一种提高果实座果率的基因及其应用的制作方法

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种提高果实座果率的基因及其应用。

背景技术：

果实的座果率是指结果数占开花总数的百分率，它决定了果实的产量。自然坐果率又称自然着果率，是自然状态下植物实际结果数占总开花数的百分率。座果率一般在采收时统计，有时也调查果实发育过程中某一时期而统计，如早期生理落果、采前落果、异常落果等。番茄开花结果过程中，常因授粉受精不完全、外界环境条件不良或栽培管理不当等原因而引起落花落果，实际座果率较低。

在番茄种植中，对番茄产量影响最大的问题就是番茄座果率的问题，座果率低，甚至空穗现象，都时有发生，这也是生理性问题当中最关键的问题。目前，常用来提高果实座果率的手段主要是利用物理措施尽可能的改善种植环境，同时叶面喷施一些抗逆剂来增加番茄植株本身的抗逆能力，从而提高座果率。提高着果率必须加强综合管理，常用的措施有：

加强种植管理。首先要重视追肥、灌水、病虫防治等措施，提高光合效率，积累贮藏养分，提高花芽质量。其次，要加强发育期管理，以保证开花坐果对养分的需要。

创造良好的授粉条件。可采取人工辅助授粉的方式，为提高授粉效果可将剪来的花枝绑在长杆上，伸到树冠上部，轻震长杆，将花粉震落使之授粉。人工授粉必须掌握好时机，据研究，每朵花在开放当日授粉往往最有利于受精坐果。因此，必须事先根据番茄生长的变化情况，及时授粉。

应用生长调节剂。落花落果的直接原因是花柄基部形成离层，而离层形成与内源激素(赤霉素、生长素等)不足有关。所以，花期或花后施用人工合成的生长调节剂，可以增加幼果中这些物质的含量，从而防止果柄产生离层，提高坐果率。

其它途径如修剪、病虫防治等措施，对提高坐果率也有一定效果。

综上所述，现有技术存在的问题是：

主要是通过人为的物理方式处理来提高番茄的坐果率，在处理方式上存在较大的人为因素，是结果不稳定的；其次通过人为施加生长调节剂，可能会对番茄植株产生其他的影响，例如可能会降低番茄风味、口感以及保存时间等；最后利用人工授粉以及施用植物生长调节剂会增加种植的人工成本和经济成本。

技术实现要素：

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种提高果实座果率的基因及其应用。

本发明是这样实现的，一种提高果实座果率的基因，所述提高果实座果率的基因序列SEQ ID NO：1；核酸序列长度为1080个核苷酸；氨基酸长度为335个氨基酸残基。

本发明的另一目的在于提供一种所述提高果实座果率的基因在提高水果座果率中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种包含所述提高果实座果率的基因构建的真核表达载体。

本发明的另一目的在于提供一种包含所述真核表达载体的真核重组质粒。

本发明的另一目的在于提供一种包含所述真核重组质粒的应用方法，所述应用方法包括：

首先将含番茄基因序列SEQ ID NO：1的真核表达载体转化农杆菌，同时将野生型番茄种子进行浸泡溶胀，用次氯酸钠溶液消毒；

其次无菌水清洗，将清洗后的种子放入1/2MS培养基上进行发苗，待子叶发出、真叶长出之前，剪取叶片，置于预培养基上进行培养至产生愈伤；

再次将含有番茄基因序列SEQ ID NO：1的真核表达载体转化的农杆菌侵染预培养番茄叶片和茎段，侵染时间5-20分钟，吸干叶片上的菌液，置于共培养基上培养2-4天；

最后将叶片转移至再生培养基上，每15-20天更换再生培养基一次直至幼苗出现，幼苗转移至生根培养基上获得转基因植株。

本发明采用转基因的方法提供了一种提高果实座果率的基因及其应用，将采用本发明的转基因番茄与野生型番茄相比，番茄果实的座果率明显提高。

本发明的转基因番茄果实与野生型番茄果实相比，番茄果实的座果率明显提高。结果显示，基因和真核重组载体能够提高果实的座果率；本发明提高了果实的座果率；通过基因工程技术克隆获得的基因，在调控提高果实座果过程和提高果实产量方面，具有着重要理论意义和实际应用价值。

附图说明

图1是本发明实施例提供的Tkn4超表达载体图谱；

图2是本发明实施例提供的超表达Tkn4-ox转基因植株座果率统计图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。

本发明实施例提供的提高果实座果率的基因的核酸序列SEQ ID NO：1；长度为1080个核苷酸，氨基酸长度为335个氨基酸残基。

下面结合实验对本发明的应用效果作详细的描述。

如图2所示；本发明提高了果实的座果率；通过基因工程技术克隆获得的基因，在调控提高果实座果过程和提高果实产量方面，具有着重要理论意义和实际应用价值。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

序列表

<110> 重庆大学

<120> 一种提高果实座果率的基因及其应用

<160> 1

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1080

<212> DNA

<213> 番茄(Solanum lycopersicum)

<400> 1