水乳液A 4500r/min离心分离25min，上层油乳相转入变温处理罐。中层水相和下层固相混合，加入15% (v/v)解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液，40°C酶解4.0h,之后加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中湿法粉碎8min，得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液B。
[0031]4、将樟树籽仁油-蛋白-水乳液B 4500r/min离心分离25min，上层油乳相转入变温处理罐。中层水相进入喷雾干燥工序，所得粉末即为樟树籽仁蛋白粉，可用做动物饲料。下层固相气流干燥(或晒干)后可用做植物有机肥料。
[0032]5、将变温罐降温至-10°C保温3.0h,然后55°C保温处理2.5h。将变温处理后的料液4500r/min离心25min，油相转入储油罐，得到樟树籽仁油279g，樟树籽仁油得率55.8%(相对于樟树籽质量)，樟树仁油提取率96.2% (相对于樟树籽仁含油量)，酸价为2.5。步骤4与步骤5中的水相合并，经喷雾干燥后得到蛋白粉80g。步骤4与步骤5中的渣相合并，经气流干燥后得到有机肥料126g。
[0033]实施例2。
[0034]1、取一环活化好的解淀粉芽孢杆菌Z16-1接种到肉汤培养基中(50mL肉汤培养基装在250mL的锥形瓶中)，37°C、200r/min摇瓶培养26h，制得种子液。将种子液以2% (v/V)接种量接种到发酵培养基中(10mL发酵培养基装在500mL锥形瓶中)，37°C、200r/min摇瓶培养46h，将发酵液5000r/min离心6min，所得上清液即为解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液。
[0035]2、取樟树籽仁500g、水2L，加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中湿法粉碎6min，得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液A。
[0036]3、将樟树籽仁油-蛋白-水乳液A 5000r/min离心分离20min，上层油乳相转入变温处理罐。中层水相和下层固相混合，加入20% (v/v)解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液，45°C酶解3.0h，之后加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中湿法粉碎6min，得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液B。
[0037]4、将樟树籽仁油-蛋白-水乳液B 5000r/min离心分离20min，上层油乳相转入变温处理罐。中层水相进入喷雾干燥工序，所得粉末即为樟树籽仁蛋白粉，可用做动物饲料。下层固相气流干燥(或晒干)后可用做植物有机肥料。
[0038]5、将变温罐降温至_5°C保温4.0h,然后45°C保温处理3.5h。将变温处理后的料液5000r/min离心20min，油相转入储油罐，得到樟树籽仁油276g，樟树籽仁油得率55.2%(相对于樟树籽仁质量)，樟树仁油提取率95.1 % (相对于樟树籽仁含油量)，酸价为2.6。步骤4与步骤5中的水相合并，经喷雾干燥后得到蛋白粉82g。步骤4与步骤5中的渣相合并，经气流干燥后得到有机肥料128g。
[0039]实施例3。
[0040]1、取一环活化好的解淀粉芽孢杆菌Z16-1接种到肉汤培养基中(50mL肉汤培养基装在250mL的锥形瓶中)，37°C、240r/min摇瓶培养22h，制得种子液。将种子液以4% (v/V)接种量接种到发酵培养基中(10mL发酵培养基装在500mL锥形瓶中)，37°C、240r/min摇瓶培养42h，将发酵液4000r/min离心lOmin，所得上清液即为解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液。
[0041]2、取樟树籽仁500g、水2L，加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中湿法粉碎1min,得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液A。
[0042]3、将樟树籽仁油-蛋白-水乳液A 4000r/min离心分离30min，上层油乳相转入变温处理罐。中层水相和下层固相混合，加入10% (v/v)解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液，35°C酶解5.0h，之后加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中湿法粉碎lOmin，得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液B。
[0043]4、将樟树籽仁油-蛋白-水乳液B 4000r/min离心分离30min，上层油乳相转入变温处理罐。中层水相进入喷雾干燥工序，所得粉末即为樟树籽仁蛋白粉，可用做动物饲料。下层固相气流干燥(或晒干)后可用做植物有机肥料。
[0044]5、将变温罐降温至-15°C保温2.0h,然后65°C保温处理1.5h。将变温处理后的料液5000r/min离心20min，油相转入储油罐，得到樟树籽仁油277g，樟树籽仁油得率55.4%(相对于樟树籽仁质量)，樟树仁油提取率95.4% (相对于樟树籽仁含油量)，酸价为2.6。步骤4与步骤5中的水相合并，经喷雾干燥后得到蛋白粉84g。步骤4与步骤5中的渣相合并，经气流干燥后得到有机肥料132g。
【主权项】
1.一种解淀粉芽孢杆菌Z16-1水酶法提取樟树籽仁油的方法，其特征是按如下步骤: (1)将活化好的解淀粉芽孢杆菌Z16-1接种到普通肉汤培养基中，37°C、200?240r/min摇瓶培养22?_26h，制得种子液；将种子液以2?4% (v/v)接种量接种到发酵培养基中，37°C、200?240r/min摇瓶培养42?46h，将发酵液4000?5000r/min离心6?lOmin，取上清液即为解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液； (2)将樟树籽仁与水按1:4?1:5(g/ml)混合，加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中粉碎6?lOmin，得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液A ； (3)将棒树轩仁油-蛋白-水乳液A4000?5000r/min离心分离20?30min，上层油乳相转入变温处理罐；中层水相和下层固相混合，加入10?20% (v/v)解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液，35?45°C酶解3.0?5.0h，之后加入内外齿间隙为0.2?0.4mm的胶体磨中粉碎6?lOmin，得到樟树籽仁油-蛋白-水乳液B ； (4)将樟树籽仁油-蛋白-水乳液B4000?5000r/min离心分离20?30min，上层油乳相转入变温处理罐；中层水相进入喷雾干燥工序，所得粉末即为樟树籽仁蛋白粉，可用做动物饲料；下层固相气流干燥后可用做植物有机肥料； (5)将变温罐降温至-5?_15°C保温2.0?4.0h，然后45?65°C保温处理1.5?3.5h ;将变温处理后的料液4000?5000r/min离心20?30min，油相转入储油罐，固相进入气流干燥工序。2.根据权利要求1所述的提取樟树籽仁油的方法，其特征是步骤(I)所述的发酵培养基的配方为:玉米粉 4.5%,麸皮 2.5%,豆柏 4.0%, KH2PO4 0.03%, Na2HPO4.12H20 0.4%,pH 7.0±0.2，121°C灭菌 20min。3.根据权利要求1所述的提取樟树籽仁油的方法，其特征是步骤(I)所述的培养条件为:37°C、220r/min摇瓶培养24h，制得种子液；种子液以3% (v/v)的接种量接种到发酵培养基，37°C、220r/min摇瓶培养44h。
【专利摘要】一种解淀粉芽孢杆菌Z16-1水酶法提取樟树籽仁油的方法，包括解淀粉芽孢杆菌Z16-1发酵酶液的制备；樟树籽仁油湿法粉碎；酶解处理；离心分离；变温处理破乳化释放樟树籽仁油等步骤。本发明所产发酵酶液水解樟树籽仁蛋白的效果比国内常用产中性蛋白酶菌所发酵酶液更好，更适宜应用于水酶法提取樟树籽仁油等中碳链油脂中。本发明克服了压榨法提取植物油脂技术中枯饼中残油率较高、溶剂浸出法提取植物油脂技术中存在有机溶剂残留问题，同时可到较高品质的动物饲料和有机肥料，樟树籽资源的利用率较高。本发明樟树籽仁油得率高于55％(相对于樟树籽仁质量)，樟树仁油提取率高于95％(相对于樟树籽仁含油量)，酸价升高值小于1.0。CGMCC No. 1072720150421
【IPC分类】C11B1/04, C11B1/00
【公开号】CN104946375
【申请号】CN201510280502
【发明人】曾哲灵, 肖彦骏, 曾诚, 余平
【申请人】南昌大学
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年5月28日