本发明属于制药领域，涉及通式(i)的苯并[def]咔唑类化合物及其药学上可接受的盐，及其制备方法和在制备抗炎药物中的应用。
背景技术：
炎症反应与多种复杂重大疾病的发生、发展密切相关，抑制早期相关炎症反应，则可对这些疾病起到预防和治疗作用。尽管目前临床上有多种抗炎药物，然而，都存在着不同程度的毒副反应风险。因此，开发具有自主知识产权的安全、有效的新型非甾体抗炎药物用于炎症相关疾病的治疗和预防具有重要意义。
丹参酮iia(tan-iia)是我国著名中药丹参一个重要脂溶性成分，具有广泛的重要生物活性，包括抗炎活性等。据文献报道，丹参酮iia具有抗急性肺损伤活性，然而其较差的成药性限制其进一步的临床开发，而其邻醌片段可能是导致其成药性差的一个重要原因，因此有必要对其进一步结构优化。天然产物salviadione是由sun等人首次从天然植物丹参根部的乙醇提取物中分离得到一个罕见的含氮四环稠合苯并[def]咔唑类3,5-二酮化合物，结构新颖独特，不具邻醌片段。由于含量极其稀少，其活性研究少见报道(j.nat.prod.2005,68,1066-1070)。
在此背景下，本发明将天然产物salviadione与丹参酮iia的结构进行拼合，通过一锅串联的氮环化反应，得到了一类新型的四环稠合苯并[def]咔唑类化合物，该类化合物具有显著的体内外抗炎活性和良好的成药性。
技术实现要素：
本发明的一个目的是提供一类通式(i)所示的苯并[def]咔唑类化合物及其药学上可接受的盐。通过对所述苯并[def]咔唑类化合物的抗炎活性的研究，发现其具有体内外抗炎活性的作用，从而可以用于抗炎药物。
本发明的再一目的为提供制备上述苯并[def]咔唑类化合物的方法。
本发明的再一目的为提供包含治疗有效量的选自上述苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的用于抗炎的药物组合物。所述药物组合物任选可以进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂(例如，稀释剂等等)。
本发明的再一目的是提供上述药物组合物在制备用于抗炎药物中的用途。
本发明的再一目的为提供一种用于抗炎的药物组合物，其包含治疗有效量的选自上述苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分以及其他药学上可接受的治疗剂，特别是其它抗炎药物。所述药物组合物任选可以进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂(例如，稀释剂等等)。
本发明的再一目的为提供一种抗炎的方法，所述方法包括给需要该治疗的患者给药治疗有效量的选自根据本发明的苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种，或根据本发明的包含治疗有效量的选自根据本发明的苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。
发明人首次以丹参酮类化合物为原料，通过“一锅多步”反应，得到通式(i)所示的苯并[def]咔唑类化合物，从而获得了一类结构新颖且具有显著体内外抗炎活性的化合物，由此完成了本发明。
在本发明第一方面，是提供一类具有下面通式(i)所示的苯并[def]咔唑类化合物或其药学上可接受的盐：
其中：
r1选自h，羟基，氨基，c1-c8烷氧基，取代或未取代的c1-c8烷基，取代或未取代的c2-c8烯基，取代或未取代的c2-c8炔基，取代或未取代的c3-c8环烷基，取代或未取代的c3-c8环烯基，取代或未取代c6-c10芳基，卤素；所述取代的取代基选自卤素，硝基，氰基，氨基，羟基，羟甲基，羟乙基，巯基，羧基，酯基，c1-c6烷基单取代胺基，c1-c6烷基双取代胺基，c1-c6烷氧基，c1-c6烷基羰氧基，c1-c6环烷基羰氧基，杂环基羰氧基，c1-c6烷氧基羰基，c1-c6环烷氧基羰基，杂环氧基羰基，c1-c6烷氧甲酰胺基，c1-c6烷巯基，或者水溶性官能团中的一个或多个；
r2选自h，羟基，氨基，c1-c8烷氧基，取代或未取代的c1-c8烷基，取代或未取代的c2-c8烯基，取代或未取代的c2-c8炔基，取代或未取代的c3-c8环烷基，取代或未取代的c3-c8环烯基，取代或未取代的c6-c10芳基，取代或未取代的c5-c10杂环基，取代或未取代的c5-c10杂芳基，卤素；所述取代的取代基选自卤素，硝基，氰基，氨基，羟基，羟甲基，羟乙基，巯基，羧基，酯基，c1-c6烷基单取代胺基，c1-c6烷基双取代胺基，c1-c6烷氧基，c1-c6烷基羰氧基，c1-c6环烷基羰氧基，杂环基羰氧基，c1-c6烷氧基羰基，c1-c6环烷氧基羰基，杂环氧基羰基，c1-c6烷氧甲酰胺基，c1-c6烷巯基，或者水溶性官能团中的一个或多个；
r3选自h，取代或未取代的c1-c8烷基，取代或未取代的c2-c8烯基，取代或未取代的c2-c8炔基，取代或未取代的c3-c8环烷基，取代或未取代的c3-c8环烯基，取代或未取代的c6-c10芳基，取代或未取代的c5-c10杂环基，取代或未取代的c5-c10杂芳基；所述取代的取代基选自卤素，硝基，氰基，氨基，羟基，羟甲基，羟乙基，羟甲氧基，羟乙氧基，巯基，羧基，酯基，三氟甲基，c1-c6烷基，c1-c6烷基单取代胺基，c1-c6烷基双取代胺基，c1-c6烷氧基，c1-c6烷基羰氧基，c1-c6环烷基羰氧基，c6-c10芳基氧基，未取代的或由选自卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基中的一个或多个基团取代的c6-c10芳基，杂环基羰氧基，c1-c6烷氧基羰基，c1-c6环烷氧基羰基，杂环氧基羰基，c1-c6烷氧甲酰胺基，c1-c6烷巯基，或者水溶性官能团中的一个或多个；
x1选自碳，氮，氧或硫；
x2不存在，或者选自氮，氧或硫；
优选，
r1选自甲基，异丙基或羟甲基；
r2选自h，卤素，取代或未取代的c2-c8烯基或c2-c8炔基，取代或未取代的c1-c8烷基，取代或未取代c6-c10芳基，取代或未取代c6-c10杂芳基；所述取代的取代基选自卤素，硝基，氰基，氨基，羟基，羟甲基，羟乙基，c1-c6烷基单取代胺基，c1-c6烷基双取代胺基，c1-c6烷氧基中的一个或多个；
r3选自h，取代或未取代的c1-c8烷基，取代或未取代的c6-c10芳基；所述取代的取代基选自卤素，氨基，羟基，羟甲基，羟乙基，羟甲氧基，羟乙氧基，三氟甲基，c1-c6烷基，c1-c6烷基单取代胺基，c1-c6烷基双取代胺基，c1-c6烷氧基，c1-c6烷基羰氧基，c1-c6环烷基羰氧基，c6-c10芳基氧基，未取代的或由选自卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基中的一个或多个基团取代的c6-c10芳基，c1-c6烷氧基羰基，c1-c6环烷氧基羰基，c1-c6烷氧甲酰胺基中的一个或多个；
x1选自氮，氧或硫；
x2不存在，或者选自氧或硫；
进一步优选，
r1为甲基或羟甲基；
r2为h，氯，溴，碘，乙基，乙烯基，噻吩基或甲氧基苯基；
r3为丁基，庚基，苯基，苄基，苯乙基，氯苯基，溴苯基，三氟甲基苯基，甲基苯基，甲基苯基，乙基苯基，甲氧基苯基，乙氧基苯基，乙酰胺基苯基，苯氧基苯基，乙酰氧基苯基，4-溴-3-氟-苯基，4-溴-3-甲基-苯基，4-氟-3-氯-苯基，二甲基苯基，二甲氧基苯基，三甲氧基苯基，甲基苄基，氯苄基，氟苄基，甲氧基苄基，氟苯基乙基或羟乙氧基乙基；
特别优选，
r1为甲基或羟甲基；
r2为h，氯，溴，碘，乙基，乙烯基，噻吩-3-基或3-甲氧基苯基；
r3为丁基，庚基，苯基，苄基，苯乙基，4-氯苯基，4-溴苯基，4-三氟甲基苯基，4-甲基苯基，3-甲基苯基，4-乙基苯基，4-甲氧基苯基，4-乙氧基苯基，4-苯氧基苯基，2-甲氧基苯基，乙酰氧基苯基，4-乙酰胺基苯基，4-溴-3-氟-苯基，4-溴-3-甲基-苯基，4-氟-3-氯-苯基，2,4-二甲基苯基，3,4-二甲氧基苯基，3,4,5-三甲氧基苯基，3-甲基苄基，3-氯苄基，4-氯苄基，4-氟苄基，2-甲氧基苄基，2-甲氧基苄基，4-氟苯基乙基或羟乙氧基乙基；
本发明所使用术语中，“c1-c8烷基”是指含有1-8个碳原子的直链或支链烷烃基，包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正戊基等。
“c1-c6烷氧基”是指含有1-6个碳原子的烷氧基，包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基。
“c2-c8烯基”是指含有2-8个碳原子的直链或支链烯烃基，包括但不限于乙烯基、烯丙基等。
“c3-c8环烷基或环烯基”是指具有饱和或不饱和环的3-8个碳原子单环系统的烃基，包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环丙烯基、环己烯基等。
“芳基”是指含有6-14个碳原子的单碳环芳香基或稠合或非稠合的多碳环芳香基，在多碳环的情况下，只要一个碳环是芳香环的即可。
“杂芳基”是指在环中含有1-4个杂原子作为环成员的芳香环基团。杂原子是指氮、氧或硫。杂芳基可以是具有5-7个环原子的单环杂芳基，或者具有7-11个环原子的双环杂芳基。所述双环杂芳基中只要一个环是杂芳环即可，另一个可以是芳香环或非芳香环的，含杂原子的或不含杂原子的。此外，所述双环杂芳基既可以是并环结构，也可以是螺环结构，也可以是两个杂环直接相连。杂芳基的例子包括但不限于吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、吲哚基等。
“杂环基”是指在环中含有1-4个杂原子作为环成员的非芳香环基团。杂原子是指氮、氧或硫。杂环基可以是具有4-8个环原子的单环杂环基，或者具有7-11个环原子的双环杂环基。所述双环杂环基中只要一个环是杂环即可，另一个可以是芳香环或非芳香环的，含杂原子的或不含杂原子的。此外，所述双环杂环基既可以是并环结构，也可以是螺环结构，也可以是两个杂环直接相连。杂环基的例子包括但不局限于氮杂环丁基、吡咯烷基、吡咯啉基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、哌嗪基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢吡喃基、四氢噻吩基等。
“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
所述的“水溶性官能基”选自羟基，多羟基烷氧基，糖残基，羧基，磺酸基，磷酸基，多羟基c1-c6烷氧基羰基，羧基c1-c6烷氧基，羧基c1-c6烷基甲酰氧基。
所述的“治疗有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。治疗有效量根据治疗对象的年龄、病情、疗程等来确定。
所述的“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组分能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有糖(如葡萄糖、蔗糖、乳糖等)，淀粉(如玉米淀粉、马铃薯淀粉等)，纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)，明胶，滑石，固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)，硫酸钙，植物油(如豆油，芝麻油，花生油，橄榄油等)，多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)，乳化剂(如吐温)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)，着色剂，调味剂，稳定剂，抗氧化剂，防腐剂，无热原水等。
在本发明一个优选的实施方案中，本发明的通式(i)所示的苯并[def]咔唑类化合物包括，但不限于以下化合物：
本发明的第二方面，还提供通式(i)的苯并[def]咔唑类化合物制备方法，该方法包括：
其中，r1、r2、r3、x1和x2的定义与前述相同，
式a所示丹参酮类化合物和胺类化合物r3-nh2在氧化剂存在下，发生氧化缩合反应，得到通式(i)的苯并[def]咔唑类化合物。所述的氧化剂可为2,2,6,6-四甲基哌啶氮氧化物(tempo)，氧气，氧化银(ago)，碳酸银(ag2co3)，醋酸银(agoac)，醋酸铜(cu(oac)2)，三氯化铁(fecl3)，二氧化锰(mno2)，2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(ddq)，二氧化硒(seo2)，叔丁基过氧化氢(tbhp)，醋酸碘苯(phi(oac)2)，苯醌(bq)，优选为2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(tempo)；
所述氧化缩合反应可在非极性芳香性溶剂中，加热条件下进行，
所述的非极性芳香性溶剂为苯，氯苯，甲苯，二甲苯，三甲苯，优选为甲苯；
所述加热的温度为50至160℃，反应时间为24小时至48小时。
本发明的第三方面是提供一种药物组合物，它含有治疗有效量的选自根据本发明通式(i)的苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分，以及任选的药学上可接受的载体和/或赋形剂(例如，稀释剂等等)。
本发明的第四方面是提供通式(i)的苯并[def]咔唑类化合物或其药学上可接受的盐、和包含该化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物在制备用于抗炎药物中的用途。本发明所述的化合物或其药学上可接受的盐可以单独给药，或者与其他药学上可接受的治疗剂联合给药，特别是与其他抗炎药物组合。所述治疗剂包括但不限于：阿司匹林、双氯芬酸、酮洛芬、布洛芬、芬布芬、甲芬那酸、甲氯芬那酸、吲哚美辛、舒林酸、阿西美辛、苄达明、依托度酸、萘普生、异丁苯丙酸等。待组合的各成分可同时或顺序地给予，以单一制剂形式或以不同制剂的形式给予。所述组合不仅包括本发明的化合物和一种其它活性剂的组合，而且包括本发明的化合物和两种或更多种其它活性剂的组合。
因此，在本发明的第五方面，提供了一种药物组合物，其包含治疗有效量的选自根据本发明的苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分以及其他药学上可接受的治疗剂，特别是其他抗炎药物。所述药物组合物任选可以进一步包含药学上可接受的载体和/或赋形剂(例如，稀释剂等等)。
在本发明的第六方面，提供了一种治疗炎症的方法，所述方法包括给需要该治疗的患者给药治疗有效量的选自根据本发明的苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种，或根据本发明的包含治疗有效量的选自根据本发明的苯并[def]咔唑类化合物和其药学上可接受的盐中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。
在本发明中，所述炎症选自急性肺损伤，毒脓症，皮炎湿疹、口腔颌面部炎症、急性外耳道炎和肺炎。
附图说明
图1为实施例中部分化合物对lps诱导的巨噬细胞炎症因子释放的影响，*p<0.05，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异；
图2为化合物s28能够剂量依赖性地抑制lps诱导的小鼠肺水肿，*p<0.05，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异；
图3为化合物s28能够剂量依赖性地缓解balf中蛋白浓度的增加；化合物s28测试了给药剂量10mg/kg和20mg/kg的两组，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异；
图4为化合物s28能够剂量依赖性地降低肺泡灌洗液中总细胞的数量，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异；
图5为化合物s28能够剂量依赖性地降低肺泡灌洗液中中性粒细胞的数量，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异。
具体实施方式
通过下列实施例说明本发明的实施方案。然而，本发明的实施方案不受限于下列实施例中的特定细节，因为鉴于本发明的公开内容，其他变化对本领域普通技术人员是已知和显而易见的。
样品数据由以下仪器测定：核磁共振氢谱(1h-nmr)用brukeravanceiii300核磁共振仪；显色使用的精科wfh-203b三用紫外分析仪，波长为254nm和365nm。柱层析硅胶(100-200目，300-400目)为青岛海洋化工厂生产；tlc硅胶板为烟台化工厂生产的hsgf-254型薄层层析硅胶板，薄层层析使用的层析板厚度为0.2±0.03mm，预制备使用的薄层层析预制备板厚度为0.4-0.5mm；石油醚(沸程60-90℃)，二氯甲烷，乙酸乙酯，甲醇均为分析纯，丹参酮iia(cas号:568-72-9)、隐丹参酮(cas号:35825-57-1)、苯胺、2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物由国药集团化学试剂有限公司提供，所用试剂和溶剂除特别说明外，均未经特别处理。其他丹参酮类化合物，例如，17-羟基丹参酮iia、15-溴丹参酮iia、15-噻吩丹参酮iia、15-乙烯丹参酮iia、15-乙基丹参酮iia、15-间甲氧基苯基丹参酮iia参考journalofnatureproducts,2016,79(10),2514–2520制得。所有温度以℃(摄氏度)表示，室温或环境温度是指20～25℃。
实施例1、化合物s1的合成
丹参酮iia(32.2mg,0.1mmol)、苯胺(10.2mg,0.11mmol)和2,2,6,6-四甲基哌啶氧化物(tempo)(20.3mg,0.13mmol)加入到1ml的甲苯中，封管120℃反应48h。tlc检测反应完毕后，通过柱层析分离得到固体26.0mg，收率85％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.86(d,j＝6.9hz,1h),7.58(d,j＝6hz,5h),7.37(d,j＝7.2hz,1h),7.32(s,1h),2.92(s,2h),2.35(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.71,173.62,156.04,143.96,140.85,136.55,129.65,128.77(2c),128.31,126.80(2c),126.46,126.39,125.37,123.61,122.71,121.80,120.66,116.05,57.83,40.67,29.91(2c),9.41.
高分辨质谱m/z(ei)c25h19no3理论值为381.1365，实测值为381.1366。
实施例2、化合物s2的合成
以丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s2，收率为73％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.86(d,j＝7.2hz,1h),7.53(q,j＝8.1hz,4h),7.37(d,j＝7.2hz,1h),7.32(s,1h),2.92(s,2h),2.34(s,3h),1.52(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.78,173.59,156.04,143.97,140.97,135.60,134.86,128.97(2c),128.40,128.22(2c),126.32,126.23,125.31,123.67,123.01,121.76,120.90,116.03,57.76,40.66,29.89(2c),9.38.
高分辨质谱m/z(ei)c25h18clno3理论值为415.0975，实测值为415.0978。
hplc纯度为97.36％。
实施例3、化合物s3的合成
以丹参酮iia和对溴苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s3，收率为80％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.86(d,j＝6.9hz,1h),7.67(d,j＝8.1hz,2h),7.50(d,j＝8.1hz,2h),7.37(d,j＝7.2hz,1h),7.33(s,1h),2.92(s,2h),2.35(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ186.74,173.57,156.02,143.96,140.96,135.37,131.93(2c),128.50(2c),128.41,126.25,126.16,125.31,123.80,123.69,122.99,121.76,120.89,116.04,57.76,40.66,29.89(2c)9.37.
高分辨质谱m/z(ei)c25h18brno3理论值为459.0470，实测值为459.0468。
hplc纯度为97.18％。
实施例4、化合物s4的合成
以丹参酮iia和对三氟甲基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s4，收率为38％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.88(d,j＝6.9hz,1h),7.82(d,j＝7.8hz,2h),7.76(d,j＝7.8hz,2h),7.39(d,j＝6.9hz,1h),7.34(s,1h),2.93(s,2h),2.35(s,3h),1.54(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.78,173.60,156.05,144.04,141.06,139.28,131.60,131.38,128.56,127.60(2c),126.33,126.21,125.93,125.91,125.30,123.83,123.24,121.76,121.10,116.12,57.75,40.70,29.89(2c),9.39.
高分辨质谱m/z(ei)c26h18f3no3理论值为449.1239，实测值为449.1243。
hplc纯度为95.51％。
实施例5、化合物s5和s41的合成
以丹参酮iia和对乙酰氨基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s5和s41，收率分别为50％和13％。
s5：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.35(s,1h),7.88(d,j＝7.2hz,1h),7.66(d,j＝8.4hz,2h),7.48(d,j＝8.4hz,2h),7.38(d,j＝7.2hz,1h),7.32(s,1h),2.92(s,2h),2.34(s,3h),2.10(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ187.52,174.34,169.18,156.86,144.83,141.62,140.51,132.30,128.94,127.71(2c),127.40,127.05,126.01,124.30,123.68,122.37,121.41,120.20(2c),116.57,58.55,41.39,30.61(2c),25.27,10.08.
高分辨质谱m/z(ei)c27h22n2o4理论值为438.1580，实测值为438.1574。
hplc纯度为99.71％。
s41：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ9.59(s,1h),8.05(d,j＝7.2hz,1h),7.73(d,j＝8.5hz,2h),7.51(d,j＝8.5hz,2h),7.37(d,j＝4.2hz,2h),6.63(d,j＝9.9hz,1h),6.47(d,j＝9.9hz,1h),2.47(s,3h),1.92(s,3h),1.51(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ169.29,169.23,154.14,151.44,145.33,140.23,140.20,138.35,131.08,126.31(2c),126.01,124.05,123.90,121.53,121.13,120.63,120.50(2c),118.18,113.29,113.26,40.37,29.09(2c),24.23,9.70.
高分辨质谱m/z(ei)c27h22n2o3理论值为422.1630，实测值为422.1628。
实施例6、化合物s6的合成
以丹参酮iia和对甲基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s6，收率为70％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.85(d,j＝6.9hz,1h),7.48(d,j＝8.1hz,2h),7.41-7.30(m,4h),2.91(s,2h),2.47(s,3h),2.35(s,3h),1.52(s,6h).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ186.72,173.60,156.02,143.91,140.79,139.67,133.97,129.52,129.43(2c),128.26,126.45(2c),126.39,125.37,123.56,122.59,121.81,120.55,115.99,57.84,40.63,29.90(2c),21.49,9.41.
高分辨质谱m/z(ei)c26h21no3理论值为396.1521，实测值为396.1520。
实施例7、化合物s7的合成
以丹参酮iia和对乙基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s7，收率为71％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.85(d,j＝7.2hz,1h),7.52(d,j＝7.2hz,2h),7.40-7.34(m,3h),7.32(s,1h),2.91(s,2h),2.86-2.62(m,3h),2.35(s,3h),1.52(s,6h),1.33(t,j＝7.5hz,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.10,175.02,157.44,147.03,145.33,142.21,135.50,129.69,129.56(2c),127.94(2c),127.80,126.78,125.01,123.98,123.22,121.94,117.41,59.29,42.04,31.31(2c),30.09,16.42,10.84.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no3理论值为409.1678，实测值为409.1681。
hplc纯度为99.29％。
实施例8、化合物s8的合成
以丹参酮iia和对甲氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s8，收率为73％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.84(d,j＝7.2hz,1h),7.53(d,j＝8.4hz,2h),7.35(d,j＝7.2hz,1h),7.32(s,1h),7.05(d,j＝8.4hz,2h),3.89(s,3h),2.91(s,2h),2.35(s,3h),1.52(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.15,175.04,161.66,157.45,145.29,142.21,130.66,129.63,129.32(2c),127.87,127.80,126.79,124.94,123.97,123.21,121.94,117.36,115.31(2c),59.28,56.90,42.03,31.31(2c),10.83.
高分辨质谱m/z(ei)c26h21no4理论值为411.1471，实测值为411.1476。
hplc纯度为:95.77％。
实施例9、化合物s9的合成
以丹参酮iia和对乙氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s9，收率为75％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.84(d,j＝6.9hz,1h),7.51(d,j＝8.1hz,2h),7.35(d,j＝7.2hz,1h),7.31(s,1h),7.03(d,j＝8.4hz,2h),4.11(q,j＝6.8hz,2h),2.91(s,2h),2.35(s,3h),1.52(s,6h),1.46(t,j＝6.8hz,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.74,173.63,159.71,156.04,143.87,140.78,129.04,128.20,127.85(2c),126.47,126.40,125.37,123.51,122.53,121.80,120.50,115.94,114.32(2c),63.70,57.87,40.60,29.89(2c),14.88,9.40.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no4理论值为425.1627，实测值为425.1627。
hplc纯度为95.13％。
实施例10、化合物s10的合成
以丹参酮iia和对苯氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s10，收率为64％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.86(d,j＝6.9hz,1h),7.55(d,j＝8.7hz,2h),7.43-.32(m,4h),7.23-7.07(m,5h),2.92(s,2h),2.37(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ186.83,173.69,158.61,156.07,156.01,143.93,140.87,130.97,129.96(2c),128.29,128.21(2c),126.50,126.39,125.35,124.23,123.59,122.74,121.78,120.67,120.24(2c),117.69(2c),115.98,57.87,40.65,29.90(2c),9.44.
高分辨质谱m/z(ei)c31h23no4理论值为473.1627，实测值为473.1629。
实施例11、化合物s11的合成
以丹参酮iia和邻甲氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s11，收率为64％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.84(d,j＝6.9hz,1h),7.51(d,2h),7.43-7.28(m,2h),7.12(d,2h),3.75(s,3h),3.01-2.80(m,2h),2.35(s,3h),1.52(d,j＝8.4hz,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.58,173.55,156.03,154.24,143.92,140.69,130.92,128.07,128.01,126.85,126.32,126.19,125.31,123.41,122.45,121.75,120.49,120.32,116.09,112.11,57.62,55.81,40.69,30.23,29.62,9.40.
高分辨质谱m/z(ei)c26h21no4理论值为411.1471，实测值为411.1467。
hplc纯度为96.63％。
实施例12、化合物s12的合成
以丹参酮iia和间甲基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s12，收率为63％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.85(d,j＝7.2hz,1h),7.49-7.30(m,6h),2.91(s,2h),2.46(s,3h),2.35(s,3h),1.52(s,6h).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ186.65,173.55,156.01,143.90,140.80,138.70,136.54,130.51,128.56,128.23,127.28,126.52,126.49,125.35,123.75,123.52,122.57,121.79,120.56,116.02,57.83,40.64,29.91(2c),21.51,9.39.
高分辨质谱m/z(ei)c26h21no3理论值为395.1521，实测值为395.1529。
hplc纯度为96.46％。
实施例13、化合物s13的合成
以丹参酮iia和3-甲基-4-溴苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s13，收率为66％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.85(d,j＝7.2hz,1h),7.70(d,j＝8.4hz,1h),7.46(s,1h),7.38–7.28(m,3h),2.91(s,2h),2.49(s,3h),2.35(s,3h),1.52(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.12,174.96,157.44,145.34,142.33,140.07,136.99,134.03,130.36,129.74,127.76,127.73,127.04,126.73,125.02,124.28,123.19,122.22,117.45,59.20,42.08,31.32(2c),24.62,10.79.
高分辨质谱m/z(ei)c26h20brno3理论值为473.0627，实测值为473.0626。
hplc纯度为95.54％。
实施例14、化合物s14的合成
以丹参酮iia和对3-氯-4-氟苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s14，收率为66％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.87(d,j＝7.2hz,1h),7.68(d,j＝4.5hz,1h),7.51(d,1h),7.43–7.27(m,3h),2.92(s,2h),2.35(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.15,174.97,161.04,159.03,157.44,145.37,142.45,134.25,130.88,129.75,128.37,127.75,126.71,125.02,124.58,123.16,122.78,122.62,122.48,118.09,117.90,117.50,59.11,42.10,31.31(2c),10.75.
高分辨质谱m/z(ei)c25h17clfno3理论值为433.0881，实测值为433.0879。
hplc纯度为96.71％。
实施例15、化合物s15的合成
以丹参酮iia和3-氟-4-溴苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s15，收率为51％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.87(d,j＝6.9hz,1h),7.72(t,j＝8.0hz,1h),7.43-7.29(m,4h),2.93(s,2h),2.35(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ186.69,173.50,159.34,157.69,156.00,143.98,141.06,136.70,136.64,133.33,128.43,126.24,126.18,125.28,123.99,123.97,123.70,123.24,121.75,121.12,116.10,116.02,115.85,110.8,57.69,40.69,29.88(2c),9.34.
高分辨质谱m/z(ei)c25h17brfno3理论值为477.0376，实测值为477.0377。
hplc纯度为98.39％。
实施例16、化合物s16的合成
以丹参酮iia和对乙酰氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s16，收率为62％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.77(d,j＝7.2hz,1h),7.64(d,j＝7.8hz,2h),7.34(d,j＝6.9hz,1h),7.29(s,1h),7.27(s,1h),4.88(t,j＝9.3hz,1h),4.43-4.35(m,1h),3.65–3.53(m,1h),2.90(s,2h),2.34(s,3h),1.51(s,6h),1.35(d,j＝6.6hz,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ185.67,173.19,168.21,162.77,150.77,146.08,132.93,127.79,127.51(2c),126.10,125.63,125.10,123.98,123.51,120.97(2c),119.92,115.59,80.89,57.27,40.26,34.92,29.58,29.10,20.77,18.82.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no5理论值为441.1576，实测值为441.1570。
hplc纯度为97.06％。
实施例17、化合物s17的合成
以丹参酮iia和2-甲基-4-甲基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s17，收率为59％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.87(d,j＝7.2hz,1h),7.38(d,j＝6.9hz,1h),7.32(s,1h),7.27(s,2h),7.17(s,1h),2.90(s,2h),2.36(d,j＝12.9hz,6h),2.01(s,3h),1.53(d,j＝6.3hz,6h).13cnmr(126mhz,cdcl3)δ186.65,173.59,156.12,143.95,140.84,136.49,136.35,131.00,130.69,130.67,127.99,127.05,126.54,126.41,125.32,123.29,122.60,121.77,120.56,116.12,57.65,40.76,30.16,29.77,21.08,16.90,9.37.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no3理论值为409.1678，实测值为409.1681。
hplc纯度为97.70％。
实施例18、化合物s18的合成
以丹参酮iia和对3-甲氧基-4甲氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s18，收率为72％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.85(d,j＝6.9hz,1h),7.39-7.30(m,2h),7.17(d,1h),7.09(s,1h),7.00(d,j＝7.8hz,1h),3.90(s,3h),3.96(s,3h),2.92(s,2h),2.36(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.57,175.40,157.88,151.75,150.55,145.75,142.69,131.23,130.09,128.44,128.39,127.25,125.38,124.46,123.69,122.46,120.99,117.84,112.36,112.25,59.78,58.04,57.88,42.50,31.80(2c),11.30.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no5理论值为441.1576，实测值为441.1577。
hplc纯度为95.88％。
实施例19、化合物s19和s20的合成
以丹参酮iia和3，4，5-三甲氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s19和s20，收率分别为70％和10％。
s19：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.84(s,1h),7.30(m,j＝7.2hz,2h),6.82(s,2h),4.03-3.80(m,9h),2.92(s,2h),2.36(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.47,175.26,157.83,154.78(2c),145.75,142.73,140.70,133.88,130.12,128.49,128.40,127.19,125.43,124.54,123.65,122.55,117.87,106.51,62.90,59.81,58.20(2c),42.50,31.79(2c),11.31.
高分辨质谱m/z(ei)c28h25no6理论值为471.1682，实测值为471.1681。
s20：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.01(d,j＝7.5hz,1h),7.37-7.29(m,j＝6.5hz,2h),6.87(s,2h),6.67(d,j＝9.9hz,1h),6.41(d,j＝9.8hz,1h),3.99-3.80(d,j＝6.9hz,12h),2.46(s,3h),1.50(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ169.58,154.00,153.32,150.11,144.61,140.08,138.38,136.89,132.32,126.15,123.98,123.23,121.82,121.20,120.40,117.91,113.66,113.52,104.28(2c),60.97,56.42(2c),40.19,29.34(2c),9.70.
高分辨质谱m/z(ei)c28h25no5理论值为455.1733，实测值为455.1732。
实施例20、化合物s21的合成
以丹参酮iia和苄胺为原料，参考s1的合成方法制备s21，收率为43％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.80(d,j＝7.2hz,1h),7.62(d,j＝7.8hz,2h),7.35–7.26(m,5h),6.23(s,2h),2.92(s,2h),2.47(s,3h),1.48(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.88,175.40,157.00,144.35,141.45,138.09,129.36(2c),129.17(2c),128.85,128.72,126.47,125.94,123.89,123.11,122.34,121.03,116.44,58.29,51.81,41.35,30.66(2c),10.17.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no3理论值为395.1521，实测值为395.1526。
hplc纯度为98.75％。
实施例21、化合物s22的合成
以丹参酮iia和苯乙胺为原料，参考s1的合成方法制备s22，收率为45％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.82(d,j＝7.2hz,1h),7.35(s,1h),7.30(d,j＝7.2hz,1h),7.24-7.16(m,5h),5.29-5.19(m,2h),3.28(t,j＝7.4hz,2h),2.77(s,2h),2.46(d,j＝14.0hz,3h),1.59(s,1h),1.42(s,6h).13cnmr(151mhz,cdcl3)δ187.93,174.50,156.36,143.65,140.74,137.37,129.22(2c),128.37(2c),127.42,126.66,126.12,125.53,125.18,123.10,122.36,121.61,120.10,115.56,57.48,49.66,40.62,37.66,29.89(2c),9.49.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no3理论值为409.1678，实测值为409.1679。
hplc纯度为97.85％。
实施例22、化合物s23的合成
以丹参酮iia和间氯苄胺为原料，参考s1的合成方法制备s23，收率为43％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.82(d,j＝7.2hz,1h),7.56(s,1h),7.52-7.46(m,1h),7.32(d,j＝7.5hz,2h),7.23(d,j＝4.5hz,2h),6.20(s,2h),2.92(s,2h),2.45(s,3h),1.49(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.88,175.39,157.04,144.40,141.54,139.75,135.14,130.65,129.12,129.08,128.73,127.36,126.36,125.93,123.88,123.36,122.34,121.24,116.48,110.70,58.20,51.18,41.40,30.67(2c),10.14.
高分辨质谱m/z(ei)c26h20clno3理论值为429.1132，实测值为429.1134。
hplc纯度为96.09％。
实施例23、化合物s24的合成
以丹参酮iia和间甲基苄胺为原料，参考s1的合成方法制备s24，收率为65％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.80(d,j＝7.2hz,1h),7.42-7.28(m,4h),7.17(t,j＝7.5hz,1h),7.06(d,j＝7.5hz,1h),6.20(s,2h),2.92(s,2h),2.46(s,3h),2.27(s,3h),1.46(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.82,175.37,156.99,144.35,141.42,138.98,137.96,129.64,129.60,129.23,128.71,126.50,126.02,125.95,123.89,123.07,122.36,120.99,116.44,58.28,51.81,41.36,30.67(2c),22.19,10.17.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no3理论值为409.1678，实测值为409.1677。
hplc纯度为98.33％。
实施例24、化合物s25的合成
以丹参酮iia和对氟苄胺为原料，参考s1的合成方法制备s25，收率为48％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.80(d,j＝7.2hz,1h),7.73-7.60(m,2h),7.37-7.28(m,2h),6.97(t,j＝8.7hz,2h),6.19(s,2h),2.92(s,2h),2.46(s,3h),1.48(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.97,175.43,164.36,162.40,157.04,144.38,141.51,134.02,134.00,131.34,131.28,128.75,126.33,126.30,125.92,123.89,123.26,122.31,121.14,116.44,116.29,116.12,58.27,50.98,41.36,30.65(2c),10.16.
高分辨质谱m/z(ei)c26h20fno3理论值为413.1427，实测值为413.1419。
hplc纯度为97.75％。
实施例25、化合物s26的合成
以丹参酮iia和邻甲氧基苄胺为原料，参考s1的合成方法制备s26，收率为53％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.83(d,j＝7.2hz,1h),7.39-7.28(m,2h),7.19(t,j＝7.7hz,1h),6.87(d,j＝8.1hz,1h),6.74(t,j＝7.5hz,1h),6.52(d,j＝7.5hz,1h),6.27(s,2h),3.88(s,3h),2.89(s,2h),2.39(s,3h),1.50(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.29,174.99,157.61,156.90,144.33,141.38,129.20,128.47,127.27,127.09,126.72,126.16,125.93,123.76,122.96,122.36,121.12,120.90,116.48,110.87,58.24,56.14,48.32,41.46,30.66(2c),10.08.
高分辨质谱m/z(ei)c27h23no4理论值为425.1627，实测值为425.1627。
hplc纯度为98.35％。
实施例26、化合物s27的合成
以丹参酮iia和对氟苯乙胺为原料，参考s1的合成方法制备s27，收率为52％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.83(d,j＝7.2hz,1h),7.36(s,1h),7.31(d,j＝7.2hz,1h),7.22-7.14(m,2h),6.90(t,j＝8.7hz,2h),5.21(t,j＝7.4hz,2h),3.26(t,j＝7.4hz,2h),2.79(s,2h),2.47(s,3h),1.45(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.67,175.20,163.50,161.55,157.08,144.34,141.48,133.73,131.43,131.37,128.14,126.69,126.24,125.86,123.77,123.14,122.28,120.90,116.27,115.91,115.74,58.18,50.27,41.31,37.45,30.56(2c),10.14.
高分辨质谱m/z(ei)c27h22fno3理论值为427.1584，实测值为427.1587。
实施例27、化合物s28和s29的合成
以丹参酮iia和正丁胺为原料，参考s1的合成方法制备s28和s29，收率分别为38％和16％。
s28:1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.81(d,j＝7.2hz,1h),7.32(d,j＝7.5hz,2h),5.02(t,j＝7.5hz,2h),2.92(s,2h),2.45(s,3h),2.08-1.90(m,3h),1.50(s,6h),1.47-1.38(m,2h),0.96(t,j＝7.4hz,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ187.55,174.03,155.82,143.05,140.18,127.18,125.48,125.40,124.67,122.50,121.67,121.09,119.57,115.04,57.14,48.04,40.14,33.12,29.45(2c),19.32,13.25,8.93.
高分辨质谱m/z(ei)c23h23no3理论值为361.1678，实测值为361.1678。
hplc纯度为98.25％。
s29:1hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.89(d,j＝7.2hz,1h),7.33(d,j＝0.9hz,1h),7.16(d,j＝7.2hz,1h),4.63(t,j＝7.2hz,2h),3.12(t,j＝6.3hz,2h),2.52(d,j＝0.9hz,3h),2.16(t,j＝6.2hz,2h),2.09-1.92(m,3h),1.43(s,6h),1.03-0.93(m,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ169.88,154.01,145.55,139.42,125.05,123.52,122.47,121.13,119.79,119.68,115.29,113.37,46.82,40.26,34.46,32.49,29.24,27.58(2c),20.11,19.65,13.34,9.22.
高分辨质谱m/z(ei)c23h25no2理论值为347.1885，实测值为347.1891。
hplc纯度为96.82％。
实施例28、化合物s30的合成
以丹参酮iia和正己胺为原料，参考s1的合成方法制备s30，收率为35％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.82(d,j＝7.2hz,1h),7.32(d,j＝7.3hz,2h),5.01(t,j＝7.4hz,2h),2.92(s,2h),2.45(s,3h),2.07-1.92(m,3h),1.50(s,6h),1.29(d,j＝18.4hz,7h),0.87(d,j＝6.4hz,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ187.58,174.08,155.88,143.11,140.23,127.24,125.52,125.44,124.73,122.57,121.71,121.16,119.61,115.12,57.19,48.27,40.19,31.13,30.94,29.49(2c),29.25,25.78,22.11,13.56,8.97.
高分辨质谱m/z(ei)c25h27no3理论值为389.1991，实测值为389.1992。
hplc纯度为99.77％。
实施例29、化合物s31的合成
以丹参酮iia和二甘醇胺为原料，参考s1的合成方法制备s31，收率为75％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.83(d,j＝7.2hz,1h),7.33(d,j＝6.6hz,2h),5.25(t,j＝5.1hz,2h),4.06(t,j＝5.1hz,2h),3.59(s,4h),2.93(s,2h),2.43(s,3h),1.50(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ189.26,175.50,157.09,144.47,141.49,128.49,127.34,126.78,125.87,123.84,123.33,122.27,121.03,116.28,73.00,71.25,62.43,58.36,48.61,41.41,30.63(2c),10.09.
高分辨质谱m/z(ei)c23h23no5理论值为393.1576，实测值为393.1576。
实施例30、化合物s32的合成
以隐丹参酮和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s32，收率为75％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.78(d,j＝7.2hz,1h),7.57(d,j＝8.4hz,2h),7.49(d,j＝8.4hz,2h),7.35(d,j＝7.2hz,1h),4.88(t,j＝9.2hz,1h),4.48-4.33(m,1h),3.61(s,1h),2.91(s,2h),1.52(s,6h),1.35(d,j＝6.6hz,3h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.17,175.61,165.29,148.49,137.37,136.58,130.66(2c),130.23,130.13(2c),128.46,128.20,127.35,126.34,125.91,122.45,118.01,83.30,59.59,42.68,37.30,31.98,31.50,21.17.
高分辨质谱m/z(ei)c25h20clno3理论值为417.1132，实测值为417.1129。
hplc纯度为96.34％。
实施例31、化合物s33和s40的合成
以17-羟基丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s33和s40，收率分别为65％和10％。
s33:1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.98(d,j＝7.2hz,1h),7.56(q,j＝9.0hz,4h),7.50(s,1h),7.43(d,j＝7.2hz,1h),4.69(d,j＝6.9hz,2h),4.57(t,j＝6.9hz,1h),2.95(s,2h),1.54(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.83,175.18,158.77,147.26,142.09,137.79,136.45,130.95,130.11,129.45,128.07,127.69,127.52,126.42,125.89,123.01,117.34,59.82,57.29,42.79,31.85(2c).
高分辨质谱m/z(ei)c25h18clno4理论值为431.0924，实测值为431.0933。
hplc纯度为98.38％。
s40：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.13(d,j＝7.5hz,1h),7.66(d,j＝8.4hz,2h),7.59(d,j＝8.4hz,2h),7.51(s,1h),7.41(d,j＝7.5hz,1h),6.70(d,j＝9.9hz,1h),6.57(d,j＝9.9hz,1h),5.80(s,1h),4.74(s,2h),1.52(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ170.20,156.42,154.36,147.81,140.96,140.64,137.30,136.62,131.45(2c),129.60(2c),128.74,128.23,126.75,126.27,122.77,122.40,120.57,115.00,57.55,42.46,30.84(2c).
高分辨质谱m/z(ei)c25h18clno3理论值为415.0975，实测值为415.0950。
实施例32、化合物s34的合成
以15-溴丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s34，收率为51％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.89(d,j＝7.2hz,1h),7.63–7.45(m,4h),7.39(d,j＝7.2hz,1h),2.93(s,2h),2.31(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.26,171.65,155.19,144.03,135.23,134.21,128.51(2c),127.78,127.68(2c),126.18,125.58,125.19,123.38,122.88,122.62,120.67,120.49,114.60,57.31,40.27,29.39(2c),9.47.
高分辨质谱m/z(ei)c25h17brclno3理论值为493.0080，实测值为493.0074。
hplc纯度为95.46％。
实施例33、化合物s35的合成
以15-噻吩丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s35，收率为50％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.91(d,j＝7.2hz,1h),7.63–7.49(m,6h),7.46(d,j＝2.7hz,1h),7.38(d,j＝7.2hz,1h),2.93(s,2h),2.60(s,3h),1.54(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.25,173.21,153.28,147.60,143.39,135.11,134.40,131.23,128.47(2c),127.87,127.75(2c),126.06,125.90,125.77,125.68,125.08,123.04,122.45,120.82,120.46,116.27,115.22,57.31,40.19,29.41(2c),9.52.
高分辨质谱m/z(ei)c29h20clno3s理论值为497.0852，实测值为497.0847。
hplc纯度为95.31％。
实施例34、化合物s36的合成
以15-乙烯丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s36，收率为66％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.91(d,j＝7.2hz,1h),7.54(q,j＝8.7hz,4h),7.38(d,j＝7.2hz,1h),6.70-6.57(m,1h),5.87(d,j＝17.4hz,1h),5.35(s,1h),2.92(s,2h),2.38(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ188.67,175.35,156.41,152.21,146.03,137.51,136.73,130.87(2c),130.27,130.11(2c),128.36,128.27,128.07,125.59,125.17,124.43,122.85,121.10,117.51,114.90,59.67,42.60,31.80(2c),11.08.
高分辨质谱m/z(ei)c27h20clno3理论值为441.1132，实测值为441.1124。
hplc纯度为97.82％。
实施例35、化合物s37的合成
以15-乙基丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s37，收率为44％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.89(d,j＝7.2hz,1h),7.63-7.45(m,4h),7.39(d,j＝7.2hz,1h),2.93(s,2h),2.31(s,3h),1.53(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.25,173.28,154.64,153.27,142.78,135.00,134.46,128.43(2c),127.93,127.75(2c),125.88,125.63,122.67,121.90,120.36,115.60,114.39,57.29,40.09,29.41(2c),18.88,12.41,8.55.
高分辨质谱m/z(ei)c27h22clno3理论值为443.1288，实测值为443.1290。
实施例36、化合物s38和s39的合成
以15-间甲氧基苯基丹参酮iia和对氯苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s38和s39，收率分别为64％和15％。
s38：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.93(d,j＝7.2hz,1h),7.55(q,j＝8.7hz,4h),7.44-7.33(m,3h),7.30(s,1h),6.91(d,j＝7.8hz,1h),3.90(s,3h),2.93(s,2h),2.63(s,3h),1.54(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ186.24,173.23,159.30,153.77,150.03,143.48,135.11,134.40,131.42,129.26,128.47(2c),127.88,127.75(2c),126.24,125.88,125.76,123.08,122.58,120.47,118.37,117.53,115.21,112.85,111.51,57.30,54.91,40.19,29.40(2c),9.93.
高分辨质谱m/z(ei)c32h24clno4理论值为521.1394，实测值为521.1391。
s39：1hnmr(300mhz,cdcl3)δ8.08(d,j＝7.2hz,1h),7.64(d,j＝8.1hz,2h),7.56(d,j＝8.1hz,2h),7.39(d,j＝3.9hz,2h),7.33(d,j＝7.5hz,2h),6.88(s,1h),6.64(d,j＝10.0hz,1h),6.44(d,j＝9.9hz,1h),3.90(s,3h),2.74(s,3h),1.50(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ169.37,159.26,151.86,150.20,149.05,144.28,136.27,134.59,134.53,132.15,129.13,128.88(2c),127.37(2c),127.04,123.56,123.18,120.46,120.11,118.37,117.94,117.74,112.82,112.62,112.49,111.33,54.89,39.81,28.79(2c),10.18.
高分辨质谱m/z(ei)c32h24clno3理论值为505.1445，实测值为505.1453。
实施例37、化合物s42的合成
以丹参酮iia和对乙酰氧基苯胺为原料，参考s1的合成方法制备s42，收率为56％。
1hnmr(300mhz,cdcl3)δ7.86(d,j＝7.2hz,1h),7.63(d,j＝8.7hz,2h),7.39-7.28(m,4h),2.92(s,2h),2.35(d,j＝4.2hz,6h),1.52(s,6h).13cnmr(125mhz,cdcl3)δ187.33,174.24,169.41,156.70,152.03,144.65,141.59,134.30,129.04,128.68,127.13(2c),126.99,126.03,124.36,123.50,122.48,122.35,121.43(2c),116.73,58.53,41.33,30.58(2c),21.98,10.07.
高分辨质谱m/z(ei)c27h21no5理论值为439.1420，实测值为439.1412。
测试例本发明的苯并[def]咔唑类化合物抗炎活性的测定
体外实验模型及步骤：
我们参考journalofnutritionalbiochemistry2013,24:146–155中报道的方法，在小鼠腹腔注射6％淀粉肉汤溶液，三天后腹腔提取原代巨噬细胞作为体外炎症模型，研究药物是否能抑制lps诱导的促炎因子肿瘤坏死因子-α(tnf-α)和白细胞介素-6(il-6)释放。
脂多糖(lps)购自美国sigma公司，产品编号：l6386。
1、化合物(10μm)或者dmso提前孵育30min后加入lps(0.5μg/ml)继续培养细胞24h后收集细胞培养基及总蛋白。
2、参考journalofnutritionalbiochemistry2013,24:146–155中报道的方法进行酶联免疫吸附试验(elisa)检测培养基里面炎症因子的含量并用蛋白浓度进行标准化。
3、选择了一个我们前期已发表的化合物l6h21(britishjournalofpharmacology,2015,172(17):4391-4405)作为阳性对照，以排除实验操作的失误。
实验结果：
如图1所示，加入化合物后柱子相对于lps组越低表明细胞释放的炎症因子量越少，也就是化合物抑制炎症因子释放的能力越强。*p<0.05，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异。由图1可知，在小鼠原代巨噬细胞中，化合物s2,s3,s21,s22,s26,s28和s32能显著抑制lps诱导的tnf-α和il-6的释放，表明本发明所述化合物具有明显的抗炎活性。
体内急性肺损伤模型的建立
将27只购自温州医科大学实验动物中心的c57bl/6小鼠(每只体重约20-22g)随机分为4组，分别为：对照组(con组，6只)、lps组(7只)、s2810mg/kg组(7只)和s2820mg/kg组(7只)。用含20％peg400、10％吐温80的生理盐水溶解化合物s28制成1mg/ml和2mg/ml的溶液，于造模前15min尾静脉注射给药组，即s2810mg/kg组和s2820mg/kg组的小鼠。各组c57bl/6小鼠乙醚麻醉后暴露气管，除对照组外，其余各组小鼠气管内缓慢滴入5mg/kglps，进行造模，对照组以相同的方式滴入生理盐水，缝合伤口。造模后6h，腹腔注射100μl10％的水合氯醛麻醉小鼠，收集血液后，开胸结扎左肺，右肺用200μl生理盐水进行支气管肺泡灌洗，收集肺泡灌洗液(balf)，相同操作重复3次。
肺湿干重比值：表征肺水肿的程度；是评价肺组织损伤的一个重要指标；如下图2所示，化合物s28能够剂量依赖性地抑制lps诱导的肺水肿。*p<0.05，**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异。
balf中总蛋白浓度：表征肺泡壁结构完整性的一个重要指标；如下图3所示，化合物s28能够剂量依赖性地缓解balf中蛋白浓度的增加。**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异。
balf中总细胞与中性粒细胞数量：表征肺组织中炎症细胞的聚集情况；如图4和图5所示，s28能够剂量依赖性地降低肺泡灌洗液中总细胞的数量(图4)以及中性粒细胞的数量(图5)。**p<0.01，表明该组与lps组相比具有统计学差异。