次，提取液滤过， 合并滤液，回收乙醇，得浸膏； 2) 浸膏再经石油醚萃取，静置，合并石油醚层，浓缩得石油醚萃取物； 3) 石油醚萃取物经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱，收集含水黄 皮素的流分，所述的石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱条件为：〇-15min，洗脱系统为石 油醚；16-60min，洗脱系统为石油醚-乙酸乙酯-丙酮，比例为9 :1 :1 ; 4) 流分用TLC检测合并，浓缩，重结晶，即得纯度为重量含量80~90%的水黄皮素粗 结晶； 5) 将水黄皮素粗结晶用制备高效液相色谱法分离纯化，收集水黄皮素组分； 6) 对所收集的每一份洗脱液利用HPLC检测，合并保留时间相同而且纯度在90%-98%之 间和纯度大于98%以上的水黄皮素，减压浓缩，得到纯度为96. 6%以及99. 3%的水黄皮素。
[0035] 所述步骤5)制备高效液相色谱的色谱柱为C-18柱，甲醇-水：75:25为流动相洗 脱，流速为5mL/min，检测波长为304nm，柱温为35°C。
[0036] 所述步骤4) TLC检测方法为：取水黄皮素粗品加甲醇制成每1ml含Img的溶液， 在同一硅胶G薄层板上，分别按20 ug、40 ug、60 ug、80 ug、100 ug不同的浓度梯度点样， 以石油醚-丙酮（7 :3)、二氯甲烷-丙酮（9. 8:0. 2)、石油醚-乙酸乙酯-丙酮（8:1:1)三种 系统为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置 紫外光（365nm)下检视。在薄层色谱中，三种展开剂系统，五个不同浓度的梯度点样，均为 单一斑点，未见杂质斑点。
[0037] 所述步骤6)的HPLC检测方法为：色谱条件：色谱柱C-18,4. 6X250mm，IOum ;流 速;进样量：10ul ;系统条件：流动相乙腈-0. 2%磷酸80 :20,检测波长304nm ;面 积归一化法计算含量，主成分(水黄皮素 C18 H12 O4)峰不得少于98.0%，如有杂质峰，除溶剂 峰外，各杂质峰面积总和不得超过2. 0%。
[0038] 实施例4 一种高纯度水黄皮素的制备方法，具体步骤为： 1) 干豆花的干燥根5kg粉碎后用7倍重量的60%的乙醇回流提取2次，提取液滤过，合 并滤液，回收乙醇，得浸膏； 2) 浸膏再经石油醚萃取，静置，合并石油醚层，浓缩得石油醚萃取物； 3) 石油醚萃取物经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱，收集含水黄 皮素的流分，所述的石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱条件为：〇-l〇min，洗脱系统为石 油醚；ll-50min，洗脱系统为石油醚-乙酸乙酯-丙酮，比例为6 :4 :1 ; 4) 流分用TLC检测合并，浓缩，重结晶，即得纯度为重量含量80~90%的水黄皮素粗 结晶； 5) 将水黄皮素粗结晶用制备高效液相色谱法分离纯化，收集水黄皮素组分； 6) 对所收集的每一份洗脱液利用HPLC检测，合并保留时间相同而且纯度在90%-98%之 间和纯度大于98%以上的水黄皮素，减压浓缩，得到纯度为96. 5%以及99. 2%的水黄皮素。
[0039] 所述步骤5)制备高效液相色谱的色谱柱为C-18柱，甲醇-水：15:85为流动相洗 脱，流速为10mL/min，检测波长为304nm，柱温为35°C。
[0040] 所述步骤4) TLC检测方法为：取水黄皮素粗品加甲醇制成每1ml含Img的溶液， 在同一硅胶G薄层板上，分别按20 ug、40 ug、60 ug、80 ug、100 ug不同的浓度梯度点样， 以石油醚-丙酮（7 :3)、二氯甲烷-丙酮（9. 8:0. 2)、石油醚-乙酸乙酯-丙酮（8:1:1)三种 系统为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置 紫外光（365nm)下检视。在薄层色谱中，三种展开剂系统，五个不同浓度的梯度点样，均为 单一斑点，未见杂质斑点。
[0041] 所述步骤6)的HPLC检测方法为：色谱条件：色谱柱C-18,4. 6X250mm，IOum ;流 速：0. 8ml/min ;进样量：10ul ;系统条件：甲醇-0. 2%磷酸溶液30:70,检测波长260nm ;面 积归一化法计算含量，主成分(水黄皮素 C18 H12 O4)峰不得少于98.0%，如有杂质峰，除溶剂 峰外，各杂质峰面积总和不得超过2. 0%。
[0042] 实施例5 一种高纯度水黄皮素的制备方法，具体步骤为： 1)干豆花的干燥根5kg粉碎后用6倍重量的50%的乙醇回流提取8次，提取液滤过，合 并滤液，回收乙醇，得浸膏； 2) 浸膏再经石油醚萃取，静置，合并石油醚层，浓缩得石油醚萃取物； 3) 石油醚萃取物经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱，收集含水黄 皮素的流分，所述的石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱条件为：0-20min，洗脱系统为石 油醚；21-50min，洗脱系统为石油醚-乙酸乙酯-丙酮，比例为8 :1 :2 ; 4) 流分用TLC检测合并，浓缩，重结晶，即得纯度为重量含量80~90 %的水黄皮素粗 结晶； 5) 将水黄皮素粗结晶用制备高效液相色谱法分离纯化，收集水黄皮素组分； 6) 对所收集的每一份洗脱液利用HPLC检测，合并保留时间相同而且纯度在90%-98%之 间和纯度大于98%以上的水黄皮素，减压浓缩，得到纯度为95. 2%以及99. 0%的水黄皮素。
[0043] 所述步骤5)制备高效液相色谱的色谱柱为C-18柱，甲醇-水：30:70为流动相洗 脱，流速为8mL/min，检测波长为304nm，柱温为30°C。
[0044] 所述步骤4) TLC检测方法为：取水黄皮素粗品加甲醇制成每1ml含Img的溶液， 在同一硅胶G薄层板上，分别按20 ug、40 ug、60 ug、80 ug、100 ug不同的浓度梯度点样， 以石油醚-丙酮（7 :3)、二氯甲烷-丙酮（9. 8:0. 2)、石油醚-乙酸乙酯-丙酮（8:1:1)三种 系统为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置 紫外光（365nm)下检视。在薄层色谱中，三种展开剂系统，五个不同浓度的梯度点样，均为 单一斑点，未见杂质斑点。
[0045] 所述步骤6)的HPLC检测方法为：色谱条件：色谱柱C-18,4. 6X250mm，IOum ;流 速：lml/min ;进样量：20ul ;系统条件：甲醇-0. 2%磷酸溶液90:10,检测波长260nm ;面积 归一化法计算含量，主成分(水黄皮素 C18 H12 O4)峰不得少于98. 0%，如有杂质峰，除溶剂峰 外，各杂质峰面积总和不得超过2. 0%。
[0046] 实施例6 一种高纯度水黄皮素的制备方法，具体步骤为： 1) 干豆花的干燥根5kg粉碎后用5倍重量的60%的乙醇回流提取7次，提取液滤过，合 并滤液，回收乙醇，得浸膏； 2) 浸膏再经石油醚萃取，静置，合并石油醚层，浓缩得石油醚萃取物； 3) 石油醚萃取物经硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱，收集含水 黄皮素的流分，所述的石油醚-乙酸乙酯-丙酮系统梯度洗脱条件为：梯度洗脱条件为： 0-15min，洗脱系统为石油醚；16-50min，洗脱系统为石油醚-乙酸乙酯-丙酮，比例为9 :3 : 1 ; 4) 流分用TLC检测合并，浓缩，重结晶，即得纯度为重量含量80~90%的水黄皮素粗 结晶； 5) 将水黄皮素粗结晶用制备高效液相色谱法分离纯化，收集水黄皮素组分； 6) 对所收集的每一份洗脱液利用HPLC检测，合并保留时间相同而且纯度在90%-98%之 间和纯度大于98%以上的水黄皮素，减压浓缩，得到纯度为94. 3%以及99. 1%的水黄皮素。
[0047] 所述步骤5)制备高效液相色谱的色谱柱为C-18柱，甲醇-水：40:60为流动相洗 脱，流速为6mL/min，检测波长为304nm，柱温为30°C。
[0048] 所述步骤4) TLC检测方法为：取水黄皮素粗品加甲醇制成每1ml含Img的溶液， 在同一硅胶G薄层板上，分别按20 ug、40 ug、60 ug、80 ug、100 ug不同的浓度梯度点样， 以石油醚-丙酮（7 :3)、二氯甲烷-丙酮（9. 8:0. 2)、石油醚-乙酸乙酯-丙酮（8:1:1)三种 系统为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，置 紫外光（365nm)下检视。在薄层色谱中，三种展开剂系统，五个不同浓度的梯度点样，均为 单一斑点，未见杂质斑点。
[0049] 所述步骤6)的HPLC检测方法为：色谱条件：色谱柱C-18,4. 6X250mm，IOum ;流 速：lml/min ;进样量：20ul ;系统条件：乙腈-0. 2%磷酸溶液30:70,检测波长260nm ;面积 归一化法计算含量，主成分(水黄皮素 C18 H12 O4)峰不得少于98. 0%，如有杂质峰，除溶剂峰 外，各杂质峰面积总和不得超过2. 0%。
[0050] 实施例7 一种高纯度水黄皮素的制备方法，具体步骤为： 1) 干豆花的干燥根5kg粉碎后用8倍重量的75%的乙醇回流提取4次，提取