本发明涉及一种活性黑糖乳酸菌的制备方法，具体涉及益生菌的发酵及健康食品制备，属于食品发酵工程技术领域。
背景技术：
益生菌是一类能改善宿主微生态平衡、产生确切健康功效从而发挥有益作用的活性微生物的总称。益生菌大体上可分成三大类，包括：乳杆菌类（如嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌等）；双歧杆菌类（如长双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜热双歧杆菌等）；以及革兰氏阳性球菌（如粪链球菌、乳球菌等）。此外，还有一些酵母菌亦可归入益生菌的范畴。益生菌对人体主要有以下作用和功能：可抑制有害菌群在肠道内的繁殖，减少毒素产生，促进肠道蠕动，从而提高肠道机能，改善排便状况，促进消化系统健康，帮助吸收营养成分，降低血清胆固醇，并且增强人体免疫力，有助于抗肿瘤、抑癌；益生菌还能预防或改善腹泻，缓解不耐乳糖症状，提高过敏性耐受能力，预防生殖系统感染等。益生菌除自身的作用与功能外，还在生长繁殖过程当中产生、分泌大量有益人体健康的代谢产物，如生成大量维生素、抗氧化剂，消化酶，将糖分解后生成乳酸和醋酸，使肠道呈酸性，抑制有害菌群繁殖，减少毒素产生，刺激肠蠕动，并能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生素d的吸收；产生乳糖酶，帮助患者消化乳糖等。人体胃肠道消化系统里存在多种菌群，有有益的（益生菌）、有害的以及中性的，在正常情况下这些菌群存在一种自然平衡。
但是，现代饮食，生活、工作高压力以及病理条件下，有害菌群的数量升高，中性菌群产生对人体有害物质，变成有害菌群，从而导致人体结肠及消化系统菌群自然平衡失去平衡：产气、腹胀、腹泻及便秘等，易受病原菌的侵染，人体处于亚健康或病理状态。补充益生菌有促于恢复人体自然平衡：维持胃肠道菌群平衡、保持胃肠正常功能、促进胃肠消化系统健康及提高人体免疫能力等。所以，益生菌日益受到人们的重视，由此带来了益生菌产业的迅猛发展。目前，益生菌产品的益生菌原料生产主要由常规的微生物培养基培养,益生菌的生长需要提供大量碳源和氮源，通常，大规模生产时，白砂糖用作碳源。
黑糖是一种没有经过高度精炼带蜜成型的的蔗糖，又称赤糖、紫糖，颜色比较深，带有焦香味，为禾本科草本植物甘蔗的茎经压榨取汁炼制而成的赤色结晶体，含有丰富的糖份、矿物质及甘醇酸。黑糖中蕴含着大量的营养物质对肌肤的健康、营养有着独到的功效，可加速皮肤细胞的代谢，补充营养，促进再生，黑糖中含独特的天然酸类和色素调节物质，可有效调节各种色素代谢过程，平衡皮肤内色素分泌数量和色素分布，减少局部色素的异常堆积。喝热的黑糖水可让身体温暖，增加能量，活络气血，加快血液循环，有促于妇女月经顺畅。
本发明旨在用黑糖代替白砂糖用作益生菌生长的碳源来培养益生菌，生产出富含黑糖营养成分的益生菌，使益生菌及其加工的产品更加富含营养和调理功能，适合于各类人群，尤其女性。
技术实现要素：
目的：为解决现有技术的不足，本发明提供了一种活性黑糖乳酸菌的制备方法。
技术方案：为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：
一种活性黑糖乳酸菌的制备方法，其步骤为：
(1)mrs固体培养基、37℃条件下活化jsx-bs2菌种；
(2)接种活化的jsx-bs2菌种于改良的mrs液体培养基中；
(3)200rpm、37℃条件下发酵1-2天；
(4)取样检测；
(5)发酵液ph值4.0-4.5、乳酸菌数达到1010个/ml时即可终止发酵，得到发酵液；
(6)将灭过菌的奶粉添加进发酵液中，混匀，然后深冷冻干燥成乳酸菌发酵液冻干粉；
(7)添加一定量的添加剂，与乳酸菌发酵液冻干粉混匀，加工成合适剂型，即得黑糖乳酸菌成品。
所述的活性黑糖乳酸菌的制备方法，其特征在于：mrs固体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、20g/l葡萄糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，然后添加2%琼脂，定容；高压1×105pa灭菌20min。
所述的活性黑糖乳酸菌的制备方法，其特征在于：改良的mrs液体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、10-30g/l黑糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，并定容；高压1×105pa灭菌20min。
所述的活性黑糖乳酸菌的制备方法，其特征在于：取样检测包括：发酵液ph值及镜检与乳酸菌计数。
作为优选方案，所述的活性黑糖乳酸菌的制备方法，其特征在于：步骤（6）中奶粉的添加量为发酵液质量的5-10%。
作为优选方案，所述的活性黑糖乳酸菌的制备方法，其特征在于：所述添加剂为可食性淀粉、β-环状糊精、硬脂酸镁中的一种或几种。
有益效果：本发明提供的活性黑糖乳酸菌的制备方法，首先从现有的益生菌种群里筛选能在黑糖配制的培养基上快速生长、繁殖的菌种，并不断优化发酵条件。从中筛选到了一株在黑糖培养基上能快速生长、繁殖的乳酸菌株---jsx-bs2，之后，用黑糖培养基对这株jsx-bs2进行深度发酵。然后向发酵产物添加包埋保护剂，深冷冻干燥加工成益生菌粉，进而生产出不同剂型的乳酸菌健康产品。产品含有黑糖营养成分、乳酸菌及其的代谢产物，比原有乳酸菌产品的营养更加丰富，并能预防多种疾病，提高人体免疫力，有益人体健康，适用于各年龄阶段的人群，尤其女性。
具体实施方式
下面结合实例对本发明做具体说明：
实施例1：
一种活性黑糖乳酸菌的制备方法，其步骤为：
（1）mrs固体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、20g/l葡萄糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，然后添加2%琼脂，定容；高压1×105pa灭菌20min；
（2）改良的mrs液体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、10g/l黑糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，并定容；高压1×105pa灭菌20min；
（3）用mrs固体培养基、37℃条件下活化jsx-bs2菌种；
（4）接种活化jsx-bs2菌种于改良的mrs液体培养基中；
（5）200rpm、37℃条件下发酵约1-2天；
（6）取样检测，包括：发酵液ph值及镜检与乳酸菌计数；
（7）发酵液ph值4.0-4.5、乳酸菌数达到>1010/ml时即可终止发酵；
（8）将5-10%的灭过菌的奶粉添加进发酵液中，混匀，然后深冷冻干燥成乳酸菌发酵液冻干粉；
（9）添加一定量灭过菌的填充物如可食性淀粉、β-环状糊精及硬脂酸镁等，与（8）中乳酸菌发酵液冻干粉混匀，加工成不同剂型，即为黑糖乳酸菌成品。
实施例2：
（1）mrs固体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、20g/l葡萄糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，然后添加2%琼脂，定容；高压1×105pa灭菌20min；
（2）改良的mrs液体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、20g/l黑糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，并定容；高压1×105pa灭菌20min；
（3）用mrs固体培养基、37℃条件下活化jsx-bs2菌种；
（4）接种活化的jsx-bs2菌种于改良的mrs液体培养基中；
（5）200rpm、37℃条件下发酵约1-2天；
（6）取样检测，包括：发酵液ph值及镜检与乳酸菌计数；
（7）发酵液ph值4.0-4.5、乳酸菌数达到>1010/ml时即可终止发酵；
（8）将5-10%的灭过菌的奶粉添加进发酵液中，混匀，然后深冷冻干燥成乳酸菌发酵液冻干粉；
（9）添加一定量灭过菌的填充物如可食性淀粉、β-环状糊精及硬脂酸镁等，与（8）中乳酸菌发酵液冻干粉混匀，加工成不同剂型，即为黑糖乳酸菌成品。
实施例3：
（1）mrs固体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、20g/l葡萄糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，然后添加2%琼脂，定容；高压1×105pa灭菌20min；
（2）改良的mrs液体培养基的配置：10g/l蛋白胨、10g/l牛肉膏、5g/l酵母粉、30g/l黑糖、5g/l无水乙酸钠、1ml/l吐温-80、2g/l柠檬酸二胺、2g/l磷酸氢二钾、0.58g/l硫酸镁、0.25g/l硫酸锰，用蒸馏水溶解，调节ph6.6-6.8，并定容；高压1×105pa灭菌20min；
（3）用mrs固体培养基、37℃条件下活化jsx-bs2菌种；
（4）接种活化的jsx-bs2菌种于改良的mrs液体培养基中；
（5）200rpm、37℃条件下发酵约1-2天；
（6）取样检测，包括：发酵液ph值及镜检与乳酸菌计数；
（7）发酵液ph值4.0-4.5、乳酸菌数达到>1010/ml时即可终止发酵；
（8）将5-10%的灭过菌的奶粉添加进发酵液中，混匀，然后深冷冻干燥成乳酸菌发酵液冻干粉；
（9）添加一定量灭过菌的填充物如可食性淀粉、β-环状糊精及硬脂酸镁等，与（8）中乳酸菌发酵液冻干粉混匀，加工成不同剂型，即为黑糖乳酸菌成品。
本发明解决了黑糖培养益生菌的发酵条件优化问题，包括：用黑糖作培养基成分的优良菌种筛选，黑糖的最适益生菌发酵浓度确定。
本发明旨在用黑糖代替白砂糖用作益生菌生长的碳源来培养益生菌，生产出富含黑糖营养成分的益生菌，使益生菌及其加工的产品更加富含营养和调理功能，适合于各类人群，尤其女性。
以上已以较佳实施例公开了本发明，然其并非用以限制本发明，凡采用等同替换或者等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。