,3h),3.41–3.35(m,1h),3.11–3.07(m,1h),2.63–2.52(m,2h),2.19(s,3h),2.03–1.98(m,1h),1.84–1.76(m,2h),1.52–1.46(m,1h),1.05–1.02(m,2h),0.89–0.83(m,2h)。

实施例16、化合物16的制备

采用2-氯噻吩-2-磺酰氯代替甲基磺酰氯，并根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物16(白色固体，89％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.60–8.52(m,2h),7.35(d,j＝4.0hz,1h),7.29(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.24(d,j＝8.4hz,2h),7.02–6.97(m,2h),6.86(d,j＝8.4hz,2h),5.11(d,j＝14.4hz,1h),4.52(s,1h),4.29(d,j＝14.4hz,1h),4.20(d,j＝13.6hz,1h),3.99(d,j＝12.4hz,1h),3.80(s,3h),3.39(dd,j＝14.8,11.2hz,1h),3.09(dd,j＝14.8,4.0hz,1h),2.70–2.59(m,2h),1.91–1.75(m,3h),1.55–1.52(m,1h),1.09–0.99(m,2h),0.87–0.83(m,2h)。

实施例17、化合物17的制备

采用1-甲基吡唑-3-磺酰氯代替甲基磺酰氯，根据实施例9中从化合物e9合成化合物9的方法合成化合物17(白色固体，71％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.71(s,1h),8.55(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.44(d,j＝2.4hz,1h),7.29(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.24(d,j＝8.4hz,2h),6.99(t,j＝8.0hz,1h),6.86(d,j＝8.4hz,2h),6.65(d,j＝2.4hz,1h),5.13(d,j＝14.6hz,1h),4.50(s,1h),4.30–4.24(m,2h),4.06(d,j＝12.8hz,1h),3.98(s,3h),3.80(s,3h),3.39(dd,j＝15.2,11.2hz,1h),3.09(dd,j＝15.2,3.6hz,1h),2.82–2.71(m,2h),2.02–1.95(m,1h),1.81–1.78(m,2h),1.51(d,j＝8.8hz,1h),1.05–1.02(m,2h),0.86–0.82(m,2h)。

实施例18、化合物18的制备

化合物e9(0.1mmol，其制备方法参见实施例9)溶于二氯甲烷(1ml)中，0℃条件下加入4-氯苯甲酰氯(0.12mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.2mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体18(88％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.73(s,1h),8.51(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.42–7.38(m,4h),7.32(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.26(d,j＝8.0hz,2h),7.00(t,j＝8.0hz,1h),6.88(d,j＝8.0hz,2h),5.19–5.15(m,2h),4.61(s,1h),4.29(d,j＝14.4hz,1h),3.80–3.78(s,4h),3.35(t,j＝13.2hz,1h),3.14(t,j＝13.2hz,1h),3.04(dd,j＝14.8,4.0hz,1h),2.90(d,j＝13.6hz,1h),2.23–2.17(m,1h),2.02–1.96(m,1h),1.49–1.31(m,2h),1.11–0.97(m,2h),0.82–0.76(m,1h),0.59–0.53(m,1h)。

实施例19、化合物19的制备

化合物e9(0.1mmol，其制备方法参见实施例9)溶于二氯甲烷(1ml)中，0℃条件下加入4-三氟甲基苯异氰酸酯(0.12mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.2mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体19(67％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3+cd3od)δ8.46(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.56(d,j＝8.4hz,2h),7.43(d,j＝8.4hz,2h),7.28–7.22(m,3h),6.96(t,j＝8.0hz,1h),6.89(d,j＝8.0hz,2h),5.15(d,j＝14.4hz,1h),4.79(d,j＝14.4hz,1h),4.31–4.24(m,3h),3.81(s,3h),3.34–3.20(m,1h),3.08(dd,j＝14.8,4.4hz,1h),2.97(t,j＝13.2hz,1h),2.83(d,j＝14.4hz,1h),1.99–1.92(m,1h),1.67–1.61(m,2h),1.51–1.47(m,1h),0.84–0.78(m,1h),0.75–0.69(m,1h),0.33–0.31(m,1h),0.04–0.01(m,1h)。

实施例20、化合物20的制备

采用2,4-二氟苯异氰酸酯代替4-三氟甲基苯异氰酸酯，并根据实施例19中从化合物e9合成化合物19的方法合成化合物20(白色固体，69％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3/cd3od)δ8.60(s,0.56h),8.54(d,j＝8.0hz,1h),7.89–7.80(m,1h),7.31–7.24(m,3h),6.96(t,j＝8.0hz,1h),6.90–6.83(m,3h),6.80–6.75(m,1h),6.68(s,0.54h),5.18(d,j＝14.4hz,1h),4.83(d,j＝14.4hz,1h),4.47(s,1h),4.27(d,j＝14.4hz,1h),3.97(d,j＝14.0hz,1h),3.81(s,3h),3.38(dd,j＝14.8,12.0hz,1h),3.22–3.02(m,2h),2.89(d,j＝14.0hz,1h),2.02–1.96(m,1h),1.74–1.64(m,2h),1.54–1.50(m,1h),0.92–0.87(m,1h),0.83–0.77(m,1h),0.54–0.50(m,1h),0.12–0.05(m,1h)。

实施例21、化合物21的制备

化合物d21的合成

化合物c9(1mmol，其制备方法参见实施例9)溶于乙醇(5ml)中，加入水(2ml)，铁粉(7mmol)，氯化铵(10mmol)，回流反应1小时。过滤，滤液减压蒸馏，残液溶于二氯甲烷，碳酸氢钠洗涤。二氯甲烷相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得淡黄色固体。所得粗产品溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入环己酰氯(1mmol)，搅拌1小时，反应液直接柱层析(二氯甲烷/乙酸乙酯)，得油状液体d21(75％)。

化合物21的合成

采用d21代替d1，并根据实施例1中从化合物d1合成化合物f1的方法合成化合物21(白色固体，92％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.52(dd,j＝8.1,1.5hz,1h),8.32(s,1h),7.65(d,j＝8.4hz,2h),7.47(d,j＝8.4hz,2h),7.23(d,j＝8.1hz,1h),7.15(d,j＝8.2hz,2h),6.94(t,j＝8.1hz,1h),6.77(d,j＝8.4hz,2h),5.03(d,j＝14.6hz,1h),4.43(s,1h),4.20–4.11(m,2h),3.89(d,j＝12.4hz,1h),3.71(s,3h),3.34–3.26(m,1h),3.03–2.97(m,1h),2.49–2.34(m,3h),1.99–1.94(m,2h),1.73–1.16(m,9h),0.82–0.78(m,2h)。

实施例22、化合物22的制备

采用4-三氟甲氧基苯磺酰氯代替对氯苯磺酰氯，并根据实施例21中从化合物d21合成化合物21的方法合成化合物22(白色固体，71％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.52(dd,j＝8.1,1.5hz,1h),8.32(s,1h),7.76(d,j＝8.4hz,2h),7.32(d,j＝8.4hz,2h),7.22(d,j＝8.1hz,1h),7.14(d,j＝8.4hz,2h),6.93(t,j＝8.1hz,1h),6.77(d,j＝8.4hz,2h),5.03(d,j＝14.5hz,1h),4.43(s,1h),4.18–4.12(m,2h),3.91(d,j＝12.4hz,1h),3.70(s,3h),3.30(dd,j＝14.9,10.8hz,1h),3.00(dd,j＝15.1,3.9hz,1h),2.53–2.38(m,3h),1.97–1.93(m,2h),1.77–1.19(m,9h),0.83–0.76(m,2h)。

实施例23、化合物23的制备

化合物i23的合成

原料顺式-1-叔丁氧羰基-4-羟基-3-哌啶甲酸乙酯(2mmol)溶于乙醇(5ml)和水(5ml)中，加入lioh.h2o(3mmol)，室温搅拌2小时，稀盐酸调ph＝5，加水，二氯甲烷萃取，有机相水洗，无水硫酸钠干燥，旋干。粗产物用二氯甲烷溶解，加入hatu(6mmol)，hoat(2mmol)和dipea(6mmol)，搅拌10分钟后，加入对甲氧基苄胺(2mmol)，室温搅拌过夜。加水，有机相水洗，干燥，旋干。再将粗产物溶于二氯甲烷中，0℃条件下加入tbsotf(2mmol)，保持0℃反应30分钟。水洗反应液，有机相干燥，柱层析(石油醚/乙酸乙酯)，得油状液体i23(57％)。

化合物j23的制备

化合物i23(2mmol)溶于thf(10ml)中，加入bh3.dms(6mmol)，50℃搅拌5小时，冷却至室温，加入甲醇淬灭，旋干溶剂，加入甲醇(10ml)和10％的酒石酸钠钾溶液(10ml)，回流过夜。反应液加水，二氯甲烷萃取，有机相干燥，旋干得无色油状液体j23，直接用于下一步反应。

化合物k23的制备

2-氟-3-硝基苯甲酸(2mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入hatu(6mmol)，hoat(2mmol)和dipea(6mmol)，搅拌10分钟后，分别加入化合物j23(2mmol)，室温搅拌过夜。反应液加水，有机相水洗，干燥，旋干。所得粗产物溶于dmf(10ml)中，加入氟化铯(4mmol)，80℃搅拌至原料反应完全，反应液加水，乙酸乙酯萃取，有机相多次水洗，旋干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯)，得淡黄色油状液体k23(87％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.85(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.73(dd,j＝8.0,1.6hz,1h),7.27(d,j＝8.4hz,2h),7.07(t,j＝8.0hz,1h),6.89(d,j＝8.4hz,2h),5.14(d,j＝14.4hz,1h),4.72(s,1h),4.28(d,j＝14.4hz,1h),4.01–3.91(m,2h),3.81(s,3h),3.26(dd,j＝15.2,12.4hz,1h),3.17–3.07(m,2h),2.80(t,j＝12.4hz,1h),2.04–1.88(m,2h),1.64–1.55(m,1h),1.48(s,9h)。

化合物l23的制备

化合物k23(1mmol)溶于乙醇(5ml)中，加入水(2ml)，铁粉(7mmol)，氯化铵(10mmol)，回流反应1小时。过滤，滤液减压蒸馏，残液溶于二氯甲烷，碳酸氢钠洗涤。二氯甲烷相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得淡黄色固体。所得粗产品溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入环丙酰氯(1mmol)，搅拌1小时，反应液直接柱层析(二氯甲烷/乙酸乙酯)，得白色固体l23(77％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.40(d,j＝8.0hz,1h),7.95(s,1h),7.34(d,j＝8.0hz,1h),7.29–7.21(d,j＝8.4hz,2h),6.99(t,j＝8.0hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,2h),5.21(d,j＝14.4hz,1h),4.69(s,1h),4.17–3.89(m,3h),3.80(s,3h),3.31–3.24(m,1h),3.09–3.04(m,2h),2.81–2.71(m,1h),2.10–1.93(m,2h),1.72–1.68(m,1h),1.51–1.44(m,10h),1.11–1.09(m,2h),0.90–0.86(m,2h)。

化合物23的合成

化合物l23(0.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟醋酸(10mmol)，室温搅拌5小时。反应液用碳酸氢钠水溶液中和，二氯甲烷萃取，有机相再水洗，干燥，旋干。所得粗产物(0.1mmol)溶于二氯甲烷(1ml)中，0℃条件下加入对氯苯磺酰氯(0.12mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.2mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体23(79％)。¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ8.24(s,1h),7.69(d,j＝8.5hz,2h),7.53–7.48(m,3h),7.29(d,j＝8.0hz,1h),7.24(d,j＝8.5hz,2h),6.95(t,j＝8.0hz,1h),6.88(d,j＝8.5hz,2h),5.13(d,j＝14.5hz,1h),4.60(s,1h),4.26(d,j＝14.5hz,1h),3.84–3.79(m,4h),3.56(dd,j＝11.5,4.0hz,1h),3.20(dd,j＝15.0,12.5hz,1h),3.06(dd,j＝15.0,5.0hz,1h),2.60(t,j＝12.0hz,1h),2.33(t,j＝11.5hz,1h),2.21–2.08(m,2h),1.92–1.85(m,1h),1.15–1.10(m,1h),0.98–0.92(m,2h),0.81–0.76(m,2h)。

实施例24、化合物24的制备

采用2-氯噻吩-2-磺酰氯代替对氯苯磺酰氯，并根据实施例23中从化合物l23合成化合物23的方法合成化合物24(白色固体，85％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.27(d,j＝7.6hz,1h),7.64(s,1h),7.33–7.25(m,4h),6.99–6.94(m,2h),6.88(d,j＝8.4hz,2h),5.13(d,j＝14.4hz,1h),4.62(s,1h),4.28(d,j＝14.4hz,1h),3.84–3.79(m,4h),3.55–3.51(m,1h),3.24(dd,j＝14.8,12.4hz,1h),3.07(dd,j＝14.8,4.8hz,1h),2.76(t,j＝12.4hz,1h),2.42(t,j＝11.6hz,1h),2.21–2.13(m,2h),1.92–1.85(m,1h)。1.28–1.23(m,1h),1.05–0.98(m,2h),0.87–0.81(m,2h)。

实施例25、化合物25的制备

采用1-甲基吡唑-3-磺酰氯代替对氯苯磺酰氯，并根据实施例23中从化合物l23合成化合物23的方法合成化合物25(白色固体，82％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.27(s,1h),7.79(s,1h),7.44(d,j＝2.4hz,1h),7.31–7.21(m,3h),6.96(t,j＝8.1hz,1h),6.88(d,j＝8.4hz,2h),6.66(d,j＝2.4hz,1h),5.17(d,j＝14.4hz,1h),4.63(s,1h),4.23(d,j＝14.4hz,1h),3.97–3.89(m,4h),3.82(s,3h),3.61–3.56(m,1h),3.27–3.18(m,1h),3.09–2.94(m,2h),2.57(t,j＝11.7hz,1h),2.21–2.13(m,2h),1.88–1.80(m,1h),1.39–1.34(m,1h),1.06–1.04(m,2h),0.88–0.83(m,2h)。

实施例26、化合物26的制备

化合物k26的制备

2-氟-5-硝基苯乙酸(2mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入hatu(6mmol)，hoat(2mmol)和dipea(6mmol)，搅拌10分钟后，分别加入化合物j23(2mmol，其制备方法见实施例23)，室温搅拌过夜。反应液加水，有机相水洗，干燥，旋干。所得粗产物溶于dmf(10ml)中，加入氟化铯(4mmol)，80℃搅拌至原料反应完全，反应液加水，乙酸乙酯萃取，有机相多次水洗，旋干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯)，得淡黄色油状液体k26(26％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.43(d,j＝2.8hz,1h),8.16(dd,j＝8.8,2.8hz,1h),7.25(d,j＝8.4hz,2h),7.12(d,j＝8.8hz,1h),6.86(d,j＝8.4hz,2h),5.04(d,j＝14.4hz,1h),4.54(d,j＝12.4hz,1h),4.11(dd,j＝15.2,10.4hz,1h),4.02–3.94(m,2h),3.82–3.78(m,5h),3.41(t,j＝12.4hz,1h),3.28(d,j＝12.4hz,1h),3.21(dd,j＝14.8,4.8hz,1h),3.10(t,j＝12.0hz,1h),2.14–2.09(m,1h),1.97–1.94(m,1h),1.63–1.58(m,1h),1.51(s,9h)。

化合物l26的制备

化合物k26(1mmol)溶于乙醇(5ml)中，加入水(2ml)，铁粉(7mmol)，氯化铵(10mmol)，回流反应1小时。过滤，滤液减压蒸馏，残液溶于二氯甲烷，碳酸氢钠洗涤。二氯甲烷相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得淡黄色固体。所得粗产品溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入环丙酰氯(1mmol)，搅拌1小时，反应液直接柱层析(二氯甲烷/乙酸乙酯)，得白色固体l26(78％)。¹hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.73(d,j＝8.4hz,1h),7.33(s,1h),7.21(d,j＝8.1hz,2h),6.93(d,j＝8.4hz,1h),6.82(d,j＝8.1hz,2h),5.04(d,j＝14.4hz,1h),4.47(d,j＝12.3hz,1h),4.16–4.07(m,1h),4.02–3.60(m,7h),3.45–3.37(m,1h),3.14–3.08(m,3h),2.08–1.90(m,3h),1.54–1.47(m,10h),1.08–1.00(m,2h),0.88–0.78(m,2h).

化合物26的合成

化合物l26(0.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)中，加入三氟醋酸(10mmol)，室温搅拌5小时。反应液用碳酸氢钠水溶液中和，二氯甲烷萃取，有机相再水洗，干燥，旋干。所得粗产物(0.1mmol)溶于二氯甲烷(1ml)中，0℃条件下加入对氯苯磺酰氯(0.12mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.2mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体26(65％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3+cd3od)δ7.92(dd,j＝8.8,2.4hz,1h),7.69(d,j＝8.4hz,2h),7.54(d,j＝8.4hz,2h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),7.07(d,j＝2.4hz,1h),6.87(d,j＝8.4hz,2h),6.82(d,j＝8.8hz,1h),4.96(d,j＝14.4hz,1h),4.37(d,j＝8.8hz,1h),4.11–4.05(m,2h),3.82(s,3h),3.55–3.49(m,2h),3.27(d,j＝8.6hz,1h),3.18(dd,j＝15.2,4.8hz,1h),3.04–2.95(m,2h),2.60–2.55(m,1h),2.19–2.11(m,2h),1.74–1.59(m,2h),1.04–0.97(m,2h),0.88–0.80(m,2h)。

实施例27、化合物27的制备

采用2-氯噻吩-2-磺酰氯代替对氯苯磺酰氯，并根据实施例26中从化合物l26合成化合物26的方法合成化合物27(白色固体，69％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.85(s,1h),7.75(d,j＝8.4hz,1h),7.34(d,j＝4.0hz,1h),7.32(d,j＝2.8hz,1h),7.22(d,j＝8.6hz,2h),7.01(d,j＝4.0hz,1h),6.88–6.85(m,3h),4.99(d,j＝14.4hz,1h),4.42(d,j＝12.0hz,1h),4.16–4.07(m,2h),3.82(s,3h),3.64–3.57(m,2h),3.33(d,j＝11.2hz,1h),3.18(dd,j＝14.8,4.8hz,1h),3.08–3.02(m,2h),2.69(t,j＝10.8hz,1h),2.24–2.14(m,2h),1.75–1.62(m,1h),1.54–1.49(m,1h),1.07–1.04(m,2h),0.84–0.76(m,2h)。

实施例28、化合物28的制备

采用1-甲基吡唑-3-磺酰氯代替对氯苯磺酰氯，并根据实施例26中从化合物l26合成化合物26的方法合成化合物28(白色固体，67％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.95(s,1h),7.71(d,j＝8.8hz,1h),7.45(d,j＝2.4hz,1h),7.31(d,j＝2.4hz,1h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),6.88–6.83(m,3h),6.66(d,j＝2.4hz,1h),5.01(d,j＝14.4hz,1h),4.40(d,j＝12.0hz,1h),4.08(dd,j＝14.8,10.4hz,1h),4.02–3.98(m,4h),3.80(s,3h),3.63–3.60(m,2h),3.41(d,j＝11.2hz,1h),3.19–3.05(m,3h),2.81(t,j＝11.2hz,1h),2.19–2.11(m,2h),1.73–1.66(m,1h),1.53–1.47(m,1h),1.04–0.97(m,2h),0.79–0.73(m,2h)。

实施例29、化合物29的制备

化合物c29的制备

2-氟-5-硝基苯乙酸(2mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，加入hatu(6mmol)，hoat(2mmol)和dipea(6mmol)，搅拌10分钟后，分别加入b9(2mmol，其制备方法参见实施例9)，室温搅拌过夜。反应液加水，有机相水洗，干燥，旋干。所得粗产物溶于dmf(10ml)中，加入氟化铯(4mmol)，80℃搅拌至原料反应完全，反应液加水，乙酸乙酯萃取，有机相多次水洗，旋干，柱层析(石油醚/乙酸乙酯)，得淡黄色油状液体c29(31％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ8.35(d,j＝2.8hz,1h),7.96(dd,j＝8.8,2.8hz,1h),7.49–7.34(m,5h),7.21(d,j＝8.4hz,2h),6.86(d,j＝8.4hz,2h),6.61(d,j＝8.8hz,1h),5.08(d,j＝14.4hz,1h),4.55(d,j＝12.0hz,1h),4.21(dd,j＝14.8,10.8hz,1h),3.95(d,j＝14.4hz,1h),3.89(d,j＝12.8hz,1h),3.82(s,3h),3.48(s,1h),3.42(d,j＝12.8hz,1h),3.24–3.12(m,4h),2.26–2.21(m,1h),2.07–1.83(m,3h),1.56–1.53(m,1h)。

化合物d29的制备

化合物c29(1mmol)溶于乙醇(5ml)中，加入水(2ml)，铁粉(7mmol)，氯化铵(10mmol)，回流反应1小时。过滤，滤液减压蒸馏，残液溶于二氯甲烷，碳酸氢钠洗涤。二氯甲烷相用饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，旋干得淡黄色固体。所得粗产品溶于二氯甲烷(5ml)中，0℃条件下加入环丙酰氯(1mmol)，搅拌1小时，洗出固体，过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，干燥得白色固体d29(84％)，直接用于下一步反应。

化合物29的合成

化合物d29(0.5mmol)溶于乙醇中(5ml)，加入pd/c(0.25mmol)，氢气条件下50℃加热反应7小时，过滤，旋干。所得粗产物(0.1mmol)溶于二氯甲烷(1ml)中，0℃条件下加入对氯苯磺酰氯(0.12mmol)和2,6-二甲基吡啶(0.2mmol)，保持0℃条件反应2小时，反应液旋干直接柱层析，得白色固体29(58％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3+cd3od)δ7.85–7.76(m,3h),7.51(d,j＝8.4hz,2h),7.21–7.09(m,4h),6.82(d,j＝8.4hz,2h),5.01(d,j＝14.4hz,1h),4.45(d,j＝12.0hz,1h),4.27–4.17(m,2h),3.96–3.87(m,2h),3.78(s,3h),3.41(s,1h),3.14–3.03(m,2h),2.44(t,j＝12.0hz,1h),2.27(d,j＝13.6hz,1h),1.87–1.61(m,3h),1.48–1.44(m,1h),1.07–1.04(m,2h),0.85–0.82(m,2h)。

实施例30、化合物30的制备

采用1-甲基吡唑-3-磺酰氯代替对氯苯磺酰氯，并根据实施例29中从化合物d29合成化合物29的方法合成化合物30(白色固体，66％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3+cd3od)δ7.80(dd,j＝8.9,2.4hz,1h),7.47(d,j＝2.4hz,1h),7.22(d,j＝2.4hz,1h),7.17–7.15(m,3h),6.83(d,j＝8.4hz,2h),6.68(d,j＝2.4hz,1h),5.05(d,j＝14.4hz,1h),4.46(d,j＝12.4hz,1h),4.30(d,j＝13.2hz,1h),4.28–4.18(m,1h),4.01–3.97(m,4h),3.92(d,j＝14.4hz,1h),3.79(s,3h),3.43(s,1h),3.14(dd,j＝14.8,4.8hz,1h),3.04(d,j＝12.4hz,1h),2.64(t,j＝12.0hz,1h),2.48(d,j＝13.2hz,1h),1.94–1.79(m,2h),1.65–1.48(m,1h),1.52–1.47(m,1h),1.06–1.03(m,2h),0.84–0.81(m,2h)。

测试例部分化合体外抑制hedgehog信号通路的活性测试。

为检验本发明提供的化合物对于hedgehog通路的抑制水平，通过hedgehog信号传导通路的gli-萤光素酶(gli-luciferase)报告基因实验来评价。荧光素酶报告基因(gli-reporter)转染的nih3t3细胞株，其包含gli-1响应的荧光蛋白报告基因，通过荧光蛋白的强弱检测化合物对hedgehog信号通路的抑制效果。以维莫德吉(vismodegib，gdc-0449)为阳性对照，不含药物组做阴性对照，实验按照文献(j.med.chem.doi:10.1021/acs.jmedchem.6b01247)中报道的方法进行，实验结果见下表(表一)。

表一实施例中部分化合物对hedgehog的抑制活性