pm，离心5min，倒清液，加入等量生理盐水吹吸、离心，反复3次。
[0039]将清洗后的菌液进行10倍梯度稀释，待用。取OD值为0.6的菌液。
[0040]称量。用分析天平称取不同质量的氧化石墨烯片状材料放入30ml蒸馏水中，超声l_3h，分散成均质金黑色分散液，对照组为无石墨烯的生理盐水。
[0041]取5ml菌液于不同浓度的氧化石墨稀分散液和对照组中，于37°C，220rpm，6h培养。
[0042]培养后的分散液和对照组稀释涂布，37°C过夜培养，观察菌落数。每个浓度做2个平行样，3次重复试验。
[0043]氧化石墨烯分散液浓度在550 μ g/ml时抗菌能力很强，金黄色葡萄球菌死亡率达94.4% ;氧化石墨烯分散液浓度在450 μ g/ml，抗菌率可达到81.1% ;氧化石墨烯分散液浓度在350 μ g/ml，抑菌率为62.2%，低浓度时抗菌能力相对较弱。
[0044]本实验用平板菌落计数法验证了氧化石墨烯的抗菌能力，但其抗菌效果与氧化石墨烯的浓度密切相关。
[0045]下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。
[0046]实施例1 (对比例)
[0047]一种氧化石墨烯/细菌纤维素抗菌性复合材料的制备方法，步骤如下:
[0048]首先，用去离子水、葡萄糖、蛋白胨、十二水合磷酸氢二钠、酵母粉配制成细菌纤维素培养液，pH = 6，将培养液置入高温高压灭菌锅中，120°C，0.1MPa，灭菌20min ;将木醋杆菌甘油管接入培养液中，摇匀后，将培养液倒入平皿培养，30°C，2-3d静置培养；取2-3d培养后的细菌纤维素膜在0.ΙΜ/lNaOH溶液中浸泡过夜，中间过程更换一次碱液，浸泡成乳白色，用去离子水反复冲洗，直至用PH试纸测试pH为中性，将纤维素膜放入高压匀浆机中匀浆，匀浆压力为0.lMPa，lmin。对比例匀浆后无酸化处理，将纤维素进行高温高压灭菌。称取500 μ g/ml的氧化石墨稀，于无菌水中超声分散l_3h，分散成金属光泽的均质氧化石墨烯分散液后与纤维素混合搅拌，并于摇床反应2h。
[0049]得到的氧化石墨烯/细菌纤维素复合材料，取OD值为0.6的金黄色葡萄球菌液与细菌纤维素/氧化石墨烯复合材料于230rpm摇床作用6h抗菌率为29%。
[0050]实施例2
[0051]一种氧化石墨烯/细菌纤维素抗菌性复合材料的制备方法，步骤如下:
[0052]与实施例1不同的是，在细菌纤维素膜进行碱液浸泡和水洗后，将膜放入高压匀浆机中，加少许去离子水匀浆，匀浆压力为20MPa，1min,匀浆后加入60%的硫酸酸化水解。称取500 μ g/ml的氧化石墨稀，于无菌水中超声分散l_3h，分散成金属光泽的均质氧化石墨烯分散液后与纤维素乳状物混合搅拌，并于摇床反应2h。
[0053]得到的氧化石墨烯/细菌纤维素复合材料，取OD值为0.6的金黄色葡萄球菌液与细菌纤维素/氧化石墨烯复合材料于230rpm摇床作用6h抗菌率为64%。
[0054]实施例3
[0055]一种氧化石墨烯/细菌纤维素抗菌性复合材料的制备方法，步骤如下:
[0056]与实施例1不同的是，在细菌纤维素膜进行碱液浸泡和水洗后，将膜放入高压匀浆机中，加少许去离子水匀浆，匀浆压力为50MPa，1min,匀浆后加入60%的硫酸酸化水解，摇床170rpm充分水解反应4h。水解反应后反复离心水洗直至pH为中性，形成微晶纤维素，微晶纤维素在使用前进行高温高压灭菌。称取500 μ g/ml的氧化石墨烯，于无菌水中超声分散l_3h，直至分散液成黑色加入灭菌后的微晶细菌纤维素胶凝物，充分搅拌，并于摇床反应2h。
[0057]得到的氧化石墨烯/细菌纤维素复合材料，取OD值为0.6的金黄色葡萄球菌液与细菌纤维素/氧化石墨烯复合材料于230rpm摇床作用6h抗菌率为72%。
[0058]实施例4
[0059]一种氧化石墨烯/细菌纤维素复合抗菌性复合材料的制备方法，步骤如下:
[0060]与实施例1不同的是，在细菌纤维素膜进行碱液浸泡和水洗后，将膜放入高压匀浆机中，加少许去离子水匀浆，匀浆压力为50MPa，10min，匀浆后加入60%的硝酸酸化水解，摇床170rpm充分水解反应4h。水解反应后反复离心水洗直至pH为中性，形成微晶纤维素，微晶纤维素在使用前进行高温高压灭菌。称取500 μ g/ml的氧化石墨烯，于无菌水中超声分散l_3h，直至分散液成黑色加入灭菌后的微晶细菌纤维素胶凝物，充分搅拌，并于摇床反应2h。
[0061]得到的氧化石墨烯/细菌纤维素复合材料，取OD值为0.6的金黄色葡萄球菌液与细菌纤维素/氧化石墨烯复合材料于230rpm摇床作用6h抗菌率为80%。
[0062]实施例5
[0063]一种氧化石墨烯/细菌纤维素复合抗菌性复合材料的制备方法
[0064]与实施例1不同的是，在细菌纤维素膜进行碱液浸泡和水洗后，将膜放入高压匀浆机中，加少许去离子水匀浆，匀浆压力为50MPa，1min,匀浆后加入15%的盐酸酸化水解，摇床170rpm充分水解反应4h。水解反应后反复离心水洗直至pH为中性，形成微晶纤维素，微晶纤维素在使用前进行高温高压灭菌。称取500 μ g/ml的氧化石墨烯，于无菌水中超声分散l_3h，直至分散液成黑色加入灭菌后的微晶细菌纤维素胶凝物，充分搅拌，并于摇床反应2h。
[0065]得到的氧化石墨烯/细菌纤维素复合材料，取OD值为0.6的金黄色葡萄球菌液与细菌纤维素/氧化石墨烯复合材料于230rpm摇床作用6h抗菌率为59%。
【主权项】
1.一种复合材料的制备方法，包含以下步骤: a)通过高压机械匀浆法破碎细菌纤维素膜，制得匀浆后的细菌纤维素后，进行酸化水解反应，酸化处理后将进行水洗，然后离心，得到微晶纤维素； b)将所得微晶纤维素分散到氧化石墨烯分散液中。
2.权利要求1所述的方法，其中所述的高压为Ι-lOOMPa，时间为l-10min。
3.权利要求1所述的方法，其中所述的酸化水解反应的酸解介质是硫酸、硝酸或盐酸。
4.权利要求1所述的方法，其中所述的氧化石墨烯分散液的浓度是300-600μ g/mlo
5.权利要求1所述的方法，其中所述的氧化石墨烯为纳米粒子。
【专利摘要】本发明提供了一种复合材料的制备方法，其包含以下步骤：通过高压机械匀浆法破碎细菌纤维素膜，制得匀浆后的细菌纤维素后，进行酸化水解反应，酸化处理后将进行水洗，然后离心，得到微晶纤维素；将所得微晶纤维素分散到氧化石墨烯分散液中，如附图1所示。本发明制备的复合材料具有更好的抗菌性能。
【IPC分类】C08K3-04, C08L1-02
【公开号】CN104650385
【申请号】CN201410853160
【发明人】钟成, 杨皛宁, 薛冬冬, 贾士儒, 韩培培, 谭之磊
【申请人】天津科技大学
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2014年12月30日